CC BY
10
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
79
онкологических заболеваний играют роль и генетические, и эпигенетические факторы. Программа времени репликации является устойчивой эпигенетической характеристикой всех эукариотических хромосом. Несмотря на то что природа феномена нарушения времени репликации до конца не известна, большинство авторов исследований связывают это явление с последующим мутагенезом и геномной нестабильностью, сопровождающей раковый фенотип.
Цель исследования. Изучить нарушения синхронности репликации гена AURKA в лимфоцитах периферической крови больных с опухолевой и неопухолевой патологией желудочно-кишечного тракта (ЖКТ).
Материалы и методы. Исследовались лимфоциты периферической крови в группах: 22 здоровых донора, 12 человек с заболеваниями ЖКТ неонкологического характера, 36 пациентов с солитарным раком желудка (РЖ) и 28 пациентов с первично-множественными злокачественными новообразованиями (ПМЗО). Исследование проводилось методом интерфазной флуоресцентной in situ гибридизации (I-FISH) с использованием прямомеченых ДНК-проб (Kreatech Diagnostics, The Netherlands).
Результаты. Среднегрупповая частота лимфоцитов с асинхронной репликацией (ЛАР) гена AURKA составила: 18,8 ± 0,7 % — в контрольной группе, 24,3 ± 0,5 % — в группе с неопухолевой патологией ЖКТ, 32,4 ± 0,5 % — в группе больных РЖ и 39,4 ± 0,6 % — в группе больных ПМЗО. Анализ показал, что все наблюдаемые различия в исследованных группах являются статистически значимыми (p <0,05).
Заключение. Увеличение частоты ЛАР гена AURKA наблюдалось по мере увеличения геномной нестабильности в исследованных группах. Таким образом, онкологические больные, имеющие высокий уровень частоты ЛАР, могут быть отнесены в группу больных с потенциальным появлением второй опухоли. Кроме того, наличие высокой частоты ЛАР у здоровых людей позволяет предполагать наличие онкологического процесса, возможно на самых ранних стадиях.
Д.А. Церковский, Е.Л. Протопович, П.Д. Демешко РАДИОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРА ФОТОЛОН НА МОДЕЛИ ГЛИОМЫ С6 В ЭКСПЕРИМЕНТЕ IN VITRO
РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, а/г. Лесной, Минский район, Минская область, Беларусь
Цель исследования. Изучение радиосенсибилизирую-щей активности фотосенсибилизатора хлоринового ряда фотолона в эксперименте на культуре клеток глиомы С6.
Материалы и методы. Исследования в эксперименте in vitro были выполнены на культуре клеток глиомы С6 крыс (РНПЦ эпидемиологии и микробиологии, Российская коллекция клеточных культур, Санкт-Петербург). Культуру клеток культивировали в среде DMEM с добавлением 10 % сыворотки эмбрионов коров и 50 мкг/мл гентами-цина. Эксперименты проводили на суспензии клеток в экспоненциальной стадии роста. Фотосенсибилизатор фотолон (РУП «Белмедпрепараты», Минск, Беларусь) добавляли в суспензию в дозе 1 мкг/мл. Облучение осуществляли через 2 ч после инкубации фотолона в питательной
среде с применением у-терапевтического аппарата Theratron в разовых очаговых дозах (РОД) 2, 4 и 6 Гр в непрерывном режиме. Группы исследования были следующими: 1) лучевая терапия РОД 2 Гр; 2) лучевая терапия РОД 4 Гр; 3) лучевая терапия РОД 6 Гр; 4) фотолон + лучевая терапия РОД 2 Гр; 5) фотолон + лучевая терапия РОД 4 Гр; 6) фотолон + лучевая терапия РОД 6 Гр. Эффективность проведенных воздействий оценивали через 24 ч на основании подсчета числа жизнеспособных опухолевых клеток в камере Горяева.
