Научная статья на тему 'Анализ морфофункционального состояния различных отделов коры головного мозга при действии ионизирующего излучения'

Анализ морфофункционального состояния различных отделов коры головного мозга при действии ионизирующего излучения Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
645
111
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ИОНИЗИРУЮЩЕЕ ИЗЛУЧЕНИЕ / КОРА ГОЛОВНОГО МОЗГА / IONIZING RADIATION / BRAIN CORTEX

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Ильичева В. Н., Ушаков Б. Н.

В результате проведенного эксперимента на 100 белых крысах-самцах, облученных в дозе 0,5 Гр однократно и фракционировано, были получены данные, свидетельствующие о зависимости изменений в нейроцитах различных в филогенетическом отношении зон коры от времени после воздействия фактора, условий облучения и филогенетического возраста участков головного мозга.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

THE ANALYSIS OF THE MORPHOFUNCTIONAL STATUS OF THE VARIOUS DIVISIONS OF THE CEREBRAL CORTEX UNDER THE ACTION OF IONIZING RADIATION

As a result of an experiment on 100 white male rats irradiated with a dose of 0.5 Gy single dose and fractionated, data were obtained showing the dependence of changes in the neurocytes in phy-logenetically different cortical areas from time to time after the exposure factor, irradiation conditions and phylogenetic age of the cortex

Текст научной работы на тему «Анализ морфофункционального состояния различных отделов коры головного мозга при действии ионизирующего излучения»

медицину композитных эндопротезов из никелида титана при реконструкции дефектов нижней челюсти и височнонижнечелюстного сустава.

Литература

1. Никелид титана. Медицинский материал нового поколения / В.Э. Гюнтер [и др.].- МИЦ, Томск, 2006.- 296 с.

2. Дюрягин, Н.М. Омский научный вестник / Н.М. Дюря-гин.- 2010.- № 1 (94).- С. 45-49.

3. Бюллетень сибирской медицины / Н.М. Дюрягин [и др.].-2011.- № 1.- С. 18-24.

4. Микроскопическая техника. Под ред. Д.С. Саркисова и Ю.Л. Перова.- Медицина, 1996.- 548 с.

5. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA /

О.Ю. Реброва.- М.: МедиаСфера, 2002.- 305 с.

6. Семченко, В.В. Гистологическая техника.- 3-е изд. доп. и перераб / В.В. Семченко, С.А. Барашкова, В.И. Ноздрин, В.Н. Артемьев.- Омск: Омская медицинская академия, 2003.- 152 с.

7. Ferreira, T.A. The ImageJ (User Guide Version 1.43) / T.A. Ferreira, W. Rasband.- 2010.- 178 p.

MORFO-FUNCTIONAL CHARACTERISTIC OF HYSTERESIS IMPLANTAT-FABRIC COMPOSITES OF BIOLOGICAL MODELS OF THE BOTTOM JAW FORMED IN COMPARABLE AND NON-COMPARABLE BIOMETRIC CONDITIONS

N.M. DJURJAGIN, S.S. STEPANOV, V.E. GJUNTER, V.V. SEMCHENKO, P.G. SYSOLJATIN, E.N. DJURJAGINA

Scientific research institute implant and materials with memory Novosibirsk state medical university Institute of veterinary medicine and biotechnologies of Omsk state agrarian university

In an experimental research on rabbits (n=20) it is spent morphometries histologic research of fabrics from the regenerat zone of the bottom jaw through 30, 130, 250, and 365 days after its damage and implantation to the place of defect composit endoprotes from the nikelid titan. Essential distinction of quality of processes reparative osteohistogenesis and formations of functionally integrated implant-fabric composites of biological models of the bottom jaw is revealed at biometric distinctions (non-comparable conditions endoprosthetics, asymmetry) and absence of distinctions (comparable conditions endoprosthetics, symmetry) between the sizes of the right and left half of jaw.

Key words: implant-fabric composites, osteohistogenesis provisory substratum, bone definitive body.

УДК 611.81:616-001.28/.29

АНАЛИЗ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ РАЗЛИЧНЫХ ОТДЕЛОВ КОРЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА ПРИ ДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ

В. Н. ИЛЬИЧЕВА*, Б. Н.УШАКОВ**

В результате проведенного эксперимента на 100 белых крысах-самцах, облученных в дозе 0,5 Гр однократно и фракционировано, были получены данные, свидетельствующие о зависимости изменений в нейроцитах различных в филогенетическом отношении зон коры от времени после воздействия фактора, условий облучения и филогенетического возраста участков головного мозга.

