CC BY
32
УДК 616.366-002:615.244
С.Ц. Аюшиева, л.п. Ковалева, К.С. Лоншакова
влияние минеральной воды «аршан» и фитосбора «байкальский-7» на секреторную активность печени и биохимический состав желчи в условиях эксперимента
Республиканская клиническая больница им. Н.А. Семашко (Улан-Удэ) Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
В данной статье на модели экспериментального холецистита доказано улучшение биохимического состава желчи на фоне курсового введения, экспериментальным животным, минеральной воды «Аршан» и фитосбора «Байкальский-7». В экспериментальных условиях доказана стимулирующее действие природных средств на секреторную активность печени.
Ключевые слова: секреторная активность печени, биохимический анализ желчи, минеральная вода «Аршан», фитосбор Байкальский - 7»
influence of MINERAL water «ARSHAN» AND pHYTocoLLEcTioN «BAiKAL-7» upon secretory activity of the liver and biochemical content of bile in experiment
S.Ts. Ayushinova, L.P. Kovaliova, K.S. Lonshakova
Republican Clinical Hospital named N.A. Semashko (Ulan-Ude) Institute of General and Experimental Biology SB RAS (Ulan-Ude)
The article describes the model of experimental cholecystitis which proves improvement ofbiochemical structure of bile on the background, of course introduction of mineral water «Arshan» and phytocollection «Baikal-7» to experimental animals. The experiment has proved, stimulating action of natural means on secretory function activity of a liver. Key words: secretory function activity of a liver, biochemical analysis of bile, mineral water «Arshan», phytocollection «Baikal-7»
Учитывая эффективность лечения больных с гепатобилиарной патологией, пролеченных на курорте «Аршан» под влиянием приема термальной маломинерализованной углекисло-гидрокарбонатно-натриево-сульфатно-кальциевой магниевой с малым содержанием кремния и железа минеральной воды (МВ) «Аршан», также принимая во внимание данные литературы [5, 8, 11] с целью изучения механизмов действия МВ в сравнении с фитосбором «Байкальский-7» была воспроизведена модель холелитиаза на морских свинках по методике С.М. Николаева с соавт. [9, 10]. Были протестированы два метода лечения в сравнении друг с другом: МВ «Аршан» и фитосбор «Байкальский-7». Фитосбор «Байкальский-7» (рег. удост. № 005462, Р.643. 07.2003) имеет следующий состав: цветки ноготков, плоды шиповника, плоды боярышника, корневища девясила, цветки бессмертника, корни солодки, листья мяты. Фитосбор «Байкальский-7» обладает гепатопротективным, противовоспалительным, желчегонным действиями [1—4, 6, 7].
материалы и методы
В качестве объекта исследования использовались морские свинки обоего пола с массой 400 — 550 г, одного возраста, находившихся в стандартных условиях вивария при одинаковом уходе и питании со свободным доступом к воде. Экспериментальные исследования проведены при соблюдении правил, сформулированных в приказах МЗ СССР № 1 от 10.10.1989 г. и № 1045-73 от 6.04.1973 г.
Всего животных было 88. В интактную группу включили 6—10 животных (здоровые), в зависимости
от исследуемого параметра. В контрольной группе морских свинок с моделью острого калькулезного холецистита было 7—10 животных. По аналогии лечения на курорте оставшиеся животные были распределены по следующим срокам приема МВ «Аршан» и фитосбора «Байкальский-7» на две большие группы. Первая группа была под наблюдением 14 дней, вторая — 21 день. В эти же сроки под наблюдением находилась контрольная группа животных, которые принимали питьевую воду. Таким образом, сформированы были следующие подгруппы: интактные животные, 1.1 — контрольная группа, принимающая воду 14 дней, 1.2 — группа животных, пролеченная минеральной водой, 1.3 — группа животных, пролеченная фитосбором 14 дней; 2.1 — контрольная группа, принимающая воду 21 день, 2.2 — группа животных, пролеченная минеральной водой 21 день, 2.3 — группа животных, пролеченная фитосбором 21 день.
