CC BY
66
УДК 612.172.4
ВЛИЯНИЕ КРЕЗАЦИНА НА ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ
КРЫС
Шарафутдинова А. Ф., Байматов В. Н.
ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина»
Ключевые слова: крезацин, двигательная активность,
исследовательский рефлекс, эмоциональный статус, морфологические показатели крови, биохимические показатели крови.
Keywords: krezacin, impellent activity, research reflex, the emotional status, morphological indicators of blood, biochemical indicators of blood
Цель: изучить влияние крезацина на физиологические показатели
крыс.
Задачи: 1. Исследовать действие крезацина на индивидуальное поведение крыс;
2. Определить влияние крезацина на биохимические показатели
крыс;
3. Выявить воздействие крезацина на морфологические показатели крови.
Материалы и методы. Камера для изучения двигательной активности и эмоциональной реактивности, устройство для изучения “норочного” рефлекса, индивидуальные пеналы для фиксации животных, камера для исследования методом “открытого поля”; фотоколориметр концентрационный, тип: КФК-2МП; микроскоп бинокулярный, тип: “Биолам”; камера Горяева; дозаторы автоматические.
Реактивы: гематоксилин; эозин; спирт этиловый ректификованный; натрий хлористый (ч.д.а.); натрий лимоннокислый (ч.д.а.); уксусная
кислота ледяная (ч.д.а.); гепарин раствор.
Ход определения. Испытание препарата крезацин проводили в лабораторных условиях на беспородных белых крысах массой тела 180200 г, содержавшихся в виварии МГАВМ и Б им. К. И. Скрябина в стандартных условиях и на одинаковом рационе. Животные были разделены на 4 опытные группы по (10 крыс в каждой), также была сформирована группа контроля, в которой находилось 10 крыс. В группы отбирали животных по следующим признакам: порода, возраст, масса тела, клиническое состояние. 1 группа-контроль; 2 группа - крезацин в дозе 15мг/кг; 3 группа - крезацин в дозе 20мг/кг; 4 группа - крезацин в дозе 25мг/кг. При изучении влияния крезацина на состояние крыс половину животных, убивали через 24 часа после введения препарата, другую
половину - на 14 сутки. Все болезненные процедуры выполнялись в соответствии с положениями Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным и методическими рекомендациями по их выведению из эксперимента и эвтаназии (Западнюк И. П. и др., 1984). Влияние препарата крезацин на индивидуальное поведение экспериментальных животных оценивалось с помощью теста «открытое поле» (Антрошенко О. Н. и др., 1999). Главным критерием являлась интенсивность ориентировочно-исследовательской активности животных, дополнительными критериями - коэффициент подвижности и эмоциональная тревожность. Исследования проводятся в ярко освещенной камере 100х100 см с высотой стенок 40 см. На пол камеры краской нанесена решетка, делящая поле на 25 (5х5) равных квадратов. Визуально за 2 минуты подсчитывают количество пересеченных квадратов 4 лапами и количество вертикальных вставаний.
Для изучения «норкового рефлекса» у крыс проводили метод «открытой площадки», результатом которого оценивается количество заглядываний в специально приготовленные норки. Животное (крыса) помещается в центр горизонтально установленной площадки размером 60х60, на которой равномерно расположены 16 отверстий диаметром 4 см. В течение 2 минут, визуально подсчитывают количество заглядываний в отверстия - норки. Для получения сыворотки отбирали кровь, выдерживали 30 мин, центрифугировали при 1500 об ./мин в течение 15 мин.
Кровь у испытуемых животных брали тотально из яремной вены, в сроки, предусмотренные экспериментом, через 14 дней по общепринятой методике. При биохимическом исследовании крови определялось содержание билирубина, глюкозы, белка, мочевины.[3,4]
В цельной крови крыс определяли количество эритроцитов, лейкоцитов, уровень гемоглобина.
Результаты. Полученные данные показывают, что эффект от введения в рацион животных крезацина зависит от дозы. Через 24 часа после введения крезацина в корм гибели животных не наблюдали.
Общее состояние крыс всех групп после 14 дней введения крезацина с кормом не отличалось от контроля. Опытные животные набирали массу так же, как и контрольные имели нормальные клинические показатели. Во всех группах она через 14 суток опыта варьировала в пределах 207,93±3,78 -210,9± 7,24 г. Двигательная активность, исследовательский рефлекс и эмоциональный статусу крыс при всех исследуемых дозах крезацина не нарушалась (рис.1-3).
