CC BY
155
ИММУНОЛОГИЯ № 5, 2013
REFERENCES
1. Vander Heiden M.G., Plas D.R., Rathmell J.C. et al. Growth factors can influence cell growth and survival through effects on glucose metabolism. Mol. Cell. Biol. 2001; 21: 5899-912.
2. Ishizaki Y., Burne J.F., Raff M.C. Autocrine signals enable chondrocytes to survive in culture. J. cell Biol. 1994; 126(4): 1069-77.
3. Lutsenko G.V., Grechikhina M.V., Diachkova L.G. ATP level regulation in normal and transformed T cells by autocrine factors. Immunologiya. 2005; 26(2): 91-5 (in Russian).
4. Caldwell C.C., Kojima H., Lukashev D. et al. Differential effects of physiologically relevant hypoxic conditions on T lymphocyte development and effector functions. J. Immunol. 2001; 167: 6140-9.
5. Vaupel P., Schlenger K., Knoop C. et al. Oxygenation of human tumors: evaluation of tissue oxygen distribution in breast cancers by computerized O2 tension measurements. Cancer Res. 1991; 51: 3316-22.
6. Brown J.M., Giaccia A.J. Tumour hypoxia: the picture has changed in the 1990s. Int. J. Radiat. Biol. 1994; 65: 95-102.
7. Arnold F., West D., Kumar S. Wound healing: the effect of macrophage and tumour derived angiogenesis factors on skin graft vascularization. Br. J. Exp. Pathol. 1987; 68: 569-74.
8. Simanonok J.P. Non-ischemic hypoxia of the arterial wall is a primary cause of atherosclerosis. Med. Hypothes. 1996; 46: 155-61.
9. Ayala A., Ertel W., Chaudry I.H. Trauma-induced suppression of antigen presentation and expression of major histocompatibility class II antigen complex in leukocytes. Shock. 1996; 5: 79-90.
10. Ertel W., Singh G., Morrison M.H. et al. Chemically induced hypotension increases PGE2 release and depresses macrophage antigen presentation. Am. J. Physiol. 1993; 264: R655-60.
11. Mapp P.I., GrootveldM.C., Blake D.R. Hypoxia, oxidative stress and rheumatoid arthritis. Br. Med. Bull. 1995; 51: 419-36.
12. Ohmori H., Yamamoto I. beta-Cyclodextrin as a substitute for fetal calf serum in the primary antibody response in vitro. Eur. J. Immunol. 1987; 17: 79-83.
13. Vermes I., Haanen C., Steffens-Nakken H. et al. A novel assay for apoptosis. Flow cytometric detection of phosphatidylserine expression on early apoptotic cells using fluorescein labeled an-nexin V J. Immunol. Meth. 1995; 184: 39-51.
14. Rose C.R., Waxman S.G., Ransom B.R. Effects of glucose deprivation, chemical hypoxia, and simulated ischemia on Na+ homeostasis in rat spinal cord astrocytes. J. Neurosci. 1998; 18(10): 3554-62.
15. De Vrij W., AzziA., Konings W.N. Structural and functional properties of cytochrome c oxidase from Bacillus subtilis W23. Eur. J. Biochem. 1983; 131: 97-103.
16. Zhu H., Bunn H.F. Oxygen sensing and signaling: impact on the regulation of physiologically important genes. Respir. Physiol. 1999; 115: 239-47.
17. SalnikowK., Su W., BlagosklonnyM.V. et al. Carcinogenic metals induce hypoxia-inducible factor-stimulated transcription by reactive oxygen species-independent mechanism. Cancer Res. 2000; 60: 3375-8.
18. Leist M., Single B., Casroldi A.F. et al. Intracellular adenosine triphosphate (ATP) concentration: a switch in the decision between apoptosis and necrosis. J. Exp. Med. 1997; 185: 1481-6.
19. Martin S. J., Reutelingsperger C. P. M., McGahon A. J. et al. Early redistribution of plasma membrane phosphatidylserine is a general feature of apoptosis regardless of initiating stimulus: inhibition by overexpression of Bcl-2 and Abl. J. Exp. Med. 1995; 182: 1545-56.
20. Darzynkiewicz Z., Juan G., LiX. et al. Cytometry in cell necrobi-ology: analysis of apoptosis and accidental cell death (necrosis). Cytometry. 1997; 27: 1-20.