Ключевые слова: ионизирующее излучение, кора головного мозга

Несмотря на условия жесткого соблюдения правил техники безопасности, использование ядерной энергии иногда сопровождается риском облучения персонала и населения, особенно в неконтролируемых аварийных ситуациях (аварии на Чернобыльской АЭС и в Фукусиме), приводящих к загрязнению окружающей среды. Таким образом, тема изучения последствий облучения организма в малых дозах в настоящее время является актуальной. С целью объяснения морфогенетических механизмов неврологических расстройств, возникающих после облучения, целесообразно изучение реакций различных в филогенетическом отношении структур головного мозга. В проблеме радиационной безопасности вопросы, связанные с психофизиологической оцен-

* ГБОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. Н. Н. Бурденко» Минздравсоцразвития России. Россия, 394036, г. Воронеж, ул. Студенческая, 10.

ФГУЗ «Всероссийский центр экспериментальной и радиационной медицины им. А. М. Никифорова» МЧС РФ; veravgma@rambler.ru

кой работы операторов в штатных и аварийных условиях, занимают одно из важных мест, что обуславливает необходимость изучения влияния облучения на функции ЦНС.

Большой интерес представляют как ранние, так и отдаленные эффекты действия малых доз ионизирующего излучения вследствие расширения использования оборудования с радиоактивными элементами [8]. Малые дозы могут представлять большую опасность вследствие способности их к суммации.

Исходными показателями, определяющими работоспособность людей следует, по-видимому, считать их физическое и психическое состояние. Изучение этих показателей при облучении ограничено исследованиями на животных и косвенной оценкой работоспособности по данным клинических наблюдений облученных людей [3,5,6,7].

Ведущее значение в оценке работоспособности приобретает изучение структурных основ изменчивости ЦНС, осуществляющей в организме интегративную и коммуникационную функции [12]. Известно, что высшая нервная деятельность человека обеспечивается работой коры головного мозга, насчитывающей четыре отдела: новую, промежуточную, старую и древнюю, функция которых определяет характер, поведение и уровень работоспособности, проявляясь в формировании целенаправленных двигательных реакций, памяти и эмоциональной сферы. Новая кора преимущественно обеспечивает внимание, эмоции, разнообразные двигательные акты, старая кора участвует в формировании памяти, тогда как функциональная нагрузка древней коры, так называемой «обонятельной коры» до конца еще не изучена. Согласованная работа корковых структур обеспечивает существование индивида как разумного существа, способного к принятию решений и взаимодействию как с окружающей средой, так и с членами социума.

Основные положения о строении и функционировании мозга были впервые сформулированы более 100 лет назад. В работах выдающихся морфологов [10,13,15] приводятся подробные описания цито-, миело- и ангиоархитектоники корковых формаций у человека, приматов и ряда млекопитающих. Продолжается изучение количественных морфометрических показателей нервных клеток и нейроглии в возрастном и гендерном аспектах, а также с позиций межполушарной асимметрии.

Однако принципы функциональной анатомии, закрепившиеся в науке, на сегодняшний день не могут быть целиком реализованы в отношении головного мозга, как объекта исследования. Такое положение в определенной мере объяснимо наличием методических особенностей исследования мозга человека post mortem. Вместе с тем при проведении экспериментов на животных исследователи получили возможность оценить проявления пластичности нервной системы в ответ на воздействие факторов экзо- и эндогенной природы. Изучение разнообразия форм морфологической изменчивости нервных клеток и нейроглии наряду с традиционными показателями плотности нейроцитов на единицу площади (объема) дает новые возможности в оценке функционального состояния нервных структур, как элементов функциональных систем.

Ионизирующее излучение выступает как универсальный фактор, дестабилизирующий функциональные возможности мозга. В радиобиологии за последние годы были накоплены сведения о влиянии ионизирующего излучения на операторскую способность у людей, а также сведения о физиологических и морфологических нарушениях в различных областях головного мозга обезьян и других млекопитающих. Изучение радиоцеребральных эффектов наряду с нейроморфологическими представляется немаловажной проблемой, решение которой обеспечит более глубокую расшифровку механизмов работы мозга.

Изменение двигательной активности животных под влиянием рентгеновских лучей послужило основой для целого ряда исследований, в результате которых была установлена высокая чувствительность нервной системы к воздействию ионизирующего излучения. Одной из первых, содержащей убедительные данные о наличии патоморфологических изменений в нейроцитах, является работа [14].

