CC BY
50
© Д. И. Маракушин, О. А. Наконечная, С. А. Стеценко
УДК 612. 017. 1: 616-099-036. 11-092. 9: 547. 395
Д. И. Маракушин, О. А. Наконечная, С. А. Стеценко ВЛИЯНИЕ «НЕОНОЛОВ» МАРОК АФ9-12 и АФС9-6 КМ НА СОСТОЯНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ В ПОДОСТРОМ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОМ ОПЫТЕ Харьковский национальный медицинский университет (г. Харьков)
Работа выполнена в Харьковском национальном медицинском университете в рамках научной проблемы «Изучение механизмов биологического действия простых полиэфиров в связи с проблемой охраны окружающей среды», № государственной регистрации 011011001812.
Вступление. В настоящее время одной из приоритетных проблем медицины является укрепление здоровья населения и повышение его резистентности к неблагоприятным социально-средовым факторам. Важная роль в этом принадлежит иммунной системе, состояние которой во многом определяет течение и исход многих болезней и патологических состояний. Она обеспечивает генетический контроль, мобилизует защитные силы и способность организма противостоять воздействию болезнетворных факторов окружающей среды (инфекционного и неинфекционного характера; физической и химической природы), направленных на поддержание гомеостаза. Профилактическая направленность здравоохранения диктует необходимость ранней донозологической диагностики нарушения иммунологической реактивности организма и своевременной коррекции иммунной недостаточности. Это является особенно актуальным в условиях кризисного состояния биосферы, когда в окружающей среде циркулирует большое количество различных химических веществ, многие из которых обладают мутагенным, тератогенным, эмбриотропным, гонадотропным действием. Ксенобиотики способны ингибировать клеточный и гуморальный иммунитет, усиливать скорость старения организма [2,5,11-13]. В последние десятилетия основными химическими загрязнителями воздушной и производственной среды, водоемов, почвы стали предприятия органического синтеза по производству поверхностно-активных веществ (ПАВ), которые по объему и ассортименту выпускаемой продукции занимают первое место в мире и странах СНГ [1,5,6,11]. Широкое использование ПАВ в производстве и быту требует комплексного изучения влияния детергентов на все органы, системы и функции организма и, в первую очередь, на иммунную систему. Особенно актуальным является этот вопрос для вновь синтезируемых и внедряемых ПАВ в различные отрасли народного хозяйства [5,11].
Целью работы являлось изучение влияния группы детергентов на состояние иммунологической
реактивности теплокровных животных в подостром токсикологическом опыте и обоснование прогностических показателей диагностики иммунологической дисфункции.
Объект и методы исследования. Выбор группы ПАВ обоснован большими объемами производства, широким ассортиментом выпускаемых продуктов на их основе и синтетических моющих средств (СМС), распространением в производственных условиях и быту, а также отсутствием прогностической оценки потенциальной опасности для человека и теплокровных животных. В работе было использовано два детергента, имеющие товарное название «Неонолы» на основе оксиэтилированного алкилфенола (ОА) марки АФ9-12 и натриевой соли карбоксиметилированного этоксилата на основе соответствующего изононилфенола марки АФС9-6 КМ с регламентированными физико-химическими свойствами. Эти соединения нашли широкое применение в различных отраслях промышленности в качестве флотореагентов, эмульгаторов, ПАВ, чистящих средств, антикоррозийных препаратов. На основании параметров острой токсичности АФ9-12 и АФС9-6 КМ относятся к умеренно токсичным соединениям, обладающим