Влияние гепарина, протамин сульфата, этанола и их сочетанного применения на показатели сна экспериментальных животных Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Исследования по диссеpтaциoнным темам

МЕДИЦИНСКИЙ

АЛЬМАНАХ

УДК Б12.821.7:Б15.2:Б1Б-092.9

ВЛИЯНИЕ ГЕПАРИНА, ПРОТАМИН СУЛЬФАТА, ЭТАНОЛА И ИХ СОЧЕТАННОГО ПРИМЕНЕНИЯ НА ПОКАЗАТЕЛИ СНА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

К.А Пурсанов1, А.Е. Хомутов2, А.Г. Бутылин2, В.С. Слободянюк2

'ГОУ ВПО «Нижегopoдскaя гoсyдapственнaя медицинская академия МинздpaвсoLlpaзвития»,

2ГОУ ВПО «Нижегopoдский гoсyдapственный yнивеpситет им. Н.И. Лобачевского»

Пурсанов Кузьма Анастасович, к. м. н., доцент -раб. тел.: (831) 465-59-60, e-mail: kpursanov@yandex.ru

В экспеpиментaх на нелинейных фысах показано, что пpедвapительнoе введение гепapинa с этанолом в виде смеси, введение этанола на фоне действия гепapинa и введение гепapинa на фоне действия этанола увеличивает вpемя засыпания и уменьшает вpемя этанолового сна. Г^отамин сульфат, блоюфуя эндогенный гепapин, снижает вpемя засыпания и увеличивает пpoдoл>l<ительнoсть этанолового сна.

Ключевые слова: гепapин, пpoтaмин сульфат, этанол, вpемя засыпания,

пpoдoлжительнoсть этанолового сна.

Experiments with non-pedigree rats showed that preliminary introduction of heparin with ethanol in the form of mixture, introduction of ethanol on the background of heparin action and introduction of heparin on the background of ethanol action, increases the time of dropping-off to sleep and reduces the time of ethanol sleep. Protamine sulphate, blocking endogenic heparin, reduces the time of dropping-off to sleep and increases the duration of ethanol sleep.

Key words: heparin, protamine sulphate, ethanol, time of dropping-off to sleep, duration of ethanol sleep.

История гепарина началась в первой четверти ХХ столетия, когда в 1916 году Мак-Леан в лаборатории Хоуэлла впервые обнаружил гепарин в печени собаки. Через 20 лет он был применён в чистом виде в клинической медицине в качестве антикоагулянта [1].

Долгое время антикоагулянтное действие гепарина считалось единственным свойством мукополисахарида, однако в настоящее время превалирующее большинство исследователей говорят о полифункциональном действии гепарина, а антикоагулянтные свойства гепарина являются одним из вариантов, связанных с комплексообразованием гепарина с широким спектром веществ, относящихся к различным типам химических соединений [2-6].

Цель работы - изучение влияния экзогенного и эндогенного гепарина на процесс засыпания и продолжительность этанолового сна лабораторных крыс.

Материалы и методы. Работа была выполнена на 90 нелинейных крысах-самцах массой 200±10 г, содержащихся на общих условиях вивария. Этанол (30%) в дозе 5 г/кг,

гепарин в дозе 500, 1000, 2500 и 5000 МЕ/кг, а также прота-мин сульфат из расчёта 10 мг/кг вводили внутрибрюшинно в объёме 2 мл. Время засыпания регистрировалось от момента введения исследуемых веществ до того момента, когда у животных утрачивался рефлекс переворачивания. Время этанолового сна оценивалось от момента засыпания до восстановления рефлекса переворачивания.

Полученные данные были подвергнуты статистической обработке методом парных сравнений по критерию Стьюдента.

Результаты и обсуждение. Гепарин в широком диапазоне доз не вызывает сна, в отличие этанола, введение которого в дозе 5 г/кг сопровождается быстрым засыпанием (4,2±0,3 мин.) и продолжительным (126,2±6,7) этаноловым сном (таблица).

При предварительном введении гепарина в дозе 500, 1000 и 2500 МЕ/кг процесс засыпания удлиняется, а продолжительность этанолового сна уменьшается, причём, чем выше доза гепарина, тем длиннее процесс засыпания и короче сон.

При предварительном введении гепарина в дозе 5000 МЕ/кг

время засыпания несколько снижается, а время этанолового сна увеличивается (таблица).

