CC BY
20Паёми Академияи илмх;ои тибби Тоцикистон - №3, 2017
УДК [616.98:579.842.15:579.835.12] - 053.2 - 078:612.017.1
КУРЛАН Н.Ю., ОЛЬХОВСКАЯ ОН.
ВЛИЯНИЕ ИНФИЦИРОВАНИЯ ДЕТЕЙ ХЕЛИКОБАКТЕР ПИЛОРИ НА ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА БОЛЬНЫХ ПРИ ШИГЕЛЛЕЗЕ
Кафедра детских инфекционных болезней Харьковского национального медицинского университета, Украина
f В статье представлены результаты оценки уровней популяций и субпопуляций лимфоцитов перифери ческой крови детей, больных шигеллезом и инфицированных H. Pylori. Определено, что у детей с фоновым инфицированием воспалительный процесс сопровождается значительными изменениями показателей клеточного звена иммунного ответа с существенным угнетением Т-хелперного звена иммунитета. У детей, инфицированных H. Pylori, выявлены достоверно более значимые изменения Т-хелперного звена иммунитета в остром периоде, отсутствие полного восстановления показателей CD3+, СD4+ до физиологических уровней в периоде реконвалесценции и в динамике инфекционного процесса. Полученные данные свидетельствуют о влиянии инфицирования H. Pylori на показатели клеточного звена иммунного ответа у детей, больных шигеллезом, и могут быть использованы для дальнейшего совершенствования терапии таких больных.
^Ключевые слова: шигеллез, Helicobacter pylori, дети, иммунитет ^
KURLAN N.YU., OLKHOVSKA O.M.
IMPACT OF H. PYLORI INFECTION OF CHILDREN ON CELL-MEDIATED IMMUNITY INDICES OF PATIENTS
WITH SHIGELLOSIS
Department of Children's Infectious Diseases of the Kharkiv National Medical University, Kharkiv
r "N
The article deals with assessment findings of lymphocyte population and subpopulation levels ofperipheral blood in children with Shigellosis and infected with H. pylori. It has been established that in children with background infection, the inflammatory process is accompanied by significant changes of the levels of cellular arm of the immune response with probable inhibition of T-helper immunity component. In children infected with H. pylori, more significant changes of T-helper immunity component in acute phase, absence of full recovery of CD3+, CD4+ up to physiological levels in convalescence period and substantial changes of CD3+, CD4+ over time of infectious process were revealed. The obtained data are representative of substantial impact of H. Pylori infection on indices of cellular arm of the immune response in children with Shigellosis and can be applied fur further improvement of treatment of this category ofpatients.
^Key words: Shigellosis, Helicobacter pylori, children, immunity. ^
Актуальность. До настоящего времени шигеллез остается распространенной бактериальной инфекцией, особенно среди детей
Курлан Н.Ю. - аспирант кафедры детских инфекционных болезней Харьковского национального медицинского университета; тел.: +380509354381; e-mail: [email protected]
раннего возраста [1, 2]. Во время инфицирования шигеллы находятся вне- и внутриклеточно, поэтому для эффективной санации организма нужна инициация как гуморального, так и клеточного звеньев иммунного ответа [3, 4]. Нормальное функционирование иммунной системы
базируется на балансе ТЫ и ^2, основанном на равноценной продукции их регуляторных цитокинов. Избыточная активация любого из типов Т-хелперных клонов может направить иммунный ответ по одному из альтернативных вариантов, а расбалансирование их продукции приводит к иммунной патологии, поэтому в клинической практике важным является определение количества CD4+ и CD8+-клеток [5]. Доказано, что при шигеллезе запуск клеточ-но-опосредованного, цитотоксического ответа обусловлен не попаданием в организм шигелл как таковых или выделением ими растворимых продуктов, а инфицированием этими патогенами собственных клеток организма [6]. Вопросы активации клеточного звена иммунного ответа при шигеллезе до настоящего веремени остаются дискутабельними. Так, выявлено, что активированные СD8+-клетки могут осуществлять ци-тотоксическую функцию после взаимодействия TCR с комплексом антигена и молекулы МНС I класса на поверхности инфицированной клетки-мишени [7, 8]. В то же время отдельные авторы указывают на наличие иммуносупрессорной активности шигелл при экспериментальном инфицировании шигеллами как животных, так и людей [7, 9]. Обнаружено, что СD8+-лимфо-циты не участвуют в формировании протек-тивного иммунитета при кишечной инфекции, вызванной бактериями вида Shigella, несмотря на то, что Ipa-протеины активно секретируются шигеллами в клетки хозяина, подвергаются процессингу и представляются СD8+ клеткам. Для определения способности шигелл стимулировать антиген-специфический СD8+ Т-кле-точный ответ был разработан штамм S. Flexneri, что производит через секреторную систему третьего типа гетерогенный вирусный СD8+ Т-клеточный эпитоп. Т-клеток, специфичных к вирусному эпитопу, не было зафиксировано ни у мышей, ни в культурах клеток, зараженных этим штаммом [9]. Авторы утверждают, что ингибирование СD8+ цитотоксичного ответа не связано с продуктами секреции шигелл [2]. При бактериальных инфекциях важная роль в выздоровлении организма принадлежит специфическим антителам, которые продуцируются В-лимфоцитами, развитие, активация и дифференцировка которых контролируется CD19+- ключевой молекулой трансдукции сигналов [10, 11].