Поступила 16.04.13
ИММУНОФАРМАКОЛОГИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 УДК 615.2/.3.03:616.858-008.6].015.4
А.В. Таллерова, Е.А. Иванова, И.Г. Капица, Л.П. Коваленко, Е.А. Вальдман, Т.А. Воронина ВЛИЯНИЕ ПРОТИВОПАРКИНСОНИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА ГИМАНТАН НА УРОВЕНЬ
цитокинов в эксперименте
ФГБУ НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН, 125315, г Москва
Известно, что воспаление способно провоцировать и усугублять развитие нейродегенеративных заболеваний. В посмертных образцах мозга пациентов с болезнью Паркинсона обнаруживают повышенный уровень провоспалительных цитокинов. При моделировании паркинсонического синдрома (ПС) у грызунов установлено, что введение токсинов, вирусных и бактериальных агентов в кору, гиппокамп, стриатум и черную субстанцию вызывает активацию микроглии, плотность которой в несколько раз больше в дофаминергических структурах мозга, что приводит к снижению концентрации дофамина в стриатуме и гибели дофаминергических нейронов. Данная работа посвящена изучению выраженности системной воспалительной реакции у крыс с двумя типами экспериментальной патологии - 6-гидроксидофамининдуцированным и липополисахаридиндуцированным ПС - и оценке влияния на нее нового противопаркинсонического препарата гимантан, а также исследованию действия препарата на острую воспалительную реакцию на модели конканавалин А-индуцированного отека у мышей.
Ключевые слова: болезнь Паркинсона, гимантан, воспаление, цитокины
Таллерова Анна Вадимовна (Tallerova Anna Vadimovna); Иванова Елена Анатольевна (Ivanova Elena Anatol’evna), iwanowaea@ yandex.ru; Капица Инга Геннадиевна (Kapitsa Inga Gennadievna); Коваленко Лариса Петровна (Kovalenko Larisa Petrovna); Вальдман Елена артуровна (Val’dman Elena Arturovna); воронина Татьяна александровна (Voronina Tatyana Aleksandrovna).
- 254 -
ИММУНОФАРМАКОЛОГИЯ
A.V. Tallerova, E.A. Ivanova, I.G. Kapitsa, L.P. Kovalenko, E.A. Val’dman, T.A. Voronina
INFLUENCE OF ANTIPARKINSONIAN DRUG HEMANTANE ON THE LEVEL OF CYTOKINES IN
EXPERIMENTAL MODELS
FSBI “Zakusov Institute of Pharmacology” RAMS, 125315, Moscow, Russian Federation
It is known that inflammation is capable of provoking and exacerbating neurodegenerative diseases. Elevated levels of proinflammatory cytokines have been demonstrated in post mortem brain samples of patients with Parkinson's disease. Experimantal models of Parkinson's disease in rodents demonstrated that injections of toxins, viral and bacterial agents in the cortex, hippocampus, striatum and substantia nigra induce microglial activation. Since microglial density is several times higher in dopaminergic brain structures then elsewhere, the activation results in the decrease of dopamine concentration in the striatum and the death of dopaminergic neurons. This study is devoted to studying systemic inflammation in rats with two experimental pathologies - 6-hydroxydopamine-induced and lipopolysaccharide-induced Parkinson's syndrome, - evaluating the influence of a new antiparkinsonian drug hemantane on inflammation intensity and investigating the effect of the drug on acute inflammation in the model of concanavalin A-induced edema in mice.
Key words: Parkinson s disease, hemantane, inflammation, cytokines
Болезнь Паркинсона (БП) - это нейродегенеративное заболевание, характеризующееся двигательными нарушениями вследствие прогрессирующей гибели дофаминергических нейронов. Несмотря на то что этиология БП остается неясной, известно большое количество клинических и экспериментальных данных, свидетельствующих о том, что воспаление играет существенную роль в развитии этого нейродегенеративного заболевания. В посмертных образцах мозга людей, страдавших БП, в компактной части черной субстанции и стриатуме обнаруживают повышенный уровень провоспалительных интерлейкинов (ИЛ) [1]. При моделировании паркинсонического синдрома (ПС) у грызунов установлено, что через неделю после инъекции 6-гидроксидофамина (6-ГОДА) в стриатум в области повреждения наблюдается активация микроглии, которая сохраняется на протяжении последующих 3 нед [2]. В свою очередь провоспалительные цитокины, выделяемые активированной микроглией, ускоряют процесс гибели дофаминергических нейронов в условиях экспериментальных моделей ПС [3].
