CC BY
13
Таблица 2
Распределение частот генотипов полиморфизма I462V гена СУР1А1 у больных с ДМЖП и здоровых _родителей в зависимости от пола_
Мальчики CYP1A1I462V Девочки CYP1A1I462V
462II 462IV 462VV 462II 462IV 462VV
Больные мальчики с ДМЖП (n=40) 39 (97,5%) 1 (2,5%) 0 (0%) Больные девочки с ДМЖП (n=63) 61 (96,8%) 2 (3,2%) 0 (0%)
Здоровые отцы (n=86) 85 (98,8%) 1 (1,2%) 0 (0%) Здоровые матери (n=146) 138 (94,5%) 8 (5,5%) 0 (0%)
Р 0,58 0,84 0 р 0,47 0,72 0
Вывод. Тем не менее, статистически значимых различий между группами больных детей с ДМЖП и контроля в зависимости от пола также выявлено не было. Хотя нами не была выявлена взаимосвязь полиморфизма, тем не менее, нельзя исключить возможность участия гена СУР1А1 в формировании наследственной предрасположенности к ВПС. Также нельзя исключить сочетанное влияние гена и токсигенных средовых факторов на риск формирования патологии - так называемых генно-средо-вых взаимодействий. Учитывая преимущественно муль-тифакториальную природу несиндромальной формы дефекта межжелудочковой перегородки ВПС, дальнейшие исследования должны быть, нацелены на поиск вовлеченности других генов ферментов детоксикации, которые могут играть важную роль в развитии пороков сердца.
Список литературы
1. Баканова М.Л., Минина В.И., Савченко Я.А. Ассоциации полиморфных вариантов генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков и рака легкого у человека (обзор литературы) // Медицинская генетика. - 2012. - №11. - С. 13-20.
2. Гордеева Л.А. Полиморфизм генов II стадии деток-сикации ксенобиотиков у матери и формирование врожденных пороков развития у ребенка / Л.А. Гор-деева // Медицинская генетика. - 2012. - № 11. - С. 43-48.
3. Землянова М. А., Кольдибекова Ю. В. Современные подходы к оценке нарушений метаболизма ксенобиотиков при поступлении в организм из внешней среды // Экология человека. - 2012. - №8. - С. 8-14.
4. Коваль А.П., Мокрик И.Ю., Дубовая А.В. Токсичные элементы у детей с врожденными пороками сердца и магистральных сосудов // Оригинальные достижения. - 2012. - Т.17, № 3. - С. 95-99.
5. Мутафьян О. А. Пороки и малые аномалии сердца у детей и подростков / О. А. Мутафьян. — СПб.: Издательский дом СПбМАПО, 2005. — 480 с.
6. Полтанова А.А., Агаркова Л.А., Бухарина И.Ю. Функциональные различия генетически детерминированных вариантов системы детоксикации ксенобиотиков в формировании осложнений гестаци-онного процесса // Современные проблемы науки и образования. - 2013. - № 6. - С. 5-9.
7. Сравнительная характеристика встречаемости различных врожденных пороков развития плода с позиции оценки экологической опасности в крупном промышленном центре / Шабалдин А.В. и соавт. // Мать и Дитя в Кузбассе. - 2014. - №4. - С. 19-24
8. Agha A., Shabaan H., Abdel-Gawad E. Polymorphism of CYP1A1 gene and susceptibility to childhood acute lymphoblastic leukemia in Egypt // Leuk. Lymphoma. - 2014. - Vol.55, №3. - P. 618-623.
9. CYP1A1 Ile462Val polymorphism and the risk of non-small cell lung cancer in a Chinese population / Lin J. et al. // Tumori. - 2014. - Vol.100, №5. - P. 547-552.
10. Go R.E., Hwang K.A., Choi K.C. Cytochrome P450 1 family and cancers // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. -2015. - Vol.147. - P. 24-30.
11. The spectrum of adult congenital heart disease in Europe: morbidity and mortality in a 5 year follow-up period. The Euro Heart Survey on adult congenital heart disease / P. Engelfriet [et al.] // Eur. Heart. J. — 2005. — Vol. 26. — Р. 2325-2333.
