Влияние фитотерапии на микробную адгезию у больных хроническим пиелонефритом Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

7. Hooton T.M., Stamm W.E. Diagnosis and treatment of uncomplicated urinary tract infection. - Infectious Disease Clinics of North America. - 1997. - Vol. 11(3). -P. 551-581.

8. Stamm W.E., Me Kevitt M., Roberts P.L. et al. Natural history of recurrent urinary tract infection in women. - Rev. In-fect.Dis. - 1991. - Vol.13. -P.77-83.

Иванов Виктор Викторович - кандидат медицинских наук, МУЗ ГК БСМП им. В.В. Ангапова, заведующий урологическим отделением. Тел. 8(3012) 55-62-58; 8(3012)44-37-71; 68-60-91.

Хитрихеев Владимир Евгеньевич - доктор медицинских наук, профессор, декан медицинского факультета Бурятского государственного университета, заведующий кафедрой госпитальной хирургии. ГК БСМП, урологическое отделение. Тел. 8(3012)55-62-58; E-mail:[email protected]

Ivanov Victor Victorovich - candidate of medical sciences, head of urological department, V.V. Angapov Municiple Clinical Hospital of First Aid.

Khitrikheev Vladimir Evgenevich - doctor of medical sciences, professor, dean of medical faculty, head of the department of hospital surgery, Buryat State University, ph.: 8(3012)55-62-58; E-mail:[email protected].

УДК 616.613 -002

О В.В. Иванов, В.Е. Хитрихеев

Влияние фитотерапии на микробную адгезию у больных хроническим пиелонефритом

Изучено влияние профилактического лечения больных хроническим пиелонефритом в стадии ремиссии с применением фиточая «Байкальский-6» на микробную адгезию. Применение растительного лекарственного средства уменьшает микробную адгезию уропатогенов.

Ключевые слова: фитотерапия, пиелонефрит, микробная адгезия.

V.V. Ivanov, V.E. Khitrikheev

Influence of phytotherapy on bacterial adhesiveness at chronic pyelonephritis patients

The influence of prophylactic therapy at chronic pyelonephritis patients in remission stage using phytomedicine «Baikalian Tea №6» on bacterial adhesiveness has been researched. The use of phytomedicine decreases bacterial adhesiveness of uropatogens. Keywords: phytotherapy, pyelonephritis, bacterial adhesiveness.

Введение. Основным фактором вирулентности уропатогенных микробов является их адгезия к клеткам эпителия мочевыводящих путей [5; 8]. Повышенная адгезивная способность уро-эпителиальных клеток, в том числе за счет дестабилизации клеточных мембран, предрасполагает к рецидивирующему течению инфекций мочевыводящих путей (ИМП) [1; 3]. Известно, что антиадгезивным действием обладают низкие дозы антибиотиков и некоторые растительные лекарственные средства [6; 9].

Учитывая патогенетические звенья развития ИМП, есть необходимость включения фитопрепаратов, обладающих противомикробным и мембраностабилизирующим действием, в комплексную терапию хронического пиелонефрита. При этом назначение фитотерапии необходимо не только в активной стадии патологического процесса, но и в период клинико-лабораторной ремиссии в качестве профилактического лечения.

Предлагаемое для этих целей комплексное растительное средство - фиточай «Байкальский-6» - создано на основе рецептов традиционной тибетской медицины. Растительное средство представляет собой сбор из следующих видов растительного сырья: побегов толокнянки обыкновенной (Arctostaphylos uva ursi L.), листа брусники обыкновенной (Vaccinium vitis idaea L.), травы горца птичьего (Polygonum aviculare L.), цветков календулы лекарственной (Calendula officinalis L.), листа крапивы двудомной (Urtica dioica L.). Сбор обладает антимикробным, противовоспалительным, иммуномодулирующим, гипоазотемическим, мочегонным, мембраностабилизирующим, антиоксидантным свойствами. Соотношение компонентов фитопрепарата составляет соответственно 3,0 : 2,0 : 2,0 : 1,5 : 1,5 масс, частей [4; 7].