Максимальное время засыпания (18,4±0,9 мин.) и минимальное время этанолового сна (46,8±2,3 мин) регистрируется при введении смеси гепарин-этанол, приготовленной in vitro при температуре +37°С, в которой концентрация реагентов соответствует следующим значениям: гепарин - 2500 МЕ/мл, этанол - 5 г/мл (таблица).

В следующем блоке экспериментов были изменены условия опыта и гепарин вводился на фоне действия этанола (10 мин.). В этом случае введение гепарина в дозе 500 и 2500 МЕ/кг сопровождалось достоверным снижением времени засыпания и достоверным увеличением продолжительности сна относительно контрольных величин. Однако по сравнению с предварительным введением гепарина, или введением смеси гепарин-этанол, введение гепарина на фоне действия этанола являлось менее эффективным с точки зрения нейтрализации действия этанола (таблица).

таблица.

Влияние гепарина, этанола и их сочетанного применения на время засыпания и продолжительность сна экспериментальных животных

* - Различия между контрольными и экспериментальными группами статистически значимы (р<0,05).

Исследования по диссертационным темам

Известно, что протамин сульфат является классическим антагонистом гепарина, с которым образует комплексное соединение, блокируя, таким образом, полифункциональ-ные свойства гепарина. В наших экспериментах протамин сульфат значительно увеличивает продолжительность этанолового сна и уменьшает время засыпания (таблица).

Заключение. Таким образом, проведённые исследования позволяют заключить, что экзогенный гепарин в значительной степени снижает продолжительность этанолового сна и вызывает снижение времени засыпания. Подавление активности эндогенного гепарина протамин сульфатом сопровождается увеличением продолжительности этанолового сна, а значит присутствие в крови экспериментальных животных эндогенного гепарина (7-10 МЕ/мл) также в определённой степени блокирует действие этанола в контрольной группе лабораторных крыс.

Этот феномен, по всей видимости, связан с взаимодействием гепарина и этанола с образованием комплексных соединений, в которых этанол в значительной степени теряет свои свойства. Это подтверждается тем, что гепарин как в составе смеси с этанолом, так и при различных способах индивидуального введения снижает продолжительность этанолового сна.

ЛИТЕРАТУРА

1. Маркосян А.А. Гепарин и его место в сохранении и нарушении процессов гемокоагуляции. // Гепарин. Физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение. 1969. С. 5-11.

2. Ляпина Л.А. Физиологические функции гепарина. //Успехи современной биологии. 1987. № 103 (1). С. 66-80.

3. Хомутов А.Е., Звонкова М.Б., Пахомова М.Е. Полифункциональные свойства гепарина. //Вестник ННГУ. Серия биологическая. Н.Новгород. 2001. С.128-134.

4. Хомутов А.Е., Пурсанов К.А., Калашникова Л.М. Пчелы, пчелиный яд, апитоксинотерапия. Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2006.

5. Liang A., Liu X., Du Y., Wang K., Lin B. Further characterization of the binding of heparin to granulocyte colony-stimulating factor: Importance of sulfate groups. Electrophoresis. 2008. V. 149 (2). Р. 109-112.

6. Meneghelli S., Luoni L., De Michelis M.I. Heparin Stimulates a Plasma Membrane Ca2+-ATPase of Arabidopsis thaliana. J. Biochem. 2008. V. 143 (2). P. 253-259.

Условия эксперимента Время засыпания и сна (мин.)

засыпание этаноловый сон

Этанол (5 г/кг) (контроль) 4,2±0,3 126,2±6,7

Гепарин (500 МЕ/кг) ^ Этанол (5 г/кг)) 7,1±0,6* 92,0±4,7*

Гепарин (1000 МЕ/кг)^ Этанол (5 г/кг) 8,9±0,7* 76,4±5,1*

Гепарин (2500 МЕ/кг)^ Этанол (5 г/кг) 12,5±1,8* 52,9±2,2*

Гепарин (5000 МЕ/кг) ^ Этанол (5 г/кг) 10,8±1,1* 55,9±4,6*

Гепарин (2500 МЕ/кг) + Этанол (5 г/кг) 18,4±0,9* 46,8±2,3*

Этанол (5 г/кг) ^ Гепарин (500 МЕ/кг) 5,5±0,9* 80,0±7,6*

Этанол (5 г/кг) ^Гепарин (2500 МЕ/кг) 7,2±1,1* 69,2±3,8*

Протамин сульфат (10 мг/кг)^ Этанол (5 г/кг) 2,4±0,1* 162±4,8*