CC BY
38
УДК 612.398.145.1:615.711.17]-092.9 О.А.Лебедько, С.С.Тимошин
ВЛИЯНИЕ МЕТИЛОВОГО ЭФИРА №-НИТРО-Ь-АРГИНИНА НА ПРОЦЕССЫ СИНТЕЗА ДНК И КАБРИ-ДИАФОРАЗНУЮ АКТИВНОСТЬ ЭПИТЕЛИОЦИТОВ И ГЛАДКИХ МИОЦИТОВ РЕСПИРАТОРНОГО ТРАКТА НОВОРОЖДЕННЫХ БЕЛЫХ КРЫС
Хабаровский филиал ДНЦ ФПД СО РАМН - НИИ охраны материнства и детства, Дальневосточный государственный медицинский университет, Хабаровск
РЕЗЮМЕ
Изучали влияние ингибитора конститутивных нитроксидсинтаз метилового эфира №-нитро-Ь-аргинина (L-NAME) на синтез ДНК и NADPH-диафоразную активность эпителиоцитов и гладких миоцитов воздухоносных путей новорожденных белых крыс. Однократное внутрибрюшинное введение L-NAME (9,310"5 М/кг) на 6 сутки пост-натального развития вызвало увеличение ДНК-синтетической активности гладких миоцитов и угнетение NADPH-диафоразной активности эпителиоцитов. Пятикратное воздействие L-NAME (9,310-5 М/кг, ежедневно, с 2 по 6 сутки жизни) угнетало пролиферацию эпителицитов, стимулировало - гладких миоцитов на фоне активации NADPH-диафоразы в этих клеточных популяциях. Наши данные свидетельствуют о том, что система оксида азота принимает участие в регуляции синтеза ДНК в эпителии и гладких миоцитах воздухоносных путей новорожденных крыс.
SUMMARY
O.A.Lebedko, S.S.Timoshin
EFFECT OF Ng -NITRO-L-ARGININE METHYL ESTER ON THE PROCESS OF SYNTHESIS DNA AND NADPH-DIAPHORASE ACTIVITY IN EPITHELIUM AND SMOOTH MUSCLE CELLS OF RESPIRATORY TRACT IN NEONATE WHITE RATS
The effect of inhibitor of constitutive nitric oxide synthase NG-nitro-L-argmine methyl ester (L-NAME) on DNA synthesis and NADPH-diaphorase activity of airway epitheliocytes and smooth muscle cell in neonate white rats were investigated. A single intraperitoneal administration of L-NAME (9,3' 10-5 М • kg -1 ) on 6 day of rat postnatal day caused increase in DNA-synthetic activity in smooth muscle cells and decrease in NADPH-diaphorase activity in epitheliocytes. Repeated administration of L-NAME (9,3' 10-5 М ' kg -1 ' d -1 ) for 5 days (from 2 to 6 days of rat postnatal life) inhibited proliferative activity of epithelium, induced - smooth muscle and increased NADPH-diaphorase activity in all investigated cell populations. Our data showed that NO-system is involved in regulation of DNA synthesis of rat airway epithelium and smooth muscle during neonate period.
Оксид азота (NO), продуцируемый эпителиоцита-ми и гладкими миоцитами респираторного тракта на ранних этапах онтогенеза [20], является важ-нейшим регулятором становления бронхомоторного тонуса развивающихся легких [18, 23]. Уместно предположить участие нитроксидергических механизмов в формировании эпителиально-гладкомышечной
структуры слизистой респираторного тракта в неонатальном периоде.
Цель настоящей работы: оценить характер влияния однократного и повторного введений ингибитора нитроксидсинтаз метилового эфира №-нитро-Ь-аргинина (L-NAME) на синтез ДНК и NADPH-диафоразную активность эпителиоцитов и гладких миоцитов трахеи и бронхов (имеющих хрящевой скелет и бесхрящевых), а также на процессы свободно-радикального окисления в легких новорожденных белых крыс.
