CC BY
49
«Дни иммунологии в СПб 2017» Медицинская Иммунология
Immunology Days in St. Petersburg 2017 Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
ЭКОЛОГИЯ, СТРЕСС И ИММУНИТЕТ
ИММУННЫЙ СТАТУС У ОБЛУЧЕННЫХ ЛИЦ, ИМЕЮЩИХ ПОВЫШЕННУЮ ЧАСТОТУ МУТАЦИЙ В ГЕНАХ Т-КЛЕТОЧНОГО РЕЦЕПТОРА
Аклеев А.А.1, 2, Долгушин И.И.1
1 Южно-Уральский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения РФ, Челябинск, Россия
2 Уральский научно-практический центр радиационной медицины ФМБА России, Челябинск, Россия
Иммунная система является одной из наиболее радиочувствительных в организме человека. В ряде исследований показано, что у лиц, подвергшихся радиационному воздействию, даже в отдалённые сроки после облучения регистрируется повышенный уровень мутаций в генах Т-клеточного рецептора (TCR). Аналогичные результаты отмечались в отдалённые сроки и у жителей прибрежных сёл реки Теча. Известно, что комплекс TCR/CD3 вовлечён на начальном этапе в ряд иммунных ответов, зависимых от Т-клеток, поэтому потеря или альтерация экспрессии TCR-генов в выживших клетках может способствовать радиационно-индуцированному нарушению Т-клеточного ответа и иммунного статуса облучённого организма в целом. Целью настоящей работы было исследование особенностей иммунитета в отдалённые сроки у лиц, подвергшихся хроническому радиационному воздействию и имеющих повышенный уровень TCR-мутаций. В исследование было включено 66 облучённых жителей прибрежных сёл реки Теча. Из них 29 лиц (18 женщин — 62,1% и 11 мужчин — 37,9%, средний возраст — 71,2±1,1 года), имеющих повышенную частоту TCR-мутаций в лимфоцитах периферической крови, составили основную группу. В группу сравнения было включено 37 жителей прибрежных сёл реки Теча (27 женщин — 73% и 10 мужчин — 27%, средний возраст — 69,7±1,1 лет), имеющих уровень TCR-мутаций, не превышавший М+25, оцененный для необлучённых жителей Уральского региона. Оценка уровня TCR-мутантных лимфоцитов проводилась методом проточной цитометрии. Мутантными считались клетки с фенотипом CD3-CD4+. Оценка иммунного статуса включала в себя определение в крови численности основных популяций и субпопуляций лейкоцитов, исследование фагоцитарной, лизосомальной активности и интенсивности внутриклеточного кислородзависимого метаболизма нейтрофилов и моноцитов крови, а также оценку уровней сывороточных цитокинов (IL-1ß, IL-1a, IL-1ra, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, GM-CSF, G-CSF, TNFa, IFNa, IFNy). У лиц с повышенным числом мутантных по генам TCR Т-лимфоцитов отмечено повышение содержания в периферической крови CD3+CD16+56+ клеток, активация ли-зосомальной активности нейтрофилов, а также повышение количества IL-1a при снижении уровней IL-2 и GM-CSF
в сыворотке крови. Поскольку эти изменения не зависели от дозы облучения ККМ и тимуса, то их, скорее всего, необходимо рассматривать как иммунный ответ на повышение частоты мутаций (в т. ч. ТС^-мутаций) в облучённых клетках.
ВЛИЯНИЕ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКИ РАЗЛИЧНОГО УРОВНЯ НА ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ У СПОРТСМЕНОВ
Зайцева И.П., Романов В.А., Зайцев О.Н.
ФГБОУ ВО «Ярославский государственный университет» им. П.Г. Демидова, Ярославль, Россия ФГБОУ ВО «Ярославский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, Ярославль, Россия
ФГБОУ ВО «Ярославский государственный технический университет», Ярославль, Россия
Введение. Роль иммунной системы в обеспечении го-меостаза организма при воздействии различных факторов внешней среды не вызывает сомнений. Представляет интерес выявление взаимосвязей функционирования различных звеньев иммунитета с уровнем тренированности спортсменов, в частности, при действии физических нагрузок различной интенсивности.
Цель и задачи. Изучение влияния различного уровня тренированности на показатели клеточного и гуморального звеньев иммунитета у спортсменов-самбистов.
Материалы и методы. Обследовано 23 мастера спорта по самбо, 22 — самбистов новичков; контрольную группу составляли 32 нетренированных лица мужского пола. Исследовали фенотип лимфоцитов крови методом им-мунофлюоресценции, уровни сывороточных иммуноглобулинов в реакции Манчини, фагоцитарные активность и число (ФА,ФЧ), продукцию нейтрофилами (Нф) активных форм кислорода в тестах спонтанной и индуцированной хемилюминесценции (сХЛ, иХЛ).
Результаты. Установлено (табл.), что только у самбистов мастеров спорта содержание Т-и В-лимфоцитов (соответственно CD3 и CD19) было достоверно увеличено по сравнению со значениями контрольной группы; существенных различий в количестве Т-хелперов (CD4) и Т-цитотоксических клеток (CD8) во всех обследованных группах не было обнаружено.
Концентрация иммуноглобулина G в сыворотке крови мастеров спорта достоверно превышала соответствующие значения новичков и лиц контрольной группы. Наибольшая концентрация иммуноглобулина М отмечалась у студентов, занимающихся самбо, как у мастеров спорта, так и у новичков, достоверно превышая соответствующие показатели контрольной группы. Существенных измене-
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Экология, стресс и иммунитет Ecology, stress and immunity
ТАБЛИЦА. ИММУННЫМ СТАТУС СПОРТСМЕНОВ-САМБИСТОВ С РАЗЛИЧНЫМ УРОВНЕМ ФИЗИЧЕСКОМ НАГРУЗКИ К ТЕЗИСАМ ЗАЙЦЕВОЙ И.П. И ДР.)