Несмотря на использование в экспериментах различных видов животных и создание различных условий облучения, исследователи обнаружили во многом сходные изменения в морфофункциональном состоянии нервной системы [1,3]. Однако, нейрохимические эффекты, происходящие в различных отделах

головного мозга под действием ионизирующего излучения довольно противоречивы [6].

В настоящее время нет единого мнения ученых о конкретном определении диапазона малых доз ионизирующего излучения и влиянии их на различные системы организма, в том числе и на нервную систему [4,9]. В своей работе мы руководствовались классификацией И. В. Воронцова и соавт. [2].

Таким образом, изучение влияния малых доз на различные зоны коры являются своевременным и актуальным.

Материалы и методы исследования. Эксперимент спланирован и проведен на базе Государственного научноисследовательского испытательного института военной медицины МО РФ (г. Москва). В его основу положены данные о лучевой нагрузке у военнослужащих-ликвидаторов аварии на ЧАЭС и состоянии их здоровья в ранние и отдаленные сроки пострадиационного периода. Эксперимент проведен на 100 половозрелых крысах-самцах весом 200-230 г, в возрасте 1,5-2 месяцев к началу эксперимента. Животные подвергались общему равномерному однократному и фракционированному гамма-облучению спектр 1,2 МЭв в дозе 0,5 Гр. Мощность дозы облучения составляла 50 сГр/ч. При фракционированном облучении суммарная доза поглощалась в течении 5 суток. Взятие материала производилось через 1 сут, 6, 12 и 18 мес после воздействия. Протокол экспериментов в разделах выбора, содержания животных и выведения их из опыта был составлен в соответствии с принципами биоэтики и правилами лабораторной практики, которые представлены в «Международных рекомендациях по проведению медикобиологических исследований с использованием животных» (1985) и приказе МЗ РФ №267 от 19.06.2003 г. «Об утверждении правил лабораторной практики». Дозиметрический контроль равномерности облучения осуществлялся клиническим дозиметром 27012, стержневая камера которого располагалась в поле облучения. Неравномерность дозового поля составила ±15%. Материалом исследования служили участки мозга, выделяемые согласно цитоархитектоническим картам [10,15] - кора верхней лобной извилины (вторичная моторная кора (cortex motoria secundaria), передней лимбической области (прелимбическая кора (cortex prelimbicus), цитоархитектонические поля СА1-СА4 гиппокампа и зубчатая фасция, пириформная зона древней коры (cortex piriformis). Кусочки мозга фиксировали в 10% растворе формалина, приготовленном на 0,2 М фосфатном буфере и смеси Карнуа с последующей заливкой в парафин. Парафиновые срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали гематоксилином Караци-эозином для обзорных целей, а для изучения цитоархитектоники - метиленовым синим по Нисслю. У каждого животного в изучаемых отделах подсчитывали по 300 нейроцитов. При этом учитывали чётко определяемые их изменения: форму клетки, равномерность окраски цитоплазмы, степень дифференцировки ядра и ядрышка, уровень базофилии вещества Ниссля.

Надо признать, что к настоящему времени не сформировался единый методический подход в классификации и распознавании структурных изменений нервных клеток. В результате были выделены следующие типовые морфологические формы морфологической изменчивости нервных клеток: пограничная, альтеративная и адаптационная. Для количественного анализа морфологических изменений нейроцитов нами использован подход, рекомендованный [11].

Результаты и их обсуждение. При однократном и фракционированном облучении во всех изученных отделах ЦНС развиваются однотипные морфофункциональные изменения нейронов, отличающиеся интенсивностью проявления различных типов морфологической изменчивости, что позволило в пострадиационном периоде впервые выделить 3 стадии: начальных проявлений, выраженных изменений и восстановления.