Материалы и методы
Эксперименты проводили на 103 новорожденных белых крысах. Для нивелирования генетически обусловленных межвыводковых различий группы формировали методом расщепления выводков. L-NAME ("ISN Biomedicals Inc.") в дозе 9,310-5 М/кг массы животного инъецировали внутрибрюшинно: в первой серии экспериментов - однократно (на 6 сутки жизни), во второй серии - пятикратно (с 2 по 6 сутки жизни). Животным контрольных групп в соответствующих режимах (однократно или пятикратно) вводили изотонический раствор NaCl. Крыс декапитиро-вали через 24 часа после заключительного воздействия. Процессы синтеза ДНК исследовали методом радиоавтографии. За 1 час до эвтаназии крысам внутрибрюшинно вводили 3Н-тимидин (молярная активность - 1570 ТБк/М) в дозе 1 мкКи/г. Радиоавтографы готовили по стандартной методике. Подсчитывали количество клеток, находящихся в S-периоде (индекс меченых ядер-ИМЯ, %) и среднее количество треков над меченым ядром (интенсивность метки-ИМ) в эпителиоцитах и гладких миоци-тах трахеи, бронхов с хрящевой основой и бесхря-щевых. Гистохимическое исследование активности NADPH-диафоразы (специфического маркера нитроксидсинтаз) проводили по методу [15], основанному на свойстве нитросинего тетразолия под влиянием NADPH-диафоразы трансформироваться в дифор-мазан синего или голубого цвета (рис. 1). В контроле из инкубационной среды исключали р-NADPH, при этом срезы не окрашивались, оставаясь прозрачными.
температуре, рассчитывали на мг липидов в пробе и выражали в относительных единицах. Концентрацию общих липидов определяли фосфованилиновым методом с помощью тест-наборов «LACHEMA». Полученные данные анализировали с использованием t-критерия Стьюдента.
Результаты исследования
При анализе результатов авторадиографического исследования установлено, что ответная реакция эпителиального пролиферативного пула зависит от режима введения L-NAME. При однократном воздействии препарата ДНК-синтетическая активность эпителиоцитов оставалась в пределах базального уровня, при пятикратном - угнеталась, о чем свидетельствовало достоверное снижение ИМЯ в трахее, хрящевых и бесхрящевых бронхах (в 1,4-, 1,3- и 1,4 раза, соответственно) (табл. 1).
При обоих режимах воздействия L-NAME активизировались процессы пролиферации в гладкомышечноклеточном пуле. Однократное введение препарата способствовало достоверному увеличению в сравнении с контролем: ИМЯ - в трахее и хрящевых бронхах в 1,4- и 1,5 раза, соответственно, ИМЯ и ИМ - в бесхрящевых бронхах в 1,6- и 1,3 раза, соответственно. При пятикратном введении L-NAME статистически значимо увеличился ИМЯ в трахее (в 1,5 раза), хрящевых (в 1,6 раза) и бесхрящевых (в 1,2 раза) бронхах (табл. 1).
NADPH-диафораза является маркером суммарной внутриклеточной активности нитроксидсинтаз (NOS). Цитохимическая идентификация NADPH-диафоразы респираторного тракта новорожденных белых крыс продемонстрировала наличие NOS-активности эпителиоцитов и гладких миоцитов на
Таблица1
Влияние однократного (I серия) и пятикратного (II серия) введений L-NAME в дозе 9,310-5 М/кг массы тела на показатели синтеза ДНК и NADPH-диафоразную активность эпителиоцитов и гладких миоцитов респираторного тракта новорожденных белых крыс (M±m)
Группы Эпителиоциты Миоциты
ИМЯ, % ИМ, число треков NADPH- диафораза, ед.опт.пл. ИМЯ, % ИМ, число треков NADPH- диафораза, ед.опт.пл.