ВЛИЯНИЕ ОСТРОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ НА СТАРУЮ И ДРЕВНЮЮ КОРУ ГОЛОВНОГО МОЗГА
Соколов Дмитрий Александрович Ильичева Вера Николаевна
канд. мед. наук, доцент кафедры нормальной анатомии человека, Воронежская государственная медицинская
академия им. Н. Н. Бурденко, г. Воронеж Минасян Вартан Вачаганович Спицин Василий Владимирович
ассистент кафедры нормальной анатомии человека, Воронежская государственная медицинская академия
им. Н. Н. Бурденко, г. Воронеж
АННОТАЦИЯ
В эксперименте изучали морфологические изменения нервных клеток и активность ферментов энергетического метаболизма в старой и древней коре головного мозга белых крыс, развивающиеся при алкогольной интоксикации. Полученные данные являются нейроморфологической и нейрохимической основой развития алкогольной энцефалопатии.
ABSTRACT
Morphological changes of neurons and activity of energetic metabolism enzymes have been studied in archicortex and paleocortex of white rats brain at experimental alcohol intoxication. The data obtained are the neuromorphological and neurochemical base of alcohol encephalophathy.
Ключевые слова: кора головного мозга, морфофункциональные изменения, алкогольная интоксикация. Keywords: brain cortex, morphofunctional changes, alcohol intoxication.
В зависимости от степени интоксикации этиловым алкоголем отравление сопровождается как ранними, обратимыми, так и отсроченными, необратимыми нарушениями в работе центральной нервной системы. Особого внимания заслуживает энцефалопатия, проявления которой имеется у большинства лиц, злоупотребляющих алкоголем [1]. Одной из основных причин деменции является алкогольная энцефалопатия, которая диагностируется у 1030% пациентов с клиническими признаками слабоумия [4]. Лидирующими признаками алкогольной энцефалопатии являются расстройства памяти и эмоциональной сферы, которые свидетельствуют о вовлечении в патологический процесс лимбической системы, в частности, образований старой и древней коры головного мозга [3]. Структурно-функциональные и нейрохимические изменения, возникающие в архео- и палеокортексе при действии высоких доз этилового спирта освящены в доступной литературе недостаточно полно.
Материал и методы исследования. Эксперимент выполнен на 168 белых беспородных крысах-самцах массой 180-200 г. Работу с лабораторными животными осуществляли в соответствии с принципами биоэтики, правилами лабораторных исследований и этическими нормами, руководствуясь приказом Минздрава СССР №755 от 12.08.1977 г. и Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, которые используются для экспериментальных и других научных целей (Страсбург, Франция, 1985). Моделирование острой алкогольной интоксикации осуществляли путем внутрибрюшинной инъекции животным 15%-ного раствора этилового спирта в дозе
2,25 г/кг в асептических условиях. В качестве биологического контроля были использованы крысы, которым вместо алкоголя внутрибрюшинно вводили физиологический раствор в аналогичном с экспериментальной группой объеме. Животных выводили из эксперимента путем декапи-тации через 3, 10, 60, 150, 300 и 600 мин после инъекции. Из фрагментов мозга, фиксированных в 10%-ном растворе нейтрального формалина, изготавливали фронтальные парафиновые срезы толщиной 6 мкм, которые окрашивали гематоксилином Караци - эозином и толуидиновым синим по Нисслю. На нефиксированных криостатных срезах толщиной 10 мкм выявляли следующие ферменты: сукци-натдегидрогеназу (СДГ; КФ 1.3.99.1), лактатдегидроге-назу (ЛДГ; КФ 1.1.1.27) и глюкозо-6-фосфатдегидроге-назу (Г-6-ФДГ; КФ 1.1.1.49). Выявление сДг и ЛДГ проводили тетразолийредуктазными методиками с использованием соответствующего субстрата и соли «нитро-СТ» в модификации Нахласа [2]; активность Г-6-ФДГ выявляли по методике [5]. Активность ферментов измерялась в единицах экстинции (е. э.), которая выражалась в процентах к контролю, принимаемому за 100%. Объектом исследования служили цитоархитектоническое поле СА3 гиппо-кампа и пириформная зона древней коры головного мозга.
Результаты и их обсуждение. Изучая изменения структурно-функциональной организации пириформной зоны древней коры и цитоархитектонического поля СА3 гиппокампа у животных контрольной группы, были установлены следующие процентные соотношения различных форм морфологической изменчивости нервных клеток (табл.).
