CC BY
22УДК 612
© 2014 О Н. Павлова, О.Н. Пинаева, В.В. Леонов, Т.В. Гарипов
ВЛИЯНИЕ ГУМАТА КАЛИЯ НА РЕПРОДУКТИВНУЮ СИСТЕМУ КРЫС
В статье рассмотрены реактивные изменения репродуктивной системы крыс на фоне нагрузки гуматом калия. В эксперименте участвовали 80 самок и 32 самца одного месяца рождения, массой 190-210 г, которые были разделены поровну на 8 групп и в соответствии с групповой принадлежностью получали гумат калия в виде раствора. Раствор готовили на дистиллированной воде и вводили животным ежедневно в соответствии с групповой принадлежностью и установленным сроком внутрижелудочно в дозе 10 мг/100 г веса тела, объемом 1 мл. Контрольным животным вводили дистиллированную воду объемом 1 мл. За животными вели ежедневное наблюдение. В зависимости от длительности поступления гумата в организм крыс оценивали состояние органов репродуктивной системы самцов и самок. В результате эксперимента было вывлено, что введение гумата калия оказывает воздействие на репродуктивную систему крыс, проявляющееся у самцов в увеличении массового коэффициент семенников; уменьшении патологических форм сперматозоидов, а у самок в уменьшении атретических тел яичников и увеличении количества зрелых фолликул. В зависимости от длительности поступления гумата калия в организм отмечено увеличение желтых тел и мест имплантации из расчета на самку.
Ключевые слова: гумат калия, крысы, репродуктивная система, семеники, яйчник, атретическое тело, фо-ликул, желтое тело.
Функциональное состояние репродуктивной системы обычно отражает физиологическую активность всего организма, а, следовательно, состояние гомеостаза. Чаще всего физиологические параметры систем зависят от совокупности множества факторов, но смещение равновесия в ту или иную сторону может быть вызвано единичным, точеным воздействием. Такое воздействие оказывают разнообразные биологические агенты, поступающие в организм с кормами. Одним из экономически выгодных агентов является гумат калия, получаемый при переработке бурого угля и довольно часто используемый в животноводстве [1, 2, 3, 4].
В связи с возможностью использования гумата калия для коррекции различных патологических состояний организма, целью данной работы явилась оценка состояния репродуктивной системы крыс для выявления возможного биологического действия гумата.
Для реализации поставленной цели предстояло решить следующие задачи: в зависимости от длительности поступления гумата калия в организм крыс оценить массовые коэффициенты семенников, придатков, предстательной железы; количество патологичных форм сперматозоидов; количество атретических тел яичников, граафовых пузырьков, фолликул с одним слоем гранулезных клеток, фолликул с двумя и более слоями гранулезных клеток.
Материалы и методы. Исследование проводили на белых беспородных половозрелых здоровых крысах, которые содержались в виварии в стандартных условиях.
В эксперименте участвовали 80 самок и 32 самца одного месяца рождения, массой 190210 г, которые были разделены поровну на 8 групп (табл. 1) и в соответствии с групповой принадлежностью получали гумат калия в виде раствора.
Раствор гумата калия готовили на дистиллированной воде и вводили животным ежедневно в соответствии с групповой принадлежностью и установленным сроком внутрижелу-дочно в дозе 10 мг/100 г веса тела, объемом 1 мл. Контрольным животным вводили дистиллированную воду объемом 1 мл. За животными вели ежедневное наблюдение.
Для получения самок с датированным сроком беременности использовали 4-4,5 месячных крыс, которым вечером подсаживали самцов (из расчета 1 самец на 2-3 самки), а утром брали влагалищные мазки. Учитывая, что у крыс покрытие происходит в 1-2 часа ночи, считали день обнаружения спермы в мазке первым днем беременности. Затем самцов отсажива-
ли от самок. Беременных крыс содержали в отдельных клетках, обеспечив их необходимой подстилкой для устройства гнезда. С первого дня беременности за животными устанавливали наблюдение. Контролировали состояние и поведение самок, регистрировали динамику изменения массы тела, продолжительность беременности, течение родов.