Контроль (I серия): Трахея Хрящевые бронхи Бесхрящевые бронхи 1,81+0,15 1,77+0,10 1,70+0,08 22,45+1,52 20,15+1,21 20,55+1,05 0,511+0,010 0,449+0,015 0,392+0,012 0,590+0,048 0,533+0,055 0,523+0,044 20,10+1,06 18,67+1,10 19,43+0,94 0,221+0,010 0,187+0,009 0,148+0,008
Ь-ЫАМЕ ( I серия): Трахея Хрящевые бронхи Бесхрящевые бронхи 1,98+0,11 1,83+0,08 1,76+0,09 23,17+1,32 20,21+1,38 21,72+1,30 0,336+0,011* 0,311+0,012* 0,190+0,010* 0,851+0,065* 0,820+0,053* 0,862+0.058* 22,10+1,42 20,33+0,96 24,34+1,07* 0,197+0,009 0,186+0,011 0,172+0,009
Контроль (II серия): Трахея Хрящевые бронхи Бесхрящевые бронхи 1,99+0,13 1,86+0,12 1,67+0,10 20,12+1,22 21,33+1,25 22,12+1,14 0,492+0,016 0,438+0,012 0,390+0,010 0,537+0,041 0,526+0,034 0,520+0.038 21,19+1,15 20,82+1,18 19,51+1,08 0,217+0,009 0,178+0,008 0,150+0,008
Ь-ЫАМЕ (II серия): Трахея Хрящевые бронхи Бесхрящевые бронхи 1,44+0,10* 1,45+0,11* 1,22+0,10* 23,24+1,29 20,00+1,21 23,33+1,20 0,558+0,019* 0,528+0,020* 0,453+0,018* 0,788+0,065* 0,854+0,071* 0,775+0,062* 21,41+1,36 20,65+1,12 19,87+1,22 0,260+0,011* 0,253+0,015* 0,234+0,015*
Примечание: здесь и далее *-p<0,05 по отношению к внутрисерийному контролю.
Рис. Хрящевой бронх 7-суточной крысы (группа "контроль") с активностью NADPH-диафоразы в эпи-телиоцитах и гладких миоцитах. Метод Hope-Vincent. Увеличение 75.
Измерение светопропускания проводили на однолучевом фотометре с помощью насадки ФМЭЛ-1УЧ.2 плаг-методом при длине волны 550 нм. В каждом препарате измеряли не менее 50 клеток. В качестве фона принимали светопропускание неокрашенных участков ткани [1]. Для интегральной оценки процессов свободнорадикального окисления применяли метод люминолзависимой хемилюминесцен-ции, индуцированной перекисью водорода. Хемилю-минесценцию регистрировали на люминесцентном спектрометре модели LS 50B фирмы «PERKIN ELMER». Стандартизацию сигнала осуществляли с помощью встроенной программы "Finlab". Измерение величин индуцированной хемилюминесценции: светосуммы (за 2 минуты)^ , а также интенсивности максимальной вспышки - Imax проводили при ком-
всех исследуемых уровнях трахеобронхиальной системы. Согласно исследованиям [20], на ранних этапах онтогенеза эпителий воздухоносных путей экспрессирует все три известные формы нитроксидсин-таз (eNOS, nNOS и iNOS), в то время как гладкие миоциты - только две (nNOS и iNOS). L-NAME является представителем группы производных L-аргинина с заместителями в аминогруппе гуанидинового фрагмента аминокислоты и считается преимущественным ингибитором конститутивных NOS [7]. Поэтому вполне закономерным является то, что при однократном воздействии L-NAME редуцировал NADPH-диафоразную, а следовательно, и NOS- активность эпителиоцитов: оптическая плотность ди-формазанового преципитата достоверно снизилась в сравнении с аналогичным показателем контроля в трахее, хрящевых и бесхрящевых бронхах в 1,4-, 1,4-и 1,2 раза, соответственно) (табл.1). Аналогичный показатель гладких миоцитов оставался на базальном уровне. Однако, в отличие от ингибирующего эффекта однократного воздействия L-NAME, пятикратное введение препарата, наоборот, стимулировало
NADPH-диафоразную активность: не только в эпителии, но и в гладких миоцитах плотность преципитата достоверно увеличилась в сравнении с контролем в трахее (в 1,6- и 1,2 раза, соответственно), хрящевых (в 1,3 - и 1,5 раза, соответственно) и бесхрящевых (в 1,4 - и 1,6 раза, соответственно) бронхах (табл. 1). В работе [17] хроническая блокада конститутивного синтеза NO, осуществленная с помощью многократного воздействия L-NAME, индуцировала в эндоте-ли-альногладкомышечноклеточных пулах сосудистой стенки экспрессию протеинов, обладающих прооксидантными и провоспалительными свойствами, в том числе iNOS (доказано иммуногистохимиче-скими методами и с помо-щью реакции на NADPH-диафоразу). Аналогичные последствия - увеличение экспрессии iNOS и гиперпродукция NO - имело многократное воздействие L-NAME в исследованиях [14]. Вероятнее всего, что и в нашем эксперименте при пятикратном введении L-NAME увеличение NADPH-диафоразной, а, следовательно, и общей NOS-активности связано с индуцибельной составляющей.