Стадия начальных проявлений наблюдается в ранние сроки после облучения и характеризуется преобладанием пограничных изменений, которые отражают промежуточные между вариантами нормы и патологии состояния, развиваются по гипо- и гипер-хромному типам и являются обратимыми. На этой стадии происходит изменение в соотношении различных типов нейронов за счет уменьшения количества нормохромных нейроцитов и увеличения числа гипер- и гипохромных нервных клеток. В тоже время наблюдается тенденция возрастания численности дистрофически и некротически измененных клеток. Дистрофические изменения развиваются по гидропическому типу. Гидропическая нейронодистофия - разновидность диспротеинозов сопровожда-

ется деструктивными изменениями органелл, их вакуолизациеи и гипоплазией, деформацией ядра, снижением биоэнергетических и биосинтетических процессов. Выделяют два варианта гидропиче-ской нейронодистрофии - гипохромный и гиперхромный. Гипо-хромная гидропическая нейронодистрофия характеризуется различными формами хроматолиза: очаговым, центральным и периферическим, гидратацией ядра и цитоплазмы, распадом липопротеиновых мембран с образованием миелиноподобных комплексов. Гиперхромная гидропическая нейронодистрофия отличается гиперхроматозом цитоплазмы и ядра, сочетающегося с микровакуолизацией мембранных органелл. Оба варианта гидропической нейронодистрофии являются обратимыми и исчезают в ближайшие и отдаленные сроки после отмены действующего фактора.

Стадия начальных проявлений в верхней лобной извилине и передней лимбической области наступает в ранние сроки после воздействия экспериментального фактора (1 сут). При этом изменения достоверны (р<0,001) и более выражены после фракционированного облучения, характерна гипохромная гидропическая нейронодистрофия с преобладанием очагового и периферического хроматолиза, уменьшением ядрышко-ядерного и увеличением ядерно-цитоплазматического и ядерно-клеточного показателей. Изменения параметров нейроцитов в пириформной зоне древней коры и старой коре в течение первых суток незначительны и не достигают значимого уровня. Спустя 6 месяцев после воздействия наступает период выраженных изменений во всех изученных зонах коры головного мозга: достоверно (р<0,001) увеличивается количество дистрофических и некротических форм нейроцитов, уменьшением ядрышко-ядерного и увеличением ядерноцитоплазматического и ядерно-клеточного показателей. Следует отметить преобладание гипохромной гидропической нейроноди-строфии в древней и старой коре, тогда как в передней лимбической области и верхней лобной извилине - гиперхромной гидро-пической нейронодистрофии. Стадия восстановления в нейроци-тах древней и старой коры происходит значительно быстрее: спустя 1 год достоверно увеличивается количество нормохром-ных нейроцитов, уменьшаются размеры ядра, ядрышка, снижается количество нервных клеток с признаками гипохромной гидро-пической нейронодистрофии. Тогда как этот процесс более пролонгирован в новой коре и становится достоверным лишь к концу срока наблюдения. Следует отметить достоверно отсроченный процесс восстановления поврежденных нейроцитов при фракционированном режиме облучения. Таким образом, можно сделать вывод, что выраженность изменений и время наступления компенсации поврежденных нейроцитов зависит от режима облучения, времени после воздействия и филогенетического возраста коры.

Литература

1. Антипов, В.В. Гематоэнцефалический барьер при воздействии ионизирующего излучения в условиях нормальной и измененной газовой среды / В.В. Антипов, Б.И. Давыдов, И.Б. Ушаков // Космич. Исслед.- 1984.- Т. 22, № 2.- С. 297-305.

2. Воронцов, И.В. Малые радиационные воздействия и здоровье человека (очерки системного анализа) / И.В. Воронцов, Е.Г. Жиляев, В.Н.Карпов, И.Б. Ушаков.- М.-Воронеж: Воронежский государственный университет, 2002.- 276 с.

3. Гайдамакин. Н.А. Состояние синапсов коры больших полушарий головного мозга при гамма-облучении / Н. А. Гайдама-кин, И. Б. Ушаков // Журн. невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова.- 1988.- Т. 88.- № 7.- С. 11-16.

4. Гераськин, С А. Концепция биологического действия малых доз ионизирующего излучения на клетки /С. А. Гераськин// Радиац. биология. Радиоэкология.- 1995.- Т. 35, вып. 5.- С. 571-580.

5. Григорьев, Ю.Г. Космическая радиобиология / Ю.Г. Григорьев.- М.: Энергоатомиздат, 1982.- 176 с.

6. Давыдов, Б.И. Ионизирующее излучение и мозг: поведенческие и структурно-функциональные паттерны / Б.И. Давыдов, И.Б. Ушаков.- М.: ВИНИТИ, 1987.- 336 с.

7. Давыдов, Б.И. Радиационное поражение головного мозга / Б.И. Давыдов, И.Б. Ушаков, В.П. Федоров; под ред. акад. АПН СССР В. А. Пономаренко.- М.: Энергоатомиздат, 1991.- 240 с.