Таблица
Содержание различных форм морфологической изменчивости нервных клеток в изучаемых отделах головного
Структура головного мозга Типы нейроцитов
нормо -хромные гипохромные гипер-хромные пикно-морфные клетки-тени
Пириформная кора 54,3 10,9 19,9 2,2 12,7
Поле СА3 гиппокампа 52,0 10,25 22,6 8,25 13,25
Под влиянием этанола в дозе 2,25 г/кг у белых крыс в различные сроки развивающейся алкогольной интоксикации наблюдалось перераспределение количества клеточных форм нейроцитов, которое носило фазный характер и приводило к изменению их соотношения. При этом на протяжении всех сроков наблюдения происходило увеличение содержания гипохромных, пикноморфных ней-роцитов и клеток-теней на фоне сокращения числа нор-мохромных и гиперхромных нервных клеток. Однако под влиянием алкоголя отмечались особенности в динамике численности нормохромных и гипохромных нейроцитов на этапах исследования. При алкогольной интоксикации была в большей степени выражена цикличность в изменении количества нормохромных нервных клеток; наиболее высокое их содержание отмечалось через 5 ч (46,0%; р<0,001) и 10 ч (31,0%; р<0,01) после введения этанола. Напротив, фазность в изменении численности гипохром-ных нейронов была менее выражена; существенно повышаясь через 1 ч (51,0%; р<0,01), количество гипохромных клеток понижалось и к 10 ч приближалось к уровню 21,0% (р<0,05). Кроме этого, под влиянием этанола в дозе 2,25 г/кг на протяжении от одного до 10 ч отмечалось значи-
тельно меньшее содержание клеток-теней при существенном повышении количества пикноморфных нейроцитов к концу срока наблюдения (21%; р<0,01).
При действии этанола на протяжении исследованного периода алкогольной интоксикации в нормо- и ги-перхромных нейронах преобладали реактивные изменения. Не исключено, что компенсаторно-приспособительные реакции проявлялись не только в возрастании числа многоядрышковых нормо- и гиперхромных нейро-цитов, но и в виде гиперплазии ядрышка, наблюдавшейся в ранние сроки алкогольной интоксикации.
Алкоголь достоверно вызывал в нервных клетках древней коры, спустя 3 мин после введения, снижение активности СДГ, сменявшееся через 60 мин тенденцией к ее повышению. Кроме того, выраженное увеличение активности ЛДГ через 60 мин после введения алкоголя сочеталось с возрастанием активности Г-6-ФДГ значительно превышавшей исходный уровень во все сроки наблюдения. Таким образом, этанол в дозе 2,25 г/кг вызывал активизацию анаэробного энергообеспечения нейроцитов древней коры как за счет интенсификации гликолиза, так и
вследствие раннего повышенного вовлечения в биоэнергетический метаболизм пентозофосфатного пути превращения глюкозы.
При действии этилового алкоголя на нейроциты поля СА3 гиппокампа было выделено три стадии наблюдаемых изменений: начальных, умеренных деструктивных и выраженных деструктивных изменений.
В стадию начальных изменений, на протяжении 3 -х мин после воздействия изучаемого фактора, среди нейроцитов гиппокампа преобладали нормо-, гипо- и ги-перхромные нервные клетки, процентное содержание которых составляло 45,2, 28,2 и 13,3% (р<0,01) соответственно. Численность пикноморфных нейронов не превышала 4,4% (р<0,001), а клеток-теней - 17,7% (р<0,05). Снижение уровня активности СДГ на данном этапе эксперимента сопровождалось его увеличением для ЛДГ и Г-6-ФДГ, что свидетельствовало об угнетении аэробного метаболизма в цикле трикарбоновых кислот на фоне активации процессов анаэробного гликолиза и пентозофосфат-ного пути превращения глюкозы.
Вторая стадия умеренных деструктивных изменений объединяла 10-, 35- и 60-ю мин наблюдения после воздействия алкоголя. В этот период в нейроцитах гиппо-кампа преобладали дистрофические изменения. В поле СА3 численность нормохромных клеток равнялась 31,2% (р<0,001). Изменение количества гипохромных нейронов в указанные сроки носило фазный характер и в целом не превышало показателя на предыдущем этапе исследования, приближаясь к нему на 60-й мин наблюдения (17,0%; р<0,01). Содержание гиперхромных нервных клеток было выше как по сравнению с контролем, так и с предыдущим сроком наблюдения. К 10-й мин число гиперхромных нейронов достигало 15,4% (р<0,05). Количество пикноморфных нейроцитов и клеток-теней возрастало с 8,1 (р<0,001) до 8,8 (р<0,001) и с 24,2 (р<0,01) до 28,5% (р<0,01) соответственно. Активность СДГ к 60-й мин несколько возрастала, не превышая контрольного значения. Уровень активности ЛДГ и АДГ увеличивался, а Г-6-ФДГ - убывал, оставаясь выше контроля. Таким образом, умеренное увеличение аэробного метаболизма в цикле лимонной кислоты, не превышающее контрольный уровень, сопровождалось существенным увеличением интенсивности анаэробного гликолиза и пентозофосфатного пути превращения углеводов.
