CC BY
45
УДК 579.61
Карташова О.Л., Пашкова Т.М., Пашинина О.А.
Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН, г Оренбург, Россия
E-mail:[email protected]
ВЛИЯНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА АНТИЛИЗОЦИМНУЮ АКТИВНОСТЬ ПРИОРИТЕТНЫХ ВИДОВ УРОФЛОРЫ, ВЫДЕЛЕННОЙ ОТ БОЛЬНЫХ МОЧЕКАМЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ
Одним из часто встречающихся урологических заболеваний является мочекаменная болезнь, при терапии которой применяют лекарственные препараты растительного происхождения, эффективные при наличии ассоциированного с заболеванием воспалительного процесса в мочевыводя-щих путях. Установлена патогенетически обусловленная взаимосвязь между наличием мочевых камней и возникновением хронической мочевой инфекции, при которой возбудитель обладает набором персистентных свойств, позволяющих ему длительно сохраняться в организме хозяина. Фитопрепараты оказывают различное влияние на организм, что обусловлено биологически активными веществами, которые входят в их состав. Вместе с тем, не изучено воздействие лекарственных препаратов растительного происхождения на персистентный потенциал микроорганизмов, в частности, антилизоцимную активность, являющуюся одним из значимых его факторов.
В связи с этим, в эксперименте in vitro изучено влияние ряда фитопрепаратов, различающихся по составу и используемых для лечения и профилактики инфекций мочевой системы, на анти-лизоцимную активность приоритетных видов урофлоры, выделенной от больных мочекаменной болезнью (P. aeruginosa и E. coli). Изучение возможности регуляции фитопрепаратами антили-зоцимного признака бактерий в эксперименте in vitro позволило выявить их однонаправленное ингибирующее действие и установить, что максимальное снижение антилизоцимной активности у P. aeruginosa происходило под действием препарата Гентос, а у E. coli - Канефрона.
Таким образом, выявленная способность фитопрепаратов однонаправлено снижать анти-лизоцимную активность псевдомонад и эшерихий в условиях in vitro, может рассматриваться в качестве одного из возможных механизмов их биологической активности in vivo.
Ключевые слова: лекарственные препараты растительного происхождения, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, антилизоцимная активность, мочекаменная болезнь.
Одним из часто встречающихся урологических заболеваний является мочекаменная болезнь. Установлена патогенетически обусловленная взаимосвязь между наличием мочевых камней и возникновением хронической мочевой инфекции [9]. В хронизации патологического процесса участвуют экспрессируемые бактериями факторы персистенции, инактивирующие эффекторные звенья противоинфекционной резистентности макроорганизма [2]. Одним из значимых факторов персистенции является антилизоцимная активность, которая встречается у подавляющего большинства условно-патогенных и патогенных микроорганизмов [1].
В структуре микрофлоры мочи у больных мочекаменной болезнью доминируют Pseudomonas aeruginosa и Escherichia coli [4], обладающие выраженными персистентными свойствами [7]. Рядом авторов показано, что ингибирующим влиянием на персистентный потенциал бактерий, в том числе возбудителей инфекций мочевой системы (ИМС), характеризуются отвары и настои лекарственных расте-
ний [3], [10], а также рассматривается возможность применения фитопрепаратов в качестве средства профилактики обострения инфекций мочевыводящих путей [8], [9].
Целью настоящего исследования явилось изучение влияния лекарственных препаратов растительного происхождения на антилизо-цимную активность приоритетных видов уроф-лоры, выделенной от больных мочекаменной болезнью.
Материалы и методы
В работе использованы официнальные препараты растительного происхождения для приема внутрь: Канефрон («Бионорика СЕ», Германия), Леспефрил (ЗАО «ВИФИТЕХ», Оболенск), Гентос («Рихард Биттнер АГ», Австрия), Уролесан (ПАО «Галичфарм», Украина), относящиеся к галеновым формам, в их состав входит вся совокупность веществ, присутствующих в растительном сырье и Роватинекс (Rowa Pharmaceuticals Ltd., Ирландия), содержащий терпены, выделенные из растительного сырья.