8. Ильин, Л А. Радиационная безопасность и защита /Л.А.Ильин, В.Ф.Кириллов.- М.: Медицина, 1996.- 336с.

9. Кузин, А.М. Природный радиоактивный фон и его значение для биосферы Земли / А.М. кузин.- М.: Наука, 1991.- 115 с.

10. Курепина, М.М. Мозг животных / М.М. Курепина.- М.: Наука, 1981.- 148 с.

11. Петров, А.В. Морфологические формы адаптационной изменчивости нервных клеток при действии антропогенных факторов / А.В. Петров, В.П. Федоров // Новости клинической цитологии России.- 1998.- Т. 2.- № 2.- С. 83-84.

12. Ушаков, И.Б. Изменение водно-электролитного обмена головного мозга крыс при облучении головы в высоких дозах / И.Б. Ушаков, В.П. Федоров // Радиобиология.- 1983.- Т. 23.-№3.- С. 372-376.

13. Филимонов, И.Н. Цитоархитектоника коры большого мозга человека / И.Н. Филимонов.- М.: Медигз, 1949.- 433 с.

14. Шеффер, Д.Г. Рентгеновские лучи и центральная нервная система / Д.Г. Шеффер.- Ростов н/Д., 1936.- 243 с.

15. Paxinos, G. The rat brain in stereotaxic coordinates / G.Paxinos, C.Watson. - Elsevier Acad.Press. 2004. - 367p.

THE ANALYSIS OF THE MORPHOFUNCTIONAL STATUS OF THE VARIOUS DIVISIONS OF THE CEREBRAL CORTEX UNDER THE ACTION OF IONIZING RADIATION

V. N. ILICHEVA, B. N. USHAKOV

Voronezh State Medical Academy after N.N. Burdenko All-Russian Center of Experimental Medicine and Radiation after A.M. Nikiforov

As a result of an experiment on 100 white male rats irradiated with a dose of 0.5 Gy single dose and fractionated, data were obtained showing the dependence of changes in the neurocytes in phy-logenetically different cortical areas from time to time after the exposure factor, irradiation conditions and phylogenetic age of the cortex. Key words: ionizing radiation, brain cortex.

УДК 611.81:616-001.28/.29

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РЕАКЦИЙ ДРЕВНЕЙ КОРЫ ПРИ ДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ И АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ

В. Н. ИЛЬИЧЕВА*, Б. Н. УШАКОВ**, Д. А. СОКОЛОВ*

В эксперименте на 550 крысах-самцах установлены проявления неврологических синдромосходных состояний, возникающих при нарушении функций древней коры после действия у-облучения в дозе 87,5 Гр и этанола в дозе 2,25 г/кг. Они проявляются однотипными изменениями активности ключевого фермента цикла Кребса, повышением активности ферментов-«маркеров» пентозофосфатного пути превращения углеводов (Г-6-ФДГ) и катаболизма этанола (АлДГ). Ключевые слова: древняя кора, ионизирующее излучение, алкогольная интоксикация

Авария на Чернобыльской АЭС показала, что существует реальная радиационная опасность как для работников атомной промышленности, так и для населения страны в целом. Не менее актуальна тема возможного облучения ионизирующим излучением при космических полетах, особенно с ядерными силовыми установками на борту, при полетах в радиационных поясах и планируемых длительных перелетах к Марсу. Фактический материал по радиобиологии ограничен исследованиями на животных и косвенной оценкой работоспособности по данным клинических наблюдений облученных людей [4,5,6,7]. В работах, посвященных исследованию действия ионизирующего излучения, для оценки эмоциональной сферы, памяти, адаптации к окружающей среде используются новые теоретические подходы, в частности, поиск имитационных моделей лучевых симптомов и синдромов. Несомненный интерес представляет направление по моделированию (имитации) симптомов и синдромов первичной лучевой реакции и ранней преходящей недееспособности с помощью физических и фармакологических средств на основе концепции синдромосходных состояний [1,6,8,]. Ее методологическая основа состоит в наличии общих закономерностей реагирования систем организма на различные экстремальные факторы; при этом учитывается принцип неспецифичности синдромов: стандартные реакции организма на различные воздействия [10,11].

* ГБОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. Н. Н. Бурденко» Минздравсоцразвития России. 394036, г. Воронеж, ул. Студенческая, 10. (473) 253 02 53.