выраженными кумулятивными свойствами. Среднесмертельные дозы (ДЛ50) определены на уровнях 3,4 и 2,2 г/кг массы животного и коэффициенты кумуляции на уровнях 2,2 и 2,72, соответственно для «неонолов» АФ9-12 и АФС9-6 КМ. Влияние ксенобиотиков на иммунную систему изучалось в условиях подострого опыта на половозрелых крысах (массой 180-210г) популяции WAG и мышах гибридной линии BALB/C и (СВА-С57ВЦ F1 массой 23-25г Животным ежедневно до кормления внутрижелудочно с помощью металлического зонда вводились перорально водные растворы «неонолов» в 1/10, 1/100, 1/1000 ДЛ50. На протяжении 45 суток контрольные группы получали соответствующие объемы питьевой воды. В каждую из групп (опытная и контрольная) было включено по 10-12 белых крыс и по 15-20 мышей. Аллергенные свойства неонолов изучались на морских свинках и кроликах породы шиншилла. Всего в эксперименте использовано 85 белых крыс, 170 мышей, 12 морских свинок, 6 кроликов при соблюдении закона Украины «О защите животных от жестокого обращения» от 21.02.06 № 3477-IV
Таблица 1
Влияние детергентов на состояние плазмоцитарной реакции у белых крыс в условиях
подострого опыта (плазматические клетки)
Вещества Д°за ДЛ50 Селезенка Лимфатические узлы
незрелые зрелые сумма незрелые зрелые сумма
Контроль 15,2 ± 2,0 21,4 ± 1,8 36,4 ± 2,2 12,5 ± 2,7 22,5 ± 2,6 36,8 ± 2,3
АФ9-12 1/10 18,6 ± 1,4 27,8 ± 2,1* 44,2 ± 2,4* 18,3 ± 2,4* 36,5 ± 2,1* 54,1 ± 2,6*
1/100 14,3 ± 1,8 20,5 ± 1,7 36,0 ± 2,1 14,2 ± 1,5 22,3 ± 1,9 37,5 ± 2,7
АФС9-6 КМ 1/10 18,3 ± 1,6 29,5 ±1,4* 47,6 ± 1,8* 18,3 ± 2,7* 36,4 ± 1,8* 55,2 ± 3,4*
1/100 14,7 ± 1,9 22,3 ± 1,6 37,3 ± 2,4 13,8 ± 2,1 20,5 ±1,7 35,4 ± 2,6
Примечание; * различия достоверные р < 0,05.
Программа исследования предусматривала: 1) изучение аллергенных свойств «неонолов» в соответствии с методическими указаниями и этапной схемой выявления аллергенных и сенсибилизирующих свойств [3,6,9,10]; 2) исследование плазмоцитарной реакции тимуса, селезенки, лимфатических узлов и печени по Г. А. Гурвичу, 1969 [7,9,10]; 3) изучение влияния веществ на антителообразующую способность, гомотрансплантационную активность лимфоидных клеток, функциональную активность Ти В- лимфоцитов в реакции бласттрансформации, антигенсвязывающую способность лимфоцитов в реакции иммунного розеткообразования, способность Т- и В- лимфоцитов к кооперативному взаимодействию при реализации гуморального иммунитета выполнено общепринятыми иммунологическими методами и с учетом методических рекомендаций [4,7,15-18]. Синтез ДНК, РНК и белка в лимфоми-елоцитных клетках селезенки интактных животных и животных, иммунизированных эритроцитами барана, изучали по уровню включения т уИго радиоактивных предшественников 3Н - тимидина, 3Н -уридина и 14С - гидролизата белка [14,16]. Влияние «неонолов» на факторы естественной резистентности опытных животных изучалось на основании фагоцитарной активности нейтрофилов и оценивалось по фагоцитарному числу, индексу поглощения и переваривания, общему количеству поглощенных и переваренных стафилококков на один активный нейтрофил [6,13]. Действие веществ на аутофлору и бактерицидность кожных покровов исследовалось в соответствии с методическими рекомендациями [6]. Качественная и количественная характеристика морфологических и биохимических свойств микробиоценоза толстого кишечника изучались общепринятыми методами [6,13]. Содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови изучалось методом их преципитации высокомолекулярным полиэтиленгликолем (ПЭГ) [10,14]. Статистическая обработка полученных результатов проводилась на персональном компьютере по программе «Биостатистика» с использованием критерия Стьюдента-Фишера [8].