Цель исследования: изучить показатели ад-гезивности микробов на клеточных мембранах и свободно-радикального окисления организма в

результате профилактического применения фиточая «Байкальский-6» у больных хроническим пиелонефритом в стадии ремиссии.

Материалы и методы исследования

Под нашим наблюдением находилось 32 пациента хроническим пиелонефритом в стадии ремиссии: 30 женщин и 2 мужчин. Возраст составил от 18 до 70 лет. Средний возраст -44,5±0,9 лет. В исследование были включены больные вторичным хроническим пиелонефритом на фоне аномалий развития мочевыделительной системы (полное и неполное удвоение почек, поясничная дистопия и нефроптоз), мочекаменной болезни (удаление конкрементов в анамнезе), после операций на верхних мочевых путях. Анамнез заболевания - 4-15 лет, в среднем - 9,5±0,8 лет.

Общий отбор больных осуществлялся по следующим критериям: возраст от 18 лет; наличие соответствующего анамнеза заболевания; отсутствие обструктивных уропатий и нейрогенных расстройств мочеиспускания; отсутствие аллергических реакций на антибиотики; отсутствие тяжелых сопутствующих соматических заболеваний. Все больные имели сохранную функцию почек, без явлений почечной недостаточности. Пациенты не принимали антибактериальные препараты в течение месяца. В соответствии с программой GCP (Good Clinical Practic) было получено информированное согласие больных.

По методике профилактического лечения больные хроническим пиелонефритом были разделены на 3 группы. В первой (12 больных) пациенты принимали фиточай «Байкальский-6» 3 раза в день, в течение 28-и дней. Во второй (10 пациентов) принимали ципрофлоксацин по 125 мг на ночь. В третьей (10 человек) профилактического лечения не проводили. Контрольную группу составили практически здоровые люди (10 человек) того же возраста.

Динамику адгезивности микроорганизмов до и после лечения на поверхности эритроцитов периферической крови изучали по методике

В.И. Бриллис и соавторов (1986) [2], с использованием нативных эритроцитов пациентов. Для сравнения применяли дважды отмытые буферным раствором донорские эритроциты 0(1) группы крови Rh+. В опытах использовали музейные штаммы Escherichia coli АТСС 25922 ГИСК им. Тарасевича.

Рассчитывали коэффициент адгезии (К) -процент эритроцитов, участвующих в адгезивном процессе и индекс адгезивности микроорганизмов (ПАМ). Коэффициент участия эритроцитов в адгезивном процессе (К) - процент эритроцитов, имеющих на своей поверхности адге-зированные микробы. К считался значимым при показателе более 50%. Индекс адгезивности микроорганизмов (ИАМ) - число адгезирован-ных микробов на одном участвующем в адгезивном процессе эритроците.

Состояние перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали по малоновому диальдегиду (МДА), который определяли по методике И.Д. Стальной и Т.Г. Гаришвили (1977) в эритроцитах спектрофотометрическим методом на УФ-спектрофотометре СФ-46. Для исследования эритроцитов использовали венозную кровь, взятую натощак и стабилизированную гепарином.

Результаты и обсуждение

Результаты показателей адгезии музейных штаммов Escherichia coli представлены в таблице 1. Как следует из этих данных, у пациентов ХП в стадии ремиссии высок процент эритроцитов, участвующих в адгезивном процессе (К -66,4), с достоверно (Р < 0,01) высоким СПА (3,1 и 1,95) и ИАМ (2,3 и 3,5) по сравнению с результатами группы здоровых. Такой потенциально высокий риск фиксации патогенной микрофлоры на цитомембранах организма обусловлен как факторами патогенности микробов, так и, возможно, нарушением стабильности клеточных мембран при наличии факторов риска или персистирующей инфекции.

