CC BY
11Abstracts Nationwide scientific forum of students with international participation «STUDENT SCIENCE - 2020»
открыть в компьютере базу с ДНК нужного организма, имеющую мутированную последовательность, найти фрагмент, который должен быть заменён. Для этого необходимо синтезировать молекулы гРНК с последовательностью мутированного гена. Упомянутый комплекс находит необходимую последовательность нуклеотидов и разрезает ДНК. В этот момент возможно редактирование существующего генома. Это делает CRISPR/Cas9 эффективным инструментом для редактирования ДНК. В будущем ученые надеются использовать CRISPR/Cas9 систему для лечения наследственных заболеваний, причиной которых является мутации генов [3]. Геном-редактор CRISPR использовали для лечения мышечной дистрофии мышей. Cas9 и гРНК были упакованы в адено-ассоциированный вирус, обладающий улучшенными мио- и кардио-тропными свойствами. Были специально разработаны гРНК для борьбы с дефектным 23-м эк-зоном гена дистрофина мыши, из-за работы которого генерировался стоп-кодон. Мутация, произошедшая в данном месте, приводила к появлению дефектного белка дистрофина. Затем векторы были введены либо системно, либо локально в мышцы у новорожденных или взрослых мышей. Однако, использование CRISPR казалось невозможным у взрослых мышей, так как зрелые мышечные клетки не делятся, следовательно, не обязательно располагают механизмом восстановления ДНК для добавления или корректировки этой нуклеиновой кислоты [1].
Выводы: благодаря CRISPR/Cas9 исследователи удалили дефектный экзон у мышей c МДД, в результате чего животные смогли вырабатывать дистрофин. Это первый успех метода CRISPR в лечении взрослых животных с генетическим заболеванием. Данные результаты являются многообещающими для поиска надлежащих методов лечения мышечной дистрофии Дюшенна в будущем. Литература
1. CRISPR/Cas9 Flexes Its Muscles: In Vivo Somatic Gene Editing for Muscular Dystrophy — [Электронный ресурс]. — Режим доступа: https: //www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/131 02818.2017.1406823.
2. Cas9 — [Электронный ресурс]. — Режим доступа: https: //ru.wikipedia.org/wiki/Cas9.
3. CRISPR Guide — [Электронный ресурс]. — Режим доступа: https: //www.addgene.org/crispr/ guide/.
влияние гиперкалорийной диеты на некоторые показатели белкового обмена в ткани печени крыс
Исупова Е. А., Мулюкова Л. А., Хакимов Р. А.
Научный руководитель: д.м.н. профессор Бутолин Евгений Германович Кафедра клинической биохимии и лабораторной диагностики Ижевская государственная медицинская академия
Контактная информация: Мулюкова Лейсан Айдаровна — студентка 3 курса Лечебного факультета. E-mail: mulyukova-leisan@mail.ru
Ключевые слова: гиперкалорийная диета, белковый обмен.
Актуальность: существенный рост метаболического синдрома в последние годы является значимой проблемой не только медицины, но и общества. Важно диагностировать метаболический синдром на ранних этапах его развития, поскольку имеется угроза развития в скором времени сахарного диабета 2 типа и атеросклеротических процессов [2]. Основным фактором в формировании метаболического синдрома является инсулинорезистентность, приводящая к нарушению липидного и углеводного обмена. В то же время инсулин, являясь системным гормоном принимает участие и в регуляции обмена белков [1].
Цель исследования: изучение некоторых показателей белкового обмена в ткани печени крыс при гиперкалорийной диете.
Материалы и методы: эксперименты проводили на 28 белых беспородных крысах-самцах в возрасте 6 месяцев, массой 190-210 г, которым в течение 60 дней давали диету с высоким содержанием липидов (44% свиного сала от калорийности суточного рациона). В крови опре-
FORCIPE
VOL. 3 SUPPLEMENT 2020
ISSN 2658-4174
Материалы всероссийского научного форума студентов с международным участием «СТУДЕНЧЕСКАЯ НАУКА - 2020» 121
деляли уровень инсулина; в гомогенатах ткани печени содержание общего белка, альбуминов и мочевины на 61, 67 и 74 дни после начала эксперимента.
Результаты: показано, что диета с высоким содержанием жиров приводит к развитию незначительной гиперинсулинемии во все дни наблюдения соответственно на 4%, 13% и 36% относительно контроля. Содержание исследуемых белков в гомогенатах ткани печени изменялось разнонаправленно: концентрация общего белка достоверно возрастала на 61, 67 и 74 дни соответственно на 74,1%, 69,4% и 61,3% по сравнению с контролем, а уровень альбуминов, равно как и мочевины, снижались во все дни эксперимента соответственно на 23,4%, 35,6% и 18,7% и на 21,5%, 46,3% и 44,9% по сравнению с контрольной группой животных. Полученные результаты обсуждаются с позиций влияния инсулина и инсулинорезистентности на показатели белкового обмена.
Выводы: высококалорийная диета у крыс способствует развитию инсулинорезистентно-сти, накоплению в гомогенатах ткани печени содержания общего белка, а также снижению уровня альбуминов и мочевины. Литература
1. Лещенко Д.В., Костюк Н.В., Белякова М.Б., Егорова Е.Н. и др. Диетически индуцированные животные модели метаболического синдрома (обзор литературы) // Верхневолжский медицинский журнал. 2015. — Т. 14, вып. 2. С. 34-39.
2. Метаболический синдром / Под ред. чл. — корр. РАМН Ройтберга Г.Е. М.: МЕД-пресс-ин-форм. 2007. — 224 с.
проточная цитометрия как современный метод биохимического анализа
Ищенко И. О., Оппедизано М. Д. Л.
Научный руководитель: д.м.н. профессор Данилова Любовь Андреевна Кафедра биологической химии
Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет
Контактная информация: Ищенко Илья Олегович — студент 2 курса лечебного факультета. E-mail: ilyshaishchenko.2000@gmail.com
Ключевые слова: проточная цитометрия; биохимический анализ; проточный цитофлюориметр; внутриклеточные ферменты.
Актуальность: Применение метода проточной цитометрии в биологической химии прев-несёт высокую точность измерения физиологических внутриклеточных параметров и заметно изменит скорость полученных данных для каждой конкретной клетки [1]. Данный метод анализа может быть использован не только в биологической химии, но и в других смежных областях [2].
Цель исследования: изучить принцип работы современного проточного цитометра и показать универсальность его применения.
Материалы и методы: проведён анализ научно-исследовательской литературы отечественных и зарубежных авторов по данной проблематике.
Результаты: проточная цитометрия — это современная технология быстрого измерения физических и химических параметров клеток, их органелл и происходящих в них процессов [1]. Она основана на регистрации флюоресценции и светорассеяния каждой отдельной клетки и её частиц, проходящих через лазерный луч в струе жидкости [2]. Разработка и внедрение в лабораторную практику данного метода позволяют проводить исследования метаболизма конкретной клетки в отдельности от всей клеточной субпопуляции. Главными преимуществами этого метода является высокая точность, простота использования и минимальная затрата времени. Современные проточные цитометры позволяют производить анализ с большой скоростью, регистрируя при этом до 106-108 клеток в образце [1].
Методом проточной цитометрии проводится измерение потенциала клеточной мембраны, концентрации свободных ионов и оценка активности внутриклеточных ферментов [3]. При необходи-
forcipe
том 3 спецвыпуск 2020
elSSN 2658-4182