Результаты исследования и их обсуждение. Результаты изучения аллергенных и
сенсибилизирующих свойств на морских свинках показали, что «неонолы» не дали положительных реакций при внутрикожном, подкожном и накожном тестировании. Реакции специфического лизиса лейкоцитов (РСЛЛ), специфической агломерации лейкоцитов (РСАЛ), специфического повреждения базофилов (РСПБ) спустя 24 часа после введения разрешающей дозы ксенобиотиков были отрицательными, что дало основание исключить у данной группы «неонолов» наличия сенсибилизирующих и аллергенных свойств [9]. Иммунологическая перестройка организма пол влияние ПАВ оценивалась по состоянию плазмоцитарной реакции лимфатических узлов, селезенки, тимуса, печени. Как известно, информация об антигене, передаваемая от макрофагов к лимфоцитам, является пусковым механизмом в становлении как гуморального, так и клеточного иммунитета. Поэтому степень макро-фагально-плазмоцитарной лимфоидной ткани отражает напряженность иммуногенеза и, прежде всего, уровень выработки антител клетками плаз-моцитарного ряда. Исследования плазмоцитарной реакции выявили увеличение количества зрелых клеток плазмоцитарного ряда. Плазмобласты, как активные продуценты антител, встречались в виде единичных клеток, несколько в большем количестве обнаруживались незрелые и еще в большем количестве зрелые плазматические клетки (табл. 1), что свидетельствует об ингибировании гуморального иммунитета.
Изучение влияния детергентов на гуморальный и клеточный иммунитет мышей обнаружило, что неонолы в 1/10 ДЛ50 снижали селезеночный и тимусный индекс, общую клеточность и количество клеток на мг/ткани (табл. 2). При этом отмечалась четкая зависимость исследуемых показателей от дозы детергентов. В меньшей мере эти нарушения проявлялись под воздействием 1/100 ДЛ50.
Для определения гемолизинпродуцирующей способности ядросодержащих клеток (ЯСК) селезенки определяли удельную литическую концентрацию и количество литических концентраций. Показано, что затравка животных неонолами в дозе 1/1000 ДЛ50 не вызывала достоверных изменений абсолютного количества ЯСК в селезенке и их числа
Таблица 2
Влияние детергентов на состояние клеточного и гуморального иммунитета у мышей линии БАЬБ/С и (СБАС57ВЬ) •П
Соединения Доза ДЛ50 Селезенка Тимус
селезеночный индекс, % общая клеточ-ность млн. кол-во клеток на мг ткани, млн. тимусный индекс, % общая клеточ-ность млн. кол-во клеток на мг ткани, млн.
Контроль 1,66 ± 0,27 172,3 ± 24,5 0,57 ± 0,06 0,31 ± 0,04 36,7 ± 5,4 0,52 ± 0,10
АФ9-12 1/10 1,12 ± 0,15 69,7 ± 8,4* 0,24 ± 0,03* 0,19 ± 0,02* 15,2 ± 2,3* 0,22 ± 0,03*
1/100 1,43 ± 0,22 105,2 ± 15,3* 0,46 ± 0,05 0,28 ± 0,03 25,6 ± 6,4 0,44 ± 0,12
АФС9-6 КМ 1/10 0,53 ± 0,07 104,3 ± 20,5* 0,98 ± 0,04* 0,20 ± 0,02* 17,4 ± 3,5* 0,31 ± 0,03*
1/100 1,38 ± 0,26 137,5 ± 33,6 0,48 ± 0,05 0,28 ± 0,03 29,9 ± 4,2 0,50 ± 0,20
Примечание; * различия достоверные р < 0,05.