Таблица 1

Показатели адгезивности Escherichia coli (АТСС 25922) у больных хроническим пиелонефритом в стадии ремиссии до и после курса фитотерапии (М±т)

Г руппа пациентов Показатели адгезивности

СПА (ед.) К(%) ПАМ

Здоровые, п = 10 1,95±0,21 43,0±2,4 2,30+0,12

Фиточай «Байкальский-6», п=12 До лечения 2,97 ± 0,23 68,5 ±2,14 3,30+0,18

После лечения 1,98±0,11** 46,12 ±0,96** 2,43+0,21**

Ципрофлоксацин 125 мг, п=10 До лечения 2,95± 0,76 64,4 ± 2,26 3,55+0,12

После лечения 1,91±0,62** 41,34 ±0,14** 2,41+0,16**

Динамическое наблюдение, п=10 1 день 3,01± 0,15 66,4 ± 1,23 3,4+0,22

Через 28 дней 3,10± 0,26 68,4 ±2,11 3,5+0,21

Примечание; * - р < 0,01 - достоверность различий результатов до и после лечения.

У преобладающего большинства больных ХП после приема фитопрепарата и низких доз ци-профлоксацина отмечалось снижение среднего показателя, коэффициента адгезии и индекса адгезивности (р < 0,01). Причем эти показатели были примерно одинаковыми как в группах, принимавших фиточай, так и в группе, принимавшей ципрофлоксацин. В контрольной группе, где лечение не проводилось, наоборот, лишь у 2-х (20%) наблюдаемых отмечалось снижение этих показателей в динамике наблюдения. У 8-и (80%) больных, не получавших фитопрепараты, сохранялись значимые показатели адгезии, в том числе у 4-х (40%) было отмечено значительное увеличение показателя коэффициента

адгезии. Такое изменение восприимчивости цитомембран к адгезии патогенной флоры указывает на наличие постоянного риска рецидива воспаления у этих пациентов.

Если механизм антиадгезивного действия низких доз антибиотиков реализуется за счет прямого антибактериального воздействия на микроорганизмы, то в механизме влияния растительных препаратов на адгезию имеется еще и компонент стабилизации клеточных мембран. С целью определения влияния фитопрепаратов на ПОЛ и мембраностабилизацию изучали показатели малонового диальдегида (МДА) в эритроцитах крови (табл. 2).

Таблица 2

Динамика показателей МДА в эритроцитах крови под влиянием приема фиточая «Байкальский-6» у больных хроническим пиелонефритом в стадии ремиссии (М ± т)

Г руппа пациентов МДА (мкмоль/л) в эритроцитах

Здоровые, п = 10 5,11±0,45

До лечения

Фиточай «Байкальский-6», п = 12 7,32±0,86

Ципрофлоксацин, п = 10 7,54±0,32

Динамическое наблюдение, п = 10 7,67±0,18

После лечения

Фиточай «Байкальский-6», п = 12 4,26±0,32**

Ципрофлоксацин, п = 10 5,74±0,77*

Динамическое наблюдение, п = 10 6,46±0,19

Примечание: р<0,05 *; р<0,01 ** — достоверность различий результатов до и после лечения.

Из данных таблицы 2 следует, что у больных ХП в стадии ремиссии концентрация МДА в эритроцитах крови была увеличена по сравнению со здоровыми (р<0,05). В результате проведения профилактического курса лечения активность показателей МДА значимо (р<0,01) снизилась по сравнению с исходной. В группе больных, принимавших низкие дозы фторхино-лонов, показатели МДА снизились достоверно (р<0,05), но концентрация МДА оставалась выше показателей здоровых лиц. В группе динамического наблюдения показатели МДА оставались без существенной динамики и были достоверно выше, чем в группе здоровых лиц (р<0,05).

