Влияние иммуностимулирующего и пробиотического препаратов на морфологические показатели органов периферической иммунной системы лабораторных животных
О.О. Датченко, соискатель, А.В. Воробьев, к.в.н,
ФГОУ ВПО Самарская ГСХА, ГНУ Самарская НИВС Россельхозакадемии
Ключевые слова: препараты, показатели, органы, иммуная система, морфология, животные.
К настоящему времени сложились основные представления о морфофункциональной организации иммунной системы, включающей центральные (костный мозг, тимус) и периферические (селезенка, лимфатические узлы) органы иммунитета, а также очаговые скопления лим-
фоцитов, повсеместно рассеянные в организме, в том числе лимфоцитов, циркулирующих с током крови и лимфы. Особое место в этой многокомпонентной и многоуровневой тканевой организации занимает так называемая лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми оболочками. К ней относятся пейеровы бляшки и солитарные фолликулы кишечника, лимфоглоточное кольцо, гортанные миндалины, очаговая лимфоидная ткань по ходу бронхов и урогенитального тракта [1, 2].
Доказана ведущая роль лимфоидной ткани кишечника в местном иммунитете и в обеспечении иммунного гомеостаза организма. Современные методы морфологического исследования — гистохимические, электронно-микроскопические и иммуногистохимические — позволяют достаточно полно оценить состояние местного иммунитета пищеварительного тракта при различных функциональных состояниях организма [3].
В литературе приводятся сведения о взаимосвязи поступающих антигенов и морфофункциональном состоянии лимфоидных образований желудочно-кишечного тракта. Известно, что поступление некоторых бактериальных антигенов оказывает стимулирующее влияние на имму-ногенную активность лимфоидных органов [4, 5].
Целью настоящей работы явилось изучение влияния компонентов липополисахаридов бактерий рода Bacillus в сочетании с пробиотическим препаратом на морфологические показатели лимфоидных образований кишечника и мезентериальных лимфатических узлов кроликов.
Экспериментальные и клинические исследования проведены на базе кафедры внутренних незаразных болезней ФГОУ ВПО «Самарская сельскохозяйственная академия».
Объектом исследования служили беспородные кролики без признаков явной патологии. Были сформированы по принципу пар-аналогов одна опытная и одна контрольная группы.
Экспериментальные препараты — комплексный пробиотический препарат, состоящий из смеси микробной массы из непатогенных родов Bacillus, представителей нормофлоры желудочнокишечного тракта родов Lactobacillus и их продуцентов в среде культивирования белого или слегка желтого цвета со специфическим запахом. В одном мл препарата содержится (1—2). 109 представителей рода Bacillus и не менее (2—5). 109 представителей рода Lactobacillus.
Препараты готовили в лаборатории гематологии и иммунологии Самарской ГСХА, стерильно фасовали в стеклянные флаконы.
Кроликам опытной группы перорально давали пробиотический препарат утром за 30 мин. до кормления, один раз в неделю в течение одного месяца в дозе 1 мл на 1 кг массы. В качестве прямого активатора лимфоидных образований брюшной полости вводили внутрибрюшинно инактивированные компоненты непатогенных бактерий рода Bacillus один раз в неделю в течение месяца в дозе 1 мл на животное.
Животные контрольной группы не подвергались воздействию препаратов.
По завершении опыта через 30 дней животные были выведены из эксперимента. Материалом исследования служили различные отделы
кишечника и мезентериальные лимфатические узлы.
Материал фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине, заливали в парафин. Готовили парафиновые срезы толщиной 8 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином.
На гистопрепаратах проводили измерения диметра лимфоидных фолликулов кортикального слоя лимфатических узлов. Подсчитывали число лимфоидных узелков в стенке тонкого кишечника в 10 полях зрения на площади 10 мм2, число иммунокомпетентных клеток в лимфоидных фолликулах лимфатических узлов.
В результате эксперимента со стороны тонкого кишечника в опытной группе обращали на себя внимание признаки повышения функциональной активности с нарастанием различия в высоте ворсин и глубине крипт, пролиферацией выстилающего цилиндрического эпителия, нарастанием количества бокаловидных клеток. Число иммунокомпетентных клеток как в строме ворсин, так и в межкриптальной зоне слизистой оболочки нарастало. Отмечались более крупные и отчетливо сгруппированные лимфатические узелки в стенке тонкой кишки, число лимфоидных узелков на 10 мм2 площади составило 14,5, разница в показателе с контрольной группой наблюдений составила 76,8%.
В мезентериальных лимфатических узлах опытных животных корковое вещество занимает больше половины площади среза узла, в нем чаще встречаются лимфоидные узелки, среди них преобладают узелки с герминативными центрами. Размер лимфоидных узелков и их герминативных центров больше, чем у контрольной группы, в два раза. Иногда узелки располагаются в два ряда. В герминативных центрах значимо выше содержание бластов и больших лимфоцитов.
Выявляется большое количество макрофагов, преимущественно расположенных по ходу кровеносных сосудов. Характеристика клеточных популяций свидетельствует об увеличении количества ретикулярных и плазматических клеток, малых и средних лимфоцитов. В мозговых тяжах содержание плазматических клеток выше, чем у контрольных животных.
Таким образом, в лимфатическом узле возросло содержание лимфоцитов и уменьшилось количество разрушенных клеток.
Толщина коркового вещества мезентериальных лимфатических узлов у контрольных животных неравномерна по протяжению, лимфоидные узелки встречаются редко, имеют небольшие размеры, а плотность популяции в их герминативных центрах меньше, чем в опыте. Значимо меньше количество средних и малых лимфоцитов, ретикулярных клеток. В мозговых тяжах снижено количество средних лимфоцитов и возросло число малых.
Таким образом, состояние органов периферической иммунной системы (лимфатическихузлов), местной иммунной системы кишечника в опытной группе наблюдений свидетельствует о достоверном повышении иммунологической активности.
На основании проведенных исследований можно сделать заключение об активизации пролиферативных процессов и иммунной функции данных органов как в лимфоидной ткани, ассоциированной с кишечной стенкой, так и в мезентериальных лимфатических узлах под воздействием вышеуказанных препаратов.
Литература
1. Быкова, В.П. Лимфоэпителиальные органы в системе местного иммунитета слизистых оболочек // Арх. патол. 1995. Т. 57. № 1. С. 11-15.
2. Сапин, М.Р. Иммунная система, стресс и иммунодефицит / М.Р. Сапин, Д.Б. Никитюк. М.: Джангар, 2000. 184 с.
3. Аруин, Л.И. Иммуноморфология желудка / Л.И. Аруин, О.Л. Шаталова // Клин. мед. 1981. № 7. С. 8-14.
4. Ивановская, Т.Е. Морфология лимфоидной системы в перинатальном периоде при антигеном воздействии / Т.Е. Ивановская, Л.Е. Кокшунова // Арх. патол. 1979. Т. 41. № 9. С. 15-22.
5. Белянин, В.Л. Диагностика реактивных гиперплазий лимфатического узла / В.Л. Белянин, Д.Э. Цыплакова. СПб.-Казань, 1999. 245 с.