Таблица 3
Гемолизинпродуцирующая способность ядросодержащих спленоцитов мышей на введение Т-зависимого антигена
Соединения Доза Дл50 селезеночный индекс, % количество клеток, млн. количество клеток на мг ткани, млн. кол-во литических конц. млн. спленоцитов
Контроль 1,41 ± 0,18 62,75 ± 4,10 0,54 ± 0,06 154,68 ± 9,76
Неонол АФ 9-12 1/100 0,57 ± 0,06* 43,72 ± 6,20* 0,38 ± 0,04* 19,20 ± 1,7*
1/1000 1,26 ± 0,4 61,43 ± 5,26 0,57 ± 0,08 63,45 ± 5,34*
Неонол АФС 9-6 КМ 1/100 0,48 ± 0,07* 37,64 ± 4,50* 0,33 ± 0,05* 16,35 ± 1,4*
1/1000 1,32 ± 0,15 59,34 ± 4,80 0,52 ± 0,06 58,66 ± 4,80*
Примечание; * - различия достоверные, р < 0,05.
на 1мг ткани органа, тогда как 1/100 ДЛ50 приводила к ингибированию функциональной способности ЯСК в тесте с трипановым синим. Вещества вызывали снижение удельной литической концентрации и как следствие - количество литических концентраций. С увеличением дозы ДЛ50 супрессия гемо-лизинпродуцирующей способности спленоцитов повышалась (табл. 3). Исследуемые детергенты в 1/10 и 1/100 ДЛ50 подавляли число антителообразующих клеток в селезенке, снижали индекс стимуляции клеток лимфатических узлов в реакции бласттрансформации на фитогемагглютинин (ФГА), индекс стимуляции в реакции бласттрансформации на липополисахарид (ЛПС) лимфоцитов селезенки, ингибировали процентное содержание экспрессирующих Е - , Ро - , С3 - рецепторы лимфоцитов.
Оценка результатов розеткообразования иммунными спленоцитами, выявила снижение процента клеток, связывающих 6-8 эритроцитов барана в сравнении с контрольной группой животных. Определение способности Т - и В - лимфоцитов к кооперативному взаимодействию показало, что у летально облученных животных, получавших 5х106 клеток костного мозга и 1х107 тимоцитов от животных, токсифицированных «неонолами», отмечалось достоверное снижения накопления антителообразующих клеток по сравнению с животными получавшими клетки от интактных животных. Ксенобиотики в 1/10 и 1/100 ДЛ50 тормозили включение в лим-фомиелоидные клетки 3Н-тимидина, 3Н-уридина и 14С-лейцина, что свидетельствовало об ингибировании синтеза ДНК, РНК и белка в иммунокомпе-тентных органах и тканях (табл. 4).
Таблица 4
Влияние детергентов на включение 3Н — тимидина, 3Н — уридина и 14С-лейцина в клетки селезенки интактных и иммунизированных мышей линии (СВА х С57БЬ) х Р1в 1/10 ДЛ50
Включение метки (имп/мин), 2 х 106 клеток Группа, вещества (М ± т)
Контроль АФ 9-12 АФС9-6 КМ
3Н - тимидин: - интактные клетки (2,4 ± 0,3) х 103 (3,8 ± 0,4) х 103* (2,6 ± 0,4) х 103*
- иммунные клетки (8,8 ± 0,6) х 103 (5,3 ± 0,7) х 103* (4,2 ± 0,5) х 103*
3Н - уридина: - интактные клетки (4,1 ± 0,5) х 103 (5,2 ± 0,6) х 103* (4,8 ± 0,7) х 103*
- иммунные клетки (9,3 ± 0,7) х 103 (7,1 ± 0,8) х 103* (6,5 ± 0,5) х 103*
14С - лейцин: - интактные клетки (7,8 ± 0,8) х 103 (9,6 ± 1,2) х 103* (6,3 ± 0,6) х 103*
- иммунные клетки (8,4 ± 1,7) х 103 (11,3 ± 0,9) х 103* (9,2 ± 0,8) х 103*
Примечание: * - различия достоверные, р < 0,05.