Таблица 1
Группы экспериментальных животных
Номер группы Материалы исследования
1 Самки и самцы получали раствор гумата калия в течение 21 дня до оплодотворения
2 Самки получали раствор гумата калия в течение 21 дня до оплодотворения, самцы получали воду дистиллированную
3 Самцы получали раствор гумата калия в течение 21 дня до спаривания с самками, самки получали воду дистиллированную
4 Самки получали раствор гумата калия 21 день до наступления беременности, а также с 1 по 13 сутки беременности
5 Самки получали раствор гумата калия 21 день до наступления беременности, а также с 14 по 20 сутки беременности
6 Самки получали раствор гумата калия с 1 по 13 сутки беременности
7 Самки получали раствор гумата калия с 14 по 20 сутки беременности
8 Контрольная группа животных
9 Самцы получали раствор гумата калия на протяжении 41 дня
Учет результатов эксперимента проводили при забое беременных самок на 20-й день беременности. После эвтаназии взрослых крыс путем дислокации шейных позвонков на вскрытии в яичках подсчитывали количество желтых тел, в матке - места имплантации, число живых и погибших зародышей, у самцов оценивали массовые коэффициенты семенников, придатков, предстательной железы; количество патологичных форм сперматозоидов.
Цифровой материал подвергали статистической обработке с определением критерия Стьюдента с использованием программы Sigma Stat 6.0 [2].
Результаты исследования. Результаты количественной оценки репродуктивной функции самок крыс на фоне нагрузки гуматом калия, представлены в таблицах 2 и 3.
По результатам, представленным в таблице 2 видно, что среднее количество крысят в помете в 3 и 7 экспериментальных группах соответствовало контролю. В остальных экспериментальных группах оно было достоверно больше, чем в контроле: в 1 группе больше на 24,3 %, во 2 - на 13,1 %, в 4 группе - 33,6 %, в 5 - на 28,0 % и в 6 группе - на 19,6 %.
Таблица 2
Репродуктивная функция самок крыс при нагрузке гуматом калия
Показатели Контрольная группа (8) Группы, получавшие раствор гумата калия
1 2 3 4 5 6 7
Количество самок 10 10 10 10 10 10 10 10
Плодов/самку 10,7±0,38 13,3±0,0, 431 12,1±0,3 51 10,1±0,3 7 14,3±0,4 91 13,7±0,5 11 12,8±0,4 21 11,1±0,3 6
Желтых тел/самку 13,8±0,44 16,1±0,5 31 15,2±0,5 5 14,5±0,5 5 16,6±0,5 81 15,9±0,4 61 14,3±0,5 1 14,5±0,4 5
Мест имплантации/самку 11,1±0,35 14,6±0,5 11 13,5±0,4 91 10,2±0,3 9 15,4±0,5 31 14,1±0,4 91 13,2±0,4 21 11,9±0,4 3
Таблица 3
Результаты количественной оценки структурных элементов яичников крыс на фоне нагрузки раствором гумата калия
Структурные элементы Контрольная группа (8) Группа 1
яичников
Атретические тела яичников 1193,5±42,93 987,2±34,551
Граафовы пузырьки 6,5±0,21 7,2±0,231
Фолликулы с одним слоем грану- 657,8±24,95 624,6±22,49
лезных клеток
Фолликулы с двумя и более сло- 82,3±2,72 117,9±3,891
ями гранулезных клеток
Примечание. В этой таблице различия достоверны при Р<0,05: 1 - по сравнению с показателями животных контрольной группы.
Количество желтых тел из расчета на одну самку во 2, 3, 6 и 7 экспериментальных группах было примерно на одном уровне и соответствовало животным контрольной группы. При этом в 1 группе среднее количество желтых тел из расчета на одну самку было больше на 16,66 %, в 4 группе - больше на 20,29 %, а в пятой группе - больше на 15,22 % относительно контроля.