Вирусные и бактериальные агенты, активирующие иммунную систему, способны провоцировать развитие нейродегенерации и усугублять влияние токсинов, вызывающих гибель дофаминергических нейронов. К ним относится бактериальный токсин липополисахарид (ЛПС), используемый для моделирования воспалительных процессов in vivo. Введение ЛПС в кору, гиппокамп, стриатум и черную субстанцию крыс вызывает быструю активацию микроглии, плотность которой в 4-5 раз больше в дофаминергических структурах мозга, особенно в черной субстанции, что приводит к снижению концентрации дофамина в стриатуме и гибели дофами-нергических нейронов. Поэтому нейровоспаление, развивающееся при введении ЛПС в вышеперечисленные структуры мозга, рассматривается в качестве модели ПС [4, 5].
В ФГБУ НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН разработан противопаркинсонический препарат гимантан, проявляющий выраженную активность в ряде экспериментальных моделей БП и находящийся в настоящее время на стадии клинических испытаний. Гимантан отличается комплексным механизмом действия, что включает неконкурентную низкоаффинную блокаду ионного канала NMDA-рецепторов, неконкурентное обратимое ингибирование моноаминооксидазы-В, модулирующее действие на подтипы дофаминовых и серотониновых рецепторов, на обратный захват дофамина, а также проявляет нейропротекторные, им-мунотропные, антирадикальные и противовоспалительные свойства.
Цель данной работы - оценка эффективности гимантана на моделях острой воспалительной реакции у мышей и хронической воспалительной реакции, сопровождающей ПС, у крыс.
Материалы и методы. Эксперименты проводили на самцах мышей линии CBA массой 25-30 г и белых ауто-бредных самцах крыс массой 250-300 и 380-420 г, полученных из питомника «Столбовая» (РАМН). Использование лабораторных животных и протокол исследования соответ-
ствуют требованиям действующих правил лабораторной практики РФ.
Острую воспалительную реакцию моделировали по методике реакции воспаления на конканавалин А (КонА) у мышей линии СВА, которую вызывали субплантарным введением КонА (Sigma, США) в дозе 100 мкг на 20 г массы тела животных. В контралатеральную конечность мышей вводился такой же объем физиологического раствора [6].Через 1 ч оценивали отечность лап инженерным микрометодом и подсчитывали индекс реакции (ИР) по следующей формуле:
ИР = (Pon - Pk) • 100%/Pk, где Pon - объем задней лапы, в которую вводили КонА, Pk - объем задней лапы, в которую вводили физиологический раствор.
Гимантан в дозе 10, 20 и 40 мг/кг вводили внутрибрюшинно (в/б) за 1 ч до субплантарной инъекции КонА мышам. Концентрацию цитокинов (фактор некроза опухоли а) (ФНОа), интерферон-у (ИФНу), ИЛ-6, ИЛ-10, ИЛ-1а, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-17) в сыворотке крови мышей изучали на проточном цитометре EPICS XL 4 colors с помощью панели FlowCytomix mouse Th1/Th2 10 plex, согласно протоколу фирмы-производителя BenderMedSystem (Австрия).
Влияние гимантана на хроническую воспалительную реакцию оценивали по выраженности системного воспаления у крыс с гемипаркинсоническим синдромом, вызванным введением в черную субстанцию ЛПС или 6-ГОДА.
ЛПС-индуцированный ПС моделировали на самцах аут-бредных крыс массой 380-420 г. Наркотизированным животным вводили ЛПС (10 мкг в 2 мкл раствора Рингера) или раствор Рингера (контроль) в черную субстанцию левого полушария. Крыс разделили на три группы: 1-я - пассивный контроль (ложнооперированные); 2-я - активный контроль (ЛПС); 3-я - гимантан 10 мг/кг + ЛПС. Гимантан вводили в/б предварительно за день до операции, непосредственно перед операцией, затем ежедневно в течение 14 дней; крысам групп активного и пассивного контроля в/б вводили физиологический раствор. На протяжении эксперимента фиксировали массу тела крыс. На 7-е сутки после операции поведение крыс оценивали в тесте «Цилиндр», который ис-
Таблица 1
Влияние гимантана на реакцию воспаления на КонА у мышей (Mean+SEM)
Группа ИР Снижение ИР относительно такового в контроле, %
Контроль 19,5±2,3 -
Гимантан:
10 мг/кг 6,5±1,5* 66,7
20 мг/кг 9,2±1,9* 52,8
40 мг/кг 4,8±1,6* 75,4
Примечание. * - p<0,01 по сравнению с показателями в контрольной группе, t-критерий Стьюдента.