1. Влияние крезацины на массу тела крыс (ряд 1 -через 24 часа; ряд 2 -через
14 суток)
Более того, эти показатели в некоторых случаях превышали контрольные, но это связано с различными дозами препарата. Возможно, что крезацин оказывает влияние на центральную нервную систему животных улучшая метаболизм. В тоже время из таблицы видно, что с увеличением дозы снижается количество пересеченных квадратов и одновременно с увеличением дозы повышается показатель исследуемых отверстий и вертикальных стоек.
2. Число исследуемых отверстий крысами после применения крезацина (ряд 1-через 24 часа; ряд 2 -через 14 суток)
3. Число вертикальных стоек сделанных крысами через сутки и 14 суток
после введени крезацина
В гемограмме крыс, получавших крезацин в дозе 25 мг/кг, в конце опыта отмечено статистически достоверное снижение количества эритроцитов. Незначительно, через 14 дней опыта, с увеличением дозы препарата в крови крыс повышается содержание лейкоцитов и эритроцитов. Наиболее оптимальной дозой является 20 мг/кг, т. к. в морфологической картине крови мы наблюдали незначительное повышение уровня гемоглобина 145,38 ± 2,44 г/л, тогда как в контрольной группе гемоглобин находился на отметке 140,13 ± 2,72 г/л. Уровень эритроцитов спустя 14 дней эксперимента находился в пределах 6,79 ± 0,31 млн/мкл, в свою очередь количество лейкоцитов составило 6,90 ± 0,72 тыс/мкл . Прочих изменений в морфологической картине крови животных не обнаружено. В лейкограмме крыс в конце опыта зарегистрированы незначительные различия в содержании лейкоцитов между группами. Биохимические показатели крови (общий белок, мочевина, глюкоза) опытных групп животных существенно не отличались от контроля. Уровень билирубина находился в пределах 8,51 ± 0,33мкмоль/л, тогда как в контрольной группе данный показатель на уровне 8,01 ± 0,3; глюкоза -6,84 ± 0,43ммоль/л, в контрольной группе - 6,43 ± 0,32ммоль/л; мочевина -4,90 ± 0,43ммоль/л, в контроле - 4,41 ± 0,21ммоль/л.
В тоже время видно, что содержание общего белка в крови увеличивалось соответственно увеличению дозы крезацина: общий белок был в пределах 75,01 ± 3,81 г/л, в контрольной группе - 68,62 ± 3,64.
Г руппы животных и доза препарата Сроки исследования Количество мочи, ті Всего мочи, ті
Через 1 час Через 2 часа Через 3 часа
1 группа контроль через 24 часа 1,62 ± 0,51 0,52 ± 0,23 2,23 ± 0,61
через 14 суток 3,11 ± 0,60 0,54 ± 0,30 - 3,71 ± 0,74
2 группа крезацин в дозе 15 мг/кг через 24 часа 1,83 ± 0,53 0,51 ± 0,21 - 2,34 ± 0,60
через 14 суток 2,30 ± 0,34 0,24 ± 0,14** - 2,61 ± 0,32
3 группа крезацин в дозе 20 мг/кг через 24 часа 2,73 ± 0,51* 0,50 ± 0,12 - 3,30± 0,63
через 14 суток 3,13 ± 0,73* 0,24 ± 0,10** - 3,64± 0,91*
4 группа крезацин в дозе 25 мг/кг через 24 часа 2,51 ± 0,44 0,51 ± 0,22 - 2,70 ± 0,42
через 14 суток 2,90 ± 0,31 0,24 ± 0,31** - 2,52 ± 0,31
Однако при использовании дозы препарата 25 мг/кг содержание общего белка было ниже, чем в контроле и других группах. У крыс, получавших крезацин в дозе 25 мг/кг, на 14-е сутки после скармливания препарата наметилась тенденция к повышению билирубина (р< 0,05), но данный показатель не выходил за рамки физиологических норм. Это говорит о том, что не все дозы препарата однозначны для организма, изменяется и функциональная нагрузка на печень. Проведенные исследования мочи на белок, билирубин, глюкозу, мочевину дали отрицательный результат. В таблице 1 показано влияние крезацина на диурез у крыс. Можно отметить, что диурез под влиянием дозы 0,25 мг/кг крезацина несколько замедляется. Это подтверждается как почасовыми наблюдениями, так и общим количеством выделенной мочи. Тогда как другие дозы стимулируют отделение мочи.
Весовые коэффициенты внутренних органов крыс опытных групп в большинстве случаев не отличались от контроля. Через 14 суток после окончания скармливания препарата в дозе 25 мг/кг обнаружено небольшое уменьшение массы печени (табл.2).
