CC BY
30
ограниченных форм гипоплазий, включая и эмфизему легких, на данном этапе развития техники и технологий, безальтернативно возможна только с помощью современной структурно-функциональной компьютерной томографии.
H.H. Дремина, И.Г. Шурыгин
ВЛИЯНИЕ FGF2 НА ДИНАМИКУ КЛЕТОК ФИБРОБЛАСТИЧЕСКОГО РЯДА В ЗОНЕ ФОРМИРОВАНИЯ ПОСТИНФАРКТНОГО КАРДИОСКЛЕРОЗА
НЦ РВХ ВСНЦ СО РАМН (Иркутск)
Заживление инфаркта миокарда (ИМ) завершается формированием зоны постинфарктного кардиосклероза. Однако, несмотря на то, что исследованиям регуляции раневого процесса посвящено достаточно большое количество исследований, на сегодняшний день остается недостаточно изученным участие ростовых факторов в процессе формирования соединительной ткани в зоне ИМ и возможные пути регуляции этого процесса.
Одно из ведущих мест в регуляции процесса фиброгенеза отводится основному фактору роста фиб-робластов (FGF2).
Целью исследования явилось изучение влияния FGF2 на динамику клеток фибробластического ряда в зоне формирования постинфарктного кардиосклероза как при естественном течении ИМ, так и при искусственном изменении активности ростового фактора.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Исследование проведено на 160 самках крыс линии Wistar весом 200 — 250 г в возрасте 9 мес. Моделирование инфаркта миокарда выполнено под кетамин-дроперидоловым наркозом посредством диатермокоагуляции передней межжелудочковой артерии в области средней трети.
После моделирования ИМ животные были разделены на 4 группы: контрольная, две основные (группа FGF2, анти-FGF2) и группа ложнооперированных животных. В контрольной группе постин-фарктный период имел естественное течение, а в основной группе FGF2 животным внутрисердечно вводили FGF2 в дозе 100 нг однократно через 1.5 ч. после операции; группе анти-FGF2 вводили антитела к FGF2 в дозе 2 мкг трехкратно через 1.5, 6 часов и 3-е суток. У ложнооперированных животных и в контрольной группе в сроки 1.5, 6 часов и 3 суток производили внутрисердечную инъекцию 0,1 мл 0,85 % раствора NaCl.
По окончанию эксперимента животных выводили через 2 ч, 6 ч, 12 ч, 1, 3, 7, 14 и 30 суток. Материалом для исследования служил миокард.
После фиксации в 10% растворе нейтрального формалина осуществляли проводку и заливку в парафиновые блоки, из которых изготавливали серийные срезы толщиной 3 мкм, окрашивали гематоксилин-эозином.
Морфометрию проводили с использованием программы ImageJ Национального института здоровья (США) с набором модулей для медицинской морфометрии от Wayne Rasband. Подсчет производили в 3 зонах — интактного миокарда, пограничной зоне, зоне инфаркта — при увеличении 600х. В каждой зоне обсчитывалось 4 поля зрения.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В группе ложнооперированных животных мы не выявили значимых изменений в гистологической картине нормального миокарда.
В контрольной группе животных ИМ протекал по классической форме. Вслед за некротическими и инфильтративными изменениями, отмеченными в ранние сроки наблюдения, начиналось формирование грануляционной ткани. Количество фибробластов резко возрастало на 3 сутки после ИМ. На 7 сут. в зоне некроза плотность фибробластов возрастала, достигая максимума. Параллельно происходили изменения части фибробластов, характерные для клазматоза. Через 14 сут. количество фибробластов значительно снижалось с одновременным увеличением количества фиброцитов, и к 30 суткам при уменьшении общего количества клеточных элементов фиброцитов становилось значительно больше, чем фибробластов. В пограничной зоне наблюдалась сходная динамика процесса.
При использовании FGF2 в интактной зоне отличий от контрольной группы не выявлено. Максимальная выраженность фибробластической реакции в обеих группах отмечалась на 7 сутки после ИМ, однако в группе FGF2, в отличие от контрольной группы, сохранялась на высоком уровне до 14 суток. В то же время количество фиброцитов в зоне некроза у животных, получавших FGF2, на 14 и 30 сутки было значительно меньше, чем у животных в контрольной группе.