Таблица б
Влияние «неонолов» на неспецифическую резистентность животных в подостром опыте
Показатели Группа, вещества (M ± m)
Контроль АФ9-12 АФC 9-6 КМ
1/10 1/100 1/10 1/100
ЦИК - низкомолекулярные (г/л), ПЭГ - 3,5 % 1,6 ± 0,014 6,4 ± 0,48* 4,7 ± 0,53* 6,8 ± 0,75* 5,2 ± 0,43*
ЦИК - низкомолекулярные (г/л), ПЭГ - 5 % 0,93 ± 0,012 1,50 ± 0,12* 1,26 ± 0,94* 1,47 ± 0,13 1,12 ± 0,11*
ЦИК - низкомолекулярные (г/л), ПЭГ - 6 % 0,41 ± 0,010 0,94 ± 0,08* 0,73 ± 0,05* 1,05 ± 0,12* 0,86 ± 0,07*
Аутофлора кожи (количество колоний Е. СоП) 32,5 ± 2,4 94,3 ± 7,2* 48,6 ± 4,3* 88,7 ± 6,25* 53,4 ± 4,60*
Бактерицидность кожи (количество колоний Е. СоП) 120,7 ± 8,6 240,5 ± 2,7* 187,3 ± 9,4* 236,7 ± 18,4* 175,3 ± 14,2*
Примечание: * - различия достоверные, р < 0,05.
Доза 1/1000 ДЛ50 не влияла на показатели клеточного и гуморального иммунитета. «Неонолы» АФ9-12 и АФС9-6 КМ в дозах 1/10 и 1/100 ДЛ50 повышали в сыворотке крови белых крыс содержание высоко-, средне и низкомолекулярных ЦИК, увеличивали рост и размножение аутофлоры кожных покровов, снижали бактерицидность кожи и фагоцитарную активность нейтрофилов (табл. 5).
Известно, что нарушение качественной и количественной характеристики микрофлоры кишечника имеет большое значение в развитии дисбактериозов. В этом аспекте изучено влияние «неонолов» на состояние микробиоценоза кишечника мышей. Исследования показали, что ксенобиотики в 1/100 и 1/1000 ДЛ50 снижали количество грамположитель-ных кокков на фоне повышения палочковидной микрофлоры, особенно количества грамотрицатель-ных палочек (табл. 6). Идентификация микрофлоры кишечника мышей показала, что среди грамполо-жительных кокков преобладает неплазмокоагулирующий S. aureus, биохимические свойства которого значительно менялись под влиянием неонолов. Так, под воздействием АФ9-12 и АФС 9-6 КМ S. aureus теряет способность сбраживать глюкозу и маннит.
Учитывая, что по отношению к манниту судят о вирулентности S. aureus, можно думать о том, что вещества снижают вирулентность стафилококков. Грамотрицательные палочковидные бактерии были представлены микроорганизмами ряда lersinia: I. enterocolitica, I. pseudotuberculosis и
Ег^егоЬа^егІасеае - Е. СоІІ. Идентификация грам-положительных бактерий обнаружила, что среди них преобладает В. виШІв - микроорганизм, относящийся к нормальной микрофлоре, теряет способность к сбраживанию сахарозы и инозита, но приобретает свойства сбраживать салицин и сорбит. Известно, что изменение соотношения грамотри-цательной и грамположительной микрофлоры кишечника и ее биохимических свойств приводит к нарушению функции нормальной микрофлоры. В этой связи следует полагать, что исследуемые вещества способны в дозах 1/100 и 1/1000 ДЛ50 приводить к развитию дизбактериоза. Недействующей дозой «неонолов» на состояние микробиоценоза кишечника была 1/1000 ДЛ50.
Выводы.
1. «Неонолы» марок АФ9-12 и АФС 9-6 КМ не обладают сенсибилизирующими и аллергенными свойствами. В условиях перорального поступления в организм 1/10 и 1/100 ДЛ50 угнетают в подостром опыте плазмоцитарную реакцию лимфатических узлов и селезенки, антителообразующую и гомотрансплантационную способность иммуно-компетентных клеток, функциональную активность ядросодержащих клеток, нарушают кооперативное взаимодействие клеточного и гуморального иммунитета, ингибируют синтез белка, РНК и ДНК. В дозе 1/1000 ДЛ50 вещества не влияли на состояние клеточного и гуморального иммунитета.