При оценке процессов ПОЛ мы выявили, что в эритроцитах крови пациентов с ХП в стадии ремиссии имеет место повышение продукции ПОЛ по сравнению с показателями, полученными у относительно здоровых пациентов. При отсутствии профилактического лечения (в период реконвалесценции) величина изучаемых мар-

керов в крови больных ХП хоть и приближается к показателям, обнаруженным у относительно здоровых, но не нормализуется. Этот фактор в дальнейшем является предпосылкой развития благоприятных условий для рецидивирования инфекционно-воспалительного процесса.

Выводы

Применение фитопрепаратов приводит к снижению основных показателей адгезии микроорганизмов на поверхности цитомембран у большинства больных, страдающих пиелонефритом за счет прямого противомикробного действия.

Использование фитотерапии ведет к снижению процессов свободнорадикального окисления, усилению антиоксидантной защиты организма и, как следствие, снижению накопления продуктов перекисного окисления липидов, что в свою очередь приводит к увеличению стабильности клеточных мембран и снижению адгезии микроорганизмов.

Литература

1. Беликова Е. Э. Роль адгезивности грамотрицательных бактерий и процессов свободнорадикального окисления в развитии инфекции мочевой системы у детей группы риска: дис. ... канд. мед наук. - Ростов н/Д, 2005. - 146 с.

2. Бриллис В. И., Брилене, Т. А. Ленцер X. П. и соавт. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов // Лабораторное дело. - 1986. - № 4. - С. 210-212.

3. Летифов Г. М. Патогенетические механизмы возникновения и хронизации пиелонефрита у детей // Нефрология и диализ. - 2001. - Т.З, № 4 - С. 475-477.

4. Патент РФ №2237488 от 22.01.2004. Средство «чай Байкальский-6», обладающее диуретической активностью и способ его получения / Е.Д. Югдурова, А.А. Маркарян, Г.Г. Николаева, Л.А. Нагаслаева, А.Г. Мондодоев, С.М. Николаев, Т.Д. Даргаева.

5. Переверзев А.С., Коган МП. Инфекции и воспаление в урологии. - М., 2007. - 244 с.

6. Перепанова Т.С. Трудности лечения рецидивирующей инфекции мочевых путей. Возможности фитопрепаратов // РМЖ. - 2009. - № 12. - С. 841-845.

7. Югдурова Е.Д. Фармакогностическое изучение комплексного растительного средства, рекомендуемого для профилактики заболеваний мочевыделительной системы: автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Улан-Удэ, 2004. - 21с.

8. Svanborg, С., Godaly G. Bacterial virulence in urinary tract infection // Infect. Dis. Clin. North Am. - 1997. - Vol.11. -P.513-529.

9. Tempera G., Corsello S., Genovese C., Caruso F.E., Nicolosi D. Inhibitory activity of cranberry extract on the bacterial adhesiveness in the urine of women: an ex-vivo study // Int J Immunopathol Pharmacol. - 2010. - Vol. 23(2). - P. 611-618.

Иванов Виктор Викторович - кандидат медицинских наук, МУЗ ГК БСМП им. В.В. Ангапова, заведующий урологическим отделением. Тел. 8(3012) 55-62-58; 8(3012)44-37-71; 68-60-91.

Хитрихеев Владимир Евгеньевич - доктор медицинских наук, профессор, декан медицинского факультета Бурятского государственного университета, заведующий кафедрой госпитальной хирургии. ГК БСМП, урологическое отделение.

Тел. 8 (3012) 55-62-58; E-mail:[email protected].

Ivanov Victor Victorovich - candidate of medical sciences, head of urological department, V.V. Angapov Municiple Clinical Hospital of First Aid. ph.: 8(3012) 55-62-58; 8(3012) 44-37-71; 68-60-91.

Khitrikheev Vladimir Evgenevich - doctor of medical sciences, professor, dean of medical faculty, head of department of hospital surgery, Buryat State University, ph.: 8(3012) 55-62-58. E-mail:[email protected].