Вопросам клеточно-опосредованного ответа детей раннего возраста при шигеллезе посвящено небольшое количество работ. Однако, исследований, касающихся изучения иммунологических показателей при шигеллезе у детей, инфицированных H. Pylori (как одного из наиболее распространенных возбудителей, заражение
которым происходит в раннем возрасте), в доступных нам научных ресурсах не обнаружено.
Цель исследования. Влияние инфицирования детей хеликобактер пилори на показатели клеточного звена иммунитета больных при шигеллезе.
Материал и методы исследования. В динамике острого шигеллеза нами проведено исследование показателей клеточного звена иммунного ответа 76 детей одного-трех лет жизни, которые были госпитализированы в Областную детскую клиническую инфекционную больницу города Харькова. Диагноз шигеллеза верифицировали по совокупности клинико-эпидемиологических, бактериологических и серологических данных. Все дети получали лечение в соответствии с утвержденными действующими клиническими протоколами. Были сформированы две группы наблюдения, сравнимые по возрасту и полу. Первую группу составили 36 детей, больных шигеллезом и инфицированных H. ру^п. Последнее подтверждалось посредством выявления H. pylori в кале методом полимеразной цепной реакции и по результатам иммуноферментного CITO TEST H.Pylori Ag. Во вторую группу вошли 40 детей, больных шигеллезом без фонового инфицирования. В остром периоде и в периоде реконвалесценции шигеллеза были определены уровни популяций и субпопуляций лимфоцитов периферической крови больных методом непрямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов CD3+, CD4+, CD8+, CD19+. Сравнение содержания CD-клеток проводили с показателями контрольной группы из 30 практически здоровых детей, аналогичных по возрасту.
Статическая обработка полученных результатов проведена с помощью компьютерных программ Excel и Statistica 6,0.
Результаты и их обсуждение. Содержание основных субпопуляций лимфоцитов крови детей групп наблюдения в остром периоде шигеллеза представлено в таблице 1.
В периоде разгара шигеллеза у больных обеих групп определены существенные изменения в показателях клеточного иммунитета, по сравнению с группой контроля, характеризующиеся достоверным снижением уровней СD3+, СD4+ СD8+ и повышением содержания СD19+ (Р<0,01). Следует отметить, что у детей первой группы в остром периоде болезни наблюдалось достоверное снижение количества СD3+, СD4+, по сравнению с показателями второй группы (Р<0,05). Наиболее существенные различия в исследуемых группах выявлены в показателях уровней СD8+ (Р<0,01). Повышение содержания CD19+ крови были более значимыми у детей второй группы (Р<0,05). Таким образом, в остром периоде шигеллеза у больных
Паёми Академияи илмх,ои тибби Тоцикистон - №3, 2017
обеих групп нами отмечены однотипные нарушения клеточного иммунитета, заключавшиеся в дефиците иммунорегулирующих Т-лимфоцитов и увеличении количества В-лимфоцитов, которые связаны с гуморальным ответом. В остром периоде шигеллеза иммунорегуляторный индекс (ИРИ), отображающий соотношение СD4+ к СD8+, был
ниже нормы за счет существенного снижения количества СD4+: соответственно 1,3±0,035 и 1,3±0,023 в группах исследования и 1,4±0,017 в группе контроля (Р<0,05).
Показатели клеточного иммунного ответа больных шигеллезом детей в периоде ранней реконвалесценции предоставлены в таблице 2.