2. Вещества в дозах 1/10 и 1/100 Табёица 6 дё50 повышают содержание в сыворотке крови ЦИК, аутофлору кожных покровов и снижают бактерицидность кожи, что свидетельствует об ингибировании неспецифической резистентности организма в условиях длительной токси-фикации ксенобиотиками.
3. Наиболее чувствительным показателям при изучении «неонолов» на иммунологическую реактивность организма в подостром опыте являлись нарушение качественной и количественной характеристики микробиоценоза кишечника. Максимально
Влияние неонолов на количественную характеристику микрофлоры кишечника мышей линии БАЬБ/С
Вещества Доза, M ± m (млн. микробных тел на 1г. фекалий)
ДЁ50 Гр- палочки Гр+ палочки Гр+ кокки
Контроль 3,84 ± 0,56 0,52 ± 0,08 1,83 ± 0,16
АФ 9-12 1/100 2,06 ± 2,3* 4,86 ± 0,64* 0,22 ± 0,05*
1/1000 13,8 ± 1,15* 2,75 ± 0,23* 0,63 ± 0,07*
АФC9-6 1/100 26,44 ± 1,72* 4,38 ± 0,56* 0,14 ± 0,003*
КМ 1/1000 27,5 ± 2,45* 2,53 ± 0,47* 0,58 ± 0,06*
Примечание; * различия достоверные р < 0,05.
недействующая доза по влиянию на показатели Перспективы дальнейших исследований. В
микр°биоцен°за ки0ечника была опредеёена на дальнейших исследованиях было бы интересным
уровне 1/1000 ДЛ50, что позволяет использовать морфологические, культуральные и биохимические свойства бактерий в комплексной диагностике им-
изучить состояние показателей клеточного и гуморального иммунитета - популяцию и субпопуляции
мунной недостаточности в условиях воздействия Т-ёимфоцитов, медиаторы иммуНН°й системы иН-
химических факторов на организм. терлейкины и фактор некроза опухолей.
Литература
1. Богомазов О. А. Автоматизированный контроль качества природных и сточных вод / О. А. Богомазов, В. Я. Кобылян-ский. - Екатеринбург : Уральский рабочий, 1997. - 239 с.
2. Григорова И. А. Этиология и патогенетические механизмы модельного атерогенеза / И. А. Григорова, Б. И. Григоров, В. Н. Погорелов [и др.]. - Харьков : РИП «Оригинал», 1999. - 183 с.
3. Гурвич Г. А. К методике цитосерологического исследования лимфоидной ткани. Проблемы инфекции иммунитета и аллергии / Г. А. Гурвич. - Москва, 1969. - С. 322-327.
4. Данилова Л. А. Влияние криоконсервирования на гемотрансплантационную активность лимфоцитов / Л. А. Данилова, А. Г. Федотенков // Проблемы гематологии и переливания крови. - 1978. - № 12. - С. 21-25.
5. Жуков В. И. Детергенты - модуляторы радиомиметических эффектов / В. И. Жуков, В. В. Мясоедов, Ю. И. Козин [и др.] . - Белгород : 2000. - 375 с.
6. Жуков В. И. Медико-биологические аспекты проблемы охраны водных объектов от загрязнения поверхностно-активными веществами / В. И. Жуков, Р. И. Кратенко, Ю. К. Резуненко [и др.]. - Харьков, 2000. - 397 с.
7. Зауэр Х. Метод иммунных розеток / Х. Зауэр. - Москва, 1987. - С. 278-282.
8. Лакин Г. Ф. Биометрия / Г. Ф. Лакин. - Москва : Высшая школа, 1990. - 154 с.
