Влияние гипоксии и эстрогенов на экспрессию BRCA1 и рецептора эстрогенов а Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ТЕЗИСЫ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ

лимфатических узлов выявлены структурные признаки активации пролиферации клеток плазматического ряда (увеличивалось число иммунобластов, незрелых плазматических клеток). По сравнению с 18 сутками опухолевой инвазии площадь паракортикальной (Т-зависимой) зоны уменьшается на 11%, а площадь мозговых синусов увеличивается на 23,4%, наблюдался выраженный лимфостаз. Заключение.

— Структурные преобразования в тимусе при экспериментальном канцерогенезе простаты свидетельствуют о его акцидентальной инволюции, что может являться следствием выраженной антигенной стимуляции, и, по данным литературы, результатом иммуносупрессивного действия ростового фактора эндотелия сосудов (VEGF).

— В динамике роста экспериментальной опухоли простаты структурная дезорганизация и инволюция тимуса, сопровождается параллельными зависимыми структурными преобразования в регионарных к опухоли лимфатических узлах (уменьшение размеров Т-зависимой зоны, мозговых синусов, изменении соотношения количества зрелых и незрелых лимфоидных клеток).

Влияние гипоксии и эстрогенов на экспрессию BRCA1 и рецептора эстрогенов а

Е.А. Шестакова', А.М. Щербаков', К.Е. Галеева', Н. О. Вих-лянцева', Т.А. Богуш'

Место работы:' ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Российская Федерация e-mail: [email protected]

Цель. изучение влияния гипоксии, эстрогенов и антиэстрогенов на экспрессию BRCA1, ключевого регулятора репарации ДНК, в клетках гормонозависимого рака молочной железы (РМЖ).

Материалы и методы. Клетки РМЖ линии MCF7 культивировали в среде DMEM с 10% сыворотки телят. Для моделирования условий гипоксии клетки инкубировали 24 ч в атмосфере с содержанием 1 % О2. Инкубацию с 17|3-эстра-диолом (Е2, 10 нМ) и/или тамоксифеном (Там, 5 мкМ) проводили в течение 24 ч в среде без стероидов. Иммуно-флуоресцентный анализ экспрессии BRCA1 и рецептора эстрогенов а (РЭа) проводили с использованием проточной цитофлуориметрии и первичных антител к BRCA1 (SD118) и РЭа (SP-1). Анализ экспрессии маркеров проводили методом Колмогорова-Смирнова с помощью программы FlowJo: уровень — количество (%) специфически флуоресцирующих клеток относительно показателя в контроле (инкубация с вторичными антителами);интенсивность — отношение специфической флуоресценции клеток в опыте к контролю; индекс — произведение уровня и интенсивности экспрессии маркера, деленное на 100.

Результаты. В условиях гипоксии наблюдалась тенденция к уменьшению интенсивности и индекса экспрессии BRCA1 по сравнению с контрольными клетками (уменьшение в 1,3 и 1,4 раза, соответственно). При инкубации клеток с Е2, Там или их комбинации не выявлено существенных изменений уровня, интенсивности и индекса экспрессии BRCA1 по сравнению с контролем. Напротив, показатели экспрессии РЭа в этих условиях значительно уменьшились. При инкубации с Е2 интенсивность и индекс экспрессии РЭа снизились в 3,9 и 4,3 раза, соответственно. При воздействии Там оба показателя снизились в 1,6 раза, а инкубация с Е2 и Там привела к уменьшению интенсивности и индекса экспрессии РЭа в 2,9 и 3,1 раза, соответственно.

Заключение. Полученные данные демонстрируют, что короткая инкубация клеток рака молочной железы линии MCF7 в условиях гипоксии ведет к уменьшению экспрессии BRCA1, что говорит о влиянии гипоксии на процессы репарации ДНК в опухолевых клетках молочной железы. Запланированное увеличение продолжительности гипоксии позволит установить роль BRCA1 в нестабильности генома опухолевых клеток при недостатке кислорода и в регуляции чувствительности опухолей с гипоксическими регионами к химиотерапии. Продемонстрировано воздействие эстрогенов и антиэстрогена тамоксифена на экспрессию РЭа, при этом экспрессия BRCA1 не регулируется гормонами. Гранты РФФИ № 15-04-06991 -а и № 15-04-02172.

Функционирование надпочечниковой, тиреоидной и гонадной систем регуляции на этапах экспериментального метастазирования в печень

И.В. Каплиева', Е.М. Франциянц', Л.К. Трепитаки', Н.Д. Черярина'

Место работы: 'Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения Российской Федерации. e-mail: [email protected]

Цель. По изменению уровней гормонов в крови и динамике весовых показателей органов изучить морфо-функциональ-ную активность трех основных систем регуляции организма: гипоталамо-гипофизарно -надпочечниковой (ГГНС), — тиреоидной (ГГТС) и -гонадной (ГГГС) на этапах метастазирования в печень.

Материалы и методы. Работа выполнена на 43 белых крысах-самцах. Через 1, 2, 5, 7 недель от момента введения клеток саркомы 45 (С45) в дислоцированную под кожу селезенку определяли вес органов; в крови методом РИА исследовали уровни ФСГ, ЛГ, ТТГ, АКТГ, кортизола, альдостерона, тироксина и трийодтиронина (Т3); методом ИФА — эстрона, эстра-диола, свободного тестостерона.

Результаты. На этапе, предшествующем появлению опухоли в селезенке, изменялось функционирование ГГНС: низкие весовые показатели надпочечников сочетались с гипокортизолемией (снижение в 2,3 раза). ГГТС работала в гиперактивном режиме (высокий сывороточный уровень тиреоидных гормонов). Уровень эстрона в крови увеличивался постепенно и ко 2 неделе становился в 6,6 раз больше контроля. Свободный тестостерон, напротив, резко возрастал на 1 неделе (в 122 раза) и несколько снижался на 2 неделе (в 10,4 раза).

При этом весовой коэффициент простаты уменьшался в 1,6 раза. В период, предшествующий появлению метастазов в печени при наличии сформированной опухоли в селезенке, на фоне гиперальдостеронемии (в 3,2 раза) и увеличения весовых показателей надпочечников (в 1,5 раза), уровень кор-тизола в крови возрастал до контрольных значений. Нарастание сывороточного ТТГ (в 5,0 раз) сочеталось с уменьшением веса щитовидной железы (в 1,4 раза) и ослаблением ее гиперфункции. В крови уменьшались уровни эстрона — в 4,8 раза, эстрадиола — в 1,3 раза.

Повторно возрастала концентрация свободного тестостерона (в 3,9 раза) и редуцировался ФСГ (в 3,4 раза). В период сформированных метастазов в печени уровни кортизола и альдостерона в крови уменьшались (в 1,8 раза) на фоне снижения веса надпочечников. Пятикратное увеличение

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org