Карташова О.Л. и др._Влияние лекарственных препаратов растительного происхождения..
Штаммы Pseudomonas aeruginosa (n=12) и Escherichia coli (n=12), выделенные из мочи пациентов с мочекаменной болезнью, находящихся на лечении в урологическом отделении Оренбургской областной клинической больницы. №1. Антилизоцимную активность (АЛА) псевдомонад и эшерихий определяли фотометрическим методом [2]. Изучение регуляции АЛА микроорганизмов фитопрепаратами осуществляли оригинальным методом. Готовили взвесь культур P. aeruginosa и E. coli, выросших на плотной питательной среде, на физиологическом растворе по стандарту мутности (концентрация 1x109 КОЕ/мл), 0,1 мл взвеси культивировали с 0,1 мл фитопрепарата в течение 1 часа при 370С, затем высевали на плотную питательную среду и выращивали 18-24 часа при 37°С. Далее определяли АЛА бактерий. Контролем в случае использования спиртовых препаратов (Канефрон, Леспеф-рил, Гентос) служил спирт, масляных (Уролесан, Роватинекс) - оливковое масло.
Статистическую обработку проводили с помощью параметрических методов [6].
Результаты и обсуждение
При изучении влияния фитопрепаратов на антилизоцимную активность микроорганизмов выявлено их однонаправленное ингибирующее действие (рис. 1).
Среднее значение уровня антилизоцимной активности у P aeruginosa составляло 1,64±0,06 мкг/мл, у E. coli - 1,55±0,04 мкг/мл.
Оценка влияния фитопрепаратов на АЛА P aeruginosa показала, что наиболее эффективно (до 0,79±0,05 мкг/мл) снижал данный признак
препарат Гентос, значение АЛА после воздействия Леспефрила было равно 0,96±0,03 мкг/ мл, Канефрона - 1,1±0,07 мкг/мл, Роватинек-са - 1,1±0,04 мкг/мл и Уролесана - 1,2±0,04 мкг/мл.
Антилизоцимную активность кишечной палочки максимально подавлял Канефрон (до 0,8±0,03 мкг/мл), умеренным ингибирующим эффектом (на 20-40%) характеризовались следующие препараты: Гентос, Роватинекс и Лесперфил, снижая АЛА E. coli до 1,02±0,01, 1,22±0,04, 1,23±0,04 мкг/мл, соответственно. Под действием Уролесана способность к инактивации лизоцима у этого микроорганизма изменилась незначительно и составила 1,43±0,04 мкг/мл.
Таким образом, изучение возможности регуляции фитопрепаратами антилизоцимного признака бактерий в эксперименте in vitro позволило установить, что максимальное снижение АЛА P. aeruginosa (на 51,8%) происходило под действием препарата Гентос, а E. coli - Ка-нефрона (на 48,4%).
Заключение
Значительное место в лечении и профилактике ИМС (пиелонефриты и циститы) занимают препараты растительного происхождения, действие которых обусловлено биологически активными веществами, которые входят в их состав и обладают спазмолитическим, антисептическим, противовоспалительным, мочегонным действием, а также способствуют выведению камней и их растворению при мочекаменной болезни [5].
Р. aeruginosa Е. coli
Рисунок 1 - Влияние фитопрепаратов на антилизоцимную активность P. aeruginosa и E. coli
Примечание: достоверность различий выраженности АЛА микроорганизмов в контроле и после действия фитопрепаратов: * - p<0,01
Микробные симбиозы в экосистемах
Выявление персистентных свойств у бактерий разных видов позволило проводить скрининг лекарственных средств, в том числе фитопрепаратов, и отбирать наиболее эффективно подавляющие эти свойства, что затрудняет паразитиро-вание микроорганизмов в организме хозяина и способствует их быстрой элиминации из очага воспаления [1]. Экспериментально разработан и апробирован в клинических условиях способ отбора рациональных фитопрепаратов для тера-
пии пиелонефрита у детей по действию на перси-стентный потенциал микроорганизмов [10].
