CC BY
90
Морфофизиология селезёнки кроликов при воздействии стресс-факторов*
Т. Я. Вишневская, к.б.н., Л. Л. Абрамова, д.б.н., профессор, Оренбургский ГАУ
Воздействие техногенных факторов на функциональное состояние организма животных в настоящее время является проблемой промышленного кролиководства [1—3]. Немаловажную роль в адаптации к этим факторам играет иммунная система организма, органы которой участвуют в его защитных реакциях, а селезёнка принимает непосредственное участие в обеспечении
иммунологической реактивности организма при распаде старых эритроцитов и пролиферации им-мунокомпетентных Т- и В-клеток в зонах органа, определяющих иммунный статус организма животных [4—8]. Это единственный орган, лимфоидные образования которого (узелки, муфты, эллипсоиды и др.) окружают конечные разветвления кровеносных сосудов и осуществляют иммунный контроль крови, протекающей по её сосудам в воротную вену. В селезёнке происходит распознавание и утилизация (фагоцитирование) деградирующих
* Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки. Государственный контракт № 12.741.11.0126
эритроцитов, одна часть освобождённого при этом гемоглобина используется печенью для синтеза жёлчных пигментов, другая — обновляется печенью и вновь участвует в эритропоэзе. Селезёнка принимает участие в обмене железа, белков, а также активно депонирует кровь [9, 10].
Цель работы: изучить динамику морфологии селезёнки кроликов в норме и при воздействии стресс-факторов.
Материалы и методы. Объектом исследования служили 18 половозрелых самцов кроликов породы советская шиншилла в возрасте 8 мес., аналогичных по массе, из которых сформировали две группы: контрольную (I) и опытную (II).
Кролики I группы служили контролем, содержались отдельно от остальных, им не применяли препараты и не подвергали воздействию стресс-факторов (n=9).
Экспериментальное моделирование стрессового состояния животных II группы проводили в течение 14 суток, используя уплотнённую посадку и тепловой климатический фактор (n=9), на базе КФХ «Раздолье» Тюльганского района Оренбургской области. Все животные находились в одинаковых условиях содержания, их кормление осуществляли по нормам ВИЖа.
Для гистологического исследования забирали пробы объёмом 0,5 см3. Полученный материал фиксировали в 10-процентном растворе нейтрального формалина, заключали в парафин и приготавливали срезы толщиной 5—6 мкм, которые окрашивали гематоксилином Майера — эозином и по Романовскому — Гимзе.
Цифровые версии микрофотографий получали с помощью микроскопа MICROS (Австрия, ув. Ч1500) и цифровой видеокамеры (винтовой окуляр-микрометр М0В-1-15Ч1500 (ГОСТ 15150-69), подвергали морфометрической обработке, используя лицензионную программу «Тест Морфо-4.0». В образце ткани измерения каждого показателя осуществляли не менее чем в 16 полях зрения каждого объекта. Для оценки различий двух групп показателей применяли критерий достоверности Стьюдента.
Результаты и обсуждение исследования. Установлено, что у кроликов селезёнка располагается в брюшной полости в области левого подреберья. Наружная, диафрагмальная поверхность селезёнки выпуклая и гладкая, внутренняя — плоская, имеет борозду (ворота селезёнки), через которую входят артерии и нервы, выходят вены и лимфатические сосуды.
Проведённые исследования показали, что у кроликов, находящихся в условиях стресса, по сравнению с контрольной группой, масса селезёнки снижалась на 1,38 раза (Р<0,01), а длина, ширина и толщина органа уменьшались соответственно в 1,19 (Р<0,01), в 1,25 (Р<0,01) и в 1,13 раза.
От капсулы селезёнки в глубь органа отходят трабекулы в продольном, косом и поперечном направлениях, её строму образует ретикулярная ткань. Морфометрия структур соединительнотканного остова селезёнки показала, что у кроликов II гр. по сравнению с I гр. толщина соединительно-тканной капсулы уменьшалась на 30,2% (Р<0,01), а трабекулы разрыхлены, их толщина достоверно увеличивалась на 60,0%.
Лимфоидные фолликулы (белая пульпа) у кроликов I гр. расположены равномерно, в количестве 11,0±0,58 в одном поле зрения, тогда как при стрессе их численность составляла 21,0±1,15 (Р<0,01). У животных в условиях стресса уменьшались диаметры крупных, средних и мелких лимфоидных фолликулов селезёнки на 10,5, 18,6 и 38,2% соответственно. Кроме того, в селезёнке животных II гр. вокруг лимфоидных фолликулов крупного диаметра располагались малые, в количестве 7,0 ±1,00. В селезёнке животных опытной группы, по сравнению с контрольной, диаметр реактивного (герминативного) центра крупных и средних лимфоидных узелков уменьшался на 23,6 (Р<0,01) и 36,4% соответственно, кроме того, толщина мантийной зоны крупных и средних лимфоидных фолликулов снижалась на 21,5 и 38,8%, равно как и толщина маргинальной зоны — на 26,9 и 46,5% соответственно. В малых фолликулах разделение на зоны не выражено. У животных I гр. диаметр эксцентрично расположенной центральной артерии в крупных и в средних лимфоидных узелках белой пульпы селезёнки увеличивался соответственно на 3,3 и 22,4%, а в мелких уменьшался на 18,8% по сравнению с контролем. Толщина стенки центральной артерии в крупных, средних и мелких лимфоидных узелках у животных в условиях стресса увеличивалась на 60,2, 54,11, 11,4% соответственно. Толщина периартериальной зоны крупных и средних лимфоидных узелков селезёнки животных I гр. по сравнению со II гр. увеличивалась в 2,46 раза и в 2,33 раза соответственно. В красной пульпе селезёнки у животных в условиях стресса обнаружены островки эритроцитов (39,42±3,89 мкм).
