CC BY
71
electroejaculation method.
The results of investigations showed that sperm obtaining by electroejaculation method within the month with the interval of 2 days and then daily during 3 days with the interval of 5 days is going to be optimal because these conditions increase the adaptation process and contributes to obtaining of the high quality sperm.
УДК 619:636.2:615.9:577.151:546.48
ВЛИЯНИЕ КАДМИЕВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ НА ФЕРМЕНТАТИВНОЕ ЗВЕНО АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ
ОРГАНИЗМА БЫЧКОВ
Гутый Б.В. - к.в.н, доцент Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологий
имени С.З. Гжицкого, Украина e-mail: [email protected]
Ключевые слова: токсикология, кадмий, антиоксидантная система, ферменты, супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионпероксидаза.
Keywords: toxicology, cadmium, antioxidant system, enzymes, superoxidedismutase, catalase, glutathioneperoxidase.
Защита окружающей среды от техногенного загрязнения является одной из важнейших задач современности. Вредные выбросы и отходы промышленных предприятий, транспорта в окружающую среду на сегодня достигли значительных масштабов, а в крупных промышленных центрах существенно превышают допустимые санитарные нормы, особенно остро стоит проблема загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами, львиная доля которых приходится на кадмий. Анализ отечественной и зарубежной литературы дает основания утверждать, что в связи с ухудшением экологической ситуации в стране, вопросам токсичности кадмия уделяется значительное внимание. Вопрос кадмиевого токсикоза всесторонне изучается. На сегодняшний день накопилось большое количество научных сообщений о чрезвычайно важных значениях перекисного окисления липидов (ПОЛ) в развитии многих токсикозов [1, 9]. Необходимым условием функционирования клетки является поддержание нормального уровня процессов ПОЛ, скорость и регуляция которых контролируется многокомпонентной антиоксидантной системой (АОС), что обеспечивает связывание и модификацию свободных радикалов, предупреждению образования и разрушения перекисей [2, 6]. Следует отметить, что данная система состоит из ферментного и неферментного звена. Особую роль в функционировании естественной АОС играют ферменты - антиоксиданты, к числу которых относятся
супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионпероксидаза.
В предыдущих наших исследованиях установлено, что при кадмиевой интоксикации усиливаются процессы перекисного окисления липидов, что, с одной стороны, обусловлено активностью радикалообразования, а с другой - буферной емкостью системы антиоксидантной защиты, которая определяет адаптационную способность клетки и организма в целом [3,4]. По этому поводу считаем важным, учитывая опыт исследователей, обобщить и охарактеризовать состояние антиоксидантной системы организма животных при кадмиевом токсикозе.
Целью наших исследований было установить влияние хлорида кадмия в дозе 0,02 и 0,03 мг/кг массы тела на активность ферментов системы антиоксидантной защиты организма бычков для дальнейшей разработки антидота для лечения животных при упомянутой выше интоксикации.
Материал и методы исследований. Опыты проводились на бычках шестимесячного возраста, которые были сформированы в 3 группы по 5 животных в каждой: группа контрольная, бычки находились на обычном рационе; 2 группа - опытная 1, бычкам скармливали хлорид кадмия в дозе 0,02 мг / кг массы тела в течение 30 суток; 3 группа - опятная 2, бычкам скармливали хлорид кадмия в дозе 0,03 мг / кг массы тела в течение 30 суток.
Кровь для анализа брали из яремной вены на 1, 8, 16, 24 и 30 сутки после скармливания хлорида кадмия.
Активность глутатионпероксидазы (ГП) (К.Ф.1.11.1.9.) определяли по методу В.В. Лемешко и соавт. [8], активность каталазы (К.Ф. 1.11.1.6) -по методу М.А. Королюк [5]; активность супероксиддисмутазы (СОД) (КФ 1.15.1.1) - по методу [10].
Результаты исследований. Начальные стадии процесса свободнорадикального окисления контролируются ферментом супероксиддисмутазой, который нейтрализует супероксидный радикал и, соответственно, уменьшает общее токсическое воздействие активных форм кислорода. В таблице 1 приведенысведения об активности супероксиддисмутазы в крови бычков, которым скармливали хлорид кадмия в дозах 0,02 и 0,03 мг / массы тела животного. Активность данного фермента в начале опыта в крови всех подопытных животных была в пределах 0,59 ± 0,010 - 0,61±0,010 ум.ед. / мг белка.
После скармливания токсического соединения, активность супероксиддисмутазы в крови обоих исследовательских групп в первые сутки опыта возросла относительно контроля на 13 и 8%. В дальнейшем наблюдали постепенное снижение активности фермента, которая на восьмые сутки исследования соответственно составила 0,52±0,011 и 0,55±0,010 ум.ед. / мг белка. На двадцать четвертые сутки исследования активность супероксиддисмутазы была низкой и относительно
контрольной группы животных она снизилась на 18 и 21% соответственно. На тридцатые сутки опыта активность фермента несколько начала возрастать, однако оставалась на низком уровне.