Третья стадия выраженных деструктивных изменений соответствовала интервалу от 150-й до 600-й мин эксперимента и характеризовалась развитием деструктивных изменений в нейронах гиппокампа. Количество нормохромных нейроцитов варьировало от 27,4 (р<0,01) на 150-й мин до 32,2% (р<0,01) на 300-й мин. Численность гипохромных клеток колебалась в пределах 19,5 (р<0,001) через 150 мин - 14,8% (р<0,01) через 300 мин, количество
гиперхромных нейронов изменялось от 17,7 (p<0,001) через 150 мин до 15,3% (p<0,001) через 300 мин. Содержание пикноморфных нейроцитов увеличивалось, достигая к 600-й мин наблюдения 14,2% (p<0,01). Число клеток-теней к указанному сроку уменьшалось до 24,6% (p<0,05). В изучаемых отделах гиппокампа среди деструктивно измененных клеток преобладали нейроны с признаками кол-ликвационного нейрононекроза.
Выводы. Острая алкогольная интоксикация, наступающая после внутрибрюшинного введения этанола в дозе 2,25 г/кг, вызывает в нейроцитах пириформной зоны древней коры и цитоархитектонического поля СА3 гиппо-кампа головного мозга крыс комплекс неспецифических морфофункциональных изменений, которые заключаются в перераспределении процентного содержания нервных клеток с различными формами морфологической изменчивости, увеличении содержания нейроцитов с пограничными изменениями по гипо- и гиперхромному типам, а также нейронов с альтеративными изменениями, соответствующими коагуляционному и колликвационному нейрононекрозам. Кроме того, воздействие алкоголя приводит к угнетению энергопродукции в цикле Кребса и активации ферментов, катализирующих анаэробные пути превращения глюкозы. Альтеративные изменения наряду с нарушениями метаболизма нервных клеток более выражены в поле СА3 гиппокампа как относительно молодом в филогенетическом плане образовании коры головного мозга. Регистрируемые к концу сроков наблюдения необратимые альтеративные изменения, сопровождающиеся угнетением аэробного метаболизма глюкозы в нейроци-тах изучаемых отделов мозга можно рассматривать в качестве морфологической основы развивающейся алкогольной энцефалопатии.
Список литературы
1. Разводовский Ю. Е. Алкогольное поражение мозга / Ю. Е. Разводовский // Медицинские новости. -2006. - № 1. - С. 13-17.
2. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная / Э. Пирс. - М.: Мир, 1962. - 962 с.
3. Соколов Д. А. Некоторые морфогенетические механизмы восприятия времени / Д. А. Соколов, В. П. Федоров // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2006. - Т. 5, № 4. - С. 681686.
4. Jargin S. V. Social vulnerability of alcoholics and patients with alcohol-related dementia: a view from Russia / S. V. Jargin // Alcohol. - 2010. - Vol. 45, № 3. - P. 293-294.
5. Karnovsky M. J. A «direct-coloring» thiocholine method for dehydrogenase / M. J. Karnovsky, L. Roots // J. Histochem. Cytochem. - 1964. - Vol. 12. - Р. 219221.
НОВЫЙ ПОДХОД К ПЕРВИЧНОЙ ХИРУРГИЧЕСКОЙ ОБРАБОТКЕ ПРОНИКАЮЩИХ
РАН ГЛАЗ С ВОВЛЕЧЕНИЕМ ЗОНЫ ЛИМБА
Сухина Ирина Витальевна, Зорина Мария Богдановна
канд. мед. наук, доцент кафедры офтальмологии ФИПО Донецкого медицинского университета, г. Донецк
Бондарь Наталия Игоревна
врач отделения микрохирургии глаза Республиканского травматологического центра, аспирант, г. Донецк АННОТАЦИЯ
Целью настоящего исследования явилось повышение эффективности лечения больных с проникающими ранениями глаза с вовлечением зоны лимба путем усовершенствования первичной хирургической обработки раны. Для достижения поставленной цели нами разработана новая методика наложения двухъярусного шва на лимбальную часть раны