9. Методические указания по изучению аллергенного действия при обосновании предельно допустимых концентраций вредных веществ в воде водоемов. Москва : МЗ СССР, 1984 : 2185-80.
10. Методические указания по изучению влияния факторов окружающей среды на иммунобиологическую реактивность. Киев : МЗ УССР, 1986 : 2185-80.
11. Попова Л. Д. Олигоэфиры - модуляторы радиомиметических эффектов / Л. Д. Попова, В. И. Жуков, В. В. Мясоедов [и др.] //Медицина сегодня и завтра. ХГМУ. - 2004. - № 4. - С. 51-59.
12. Сидоренко Г. И. Методические и теоретически аспекты гигиены окружающей среды / Г. И. Сидоренко // Гигиена окружающей среды в СССР. - Москва : Медицина, 1989. - С. 5-14.
13. Цыганенко А. Я. Методические основы регламентации сложных смесей триэтаноламиновых солей алкилфосфатов и ал-килполифосфатов в воде водоемов / А. Я. Цыганенко, Н. Г. Щербань, Л. А. Бондаренко [и др.]. - Белгород, 2001. - 178 с.
14. Чернушенко Е. Ф. Иммунология и иммунопатология заболевания легких / Е. Ф. Чернушенко, Л. С. Когосова. - Киев : Здоровя, 1981. - 208 с.
15. Claman H. N. Thymus-marrow cell combinations: Synergism in antibody production / H. N. Claman // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. - 1966. - Vol. 122. - P. 1167-1171.
16. Dijk H. On antification in vitro antibody secretion by immune spleen cells / H. Dijk, N. Bloksma // Immunol. Methods. -1977. - № 14. - Р 325-331.
17. Jerne N. K. Plague-formation in agar by single antibody producing call / N. K. Jerne, А. А. Nordin // Scien. -1963. -Vol. 140. - Р 405-406.
18. Jondel M. Surtace markers an human T - and B - lymphocytes A. Large population of lymphocytes forming non-immune rosettes with sheep red blood cells / М. Jondel // J. Exp. Med. - 1972. - № 2. - Р 207-215.
УДК 612. 017. 1: 616-099-036. 11-092. 9: 547. 395
ВПЛИВ «НЕОНОЛІВ» МАРОК АФ9-12 та АФС9-6 КМ НА СТАН ІМУНОЛОГІЧНОЇ РЕАКТИВНОСТІ У ПІДГОСТРОМУ ТОКСИКОЛОГІЧНОМУ ДОСЛІДІ
Маракушин Д. І., Наконечна О. А., Стеценко С. О.
Резюме. Вивчено вплив неонолів марок АФ9-12 и АФС9-6 КМ на стан імунологічної реактивності теплокровних тварин у підгосторому досліді. Виявлено, що досліджувані ксенобіотики не мають сенсибілізуючі та алергенні властивості. У дозах 1/10 и 1/100 ДЛ50 вони пригнічують плазмоцитарну реакцію лімфатичних вузлів і селезінки, антитілоутворюючу та гомотрансплантаційну властивість імунокомпетентних клітин. Детергенти підвищюють вміст в сироватці крові ЦІК, аутофлору та знижують бактерицидність кожних покривів, що свідчить про інгібування неспецифічної резистентності организму.
Ключові слова: неоноли, імунологічна реактивность, клітинні та гуморальні ланцюги імунітету.
УДК 612. 017. 1: 616-099-036. 11-092. 9: 547. 395
ВЛИЯНИЕ «НЕОНОЛОВ» МАРОК АФ9-12 и АФС9-6 КМ НА СОСТОЯНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ В ПОДОСТРОМ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОМ ОПЫТЕ
Маракушин Д. И., Наконечная О. А., Стеценко С. А.