1. Активность супероксиддисмутазы в крови бычков при хроническом кадмиевом токсикозе, (М ± т, п = 5)
Время исследования крови (сутки) Супероксиддисмутаза (ум.ед./мг белка)
Группы животных
Контрольная Опытная 1 Опытная 2
Исходные данные 0,59±0,010 0,61±0,010 0,60±0,014
Первые 0,60±0,011 0,68±0,010 0,65±0,015
Восьмые 0,63±0,010 0,52±0,011** 0,55±0,010**
Шестнадцатые 0,62±0,010 0,50±0,012** 0,49±0,010**
Двадцать четвертые 0,61±0,012 0,50±0,011** 0,48±0,011**
Тридцатые 0,62±0,011 0,54±0,010** 0,50±0,011**
Степень достоверности по сравнению с данными контрольной группы - Р <0,05 - *, Р> 0,01 - **
Необходимо отметить, что активность супероксиддисмутазы тесно связана с активностью каталазы, которая защищает организм от высокотоксичных кислородных радикалов. Следует заметить, что слишком резкое повышение активности СОД, без соответствующей активации каталазы, само по себе является цитотоксичным. Каталаза катализирует расщепление перекиси водорода с образованием воды и кислорода. Изменения активности каталазы у бычков при развитии хронического кадмиевого токсикоза приведены в таблице 2.
2. Активность каталазы в сыворотке крови бычков при хроническом кадмиевом токсикозе, (М ± т, п = 5)
Время исследования крови (сутки) Каталаза (единицы)
Группы животных
Контрольная Исследовательская 1 Исследовательская 2
Исходные данные 6,49±0,14 6,52±0,15 6,51±0,15
Первые 6,57±0,13 6,50±0,13 6,48±0,14
Восьмые 6,54±0,15 6,31±0,15* 6,28±0,10*
Шестнадцатые 6,58±0,14 6,08±0,11* 5,95±0,11**
Двадцать четвертые 6,49±0,12 5,94±0,10** 5,86±0,13**
Тридцатые 6,51±0,15 6,19±0,12* 6,03±0,11*
Степень достоверности по сравнению с данными контрольной группы - Р <0,05 - *, Р> 0,01 - **
При определении активности каталазы крови бычков установлено, что под действием хлорида кадмия в дозе 0,02 мг/кг массы тела отмечено
снижение активности фермента по сравнению с исходными данными, а именно: в первые сутки на 1%, восьмые - на 3,5%, шестнадцатые - на 7,6%. Низкой активность фермента была на двадцать четвертые сутки эксперимента, где в первой опытной группе она составляла 5,94±0,10 единиц. В дальнейшем активность каталазы начала несколько возрастать до первоначальных величин и на тридцатые сутки опыта составляла 6,19±0,12 единиц.
При скармливании хлорида кадмия в дозе 0,03 мг / кг массы тела, у животных обнаружены такие же изменения, как и в первой опытной группе, но активность каталазы была значительно ниже на двадцать четвертые сутки опыта и составляла 5,86±0,13 единиц. По сравнению с началом опыта, на 1, 8, 16 и 30-ю сутки после введения указанных элементов, активность каталазы была соответственно на 1, 4, 10 и 7% ниже.
При скармливании хлорида кадмия в дозах 0,02 и 0,03 мг / кг массы тела активность глутатионпероксидазы в первые сутки опыта возросла на 5,5 и 5,0% (табл. 3). В дальнейшем активность фермента, постепенно в течение всего опыта снижалась и на восьмые сутки опыта составила в первой опытной группы 33,1±1,14 нмоль КЛОРИ / мин на 1 мг белка и второй - 32,4±1,12 нмоль КЛОРИ / мин на 1 мг белка.
3. Активность глутатионпероксидазы в сыворотке крови бычков при хроническом кадмиевом токсикозе, (М ± т, п = 5)
Время исследования крови (сутки) Глутатионпероксидаза (нмоль КЛОРИ/хв на 1 мг белка)
Группы животных
Контрольная Исследовательская 1 Исследовательская 2
Исходные данные 36,2±1,20 36,1±1,18 36,4±1,21
Первые 36,1± 1, 18 38,1±1,20* 37,9±1,25 *
Восьмые 36,3±1,19 33,1±1,14* 32,4±1,12*
Шестнадцаыея 36,4±1,21 31,4±1,15** 30,5±1,14**
Двадцать четвертые 36,2±1,22 29,8±1,18** 28,7±1,20**
Тридцатые 36,5±1,25 33,1±1,20* 32,1± 1,15*
Степень достоверности по сравнению с данными контрольной группы - Р <0,05 - *, Р> 0,01 - **
Низкой активность глутатионпероксидазы в сыворотке крови опытных животных была на шестнадцатые и двадцать четвертые сутки эксперимента. Так, в 1 опытной группе животных активность фермента снизилась в указанные периоды на 14 и 18%, во 2 опытной группе 16 и 21% соответственно. На тридцатые сутки опыта отмечается несколько повышенная активность глутатионпероксидазы, однако по сравнению с контролем, она оставалась на низком уровне.