В пограничной зоне максимум выраженности фибробластической фазы приходился на 7 сутки, однако уровень фибробластов у животных, получавших FGF2, был выше на 7 и 14 сутки, чем в группе контроля. Количество фиброцитов у обеих групп животных нарастало с 3 до 30 суток, однако количество фиброцитов в группе животных, получавших FGF2, на 14 и 30 сутки было достоверно ниже, чем в контроле.
При введении животным антител, блокирующих активность FGF2, при сравнении морфологической картины миокарда с наблюдаемой у животных контрольной группы в интактном миокарде картина не отличалась от показателей контрольной группы. Количество фибробластов в пограничной зоне и зоне инфаркта также значимо не различались в сравниваемых группах. Интересным оказалось то, что при введении антител к FGF2, как и при повышении уровня FGF2, нарушалась трансформация фибробластов в фиброциты. По сравнению с контролем большая часть фибробластов прекращали свое существование, не трансформируясь в фиброциты.
Изменение процесса фиброобразования в зоне формирования постинфарктного кардиосклероза при изменении концентрации FGF2 демонстрирует возможность управлять этим процессом. При этом для исследования механизмов, лежащих в основе выявленной сходной динамики клеток фиброцитар-ного ряда при разнонаправленных изменениях концентрации FGF2, требуется проведение дополнительных исследований.
Е.А. Дынжинова, Л.М. Доржиев, H.A. Попова, Г.А. Бикмулина
ВЛИЯНИЕ КОМПЛЕКСНЫХ РАСТИТЕЛЬНЫХ СРЕДСТВ НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ СТАДИЮ ВОСПАЛЕНИЯ
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
На сегодняшний день в клинической медицине для лечения и профилактики различных заболеваний широко применяются лекарственные растения и препараты, приготовленные на их основе. Актуальной задачей является разработка новых эффективных средств растительного происхождения, которые обладают преимуществами — низкой токсичностью, возможностью их длительного применения.
На основании этого разработаны комплексные растительные средства, предназначенные для лечения гепатитов и панкреатитов различной этиологии — «Гепатон» и «Панкреофит». «Гепатон» — условное название сухого экстракта, в состав которого входят цветки ромашки аптечной, трава зверобоя продырявленного, корни солодки голой, плоды шиповника и другие виды растений. Второе изучаемое нами растительное средство «Панкреофит» состоит из сухих экстрактов травы сушеницы, корней девясила, побегов черники, побегов пятилистника и других видов растений.
Цель настоящей работы: оценить влияние комплексных растительных средств на пролиферативную фазу воспаления.
Опыты проведены на 30 белых крысах линии Wistar обоего пола массой 200 — 230 г. Для определения влияния исследуемых лекарственных средств на пролиферативную стадию воспаления животным под эфирным наркозом подкожно имплантировали стерильные ватные тампоны (шарики) массой 15 мг. «Гепатон» в дозе 50 мг/кг, «Панкреофит» в дозе 300 мг/кг и препарат сравнения — калефлон в дозе 100 мг/кг массы животного в виде водной взвеси вводили крысам внутрижелудочно один раз в сутки в течение 7 дней. Контрольная группа животных получала эквиобъемное количество дистиллированной воды по аналогичной схеме. Спустя 7 суток с начала опыта извлеченные у животных под эфирным наркозом гранулемы взвешивали до сушки и после высушивания при температуре 56 °С в течение 24 часов. На основании полученных данных оценивали влияние испытуемых средств на пролиферативную стадию воспаления.
В результате проведенных исследований установлено, что на фоне введения «Гепатона» и «Панк-реофита» масса соединительнотканной капсулы в очаге воспаления на 9,3 и 8,9 % соответственно больше таковой, чем у животных контрольной группы. Калефлон способствовал образованию соединительной капсулы на 15 %.
Таким образом, комплексные растительные средства «Гепатон» и «Панкреофит» обладают умеренным пролиферативным действием.
