CC BY
7MEDICAL SCIENCES
INFLUENCE OF THE EXTRACT OF DRY "CENTAFIT" ON RAT-SAMTSO REPRODUCTION
PROCESSES
Dashinamzhilov Zh.
Senior Researcher, Doctor of Medical Sciences Institute of General and Experimental Biology, Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences, Ulan-Ude
ВЛИЯНИЕ ЭКСТРАКТА СУХОГО «ЦЕНТАФИТ» НА ПРОЦЕССЫ РЕПРОДУКЦИИ
КРЫС САМЦОВ
Дашинамжилов Ж.Б.
Старший научный сотрудник, доктор медицинских наук Институт общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской Академии наук, г. Улан-Удэ
Abstract
In experiments on rats, the effect of the dry «Centafit» extract on the reproductive function of male rats was studied.
It was found that dry « Centafit» extract, diluted in purified water at a dose of 100 mg / kg in a volume of 10 ml / kg, stimulates various aspects of sexual behavior and increases the reproductive function of male rats. Аннотация
В экспериментах на крысах изучено влияние экстракта сухого «Центафит» на репродуктивную функцию крыс самцов.
Установлено, что экстракт сухой «Центафит», разведенный в воде очищенной в дозе 100 мг/кг в объеме 10 мл/кг стимулирует разные аспекты полового поведения и повышает репродуктивную функцию крыс самцов.
Keywords: «Centafit» dry extract, reproductive function, male rats
Ключевые слова: экстракт сухой «Центафит», репродуктивная функция, крысы- самцы
Репродуктивное здоровье населения является неотъемлемым составляющим демографических процессов, происходящих в обществе, поэтому проблемы, связанные с его нарушением, выходят, сегодня за рамки медицинских, и приобретают социальный характер.
В то же время исследование функционирования половой системы и возможности ее регуляции представляет не только фундаментальный интерес, но имеет большое практическое значение, поскольку репродуктивное здоровье является важным фактором, определяющим качество жизни человека. Наиболее перспективным направлением в этом отношении является разработка адаптогенных препаратов на основе сырья природного происхождения, обладающих рядом преимуществ по сравнению с синтетическими средствами: содержат, как правило, широкий спектр биологически активных веществ; обладают несколькими видами фармакологической активности; характеризуются плавным нарастанием фармакологического эффекта [3, 346348]. Немаловажным свойством препаратов природного происхождения является низкая токсичность и отсутствие неблагоприятных побочных реакций при длительном приеме, что имеет особое значение в виду широкого распространения лекарственной болезни. В связи с вышесказанным в Отделе биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН разработан экстракт сухой «Центафит».
Целью настоящего исследования явилось определение влияния ЭС «Центафит» на процессы репродукции крыс самцов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объектом исследования служил экстракт сухой «Центафит», полученный из сырья следующих видов растений: травы Serratula centauroides L. (30 в.ч.), корневищ с корнями Inula helenium L. (20 в.ч.), перезимовавших листьев Bergenia crassifolia L. Fritsch. (10 в.ч.), травы Echinacea purpurea L. Moench. (20 в.ч.), плодов Rosa spp. (20 в.ч.). Способ получения экстракта сухого заключался в последовательной трехкратной экстракции 30/30/70 % этиловым спиртом по 90 минут. Оптимальное соотношение сырья и экстрагента - 1:12, температурный режим - 60 °С, содержание суммы экстрактивных веществ составляла 4,38 %, арбутина - 0,22 %, суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-гликозид - 0,15 %.
Исследования проведены в летне-осенний период на половозрелых беспородных белых крысах: 15 самцах и 15 самках 4- месячного возраста, массой 200- 210 г. Животных содержали в виварии с учетом правил, принятых Международной конвенцией по защите позвоночных животных, используемых в экспериментах для научных целей (Страсбург, 1986). Испытуемые крысы-самцы перед началом экспериментов были разделены на 3 равные
30
Norwegian Journal of development of the International Science No 36/2019
группы (по 10 особей): 1-я группа была контрольной (интактная), а 2-я группа была опытной, которым внутрижелудочно вводили ЭС «Центафит» разведенной в дистиллированной воде в дозе 100 мг/кг в объеме 10 мл/кг ежедневно в течение 14 дней 1 раз в сутки. В качестве препарата сравнения - в 3 группе использовали деалкоголизированный экстракт жидкий левзеи сафлоровидной (ДЭЖЛС) в дозе 5,0 мл/кг (изоэффективная доза, установленная опытным путем). Животные контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды по аналогичной схеме.
Тестирование полового поведения проводили на «площадке зоосоциальных предпочтений» на второй день после завершения курса введения ЭС «Центафит» [1, 34-37]. При этом к испытуемому самцу, помещенному на площадку за 20 мин до тестирования, подсаживали интактную самку. Наблюдение за парой вели в течение одного часа при инфракрасном освещении. В этот период у самцов фиксировали латентный период первого подхода к интактной самке и длительность полового поведения, в котором учитывали процептивное поведение (латентный период и время, проведенное около самки) и рецептивное поведение (по количеству эмоциональных подходов и лордозов, свидетельствующих о готовности самца к спариванию). В параметре «эмоциональные подходы к самке» учитывали элементы обнюхивания и взаимного груминга. Спаривание проводили в течение 14 дней.
Во второй серии опытов тестирование полового поведения крыс-самцов проводили на «площадке зоосоциальных предпочтений» разделенной перегородкой с закрытыми «дверцами» (заслонкой), также на второй день после завершения курса введения ЭС «Центафит» [1, 34-37]. Перед началом эксперимента - крыс (самца и самку) для привыкания (адаптации к «отсеку») помещали по разным
«камерам» изолированным друг от друга и содержали в течение 2-3 часов при инфракрасном освещении. После адаптации заслонку открывали и наблюдали в течение часа за поведением крыс. При тестировании полового поведения также проводили оценку, что при предыдущем эксперименте, а также засекали время перемещения самца в отсек самки.