Животным под гексеналовым наркозом вскрывали брюшную полость и вводили в полость желчного пузыря 0,1 мл свежеприготовленного 3% раствора перекиси водорода, предварительно удалив желчь из пузыря. Рану послойно зашивали. С первого дня, с момента операции животным вводили зондовым методом однократно испытуемые средства: МВ «Аршан» в объеме 1,68 мл на 100 г массы и фитосбор «Байкальский-7» в расчете 0,3 г/кг массы животного (пересчете на воздушно-сухое сырье) в виде отвара, приготовленного по Государственной Фармакопее XI издания, дистиллированную воду в эквиобъемном количестве (контроль).
Влияние МВ «Аршан» на скорость секреции желчи при однократном введении было изучено у
40 белых крыс линии Wistar обоего пола с исходной массой тела 160—180 г.
Определялись следующие параметры:
1. Биохимический анализ желчи — билирубин, холестерин, желчные кислоты, расчет холято-холестеринового индекса (ХХИ). Количество билирубина определяли по методу Ван ден Берга в модификации Скакуна Н.П. (1956), холестерина — по методике Дроговоз С.М. (1971), желчных кислот — по методу Петенкоффера (Карбач, 1961), ХХИ вычисляли делением желчных кислот на холестерин.
2. Влияние МВ «Аршан» на скорость секреции желчи у белых крыс при однократном введении. Оценку скорости секреции у животных проводили в остром опыте по методике Н.Н. Скакуна и А.Н. Олейник (1967) на наркотизированных 1% раствором барбамила (0,8 мл на 100 г. массы, внутрибрюшинно) крысах. После вскрытия брюшной полости находили петлю ДПК и, отступя от пилорической части желудка на 0,5 см, на стенку ДПК накладывали лигатуру для дальнейшего введения в кишку МВ «Аршан». Вторую лигатуру подводили под общий желчный проток. Слегка оттянутый проток надрезали, отступя от места впадения его в ДПК. В надрез вводили катетер, который фиксировали второй лигатурой. На рану накладывали один шов. В ДПК с помощью шприца вводили МВ «Аршан» в расчете 3 мл на кг массы животного. Эксперименты проводили в одинаковое время суток (9—15 часов) при одинаковом пищевом рационе кормления животных с целью исключения влияния характера питания. В опытах учитывали количество желчи, получаемой за каждый час и в сумме за 4 часа опыта. Интенсивность желчеотделения оценивали по скорости секреции желчи в течение
каждого часа, которую выражали за 1 минуту на 100 г массы (мг/мин на 100 г). Для этого количество желчи в мл, полученное за 1 час, умножали на 100 г и делили на массу животного, умноженную на 60 минут. Например, крыса с массой 160 г. в течение 1 часа выделила 480 мл желчи. Скорость секреции желчи = 480 х 100/160 х 60 = 3,75 мг/мин. на 100 г. Расчет общего количества желчи проводили следующим образом: количество желчи, выделенное за 1 мин. на 100 г живой массы, умножали на 60, находили количество желчи, выделенное за 1 час, а затем рассчитывали количество желчи, выделенное в течение всего опыта. Например, скорость секреции желчи равна
3.7 мг/мин. на 100 г. Тогда количество желчи за 1 час =
3.7 мг/мин. х 60 мин. = 222 мг/100 г, а общее количество желчи получали, суммируя количество желчи за весь опыт (4 часа).
результаты и обсуждение
У морских свинок на 14 сутки эксперимента были выявлены достоверные (р < 0,001) сдвиги в биохимическом анализе желчи по сравнению с интактной (здоровой) группой: уровень билирубина, холестерина — повышены, а желчных кислот и ХХИ — понижены. Указанные сдвиги сохранялись и на 21 сутки эксперимента (табл. 1 и 2). Это говорит о нестабильности желчной мицеллы и наклонности к камнеобразованию при остром холецистите.