Выводы. 1. Кадмиевая интоксикация приводит к повышенной
активации процессов липопероксидации и нарушению равновесия между активностью антиоксидантной системы и интенсивности перекисного окисления липидов. 2. Супероксиддисмутаза, каталаза и глутатионпероксидаза при действии на организм хлорида кадмия обуславливаеют одинаковые по направленности и выраженности изменения.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Абрагамович О.О. Процеси лшщно! пероксидаци при хрошчних ураженнях печшки / О. О. Абрагамович, О. I. Грабовська, О. I. Терлецька [та ш.] // Медична хiмiя. — 2000. — Т. 2, № 1. - С. 5-8. 2. Боршов О.Ю. Вплив хлориду кадмш та пероксиду водню на процеси пероксидного окислення i фракцiйний склад лiпiдiв у гепатоцитах щурiв / Борiков О.Ю., Калiман П.А. // Укра1нський бiохiмiчний журнал. - 2004. - Т. 76., № 2. - С. 107-111. 3. Гутий Б.В. Змша бiохiмiчних i морфолопчних показникiв кровi щурiв при хронiчному кадмieвому токсикозi. - Проблеми зоошженери та ветеринарно! медицини:Збiрник наукових праць Харювсько! державно! зооветеринарно! академп . - Х.:РВВ ХДЗВА., 2012. Випуск 24, ч. 2 «Ветеринары науки» с.247-249. 4. Гутий Б.В. Вплив хлориду кадмш на штенсившсть процешв перекисного окиснення лшщв та стан системи антиоксидантного захисту оргашзму щурiв. - Вiсник Сумського нацюнального аграрного унiверситету. - Суми, 2012. випуск 7(31) - С. 31-34. 5. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова, В.Е. Токарев // Лаб. дело.- 1988.- №1.- С. 16-18. 6. Коршун М.М. Експериментальне вивчення механiзмiв комбшовано! ди малих доз пестицидiв, штра^в, солей свинцю та кадмш / Коршун М.М., Колесова Н.А., Веремш М.1., та ш. // Современные проблемы токсикологии. - 2001. - № 3. - С. 46-50. 7. Колб В.Г. Справочник по клинической химии/ В.Г. Колб, В.С. Камышников. — М.: Минск, 1982. — 311 с. 8. Лемешко В.В., Никитенко Ю.В., Ланкин В.З. Ферменты утилизации годропероксидов и О2 в миокарде крыс разного возраста // Бюл. эксп. биол. и мед. - 1985. - №5. - С.563-565. 9. Осипов А. И. Активные формы кислорода и их роль в организме / А. И. Осипов, О. А. Азизова, Ю. А. Владимиров // Успехи биол. химии. — 1990. — Т. 31. — С. 180-208. 10. Чевари С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах / С. Чевари, И. Чаба, Й. Секей // Лаб. дело. — 1985. — № 11. — С. 678-681.
ВЛИЯНИЕ КАДМИЕВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ НА ФЕРМЕНТАТИВНОЕ ЗВЕНО АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ ОРГАНИЗМА БЫЧКОВ
Гутый Б. В.
Резюме
Раскрыты особенности антиоксидантной системы организма бычков
при кадмиевой интоксикации. Установлено, что хлорид кадмия в токсических дозах способствует снижению активности ферментов системы антиоксидантной защиты, на что указывает снижение ферментов глутатионпероксидазы, супероксиддисмутазы и каталазы.
INFLUENCE OF CADMIUM INTOXICATION ON ENZYMATIC CHAIN ANTIOXIDANT SYSTEM BULLS
Hutiy B.V.
Summary
The features of antioxidant system steers for cadmium intoxication. Found that cadmium chloride in toxic doses, reduces the activity of antioxidant enzymes, as indicated by reduced enzyme glutathioneperoxidase, superoxidedismutase and catalase.
УДК 619:636.4.087.72
МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ СВИНЕЙ ПРИ ДОБАВЛЕНИИ В РАЦИОН СОЕВОЙ ОКАРЫ
Дежаткина С.В. - к.б.н., доцент; Губейдуллина З.М. - к.б.н., доцент;
Мухитов А.З. - к.б.н., доцент Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия имени П. А. Столыпина
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: соевая окара, свиньи, кровь, гемоглобин, эритроциты, лейкоциты.
Keywords: soyа okara, pigs, blood, hemoglobin, erythrocytes, leukocytes.
Сохраняя постоянство состава, кровь является достаточно лабильной системой, быстро отражающей происходящие в организме изменения, как в норме, так и в патологии. Состав крови зависит от физиологического состояния организма, возраста, пола, условий кормления и других факторов. У свиней отмечают возрастные изменения крови: сразу после рождения наблюдается относительно повышенное содержание эритроцитов, гемоглобина, с возрастом - снижение. Особенно резкое снижение перечисленных показателей наблюдают при анемии молодняка. Недостаток железа у поросят приводит к микроцитарной гипохромной анемии. Как гемоглобин, так и гематокрит - достоверные показатели содержания железа в рационе. Введение железа анемичным поросятам вызывает увеличение синтеза гемоглобина и возрастание числа эритроцитов и показателя гематокрита [2, 3, 4, 6].