Г руппы животных Сроки исследо- вания Весовые коэффициенты, %
сердце легкие печень селезенка почки
1 группа контроль через 24 часа 0,41±0,01 0,61±0,02 3,51±0,09 0,35±0,04 0,63±0,03
через 14 суток 0,40±0,03 0,60±0,06 3,74±0,10 0,38±0,03 0,65±0,03
2 группа крезацин в дозе 15 мг/кг через 24 часа 0,41±0,02 0,52±0,03 3,64±0,11 0,38±0,03 0,62±0,01
через 14 суток 0,43±0,02 0,53±0,04 3,72±0,23 0,35±0,02 0,59±0,03
3 группа крезацин в дозе 20 мг/кг через 24 часа 0,42±0,03 0,63±0,03 3,61±0,09 0,37±0,03 0,63±0,02
через 14 суток 0,40±0,01 0,50±0,03 3,70±0,09 0,41±0,02 0,65±0,02
4 группа крезацин в дозе 25 мг/кг через 24 часа 0,41±0,02 0,51±0,05 3,56±0,07 0,36±0,03 0,62±0,03
через 14 суток 0,43±0,03 0,52±0,05 3,27±0,33 0,37±0,03 0,63±0,02
Заключение. Крезацин в дозах 15...25 мг/ кг живой массы у крыс изменяет на 14 сутки двигательную активность по сравнению с контролем:
- по числу пересеченных квадратов только первая доза повышает ее
на 3,57%. Вторая и третья приводит к снижению на 46,43 и 25, 27% соответственно; - число исследованных отверстий в тоже время
повышается на 12,27; 67,94 и 37,17%.- число вертикальных стоек от первой дозы повышается на 33,33%, а от последующих снижается на 32, 30 и 18,75%.
- морфологические, биохимические показатели крови, весовые коэффициенты органов и диурез у опытных групп крыс изменяется в большинстве случаев недостоверно. По показателям двигательной активности, исследовательского рефлекса, эмоционального статуса, а также морфологических и биохимических показателей крови можно сделать вывод о том, что препарат крезацин во всех исследуемых дозах не оказывает отрицательного влияния на организм животных.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Аганин, А.В., Демкин Г.П. и др. Справочник ветеринарного врача./ А.В. Аганин, Г.П. Демкин и др.// Ростов-на-Дону.: Феникс, 1996. - с. 608. 2. Андреева, Н.Л. Ростостимулирующие свойства иммуномодуляторов/ Андреева Н.Л. // Новые фармакологические средства в ветеринарии.: Тез. докл. науч.-практ. конф. - Л., 1990. - с. 32. 3. Антонов, Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии: биохимические и
микологические/Антонов Б.И. //. - М.: Агропромиздат, 1991. - с.6-7, 8-9, 16-18, 37-42. 4. Гурьянов,А. М. Петуненков В. А. Прытков Ю: Н. Дугушкин Н. В. Справочник по кормовым добавкам/ Гурьянов А. М. Петуненков В. А. Прытков Ю: Н. Дугушкин Н. В. //. - Саранск.: Изд. Морд. ун-та, 1999.-с.58. 5. Кондрахин, И.П. Клиническая лабораторная
диагностика ветеринарии: Справочное изд. /И.П. Кондрахин и др.//. - М., Агропромиздат, 1985. - с.287. 6. Лившиц, В.М. Биохимические анализы в клинике / В.М. Лившиц, В.И. Сидельников//.- М., Агропромиздат, 1998.- с.52. 7. Bendick A. Physiological role of antioxidants in the immune system. /. Bendick A.//J Dairy Sci, 1993.-P. 2789-2794. 8. Pathomorphology of acute and chronic stages of CCl-4-induced liver fibrosis: immunhisoche mical and in situ hybridization studies / H. Herbst, S. Milani, O. Heinrichs, D. Schuppan // Z. Gastroenterol. - 1992. - Bd. 30, № 2. - P. 21-28. 9. Singlair, H.M. Biochemical Society Symposia. - Cambrige, 1952. - p. 58.
ВЛИЯНИЕ КРЕЗАЦИНА НА ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРЫС
Шарафутдинова А. Ф., Байматов В. Н.
Резюме
В статье идет речь о влиянии крезацина в различных дозировках на морфологические показатели организма крыс. Проводили
морфологические, биохимические, этологические исследования. В
результате проведенных анализов было выяснено, что крезацин в указанных дозировках не оказывает негативного эффекта на организм крыс.
INFLUENCE KREZACINI ON MORPHOLOGICAL INDICATORS OF RATS
Sharafutdinova A.F., Baymatov V. N.
Summary
This article is about the impact of krezacin on the investigatory reflex, the motor activity and other physiological indicators of rats. There is evidence that the investigational drug has no effect on the processes of the organism systems.