Результаты. В контрольной группе (без воздействий) число жизнеспособных клеток глиомы С6 составило 500 000. В группах 1 и 4 - 286 000 ± 16 250 и 178 750 ± 8750 (p = 0,000 033) соответственно. В группах 2 и 5 — 260 000 ± 32 500 и 167 500 ± 30 000 (p = 0,049) соответственно. В группах 3 и 6 — 231 250 ± 38 750 и 147 500 ± 20 000 (p = 0,074) соответственно.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о высокой чувствительности клеток глиомы С6 к ионизирующему излучению. Вместе с тем предварительное добавление в питательную среду фотолона с последующим облучением в РОД 2, 4 и 6 Гр позволяет существенно сократить число жизнеспособных опухолевых клеток по сравнению с воздействием одного ионизирующего излучения. Продемонстрированные результаты являются предварительными, что делает актуальным и необходимым проведение дальнейших исследований в данной области.
Д.А. Церковский, Е.Л. Протопович, П.Д. Демешко ВЛИЯНИЕ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ С ФОТОЛОНОМ НА ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ НА КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК ГЛИОМЫ С6
РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, а/г. Лесной, Минский район, Минская область, Беларусь
Цель исследования. Изучение противоопухолевой эффективности комбинации ионизирующего излучения и фотодинамической терапии (ФДТ) с фотолоном в эксперименте на культуре клеток глиомы С6.
Материалы и методы. Исследования в эксперименте in vitro были выполнены на культуре клеток глиомы С6 крыс (РНПЦ эпидемиологии и микробиологии, Российская коллекция клеточных культур, Санкт-Петербург). Культуру клеток культивировали в среде DMEM с добавлением 10 % сыворотки эмбрионов коров и 50 мкг/мл гентамицина. Эксперименты проводили на суспензии клеток в экспоненциальной стадии роста. Фотосенсибилизатор фотолон (РУП «Белмедпрепараты», Минск, Беларусь) добавляли в суспензию в дозе 1 мкг/мл. Облучение осуществляли через 2 ч после инкубации фотолона в питательной среде с применением у-терапевтического аппарата Theratron в разовых очаговых дозах (РОД) 2, 4 и 6 Гр в непрерывном режиме. Фотооблучение производили непосредственно после воздействия ионизирующим излучением с помощью полупроводникового лазера PDT diode laser (ЛЭМТ Беларусь, X = 660 ± 5 нм) в экспозиционной дозе 5 Дж/см2. Группы исследования были следующими: 1) фотолон + лучевая терапия РОД 2 Гр; 2) фотолон + лучевая терапия РОД 4 Гр; 3) фотолон + лучевая
80
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
терапия РОД 6 Гр; 4) фотолон + лучевая терапия РОД 2 Гр + ФДТ 5) фотолон + лучевая терапия РОД 4 Гр + ФДТ 6) фотолон + лучевая терапия РОД 6 Гр + ФДТ Эффективность проведенных воздействий оценивали через 24 ч на основании подсчета числа жизнеспособных опухолевых клеток в камере Горяева.
результаты. В контрольной группе (без воздействий) число жизнеспособных клеток глиомы С6 составило 500 000. В группах 1 и 4 - 178 750 ± 8750 и 83 750 ± 18 750 (p = 0,00 035) соответственно. В группах 2 и 5 — 167 500 ± 30 000 и 105 000 ± 22 500 (p = 0,116) соответственно. В группах 3 и 6 — 147 500 ± 20 000 и 87 500 ± 7500 (p = 0,013) соответственно.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о синергетическом влиянии ионизирующего излучения и фотооблучения на сенсибилизированные фотолоном опухолевые клетки глиомы С6 крыс. По нашим данным, наиболее оптимальным является комбинированное применение ионизирующего излучения в РОД 2 Гр и последующая ФДТ в экспозиционной дозе 5 Дж/см2. Продемонстрированные результаты являются предварительными, что делает актуальным и необходимым проведение дальнейших исследований в данной области.
Д.А. Церковский, Т.П. Артемьева
фотодинамическая терапия в онкодерматологии (на примере базально-клеточной карциномы кожи)
РНПЦОМР им. Н.Н. Александрова, а/г. Лесной, Минский район, Минская область, Беларусь
Цель исследования. Оценка переносимости и противоопухолевой эффективности метода фотодинамической терапии (ФДТ) в лечении пациентов с базально-клеточным раком кожи (БКРК).