По окончании наблюдений самцов выводили из эксперимента, регламентируемым методом [2] декапитации под эфирным наркозом.
Статистическую обработку данных проводили общепринятыми методами с использованием пакета программ «Биостат-6». Для оценки уровня значимости полученных результатов использовали и-критерий Манна-Уитни. Различия считали статистически значимыми при вероятности 95% (Р< 0.05) [4. 263].
Результаты исследований В результате в первой серии экспериментов установлено, что при помещении крыс-самок к самцу, получавшему ЭС «Центафит», на «площадку зоосоциальных предпочтений» время про-цептивного поведения укорачивается по сравнения с интактным контролем на 46%, а рецептивное поведение удлиняется на 22%, что свидетельствует о готовности самца к спариванию. Также количество обнюхивания и груминга соответственно увеличивается на 29% и 49% соответственно (табл.1). При исследованиях мазков под микроскопом обнаруживается наличие спермии (единичные) в вагинальном содержании у крыс-самок. В половом поведении крыс самцов, получавших препарат сравнения ДЭЖЛС время процептивного поведения, укорачивалось на 22%, а рецептивное поведение удлинялось лишь на 10%. Количество обнюхиваний и гру-минга не отличались от уровня интактного контроля. При микроскопии в вагинальном содержании у крыс самок наличие спермы не обнаружено.
Таблица 1
Влияние ЭС «Центафит» на половое влечение самцов белых крыс
латентный период первого подхода к интактной самке и длительность
полового поведения
Группа животных (п= 10) Процептив- Рецептив- Обню- Груминг Спаривание (наличие
ное поведе- ное поведе- хивание (взаимный) спермы в ва-
ние (мин) ние (к-во) (к-во) (к-во) гинальном выделении)
Интактная группа (дис. вода) 13,0 ± 1,3 4,5±0,2 3,5±0,1 2,0±0,1 -
Опытная группа («Центафит») 7,0± 1,2* 5,8±0,1* 4,9±0,1 * 3,9±0,1* +
ДЭЖЛС 10,2±1,0 5,0±0,1* 3,8±0,1 3,0±0,1* -
Примечание: * - здесь и далее означает, что различия существенны при Р < 0,05
Во второй серии опытов при тестировании полового поведения крыс-самцов, получавших ЭС «Центафит» на «площадке зоосоциальных предпочтений» разделенной перегородкой, установлено, что латентный период перехода самца в «отсек» самки укорачивается по сравнению с интактным контролем на 16 мин., что соответствует 47%, тогда
как на фоне препарата сравнения ДЭЖЛС укорачивалось на 4 мин (12%). Время процептивного поведения также укорачивается по сравнения с интакт-ным контролем на 46%, а у препарата сравнения ДЭЖЛС на 30%. Рецептивное поведение удлиняется на 47%, что также свидетельствует о готовности самца к спариванию, при 12%-м удлинении ре-
цептивного поведения у 3 опытной группы, получавшей ДЭЖЛС. Также количество обнюхивания и груминга увеличивается на 31% и 47% соответственно, а у крыс, принимавших ДЭЖЛС эти же показатели оставались на уровне интактного-кон-
троля (табл. 2). При исследованиях мазков под микроскопом у крыс самок, бывших в контакте с крысами - самцами, получавших ЭС «Центафит» также обнаружено наличие спермии (единичные) в вагинальном содержании самок.
Таблица 2
Влияние ЭС «Центафит» на латентный период перехода самца в «отсек» самки
латентный период перехода самца в «отсек» самки и первого подхода к ин-
тактной самке и длительность полового поведения
Латент-
Группа животных (П= 10) Процептив-ное поведение (мин) Рецептивное поведение (к-во) Обнюхивание (к-во) Гру- минг (вза- Спаривание (наличие спермы в ный период перехода
им-ный) (к-во) вагинальном выделении) самца в «отсек» самки (мин)
Интактная группа 26,5 ± 4,0 2,2±0,5 2,2±0,3 2,2±0,1 - 34,0±5,0
Опытная группа («Центафит») 14,0± 2,0* 4,0±02* 3,5±02* 3,2±0,1* + 18,0±2,0*
ДЭЖЛС 18,7±1,0* 2,5±0,1 2,7±0,1 2,3±0,2 - 30,0±4,0
Таким образом, из приведенных исследований можно предположить, что ЭС «Центафит» в дозе 100 мг/кг веса умеренно стимулирует репродуктивную функцию крыс- самцов, благодаря наличию в нем биологически активных веществ таких как, фи-тоэкдистероиды, флавоноиды, макро- и микроэлементы, органические кислоты, полисахариды, три-терпеновые гликозиды, глицирризин и др.
БЛАГОДАРНОСТИ Исследования проведены в рамках выполнения темы госзадания №АААА-А17-117011810037-0 «Биотехнологические основы и молекулярно-кле-точные механизмы действия адаптогенных средств, созданных на основе эксдистероидсодержащих растений Восточной Сибири».
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. 1.Л.И. Бугаева, А.А. Спасов, Е.А. Кузу-бова. Влияние препарата бромантан на половое поведение и процессы зачатия у крыс/ Экспериментальная и клиническая фармакология, Т.67, №3, стр.34-37 (2004).
2. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, Москва (2005).
3. Кукес В.Г., Булаев, В.М., Колхир В.К. и др. 2000. Методические указания по доклиническому изучению новых препаратов, разрабатываемых из природного сырья. — В кн.: Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. С. 346-348.
4. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. 2006. Математическая статистика в клинических исследованиях. М., 263.