- 255 -
ИММУНОЛОГИЯ № 5, 2013
Таблица 2
Влияние гимантана на концентрацию МХП-1 в плазме крови крыс с ЛПС-индуцированным ПС (Mean+SEM)
Группа Концентрация МХП-1, пг/мл
Ложнооперированные крысы 1925,6 ± 283,1
ЛПС 3153,9 ± 305,2*
Г имантан+ЛПС 2058,3 ± 154,0**
Примечание. p<0,05: * - по сравнению с показателями у ложнооперированных крыс, /-критерий Стьюдента; ** - по сравнению с показателями в группе ЛПС, /-критерий Стьюдента.
Таблица 3
Влияние гимантана на концентрацию ИЛ-1а в плазме крови крыс с 6-ГОДА-индуцированным ПС (Mean+SEM)
Группа Концентрация ИЛ-1а, пг/мл
Ложнооперированные крысы 1348,6 ± 283,0
6-ГОДА 2858,3 ± 482,1*
Г имантан+6-ГОДА 1859,1 ± 316,1
Примечание. * - p<0,05 по сравнению с показателями у ложнооперированных крыс, /-критерий Стьюдента.
пользуется для анализа акинезии передних конечностей животных [7]. Через 3 нед после операции у крыс брали кровь для измерения в сыворотке уровня цитокинов ФНОа, ИЛ-1а, ИЛ-4, ИФНу и моноцитарного хемотаксического протеина-1 (МХП-1).
ПС, вызванный унилатеральным введением 6-ГОДА, моделировали на самцах аутобредных крыс массой 250-300 г. 6-ГОДА вводили в левую черную субстанцию наркотизированных животных в виде раствора 2 мкг/мкл в 0,02% растворе аскорбиновой кислоты объемом 4 мкл. Ложнооперированным крысам вводили 0,02% раствор аскорбиновой кислоты. Через 3 нед после операции у животных оценивали выраженность акинезии передней конечности на контралатеральной стороне поражения в тесте «Цилиндр». Крыс с гемипаркинсонизмом, у которых количество касаний стенок цилиндра правой лапой было достоверно меньше 50%, включали в дальнейшее исследование. После отбора крыс с ПС оставшихся в эксперименте животных разделили на следующие группы: 1-я - пассивный контроль (ложнооперированные); 2-я - активный контроль (6-ГОДА); 3-я - гимантан 10 мг/кг в/б + 6-ГОДА. Гимантан вводили ежедневно, крысам групп пассивного и активного контроля в/б вводили физиологический раствор. Через неделю после введения гимантана или физиологического раствора у животных брали кровь для измерения в сыворотке уровня ФНОа, ИЛ-1а, ИЛ-4, ИФНу и МХП-1.
Уровень цитокинов у крыс измеряли на проточном лазерном цитометре EPICS XL/4 colors по методу мультиплексного определения флюоресцентных частиц с помощью панели Flow Cytomixrat 5 plex, согласно протоколу фирмы-производителя Bender MedSystem (Австрия).
Статистическую обработку данных проводили с помощью пакета программ Statistica v. 6.0. Проверку на нормальность распределения осуществляли по критерию Шапиро-Уилкса, различия между группами оценивали с использованием критериев Стьюдента и Манна-Уитни.
Результаты и обсуждение. На модели КонА-индуцированного воспаления у мышей гимантан проявлял значимый противовоспалительный эффект, подавляя выраженность псевдоаллергической реакции, обусловленной выделением медиаторов воспаления за счет прямого действия используемого неиммунологического активатора на рецепторы мембран тучных клеток и базофильных лейкоцитов. Изучаемый препарат в диапазоне доз от 10 до 40 мг/кг достоверно снижал ИР воспаления по сравнению
с таковым в контрольной группе на 52,8-75,4% (табл. 1). Максимальную эффективность гимантан проявлял в дозе 40 мг/кг.
Установили, что механизм действия гимантана в условиях КонА-индуцированного воспаления объясняется его влиянием на уровень ИЛ в плазме крови мышей. Препарат в дозе 10, 20 и 40 мг/кг достоверно снижал концентрацию провоспалительного ИЛ-6 по сравнению с таковой в контрольной группе соответственно в 2,5; 2,1 и 3,8 раза (p<0,01). В дозе 10 и 20 мг/кг гимантан не вызывал значимого изменения концентрации ИЛ-1а, хотя при его введении в дозе 40 мг/кг отмечали тенденцию к повышению уровня ИЛ-1а.