Сравнительный анализ массы и микромор-фологических показателей селезёнки кроликов в норме и в условиях стресса выявил динамику её реактивных свойств. Стресс, связанный с увеличением плотности размещения животных на фоне теплового климатического фактора, приводит к потере животными массы селезёнки, к снижению толщины капсулы, но к увеличению ширины трабекул в связи с утолщением трабекулярных артерий. Во время стресса в органе вокруг крупных и средних лимфоидных фолликулов образуется множество мелких узелков. В крупных и средних фолликулах отмечены периваскулярные отёки центральных артерий и, как следствие этого —
уменьшение диаметра их герминативного центра и увеличение толщины периартериальной зоны (Т-зависимой зоны).
Уменьшение диаметра герминативного центра лимфоидных фолликулов селезёнки кроликов II гр, происходит за счёт апоптоза части ретикулярных и дендритных клеток, понижения численности В-лимфобластов на фоне снижения интенсивности их миграции из костного мозга и тимуса, падения митотической активности лимфобластов и интенсивности их цитодиф-ференцировки в плазмоциты. В результате снижения численности деградирующих форм лимфоцитов прямо пропорционально падает численность макрофагов, в том числе и в маргинальной зоне. Одновременно в мантийной зоне нарушается кооперация (взаимодействие) Т- и В-лимфоцитов и накопление плазмоцитов.
Уменьшению толщины маргинальной зоны лимфоидных фолликулов селёзенки способствуют снижение численности В-лимфоцитов и малоинтенсивная миграция Т-лимфоцитов и макрофагов по гемокапиллярам из периартериальной зоны, в результате чего в ней нарушается их взаимодействие с антигенами. Вследствие нарушения цитодифференцировки В-лимфоцитов падет численность плазматических клеток, продуцирующих антитела.
Выводы. Таким образом, анализ динамики морфологических показателей селезёнки кроликов в норме и при стрессе позволил выявить её реактивные свойства, выразившиеся в:
— снижении массы органа и его морфометрических показателей;
— изменении опорно-сократительного аппарата селезёнки, а именно — снижении толщины
соединительно-тканной капсулы, но увеличении толщины трабекул за счёт утолщения трабекулярных артерий;
— уменьшении внутреннего диаметра центральных артерий и, как следствие, снижении диаметров лимфоидных фолликулов, их герминативных центров и толщины мантийных и маргинальных зон;
— массовом образовании мелких фолликулов вокруг крупных и средних лимфоидных узелков, увеличении их общей численности.
Комплекс выявленных морфофункциональных изменений селезёнки свидетельствует о снижении её кроветворных и иммунной функций, что опосредованно снижает адаптационные возможности организма к стрессу.
Литература
1. Гуськов А.Н. Влияние стресс-фактора на состояние сельско-хозяйственныхживогных. М.: Агропромиздат, 1994. С. 38—41.
2. Ковальчикова М. Адаптация и стресс при содержании и разведении сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1986. 270 с.
3. Плященко С.И., Сидоров В.Т. Стрессы у сельскохозяйственных животных. М.: Агропромиздат, 1987. 192 с.
4. Аверина Т.М., Капитонова М.Ю. Морфометрическая оценка белой пульпы селезёнки растущих крыс в различные возрастные периоды // Научные труды эколого-медицинского научно-практического опыта. Вып. 1. Саратов, 2001. С. 14—15.
5. Авылов Ч.К. Влияние стресс-факторов на резистентность организма свиней // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2006. №6. С. 46-47.
6. Игнатов П.Е. Иммунитет и инфекция. М.: Время, 2002. С. 114-215.
7. Мазгаров И.Р. Стресс: механизм развития, влияние его на физиологическое состояние и продуктивность животных, пути и способы предупреждения. Троицк, 2005. 80 с.
8. Никитченко И.Н., Плященко С.И., Зеньков А.С. Адаптация, стрессы и продуктивность сельскохозяйственных животных. Минск: Урожай, 1988. С. 93.
9. Петров А.М. Формирование колострального иммунитета у животных // Ветеринария. 2006. №8. С. 35—37.
10. СмирноваТ.С.,ЯгмуровО.Д. Строение и функция селезёнки // Морфология. 1993. №5-6. С. 142-160.'