Анализ показателей перекись-индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции продемонстрировал нарушение свободнорадикального статуса легких при воздействии L-NAME, обусловленное декомпенсированной интенсификацией процессов генерации активных метаболитов кислорода. И при однократном, и при пятикратном введении препарата наблюдалось статистически значимое в сравнении с контрольными уровнями увеличение Imax (в 1,3 -и 1,7 раза, соответственно) и S (в 1,3 - и в 1,6 раза, соответственно) (табл. 2). Следует отметить, что степень выраженности процессов накопления свободных радикалов и снижения буферной емкости системы антиоксидантной защиты легких была выше у животных, подвергнутых пятикратному воздействию L-NAME.
Известно, что в физиологических дозах NO обладает антиоксидантными свойствами, в частности,
Таблица 2
Влияние однократного (I серия) и пятикратного (II серия) введений Ь-КАМЕ в дозе 9,310-5 М/кг массы тела на показатели люминол-зависимой хемилюминесценции, индуцированной перекисью водорода, в легочных гомогенатах новорожденных белых крыс (М±т)
Группы S , отн. ед. Imax, отн.ед.
Контроль (I серия) 49,80±3,67 0,34±0,023
Ь-ЫАМЕ (I серия) 65,72±5,16* 0,45±0,031*
Контроль (II серия) 57,72±4,22 0,47±0,035
Ь-ЫАМЕ (II серия) 91,52±8,26* 0,79±0,048*
ингибирует образование чрезвычайно токсичных гидроксил-радикалов в реакции Фентона, связываясь со свободными и входящими в состав гема ионами Fe2+ [16]. Вероятно, при однократном воздействии L-NAME снижение (в сравнении с базальным уровнем) продукции NO эпителием воздухоносных путей способствовало активизации радикальных окислительных реакций в легочной ткани. Механизм развития окислительного стресса при пятикратном введении L-NAME вероятно иной. Ряд исследователей считает, что на фоне многократного воздействия L-NAME происходит разобщение NADPH-редуктазной и N-оксидазной активностей NOS [21]. Таким образом, одной из основных причин прооксидантного эффекта L-NAME при данном режиме введения является NADPH- зависимое образование активных метаболитов кислорода.
Выявленные изменения ДНК- и NO-синтетических активностей эпителиоцитов и гладких миоцитов воздухоносных путей, а также свободнорадикального статуса легких новорожденных крыс, индуцированные L-NAME при различных режимах введения, следует признать однонаправленными и зависящими от кратности воздействия. Очевидна взаимосвязь кинетики пролиферативных пулов, метаболизма NO исследуемых клеточных популяций и процессов свободнорадикального окисления.
При однократном введении L-NAME нарушение изоэнзимного NOS-баланса зарегистрировано только в эпителии и ограничено снижением активности конститутивных NOS-cNOS. Известно, что конститутивно генерируемый в воздухоносных путях NO ограничивает рост пролиферативного пула гладких миоцитов [19] посредством цГМФ-зависимых механизмов, активируя растворимую гуанилатциклазу [12]. Возможно, в данной экспериментальной ситуации увеличение количества ДНК-синтезирующих гладких миоцитов опосредовано уменьшением пара-кринного влияния NO, синтезируемого сNOS эпителиоцитов.