Параметр Самбо - мастера Самбо - новички Контроль
Количество (n) 23 22 32
CD3, % 70±4,7 68±3 65±31
CD4, % 42±3,3 40±3 39±4
CD8, % 32±3,7 33±4 33±4
CD19, % 19±2,9 18±3 16±21
IgG, г/л 16,18±2,8 12,05±1,81 10,3±1,191
IgM, г/л 1,53±0,16 1,51 ±0,18 1,31 ±0,171, 2
IgA, г/л 2,8±0,25 2,62±0,35 2,50±0,32
ФА, % 67±1,52 63±1,821 58±2,071, 2
ФЧ, ед. 8±0,48 7±0,38 1 4,3±0,421, 2
сХл, 104 имп/мин 2,11±0,7 1,09±0,121 0,83±0,161
иХл, 104 имп/мин 4,3±1,26 2,8±0,861 2,0±0,191
Примечание. 1 — достоверность отличий от показателей группы мастеров спорта (р < 0,05); 2 — достоверность отличий от показателей группы новичков (р < 0,05).
ний в уровне иммуноглобулина А среди спортсменов мастеров спорта и новичков выявлено не было. Наиболее выраженные изменения у спортсменов наблюдались в фагоцитарном звене иммунитета — показатели ФА, ФЧ, сХЛ, иХЛ у мастеров спорта достоверно превышали таковые самбистов-новичков и данные группы контроля.
Заключение. Выполненные исследования свидетельствуют об активации у спортсменов клеточного и гуморального звеньев иммунной системы под влиянием регулярных физических тренировок, наиболее выраженных у мастеров спорта, испытывающих систематические нагрузки высокой интенсивности.
ИЗМЕНЕНИЯ ИММУННОГО СТАТУСА У ВОЕННОСЛУЖАЩИХ - УЧАСТНИКОВ СПЕЦОПЕРАЦИЙ
Зайцева Н.С., Сизякина Л.П.
Ростовский государственный медицинский университет, Ростов-на-Дону, Россия
Стресс представляет собой совокупность неспецифических реакций организма на воздействие различных неблагоприятных факторов. И если кратковременные стрессорные реакции можно рассматривать как физиологические, то стресс в условиях боевых действий связан со множеством отрицательных влияний и прежде всего с длительностью воздействия. При этом изменения в нервной системе человека успевают не только сформироваться, но и закрепиться, что приводит к формированию посттравматического стрессового расстройства (Крыжановский Г. Н. и соавт., 2010).
Цель. Изучение особенностей иммунного статуса у военнослужащих, вернувшихся из командировки в районы со сложной оперативной обстановкой.
Материалы и методы. Обследовано 15 военнослужащих (средний возраст 32,5±4,2 лет) до и сразу после участия в спецоперациях (продолжительность — 3 мес.). Состояние иммунного статуса оценивали по экспрессии CD3+, CD4+, CD16+, CD19+ методом непрямой иммунофлюорисценции с использованием соответствующих моноклональных антител в иммунофлюоресцентном тесте на лазерном проточном цитофлюориметре Cytomics FC 500 (Becman Coulter,
USA), уровни сывороточных иммуноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини. Уровень циркулирующих иммунных комплексов определяли методом их преципитации в растворе полиэтиленгликоля. Интегральную кислородзависимую микробицидность ней-трофилов оценивали в спонтанном и стимулированном НСТ-тесте с расчетом коэффициента стимуляции. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием набора прикладных программ MS Office 2010, Statistica 6,0 for Windows. Достоверные отличия между показателями определялись при p < 0,05.
Результаты. Анализ полученных данных показал, что участие в спецоперациях у военнослужащих приводит к угнетению процессов созревания лейкоцитов и лимфоцитов. При рутинном исследовании периферической крови в динамике отмечено значительное достоверное уменьшение количества лейкоцитов (с 6,3±0,4 до 4,8±0,3 х 109/л) и лимфоцитов (2,5±0,1 до 1,24±0,1 х 109/л). На фоне изменений, указанных выше, отмечались следующие нарушения в иммунном статусе: в Т-клеточном звене иммунной системы на фоне неизмененного содержания общего количества лимфоцитов регистрируется значительное нарастание количества CD4+ лимфоцитов (41±2,2 до и 53±2,1% сразу после участия в спецоперациях) и снижение CD8+ клеток (32±2,4% против 21±1,6%,), что привело к сохранению адаптационного потенциала у обследуемых и нарастанию иммунорегулятор-ного индекса (1,4±0,19 против 2,52±0,18, < 0,05). Указанные сдвиги сопровождались значительным достоверным уменьшением количества клеток-натуральных киллеров (CD16+ - 15,1±1,5% против 7,9±1,9%). В гуморальном звене иммунной системы на фоне неизмененного количества В-лимфоцитов выявлено значительное уменьшение иммуноглобулинов класса А (IgA — 2,19±0,11 против 1,6±0,4 г/л). В фагоцитарном звене спонтанная активность нейтрофи-лов в НСТ тесте была значительно угнетена (99±3,6 против 79±4,1 у.е.) на фоне сохраненной стимулированной активности, что позволило поддерживать коэффициент стимуляции на исходном уровне.
Вывод. Даже краткосрочное (до 3 месяцев) участие в спецоперациях приводит к ощутимым нарушениям иммунного статуса в виде изменений процессов дифферен-