Так как повышение концентрации холестерина, а также снижение содержания желчных кислот в желчи не являются причиной образования камней, наиболее объективным показателем является хелато-холестериновый индекс (ХХИ), характеризующий коллоидную стабилизацию желчи.
Таблица 1
Биохимический анализ желчи у морских свинок при введении Н2О2 (14 день)
Показатели Группы животных. п=10
Интактная 1.1. контрольная 1.2. Минеральная вода «Аршан» 1.3. Фитосбор «Байкальский-7»
Билирубин, мг% 7,63 ± 1,43 10,71 ± 1,26 а*** 9,62 ± 0,95 а**в* 7,34 ± 1,26 в***
Холестерин, мг% 21,72 ± 4,5 33,35 ± 3,72 а** 21,49 ± 1,93 в*** 21,99 ± 2,77 в***
Желчные кислоты, мг% 157,6 ± 12,32 118,3 ± 6,1 а*** 136,0 ± 18,0 а**в** 136,3 ± 12,87 а**в**
ХХИ 7,49 ± 1,49 3,57 ± 0,38 а*** 6,37 ± 0,96 в*** 6,27 ± 0,88 в***
примечание: а - достоверность различий с интактной группой, в - достоверность различий с контрольной группой. * -р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001.
Таблица 2
Биохимический анализ желчи у морских свинок при введении Н2О2 (21 день)
Показатели Группы животных. п=10
Интактная 1.1. контрольная 1.2. Минеральная вода «Аршан» 1.3. Фитосбор «Байкальский-7»
Билирубин, мг% 7,63 ± 1,43 9,79 ± 1,56 а** 5,51 ± 0,88 д***ц** 5,47 ± 1,37 а***в***
Холестерин, мг% 21,72 ± 4,5 28,96 ± 3,25 а* 22,06 ± 2,07 в*** 23,0 ± 3,32 в***
Желчные кислоты, мг% 157,6 ± 12,32 112,1 ± 11,03 а*** 158,0 ± 14,38 в*** 139,8 ± 10,69 д**ц***
ХХИ 7,49 ± 1,49 3,88 ± 0,32 а*** 7,21 ± 0,89 в*** 6,17 + 0,85 а*в***
примечание: а - достоверность различий с интактной группой, в - достоверность различий с контрольной группой. * -р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001.
Таблица 3
Влияние минеральной воды «Аршан» на скорость секреции желчи у белых крыс при однократном введении
Группы Скорость секреции желчи за 4 часа, мг/мин. 100 г. Общее количество желчи, 4 часа мг/100 г.
1 2 3 4
Контроль 5,19 ± 1,16 4,27 ± 0,52 4,06 ± 0,29 4,12±0,39 736,2± 85,32
«Аршан» 5,33 ± 0,49 6,24 ± 0,74 р*** 6,05 ± 0,53 р*** 4,96±0,43 р*** 953,3±214, р***
примечание: * - р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001.
У морских свинок подгруппы 1.2 (МВ «Аршан» в течение 14 дней) выявлено по сравнению с контрольной подгруппой достоверное снижение уровня билирубина (р < 0,05), холестерина (р < 0,001), а повышение уровня желчных кислот (р < 0,01) и ХХИ (р < 0,001), причем уровень холестерина и ХХИ достигли уровня интактной группы (р > 0,05). В подгруппе 1.3 (фитосбор «Байкальский-7» в течение 14 дней) наблюдались аналогичные изменения.
При 21 дневном сроке наблюдения отмечено достоверное (р < 0,001) снижение у морских свинок, пролеченных как МВ «Аршан» (2.2), так и фитосбором «Байкальский-7» (2.3) по отношению контрольной подгруппы уровней билирубина, холестерина, и повышение желчных кислот, ХХИ. Уровень билирубина при этом более всего снижался на 21 сутки наблюдения как в подгруппе 2.2, так и 2.3.
Полученные данные говорят о мощном, ингибирующем камнеобразование действии МВ «Аршан» ни сколько не уступающем по воздействию фитотерапии.