При пятикратном воздействии L-NAME дисбаланс в NO-NOS системе усугубился увеличением суммарной NOS-активности (очевидно за счет экспрессии iNOS) на фоне выраженных изменений свободнорадикального статуса легких. По мнению [17], одной из основных причин увеличения экспрессии iNOS при многократном воздействии L-NAME является гиперпродукция активных метаболитов кисло-
рода, активизирующая ядерный фактор №-кВ [5], который участвует в генной транскрипции 1М08 [22]. Соответственно и структурные изменения в слизистой респираторного тракта при пятикратном введении препарата были более выраженными, чем при однократном, и, помимо гиперплазии гладких миоцитов, включали уменьшение количества ДНК-синтезирующих эпителиоцитов. В данном случае увеличение гладкомышечноклеточного пролиферативного пула могло быть обусловлено нарушением цГМФ-зависимого защитного антипролиферативного механизма вследствие десенситизации растворимой гуанилатциклазы супрафизиологическими дозами N0 [13], генерируемыми 1М08. Необходимо отметить, что по данным литературы Ь-ЫАМЕ способен активировать эндогенные системы эндотелина I [10] и ангиотензина II [17]. Возможно, вазоактивные пептиды принимают участие в реализации митоген-ного эффекта Ь-ЫАМЕ в отношении гладких миоци-тов трахеобронхиальной системы, поскольку обладают способностью стимулировать пролиферацию клеток данного типа и локализации [2, 3].
Вероятно, подавление ДНК-синтетической активности эпителиоцитов при пятикратном введении Ь-NAME в значительной мере обусловлено тканеспецифичным окислительным повреждением. N0, продуцируемый в избыточном количестве, в реакции с супероксидным радикалом образует пероксинитрит, чрезвычайно токсичный для эпителия [6], действующий на различные внутриклеточные мишени, в том числе и на ДНК [9]. Подобный механизм имеют структурно-функциональные нарушения эпителия воздухоносных путей при астме: иммуногистохимически подтверждено преимущественное формирование пероксинитрита в эпителии респираторного тракта [11].Не исключено также аутокринное анти-пролиферативное влияние факторов адгезии эпителия [4], экспрессия которых повышается при интенсификации процессов свободнорадикального окисления. Уместно заметить, что воздействие Ь-ЫАМЕ и механическая деэпителизация обладают сходными эффектами в отношении ряда функций трахеобронхиальной системы, например, контрактильной [8].
Таким образом, в неонатальном периоде ингиби-ция конститутивных нитроксидсинтаз с помощью Ь-NAME приводит к патологическому ремоделированию стенки воздухоносных путей: гиперплазии гладких миоцитов (независимо от режима воздействия) и гипоплазии эпителия (при пятикратном воздействии). Понимание N0-зависимых механизмов, регулирующих кинетику клеточных популяций, может способствовать рациональной терапии пролиферативных патологий в системе органов дыхания.
ЛИТЕРАТУРА
1. Агроскин Л.С., Папаян Т.В. Цитофотометрия Л.: Наука, 1977.-200 с.
2. Лебедько О.А.,Тимошин С.С, Беспалова Н.Н. Влияние ангиотензина II на пролиферативную активность эпителиоцитов и гладкомышечных клеток трахеобронхиальной системы новорожденных белых крыс//Бюл. экспер. биол.-2000.-Т.130, №7.-С.28-30.
3. Лебедько О.А.,Тимошин С.С.Влияние эндотелина I на синтез ДНК в эпителии и гладкомышечных клетках трахеи новорожденных белых крыс//Бюл. экспер. биол.-2000.-Т.129, № 3.-С.294-296.
4. Туманова Н.Б., Попова Н.В., Ямскова В.П. Нарушение молекулярных механизмов клеточной адгезии при генетической предрасположенности к спонтанному бластомогенезу//Известия РАН (сер. биол.).-
1996.-№6.-С.653-657.