Как было описано ранее [8], интранигральное введение ЛПС приводило к значительной потере массы тела животных. Гимантан препятствовал индуцированной токсином потере массы крыс, у ложнооперированных крыс отрицательной динамики массы тела не наблюдали. При оценке поведения животных в тесте «Цилиндр» у крыс группы активного контроля выявили акинезию правой передней конечности, обусловленную поражением дофаминергических нейронов в левой черной субстанции животных. Гимантан снижал выраженность повреждающего действия токсина, о чем свидетельствовало практически двукратное увеличение количества касаний стенок цилиндра правой конечностью крыс, получавших гимантан, по сравнению с таковым в группе активного контроля.
Результаты исследования ex vivo показали , что интрани-гральное введение ЛПС вызывало системную хроническую воспалительную реакцию. Через 3 нед после стереотаксической операции в сыворотке крови животных определяли достоверное повышение содержания МХП-1 - в 1,6 раза по сравнению с таковым в группе ложнооперированных крыс (табл. 2). Гимантан снижал вызванную ЛПС активацию клеток макрофагально-моноцитарного ряда, о чем свидетельствовала обусловленная препаратом нормализация уровня хемокина МХП-1 практически до значения в группе пассивного контроля. Что касается остальных изучаемых цитокинов, то достоверных отличий в их концентрациях в сыворотке крови между группами не выявили.
Системная воспалительная реакция у крыс развивалась и на фоне интранигрального введения 6-ГОДА. Через 4 нед после операции в сыворотке животных группы активного контроля определяли достоверное двукратное повышение содержания провоспалительного ИЛ-1а по сравнению с таковым в группе ложнооперированных крыс (табл. 3). На фоне гимантана достоверных отличий концентрации данного цитокина от его концентрации у ложнооперированных крыс не наблюдали. Изучаемый препарат в 1,5 раза снижал его уровень по сравнению с таковым в группе активного контроля. Что касается остальных исследуемых цитокинов, то достоверных отличий в их концентрации в сыворотке крови крыс между группами не выявили.
Выводы
1. Гимантан в дозе 10, 20, 40 мг/кг вызывает значимое уменьшение КонА-индуцированного отека стопы у мышей, что сопряжено с выраженным снижением концентрации ИЛ-6 в сыворотке крови животных.
2. Интранигральное введение ЛПС и 6-ГОДА вызывает системную воспалительную реакцию, которая характеризуется повышением содержания соответственно МХП-1 и ИЛ-1а в сыворотке крови животных.
3. Г имантан в дозе 10 мг/кг нормализует уровень МХП-1 в сыворотке крови крыс с индуцированным интранигральным введением ЛПС воспалением и уровень ИЛ-1а в сыворотке крови крыс с 6-ГОДА гемипаркинсонизмом.
4. Выявленная способность гимантана снижать повышенный уровень цитокинов в сыворотке крови животных с острым и хроническим воспалением является значимым компонентом в механизме фармакологического действия исследуемого препарата.
- 256 -
ВАКЦИНОЛОГИЯ
ЛИТЕРАТУРА
6. Любимов Б.И., Коваленко Л.П., Федосеева В.Н., Иванова А.С., Мастернак Т.Б., Ларин А.С. и др. Методические указания по оценке аллергизирующих свойств фармакологических веществ. В кн.: Миронов А.Н., ред. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. М.: Гриф и К; 2012: 51-63.
REFERENCES
1. Nagatsu T., MogiM., Ichinose H., Togari A. Cytokines in Parkinson’s disease. J. Neural Transmiss. Suppl. 2000; (58): 143-51.
2. Ferrari C., Godoy M., Tarelli R., Chertoff M., Depino A., Pitossi F. Progressive neurodegeneration and motor disabilities induced by chronic expression of IL-1 beta in the substantia nigra. Neuro-biol. Dis. 2006; 24: 183-93.
3. Armentero M.T., Levandis G., Nappi G., Bazzini E., Blandini F. Peripheral inflammation and neuroprotection: systemic pretreatment with complete Freund’s adjuvant reduces 6-hydroxydop-amine toxicity in a rodent model of Parkinson’s disease. Neuro-biol. Dis. 2006; 24: 492-505.
4. Gao H.M., Jiang J., Wilson B., Zhang W., Hong J.S., Liu B. Microglial activation-mediated delayed and progressive degeneration of rat nigral dopaminergic neurons: Relevance to Parkinson’s disease. J. Neurochem. 2002; 81: 1285-97.