Резюме. Изучено влияние неонолов марок АФ9-12 и АФС9-6 КМ на состояние иммунологической реактивности теплокровных животных в подостором опыте. Выявлено, что исследуемые ксенобиотики не обладают сенсибилизирующими и аллергенными свойствами. В дозах 1/10 и 1/100 ДЛ50 они угнетают плаз-моцитарную реакцию лимфатических узлов и селезенки, антителообразующую и гомотрансплантационную способность иммунокомпетентных клеток. Детергенты повышают содержание в сыворотке крови ЦИК, аутофлору кожных покровов и снижают бактерицидность кожи, что свидетельствует об ингибировании неспецифической резистентности организма.
Ключевые слова: неонолы, иммунологическая реактивность, клеточное и гуморальное звенья иммунитета.
UDC 612. 017. 1: 616-099-036. 11-092. 9: 547. 395
The Influence of «Neonols» AF9-12 and AFS9-6 KM on the State of Immunological Reactivity during Subacute Toxicological Experiment
Marakushin D. I., Nakonechnaya O. A., Stetsenko S. A.
Summary. In the work we have used two detergents, which are called “neonols” on the basis of the oxyethylized alkylphenols AF9-12 and sodium salt of carboxyethylized isononylphenols AFC9-6 KM with the regulated physicochemical properties.
On the basis of parameters of acute toxicity AF9-12 and AFC9-6 KM are belong to moderately toxic compounds, possessing the expressed cumulative properties. The median lethal doses (DL50) are defined at the level of 3,4 and 2,2 g/kg mass of animal and coefficients of cumulation at the level of 2,2 and 2,72, accordingly for “neonols” AF9-12 and AFC9-6KM. The influence of “neonols” AF9-12 and AFC9-6KM on the state of immunological reactivity of warm-blooded animals in subacute experiment is studied. The influence of xenobiotics on the immune system was studied on the eugamic rats (weight 180-210г) of WAG population and mouses of hybrid line BALB/C and (CBA^C57BL) ^F1 (weight 23-25g). Allergenic properties of neonols were studied on guinea-pigs and rabbits of chinchilla breed.
The program of research has comprised the research of allergenic properties of «neonols», research of plas-mocytic reaction of thymus, spleen, lymphatic nodes and liver, the study of influence of substances on antibody-producing ability, homotransplantative activity of lymphoid cells, functional activity of T- and B- lymphocytes in the reaction of blast-cell transformation, antigen-binding ability of lymphocytes in the reaction of immune rosetting, ability of T- and B- lymphocytes to cooperative interaction. The influence of «neonols» on the factors of natural resistance of experimental animals was studied on the basis of phagocytic activity of neutrophils and estimated on phagocytic number, index of absorption and digestion, common quantity of absorbed and digested staphylococci by one active neutrophil.
It has been revealed, that researched xenobiotics do not possess sensitizing and allergenic properties. In the doses 1/10 and 1/100 DL50 xenobiotics depress the plasmocytic reaction of lymphatic nodes and spleen, antibody-producing ability, homotransplantative activity of lymphoid cells, functional activity of nuclear cells, disturb cooperative integration of cellular and humoral immunity, inhibit the synthesis of proteins, RNA and DNA. In a dose 1/1000 DL50 substances do not affect the state of cellular and humoral immunity. It has been established, that detergents in doses 1/10 and 1/100 DL50 increase the content of CIC in the blood, autoflora of skin and decrease bactericidal action of skin that testifies about inhibition nonspecific resistance of an organism in conditions of prolonged toxifi-cation by the xenobiotics. The most representative indexes at the study of «neonols» on immunological reactivity of an organism during subacute experiment were disturbance of qualitative and quantitative characteristic of micro-biocoenosis of intestine. A maximum inactive dose on influence on the indexes of microbiocoenosis of intestine was defined at the level of 1/1000 DL50, that allows to use morphological, cultural and biochemical properties of bacteria in complex diagnostics of immune insufficiency in conditions of the influence of chemical factors on an organism.
Key words: neonols, immunological reactivity, cellular and humoral links of immunity.
Рецензент - проф. Костенко В. О.
Стаття надшшла 16. 04. 2013 р.