5. Adcock I.M., Brown C.R., Kwon O.J. et al. Oxidative stress induces NF-B DNA binding and inducible NOS mRNA in human epithelial cells//Biochem. Biophys. Res. Commun.-1994.-Vol.199.-P.1518-1524.
6. Barnes P.J., Chung K.F., Page C.P. Inflammatory mediators and asthma//Pharmacol. Reviews.-1998.-Vol.50.-P.515-596.
7. Boer R., Ulrich W.R, Klein T. et al. The inhibitory potency and selectivity of arginine substrate site nitric-oxide synthase inhibitors is solely determined by their affinity toward the different isoenzymes//Mol. Pharmacol.-2000.-Vol.58.-№>5.-P.1026-1034.
8. Clayton R.A., Nally J.E., MacLean M.R. et al. Chronic exposure to hypoxia attenuates contractile responses in rat airways in vitro: a possible role for nitric oxide//Eur. J. Pharmacol.-1999.-Vol.385.-№1.-P.29-37.
9. Eiserich J.P., Patel R.P., Donell V.B. Pathophysiology of nitric oxide and related species: free radical reactiones and modification of biomolecules//Mol. Aspect Med.-1998.-Vol.19.-№4-5.-P.221-357.
10. Filep J.G. Endogenous endothelin modulates blood pressure, plasma volume and albumin escape after systemic nitric oxide blockade//Hypertension.-1997.-Vol.30.-P.22-28.
11. Giaid A. Saleh D., Lim S. et al. Formation of per-oxynitrite in asthmatic airways//FASEB J.-1998.-Vol.12.-P.929-937.
12. Hamad A.M., Jonson S.R., Knox A.J. Antiproliferative effect of NO and ANP in cultured human airway smooth muscle//Am. J. Physiol.-1999.-Vol.277.-№5.-Pt.1.-P.L910-L918.
13. Hamad A.M., Range S.P., Holland E. et al. Regulation of cGMP by soluble and particulate guanylyl cyclases in cultured human airway smooth muscle//Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol.-1999.-Vol.20.-№5.-P.1087-1095.
14. Henningsson R., Alm P., Lindstrom E. et al.
Chronic blockade of NO synthase paradoxically increases islet NO production and modulates islet
hormone release//Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab.-2000.-Vol.279.-№1.-P.E95-E107.
15. Hope B.T., Vincent S.R. Histochemical
characterization of neuronal NADPH-diaphorase//J.
Histochem. Cytochem.-1989.-Vol.37.-P.653-661.
16. Kanner J., Harel S., Granit R. Nitric oxide as an antioxidant//Arch. Biochem. and Byophys.-1991.-Vol.289.-P.130-136.
17. Luvara G., Pueyo M.E., Philippe N. et al. Chronic
blockade of NO synthase activity induces a
proinflammatory phenotype in the arterial wall//Arterioscler. Thromb.-1998.-Vol.18.-P.1408-1416.
18. North A.J., Star R.A., Brannon T.S. et al. Nitric oxide synthase oxide type I and type III gene expression is developmentally regulated in rat lung//Am. J. Physiol.
Lung Cell. Mol.Physiol.-1994.-Vol.266.-P.L635-L641.
19. Patel H.J., Belvisi M.G., Donnelly L.E. et al. Constitutive expression of type I NOS in human airway smooth muscle cells: evidence for an antiproliferative role//FASEB J.-1999.-Vol.13.-№13.-P.1810-1816.
20. Sherman T.S., Chen Z., Yuhanna I.S. et al. Nitric oxide synthase isoform expression in the developing lung epithelium//Am. J. Physiol.-1999.-Vol.276.-№2.-Pt.1.-P.L383-L390.
21. Stuehr D.J. Structure-functiones aspectsion the
nitric oxide synthases//Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol.-
1997.-Vol.37.-P.339-359.
22. Xie Q., Kashiwarbara Y., Nathan C. Role of transcription factor NF-B/Re1 in induction of nitric oxide synthase// J.Biol. Chem.-1994.-Vol.269.-P.4705-4708.