Таблица 1
Показатели клеточного иммунитета крови больных в остром периоде шигеллеза (M±m)
Показатель Первая группа (n=36) Вторая группа (n=40) Группа контроля (n=30)
CD 3+, % 52,16±0,77u 54,71±0,7812 60,60±1,20
CD 4+, % 28,41±0,5612 30,59±0,541,2 36,30±0,75
CD 8+, % 21,10±0,6412 23,27±0,391,2 25,70±0,68
CD 19+, % 23,11±0,251,2 24,67±0,621,2 17,30±0,79
Примечание: 1 - относительно группы контроля; 2 - между группами наблюдения
Таблица 2
Показатели клеточного иммунитета крови больных в период ранней реконвалесценции (M±m)
Показатель Первая группа (n=36) Вторая группа (n=40) Группа контроля (n=30)
CD 3+, % 56,59±0,9412 58,97±0,682 60,60±1,20
CD 4+, % 32,23±0,891,2 35,84±0,512 36,30±0,75
CD 8+, % 23,88±0,431,2 25,84±0,862 25,70±0,68
CD 19+, % 20,15±0,781 19,44±0,671 17,30±0,79
Примечание: 1 - относительно группы контроля; 2 - между группами наблюдения
В периоде ранней реконвалесценции у детей без фонового инфицирования H. pylori проявлялась тенденция к нормализации количества CD3+, CD4+, CD8+, уровни которых не отличались от показателей группы контроля (Р<0,05). У детей первой группы в периоде реконвалесценции шигеллеза содержание CD3+, CD8+ (Р<0,05) и CD4+ (Р<0,01) сохранялось достоверно низким. Уровни CD19+ в обеих группах наблюдения снижались к периоду реконвалес-ценции, но оставались високими, по сравнению с контрольной группой (Р<0,05). ИРИ детей первой группы был ниже нормальных величин (1,3±0,04 и 1,4±0,017 соответственно, Р>0,05), в то время как у детей без фонового инфицирования он приближался к показателям контрольной группы (1,4±0,02).
Анализ показателей иммунитета больных двух групп в различные периоды шигеллеза выявил, что инфицирование H.pylori приводит к значимым изменениям супрессорной активности клеточнго звена иммунного ответа. Определено достоверное различие показателей CD8+ в остром периоде и периоде ранней реконвалесценции шигеллеза у детей раннего возраста с фоновым инфицированием
хеликобактер пилори (Р<0,01). У больных без фонового инфицирования в динамике болезни были выявлены существенные изменения показателей СD19+ (Р<0,01), что, вероятно, обусловлено компенсаторными механизмами реагирования иммунной системы на транзиторную несостоятельность Т-хелперного звена.
Таким образом, течение шигеллеза у детей раннего возраста сопровождается существенными изменениями показателей клеточного звена иммунного ответа, максимальная степень выраженности которых определяется в остром периоде болезни. Инфицирование детей хеликобактер пилори приводит к угнетению Т-хелперного звена иммунитета больных шигеллезом в остром периоде, восстановление которого в полной мере не происходит вплоть до периода реконвалесценции, а также активацией супрессорной активности цитотоксических Т-лим-фоцитов. Выявленные особенности иммунного реагирования больных расширяют наши знания о патогенетических механизмах формирования шигеллеза у детей, инфицированных хеликобактер пилори, а в будущем будут способствовать совер-
шенствованию терапии таких больных.
Выводы
1. Течение шигеллеза у детей раннего возраста сопровождается значительными изменениями показателей клеточного звена иммунного ответа с угнетением Т-хелперного звена.
2. В остром периоде шигеллеза максимально выраженные изменения Т-хелперного звена иммунитета происходят у детей, инфицированных хеликобактер пилори.
3. В периоде ранней реконвалесценции у детей с фоновым инфицированием хеликобактер пилори не происходит полного восстановления показателей СD3+, СD4+ до физиологических уровней, что свидетельствует о сохранении депрессии Т-хелперного звена.
4. Течение шигеллеза у детей, инфицированных хеликобактер пилори, сопровождается существенной динамикой показателей СD8+, что может свидетельствовать о значительной цитотоксической активности клеточных иммунных реакций.
5. Выявлены существенные отличия иммунного реагирования больных шигеллезом и инфицированных хеликобактер пилори детей, которые характеризуется неполноценностью хелперного звена защиты (СD4+) при активации супрессорной активности цитотоксических Т-лимфоцитов (СD8+).