материалы и методы. Данное исследование выполнено у 95 пациентов с гистологически верифицированным БКРК (T1N0M0, I стадия), средний возраст 58,9 ± 12,8 года. Первичные опухоли были в 90,5 % наблюдений (n = 86), рецидивные — в 9,5 % (n = 9). Фотосенсибилизатор фотолон (РУП «Белмедпрепараты», Минск, Беларусь) вводился внутривенно капельно в дозах 2,0—2,5 мг/кг. Фотооблучение производили через 2,5—3,0 ч после введения фотолона с использованием полупроводникового лазерного аппарата «УПЛ ФДТ лазер» (ЛЭМТ, Беларусь, X = 660 ± 5 нм) в экспозиционных дозах от 50 до 300 Дж/см2 (<100 — n = 41 (43,1 %), 100—150 — n = 38 (40 %) и >150 — n = 16 (16,9 %). Оценку переносимости производили на основании анализа частоты и выраженности нежелательных реакций (CTCAE v. 4.0). Оценку противоопухолевой эффективности осуществляли по критериям ВОЗ, основываясь на данных клинического и цитологического исследования через 1—3 мес после проведенного лечения.
результаты. Нежелательных реакций, связанных с введением фотолона и фотооблучением, зарегистрировано не было. Частота полных и частичных регрессий у пациентов с первичными опухолями составила 91,9 % (n = 79) и 5,8 % (n = 5) соответственно. Объективный терапевтический эффект достигнут у 97,7 % пациентов. Частота полных и частичных регрессий у пациентов с рецидивны-
ми опухолями составила 88,9 % (и = 8) и 11,1 % (п = 1). Объективный терапевтический эффект достигнут у 100 % пациентов. Частота локальных рецидивов составила: через 1 год — 4,2 %; через 2 — 4,2 %; через 3 — 5,3 %; через 4 — 5,3 % и через 5 лет — 15,8 %. Локальные рецидивы выявлены при использовании экспозиционной дозы менее 100 Дж/см2 - в 50 % (и = 4); 100-150 Дж/см2 - в 37,5 % (и = 3) и >150 Дж/см2 — в 12,5 % случаев (и = 1). Во всех наблюдениях отмечен хороший косметический результат (в зоне фотооблучения имело место формирование соединительно-тканного рубца без признаков опухолевого роста).
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что ФДТ является высокоэффективным методом лечения БКРК I стадии, с минимальным риском развития нежелательных реакций и осложнений и может применяться в тех случаях, когда традиционные методы противопоказаны.
Д.А. Церковский, Т.П. Артемьева
фотодинамическая терапия при лечении пациенток с дистрофическими заболеваниями вульвы
РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, а/г. Лесной, Минский район, Минская область, Беларусь
Цель исследования. Оценка переносимости и эффективности лечения пациенток с лейкоплакией вульвы методом фотодинамической терапии (ФДТ) с фотолоном.
материалы и методы. В исследование включено 55 пациенток с гистологически верифицированной лейкоплакией вульвы, средний возраст 54,8 ± 13,5 года. Фотосенсибилизатор фотолон (РУП «Белмедпрепараты», Минск, Беларусь) вводили в дозах 1,5—2,5 мг/кг. Фотооблучение (ФО) патологических очагов производили через 2,5—3,0 ч после введения фотолона с применением полупроводникового лазера «УПЛ ФДТ лазер» (ЛЭМТ, Беларусь, X = 660 ± 5 нм). Экспозиционная доза света составила 50 Дж/см2, плотность мощности — 100—170 мВт/см2 и длительность облучения одного очага — 5—10 мин. Число сеансов лечения варьировало от 2 до 9 в зависимости от распространенности патологического процесса. Лечение проводили под медикаментозным обезболиванием. Оценку эффективности осуществляли на основании данных клинического и цитологического исследования через 1—3 мес после проведенного лечения.
результаты. У всех пациенток в зоне ФО в течение 4—7 сут было отмечено формирование типичных признаков фотохимического некроза. При локализованном процессе у всех пациенток отмечена полная регрессия патологически измененных очагов; при распространенном — лечение продолжается. При частичной излеченности период купирования объективных жалоб (зуд, жжение и др.) составил 6 мес. Срок наблюдения варьирует от 1 до 42 мес. Полная эпителизация раневого дефекта происходила в течение 4—6 нед после проведенного лечения.
Заключение. Полученные результаты позволяют рекомендовать ФДТ пациенткам с лейкоплакией вульвы как эффективную и хорошо переносимую альтернативу традиционным методам лечения.