Количество мест имплантации из расчета на одну самку в группах 3 и 7 также соответствовало контролю, а в группах 1, 2, 4, 5 и 6 было больше на 31,53 %, 21,62 %, 38,74 %, 27,03 % и 18,92 % соответственно.
Выявлено, что в первой экспериментальной группе количество атретических тел яичников меньше на 17,3 % по сравнению с контролем; граафовых пузырьков больше на 10,8 % по сравнению с контролем; фолликул с двумя и более слоями гранулезных клеток больше на 43,3 % по сравнению с контролем.
При этом количество фолликул с одним слоем гранулезных клеток в обеих группах было почти одинаковым.
Результаты количественной оценки репродуктивной функции самцов крыс, на фоне нагрузки гуматом калия, представлены в таблице 4.
Выявлено, что массовый коэффициент семенников в 1 экспериментальной группе схож с контрольной, а в 9 группе достоверно выше на 10,6 %.
Таблица 4
Функциональные показатели состояния семенников крыс на фоне нагрузки
раствором гумата калия
Показатели Контрольная Группы, получавшие гумат калия
группа (8) 1 9
Массовый коэффициент семенников 8,5±0,29 8,9±0,32 9,4±0,271
Массовый коэффициент придатков 3,9±0,13 3,7±0,11 4,3±0,121
Массовый коэффициент предстательной же- 3,3±0,12 3,3±0,14 3,5±0,13
лезы
Патологические формы сперматозоидов, % 38,7±1,35 34,7±1,291 32,1±1,061
Примечание. В этой таблице различия достоверны при Р<0,05: 1 - по сравнению с показателями животных контрольной группы.
Массовый коэффициент придатков в 1 экспериментальной группе также схож с контрольной, а в 9 группе достоверно выше на 10,3 %.
Массовый коэффициент предстательной железы во всех группах был примерно одинаков.
У крыс, получавших раствор гумата калия, патологические формы сперматозоидов в 1 группе встречались реже, чем в контроле на 10,3 %, а в 9 группе - реже на 17,0 %.
Таким образом, учитывая все вышесказанное, мы можем сделать следующие выводы:
- введение гумата калия оказывает несомненное воздействие на репродуктивную систему крыс, проявляющееся у самцов в увеличении массового коэффициент семенников; уменьшении патологических форм сперматозоидов, а у самок в уменьшении атретических тел яичников и увеличении количества зрелых фолликул;
- в зависимости от длительности поступления гумата калия в организм отмечено увеличение желтых тел и мест имплантации из расчета на самку.
Следовательно, нагрузка гуматом калия приводит в целом к положительным биологическим последствиям.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
4. Павлова О.Н., Пинаева О.Н. Реактивные онтогенетические изменения нервной системы крыс на фоне нагрузки гуматом калия / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева // Вестник Медицинского Института «РЕАВИЗ» (Реабилитация, Врач И Здоровье) № 2 (14) Апрель-Июнь. - Самара, 2014. - С. 54-62.
5. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под общ. ред. Р. У. Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М. : Медицина, 2005. - 832 с.
6. Сычев С.М., Орлов А.В. Изучение питательных смесей с гуматами и цеолитом / С.М. Сычев, А.В. Орлов // Агрохимический вестник. - 2009. - № 03. - С. 40-41.
7. Ушкалов В.А. Применение гумата натрия для восстановления репродуктивной функции у коров после родов. (Украина) / В.А. Ушкалов // Ветеринария. Реферативный журнал. - 2001. - № 4. - С. 1135.
Статья принята в печать 23 сентября 2014 г.
Рецензент Зайцев В.В. доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой физиологии и биохимии сельскохозяйственных животных, декан факультета биотехнологии и ветеринарной медицины ГОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия».