Скорость секреции желчи при введении МВ «Аршан» у подопытных животных также достоверно (р < 0,001) по сравнению с контрольной группой была изменена: так на 2, 3 и 4 часы опыта она была увеличена, а в 1 час опыта — не имела достоверных (р > 0,05) различий (табл. 3). Общее количество желчи в течение 4 часов по сравнению с контрольной группой также было достоверно (р < 0,001) увеличено. Следовательно, прием МВ «Аршан» действует стимулирующе на желчевыделительную функцию печени.
заключение
Однократный прием МВ «Аршан» обладает стимулирующим действием на желчевыделительную функцию печени. На модели экспериментального холецистита при анализе биохимического состава желчи выявлено достоверное снижение уровней билирубина и холестерина, что привело к достоверному увеличению уровня желчных кислот и изменению хелато-холестеринового индекса. Изменение биохимического состава желчи на фоне усиления желчевыделительной функции печени под воздействием МВ «Аршан» свидетельствует о мощном, ингибирующем камнеобразование действии МВ, не уступающем по действию фитотерапевтическому средству.
литература
1. Баторова С.М. Поиск гепатопротекторных препаратов из арсенала Восточной медицины для
лечения больных пожилого возраста / С.М. Баторова, Ж.Б. Дашинамжилов, С.М. Николаев // Вестн. Бурятского университета. Серия 11. — Улан-Удэ, 2003. - С. 123-128.
2. Буеверов А.О. Место гепатопротекторов в лечении заболеваний печени / А.О. Буеверов // Болезни органов пищеварения. — 2001. — № 1. — С. 16-18.
3. Диагностика и лечение заболеваний желчевыводящих путей / Под ред. И.В. Маева. — М., 2003. — 96 с.
4. Катикова О.Ю. Гепатопротекторное действие препаратов растительного происхождения / О.Ю. Ка-тикова, Я.В. Костин, В.С. Тишкин // Эксперимент. клин. фармакология. — 2002. — Т. 65, № 1. — С. 41—43.
5. Мамонова Н.В. Сочетанное влияние минеральной воды и лекарственных растений на секреторную активность желудка и метаболическую функцию печени лабораторных животных : автореф. дис. ... канд. биол. наук : 03.00.13 / Н.В. Мамонова. — М., 2004. — 14 с.
6. Мембраностабилизирующая активность комплексного фитосредства «нор-бу-дун-тан» / С.М. Николаев [и др.] // Матер. IX Росс. национ. конгр. «Человек и лекарство». — М., 2002. — С. 615.
7. Особенности влияния полифитохола при вирусном гепатите В / И.П. Убеева [и др.] // Вестн. Бурятского университета. Серия 11. — Улан-Удэ, 2003. — С. 28 — 32.
8. Репс В.Ф. Экспериментальное обоснование лечебно-профилактического применения питьевых минеральных вод при нарушении функций печени : автореф. дис.. д-ра биол. наук : 14.00.51 / В.Ф. Репс; НИИ курортологии. — Пятигорск, 2001. — 42 с.
9. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. — М., 2000. — 398 с.
10. Способ моделирования острого холецистита [Текст] ; пат 1343437 Рос. Федерация : МПК 4 G 09 В 23/28 / Николаев С.М., Лоншакова К.С., Уба-шеев И.О., Матханов Э.И., Самбуева З.Г. ; заявитель и патентообладатель Институт биологии Бурятского филиала СО АН СССР. — № 3733785 ; заявл. 06.02.1984 ; опубл. 07.10.1987, Бюл. № 10. — 1 с.
11. Эмирбеков И.Ш. Влияние минеральной воды Рычал-Су на функциональные, биохимические показатели печени при экспериментальном токсическом гепатите : автореф. дис. . канд. фар-мац. наук : 14.00.25 / И.Ш. Эмирбеков; Пятигор. гос. фармац. акад. — Пятигорск, 2001. — 24 с.
Сведения об авторах:
Аюшиева Сэсэг Цыренжаповна - к.м.н., врач-терапевт высшей категории, Республиканская клиническая больница им. Н.А.Семашко