Проведенная ревизия используемых для лечения ИМС лекарственных препаратов растительного происхождения показала, что они обладают способностью однонаправлено снижать антили-зоцимную активность псевдомонад и эшерихий в условиях in vitro, что может рассматриваться в качестве еще одного из возможных механизмов их биологической активности in vivo.
05.10.2017
Список литературы:
1. Бухарин, О. В. Бактерионосительство (медико-экологический аспект) / О. В. Бухарин, Б. Я. Усвяцов Екатеринбург: УрО РАН, 1996. - 206 с.
2. Бухарин, О. В. Персистенция патогенных бактерий / О. В. Бухарин // Москва, Медицина, 1999. - 365 с.
3. Влияние лекарственных растений на антилизоцимную активность микроорганизмов / О. В. Бухарин, О. Е. Челпаченко, Б. Я. Усвяцов [и др.] // Антибиотики и химиотерапия. - 2003.- №5.- С. 11-14.
4. Видовая структура микроорганизмов, выделенных из мочи при мочекаменной болезни / М.Д. Кузьмин, Ю.И. Пешкова, Т.М. Пашкова [и др.] //Урология. -2017. - № 4.- С. 18-21. Эо1: Ьйр8/Мх.ао1.огв/10.18565/иго1.2017.4.18-21.
5. Ермоленко, Т.И. Перспективы применения фитопрепаратов в лечении мочекаменной болезни. / Т.И. Ермоленко// Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия Медицина. Фармация. - 2014. - №18 (189). - С.205-211.
6. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин.- М.: Высшая школа, 1990. - 352 с.
7. Пашкова, Т.М., Карташова, О.Л. Факторы персистенции неферментирующих микроорганизмов, выделенных из мочи при мочекаменной болезни / Т.М. Пашкова, О.Л. Карташова // Проблемы медицинской микологии. 2017. - № 2. С. 116.
8. Перепанова, Т.С. Настоящее и будущее терапии урологических инфекций. Эффективная фармакотерапия / Т.С. Перепанова //Урология и нефрология. - 2015. - № 5. С. 3-11.
9.Спивак, Л.Г., Еникеев, Д.В., Платонова, Д.В. Опыт применения препарата Фитолизин в комплексной терапии хронического цистита у больных уратным нефролитиазом / Л.Г. Спивак, Д.В. Еникеев, Д.В.Платонова // Урология. -2017.- № 4.- С. 32-36. Эо1: Ьйр8//ах.ао1.огв/10.18565/иго1.2017.4.32-36.
10. Челпаченко, О. Е. Экспериментальное обоснование рациональной терапии пиелонефрита у детей под контролем маркеров персистенции возбудителя / О. Е. Челпаченко //Автореф.... канд. мед. наук. Челябинск, 1993.- 19с.
Сведения об авторах:
Карташова Ольга Львовна, заведующий лабораторией по изучению механизмов и регуляции персистенции бактерий Института клеточного и внутриклеточного симбиоза
Уральского отделения РАН, доктор биологических наук, доцент 460000, г. Оренбург, ул. Пионерская, 11, тел. 8 (3532) 77-44-63, е-шаП: [email protected]
Пашкова Татьяна Михайловна, старший научный сотрудник лаборатории по изучению механизмов и регуляции персистенции бактерий Института клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения РАН, кандидат биологических наук 460000, г. Оренбург, ул. Пионерская, 11, тел. 8 (3532) 77-44-63, е-таП: [email protected]
Пашммима Ольга Александровна, старший научный сотрудник лаборатории по изучению механизмов и регуляции персистенции бактерий Института клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения РАН, кандидат биологических наук 460000, г. Оренбург, ул. Пионерская, 11, тел. 8 (3532) 77-44-63, е-mai1: [email protected]