5. IravaniM.M., Leung C.C., SedeghianM., Haddon C.O., Rose S., Jenner P. The acute and the long-term effects of nigral lipopoly-saccharide administration on dopaminergic dysfunction and glial cell activation. Eur. J. Neurosci. 2005; 22: 317-30.
6. Lubimov B.I., Kovalenko L.P., Fedoseeva VN., Ivanova A.S., Masternak T.B., Larin A.S. et al. Methodological instructions on assessment of allergenic properties of pharmacological substances. In: Mironov A.N., ed. Guidance on the preclinical study of drugs. Part 1. Moscow: Grif i K; 2012: 51-63 (in Russian).
7. Schallert T., Woodlee M.T. Orienting and placing. In: Whishaw I.Q., Kolb B., eds. The behavior of the laboratory rat. New York: Oxford University Press; 2005: 129-40.
8. Ivanova E.A., Kapitsa I.G., Valdman E.A., Voronina T.A. The activity of antiparkinsonian drug hemantane in models of peripheral inflammation and lipopolysaccharide-induced neuroinflammation. Adv. Parkinson’s Dis. 2013; 2(1): 11-7.
Поступила 04.04.13
ВАКЦИНОЛОГИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 УДК 615.371.015.46
А.П. Топтыгина1, Е.Л. Семикина2, В.А. Алешкин1
формирование и поддержание специфического клеточного иммунного ответа на вакцинацию приорикс
1Лаборатория цитокинов, ФБУН МНИИЭМ им. ГН. Габричевского, 125212, Москва, Объединенная клиникодиагностическая лаборатория гУ Научный центр здоровья детей РАМН
Двадцать детей (9 мальчиков и 11 девочек) в возрасте от 1 до 2 лет (группа 1) и 20 детей (10 мальчиков и 10 девочек) в возрасте от 6 до 7 лет (группа 2) были привиты (группа 1) или ревакцинированы (группа 2) тривалентной живой аттенуированой вакциной, содержащей вирусы кори, краснухи и эпидемического паротита, - Приорикс. Лимфоциты периферической крови (ЛПК) были изолированы на градиенте плотности до вакцинации, через 1 и 6 нед после и разделены на две части. Первую часть ЛПК окрашивали CFSE и инкубировали в присутствии антигенов вирусов кори или краснухи 8 дней. Вторую часть ЛПК инкубировали при тех же условиях 15 ч и метили CD8 (FITC) и CD107a (РЕ-Су5) антителами. Интенсивность флюоресценции оценивали с помощью проточного цитометра. В группе 1 антигены вирусов кори и краснухи не индуцировали митозов до вакцинации и через неделю после нее, как и в отрицательном контроле, однако через 6 нед более 40% ЛПК демонстрировали антигениндуциро-ванную пролиферацию. Специфическая дегрануляция CD8hi9h-клеток также отсутствовала до вакцинации и через неделю после, но достигала 4-5% через 6 нед после прививки. В группе 2, напротив, до прививки 27-28% ЛПК проходили 1-2 митоза. Через неделю специфическая пролиферация ЛПК снижалась, а через 6 нед достигала 40%. Специфическая CD8high пролиферация была около 2,5% до ревакцинации, повышалась до 3,5-4% через неделю и стабилизировалась на 3% через 6 нед. Показано, что оба использованных нами метода (антигениндуцированная пролиферация и дегрануляция CD8high) способны выявлять антигенспецифические Т-клетки памяти, формирующиеся в ответ на прививку.
Ключевые слова: Т-клетки памяти, специфический клеточный иммунный ответ, дегрануляция CD8high, пролиферативная реакция Т-лимфоцитов
A. P. Toptygina1, Elena L. Semikina2, Vladimir A. Alioshkin1
THE SHAPING AND THE MAINTENANCE OF T- CELL SPECIFIC IMMUNE RESPONSE TO VACCINATION PRIORIX
O.N.Gabrichevsky Institute of Epidemiology and Microbiology, Moscow, Russia Scientific Center of Children’s Health RAMS, Moscow, Russia
Топтыгина Анна Павловна (Toptygina Anna Pavlovna) 8(495) 452-18-01, e-mail: toptyginaanna@rambler.ru; Семикина Елена Леонидовна (Semikina Elena Leonidovna), Алешкин Бладимир Андрианович (Alioshkin Vladimir Andrianovich). 125212, Москва, ул Адм. Макарова 10, МНИИЭМ им. ГН. Габричевского.
- 257 -