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов
ЛИТЕРАТУРА
1. Иванова Л.А. Гарас М.Н., Марусик У.И. и др. Особенности течения инвазивныйх диарей у детей на современном этапе //Актуальная инфектология.- 2015.-№3(8).- С. 34-37
^КУРЛАН Н.Ю., ОЛХОВСКАЯ О.Н.
2. Anderson M., Sansonetti P. J., Marteyn B.S. Shigella Diversity and Changing Landscape: Insights for the Twenty-First Century // Frontiers in Cellular and Infection Microbiology.-2016.- Vol. 6. Р. 45.
3. Тагирова З.Г., Ахмедов Д.Р., Амирова Д.М. Показатели провоспалительных цитокинов у больных шигеллёзами // Инфекционные болезни.- 2010.- Т. 8, №1.- С. 55-57
4. Phalipon A., Sansonetti P. J. Shigella's ways of manipulating the host intestinal innate and adaptive immune system: A tool box for survival? // Immunology and Cell Biology.- 2007.- № 85(2).- P. 119-129.
5. Salgado-Pabуn W. Celli S., Arena E.T., Nothelfer K., Roux P. et al. Shigella impairs T lymphocyte dynamics in vivo // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.- 2013.- № 110.- P. 4458-4463.
6. Jehl S.P., Doling A.M., Giddings K.S., Phalipon A., Sansonetti P.J., Goldberg M.B., Stambach M.N. Antigen-specific CD8(+) T cells fail to respond to Shigella flexneri // Infection and Immunity.- 2011.- Vol. 79 (5).- P. 2021-2030.
7. Червинец В.М., Червинец Ю.В., Михайлова Е.С. и др. Микробиоценоз кишечника и иммунный статус у детей младшего школьного возраста// Клиническая лабораторная диагностика.- 2013.- Т. 1.- С. 49-51
8. Carayol N., Tran Van Nhieu G. Tips and tricks about Shigella invasion of epithelial cells // Current Opinion in Microbiology.- 2013.- Vol. 16, Issue 1.- P. 32-37.
9. Maman Y., Nir-Paz R., Louzoun Y. Bacteria Modulate the CD8+ T Cell Epitope Repertoire of Host Cytosol-Exposed Proteins to Manipulate the Host Immune Response // PLOS Computational Biology.- 2011.- Vol. 7(10).
10. Ashida H., Ogawa M., Mimuro H., Sasakawa C. Shigella Infection of Intestinal Epithelium and Circumvention of the Host Innate Defense System Molecular Mechanisms of Bacterial Infection via the Gut0 // Current Topics in Microbiology and Immunology.- 2009.- Vol. 337.- P. 231-255.
11. Rudel T. To Die or Not to Die—Shigella Has an Answer // Cell Host & Microbe.- 2012.- Vol. 11, Issue 3.- P. 219 - 221.
л
ТАЪСИРИ СИРОЯТНОКИИ ХЕЛИКОБАКТЕРИ пилори ба нишондоди масунияти ХУЧАЙРАГИИ КУДАКОНИ БЕМОРИ ШИГЕЛЛЁЗ
Кафедраи беморичои сироятии кудакона Доншш очи тиббии миллим Харков
К'алимачои калидй: шигеллёз, Helicobacter pylori, кудакон, масуният.
Дар мацола натица%ои арзёбии сат%и популятсия ва зерпопулятсияи лимфосит%ои хуни периферикии кудакони гирифтори бемории шигеллёз ва сироятёфтагони H. Pylori оварда шудааст. Муайян карда шудааст, ки дар кудакони ба ин беморй сироятёфта, раванди илтщобй бо тагйирот^ои куллии нишондоди цисмати (%алцаи) %уцайрагии цавоби масунй бо заифшавии циддии %алцаи Т-%елперии масуният зу%ур мекунад. Дар кудакони бо H. Pylori сироятёфта бо-шад, дар давраи шадид - тагйирот^ои цуллии %алцаи Т-%елперии масуният, дар маршаламреконвалесентй - барцарор-нашавии пурраи нишондоди CD3+ ва CD4+ то сат%и физиологи, дар цараёни раванди сироятй - тагйирот^ои куллии нишондоди CD8+ ошкор карда шуданд. Натица%ои бадастомада аз таъсири сироятнокии H. Pylori ба нишонди%ан-да%ои цисмати %уцайрагии цавоби масунй дар кудакони гирифтори бемории шигеллёз ша%одат меди%анд, %амзамон барои такмили ояндаи табобати чунин беморон метавон истифода бурд.