23. Xue C., Reynolds P.R., Johns R.A. Localization of endothelial NOS at the basal microtubule membrane in ciliated epithelium of rat lung//Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol.Physiol.-1994.-Vol.270.-P.L88-L100.
□ □□
УДК 616.233-002-085:612.017.1
Т.Ф.Боровская, Э.Х.Курпас, С.Н.Гориславец, А.В.Волков, В.И.Резник, М.А.Перескокова, Я.Н.Рыбальченко, М.В.Ефименко, Е.А.Ганьчева
ИММУНОПРОЛИФЕРАТИВНЫЙ ОТВЕТ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ КРУПНЫХ БРОНХОВ В ДИНАМИКЕ БОЛЕЗНИ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ СТАНДАРТНЫХ СХЕМ ЛЕЧЕНИЯ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ БРОНХИТОМ
Хабаровский филиал ДНЦ ФПД СО РАМН - НИИ охраны материнства и детства,
301 Окружной военный клинический госпиталь, Центр Госсанэпиднадзора в Хабаровском крае
РЕЗЮМЕ
Изучали состояние местного иммунитета слизистой оболочки крупных бронхов у больных хроническим бронхитом в динамике болезни при лечении стандартными схемами. В остром периоде болезни выявлено усиление пролиферативной активности, как эпителия, так и стромы слизистой оболочки бронхов. Иммунный ответ острого периода характеризовался увеличением количества цитотоксических, цитолитических и активированных Т-лимфоцитов. Период ремиссии характеризовался снижением уровня лимфоидных клеток, экспрессирующих активационные антигены, и повышением процентного содержания общей популяции Т- и В-клеток. Проведение антибактериальной терапии не привдило к нормализации исследуемых показателей.
SUMMARY
T.F.Borovskaya, E.Kh.Kurpas, S.N.Gorislavets,
A.V.Volkov, V.I.Reznik, M.A.Perskokova, Ya.N.Ry-balchenko, M.V. Efimenko, E.A.Gancheva
IMMUNE PROLIFERATIVE REACTION OF LARGE BRONCHUS MUCOSA IN PATIENTS WITH CHRONIC BRONCHITIS TREATED WITH STANDARD SCHEMES
We studied large bronchus mucosa in patients with chronic bronchitis. In acute disease, proliferative activity of epithelium and that of bronchus mucosa strome increased. In acute period immune reaction was characterized by the increased number of cytotoxic, cytolytic and activated T-lymphocytes. Remission period was
characterized by decreased lymphoid cell level, and increased percentage content of total population of T-and B-cells. However antibacterial therapy didn’t result in improvement of the studied indices.
Большую роль в формировании хронических заболеваний легких играют генетическая предрасположенность, активное и пассивное курение, несвоевременная диагностика острых респираторных инфекций и неадекватность их лечения, а также различные антропогенные факторы окружающей среды, вызывающие механическое и химическое раздражение слизистой оболочки дыхательных путей [4, 7]. Однако о роли инфекции и иммунной системы в патогенезе развития болезней органов дыхания нет единой точки зрения. По мнению ряда авторов [11] ведущим триггером развития воспалительных заболеваний дыхательной системы является респираторная вирусная инфекция. Работами сотрудников НИИ клинической иммунологии СО РАМН, ВНИИ пульмонологии Минздрава РФ убедительно показана ведущая роль в обострении хронического воспалительного процесса в легких как вирусных, так и бактериальных инфекций [1, 9]. В то же время некоторые исследователи считают, что инфекционное поражение бронхиального дерева не единственная, и даже не главная причина обострения [4, 13].
В.С.Ширинский с соавт. [12] в своей работе доказывает, что ведущая роль в развитии хронизации неспецифических заболеваний легких, частых рецидивов и торпидного течения принадлежит иммунной системе.
Поэтому изучение иммунного ответа организма в целом и слизистых оболочек дыхательных путей, в частности, на патогенное воздействие возбудителей является актуальным.