ФГУЗ «Всероссийский центр экспериментальной и радиационной медицины им. А. М. Никифорова» МЧС РФ; veravgma@rambler.ru

В качестве одного из факторов, которые применяются для моделирования поведения человека после сублетального или летального ионизирующего облучения, в настоящее время широко используется этиловый спирт в пороговой и транквилизирующей дозах. Известно, что одним из отделов ЦНС, функция которого определяет характер, поведение и уровень работоспособности, проявляясь в формировании целенаправленных двигательных реакций, памяти и эмоциональной сферы является древняя кора головного мозга.

Тем не менее, несмотря на то, что в литературе имеются данные о гистоморфологических изменениях в ЦНС, наблюдающихся при действии различных доз алкоголя и ионизирующего излучения, характер структурно-функциональных изменений нейроцитов древней коры головного мозга в условиях летального у-облучения и алкогольной интоксикации изучен недостаточно полно. В то же время, в доступных публикация отсутствуют сведения о нейроморфологической основе синдромосходных неврологических состояний, развивающихся под влиянием названных выше факторов.

Объект и методы исследования. Планирование и проведение эксперимента осуществлялось на базе Государственного научно-исследовательского испытательного института военной медицины МО РФ (г. Москва). Для имитации синдромосходного с у-облучением неврологического статуса использован этанол, доза которого рассчитывалась эквивалентно изменениям поведенческих реакция (1,5 г/кг) и ранних неврологических нарушений (2,25 г/кг). Эксперимент проведен на 550 белых беспородных половозрелых крысах-самцах массой 180-200 г, которые находились в условиях обычного виварного содержания.

Для исследования сформировано 4 экспериментальных группы животных. I группу биологического контроля составили интактные животные. Крысы II группы подвергались облучению у-квантами 60Со (1,25 МэВ) на установке «Хизатрон» (Чехия) в кранио-каудальном направлении; предварительно они фиксировались в пеналах из оргстекла. Доза облучения составила 87,5 Гр; мощность дозы - 0,86 Гр/мин. В III и IV группах животным с соблюдением правил асептики производилось однократное внут-рибрюшинное введение 15,0% раствора этилового спирта в дозах 1,5 г/кг и 2,25 г/кг соответственно.

Объектом исследования служила пириформная зона древней коры головного мозга. Выбор участков мозга для изучения осуществлялся при помощи цитоархитектонических карт [9]. Животных забивали декапитацией в зимний период, в одно и тоже время суток через 3, 10, 17, 35, 60, 150, 300 и 600 мин после воздействия. Часть кусочков головного мозга крысы объединяли в комбинированные блоки, замораживали в твердой углекислоте, упакованными в алюминиевую фольгу. Из замороженных блоков в камере криостата приготовляли срезы толщиной 5-6 мкм. На криостатных срезах выявляли содержание рибонуклеиновой кислоты, дегидрогеназ: сукцинатдегидрогеназы (СДГ), лактат-дегидрогеназы (ЛДГ), глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ), алкогольдегидрогеназы (АлДГ), а также щелочной фосфо-моноэстеразы (ЩФ).

Выявление активности ферментов-«маркеров» цикла лимонной кислоты - СДГ и гликолиза - ЛДГ проводили тетразо-лийредуктазными методиками с использованием соответствующего субстрата и соли «нитро-СТ» в модификации Нахласа [12]. Активность фермента-«маркера» пентозо-фосфатного пути превращения глюкозы - Г-6-ФДГ выявляли по методике [2]; Активность АлДГ, катализирующей биологическое преобразование этилового спирта, определяли по [13]. Исследование активности ЩФ - «маркера» эндотелиального транспорта - проводили, используя реакции азосочетания с а-нафтилфосфатом и прочным синим РР [2,3], после стабилизации мембран при температуре +4°С в смеси равных объемов ацетона и хлороформа [3].

Величину активности ферментов (СДГ, ЛДГ, Г-6-ФДГ, АлДГ) в нейроцитах древней коры определяли по величине экс-тинции с помощью системы «Микротелс-4».

Количественные данные обрабатывались статистически с помощью пакета программ «ЗТАЭ^-ШМ» РС-АТ 386 ДХ на базе ЦНИЛ ВГМА. При этом учитывали характер закона распределения параметров: в условиях нормального распределения выборки для оценки вероятности различий использовали критерий Стьюдента, в остальных случаях - непараметрический критерий Вилкоксона-Манна-Уитни.

Результаты и их обсуждение. В раннем пострадиационном периоде изменение активности СДГ, с одной стороны, и ЛДГ, Г-

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.