Батоцыренова Э.Т., Торопова А.А., Танхаева Л.М., Шантанова Л.Н., Алексеева Э.А. Мембраностабилизирующая и антиоксидантная активность сухого экстракта Astragalus membranaceus___________________________________

УДК 615.322

ОЭ.Т. Батоцыренова, А.А. Торопова, Л.М. Танхаева, Л.Н. Шантанова, Э.А. Алексеева

Мембраностабилизирующая и антиоксидантная активность сухого экстракта ASTRAGALUS MEMBRANACEUS

В представленной работе проведено исследование мемраностабилизирующей и антиоксидантной активности сухого экстракта корней астрагала перепончатого Astragalus membranaceus (Fish.) Bunge in vitro.

Ключевые слова: Astragalus membranaceus, мембраностабилизирующая активность, антиоксидантная активность, ДФПГ, супероксид-радикалы, оксид азота.

Е.Т. Batotsyrenova, A.A. Toropova, L.M. Tankhaeva, L.N. Shantanova, E.A. Alekseeva

Membrane stability and antioxidant activities of dry extract of ASTRA GAL US MEMBRANA CEUS

In the submitted work a research of membrane stability and antioxidant activities of dry extract of Astragalus membranaceus (Fish.) Bunge roots, using in vitro method, has been carried out.

Keywords: Astragalus membranaceus, membrane stability activity, antioxidant activity, DPPH, superoxide-radicals, nitrogen oxide.

В исследованиях последних лет выявлено, что ведущим молекулярно-клеточным механизмом патогенеза многих заболеваний является дисбаланс в системе свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты. Избыток свободных радикалов сопровождается индукцией процессов свободнорадикального окисления биомакромолекул. При этом нарушается структурно-функциональная целостность клеточных мембран, и, как следствие, происходит повреждение клеток организма [2; 10]. В связи с этим одним из путей повышения адаптации организма к неблагоприятным условиям окружающей среды, повышения его стрессоустойчивости является использование антиоксидантных и адап-тогенных средств [3]. Наиболее перспективным направлением представляется использование средств растительного происхождения, обладающих широким спектром действия, отсутствием токсичности и отрицательных побочных эффектов при их длительном применении.

В традиционной медицине стран Восточной Азии для лечения заболеваний различной этиологии издавна применяются галеновые препараты на основе астрагала перепончатого (Astragalus membranaceus Ficher Bunge - многолетнее травянистое растение семейства Fabaceae). Растение содержит биологически активные вещества, принадлежащие к различным классам химических соединений: флавоноиды (кверцетин, рутин, каликозин, одоратин, афрор-мозин) [5; 9; 15], органические кислоты (кофей-

ная, феруловая кислоты), витамины А, Е, С, РР, Р [5; 9] и др. Известно, что указанные соединения обладают антирадикальной активностью, способствуя стабилизации биологических мембран. В частности для флавоноидов установлено три механизма антиоксидантного действия: образование феноксильных радикалов, хелатиро-вание ионов металлов переменной валентности и стабилизация мембран путем изменения их текучести вследствие способности фенолов проникать в липидный слой мембран. Также они способствуют повышению активности эндогенных антиоксидантов [1; 13]. В Институте общей и экспериментальной биологии СО РАН был разработан фитопрепарат на основе сухого экстракта А. тетЬгапасеш (СЭА), представляющий собой комплекс экстрактивных веществ, полученный из корневищ данного растения.

Цель работы: определение антиоксидантной и мембраностабилизирующей активности сухого экстракта астрагала перепончатого в коррекции процессов перекисного окисления липидов биологических мембран.

Материалы и методы

Растительное сырье (корни и корневища астрагала перепончатого) было собрано в окрестностях г. Улан-Удэ в сентябре 2011 г. Способ получения препарата (СЭА) заключается в экстракции измельченного сырья 60-70%-ным этиловым спиртом, концентрировании и высушивании в вакуумной установке.

Мембраностабилизирующую активность ис-