CC BY
98
12. Таточенко В.К. Пневмонии у детей: диагностика и лечение // Леч. врач. - 2008. - №8. - С. 5-9.
13. Черняев А. Л. Диагностические ошибки в пульмонологии // Пульмонология. - 2005. - №3. - С. 5-11.
Координаты для связи с авторами : Морозова Нина Викторовна — канд. мед. наук, доцент кафедры детских болезней педиатрического факультета ДВГМУ; Холодок Галина Николаевна — канд. мед. наук, вед. науч. сотрудник Клинико-диагностической лаборатории НИИ охра-
ны материнства и детства Хабаровского филиала ДНЦ физиологии и патологии дыхания СО РАМН; Ефименко Марина Викторовна — канд. мед. наук, ст. науч. сотрудник Клинико-диагностической лаборатории НИИ охраны материнства и детства Хабаровского филиала ДНЦ физиологии и патологии дыхания СО РАМН; Козлов Владимир Кириллович — доктор мед. наук, профессор, засл. деятель науки, чл.-кор. РАМН, директор НИИ охраны материнства и детства Хабаровского филиала ДНЦ физиологии и патологии дыхания СО РАМН.
□□□
УДК 616.24 - 002.2 - 08 : 612.15.1.11] - 053.2 В.К. Козлов1, М.В. Козлов1, О.А. Лебедько1, М.В. Ефименко1, О.Е. Гусева1, Н.В. Морозова2
ВЛИЯНИЕ ЭХИНОХРОМА А НА НЕКОТОРЫЕ ПАРАМЕТРЫ СИСТЕМНОГО СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО СТАТУСА И Т-КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЛЕГКИХ В СТАДИИ РЕМИССИИ
Институт охраны материнства и детства СО РАМН1,
680022, ул. Воронежская, 49, кор. 1, e-mail: [email protected]; Дальневосточный государственный медицинский университет2,
680000, ул. Муравьева-Амурского, 35, тел.: 8-(4212)-32-63-93, e-mail: [email protected], г. Хабаровск
Эхинохром А (2,3,5,7,8-пентагидрокси-6-этилнафта-линдион-1,4) является одним из самых распространенных спинохромов — хиноидных пигментов морских беспозвоночных. Высокая биологическая активность эхинохрома А определяется его выраженными анти-оксидантными антирадикальными свойствами. Данное защитное действие эхинохрома А в немалой степени обусловлено его относительно высокой растворимостью в воде (~1 тМ) по сравнению с другими липидорастворимыми антиоксидантами. Это создает возможность для эффективного перехвата водорастворимых ион-радикалов, в частности супероксид-анион-радикала и перок-сильных радикалов [2]. Кроме того, эхинохром А путем хелатирования ионов Ге 2+ снижает концентрацию инициатора окисления. При этом ключевую роль в редокс-превращениях эхинохрома А играют гидроксигруппы в
2, 3 и 7 положениях [2, 8, 9]. На основе эхинохрома А создан лекарственный препарат «Гистохром», являющийся антиоксидантом нового поколения и обладающий противовоспалительным, антимикробным, антивирусным эффектами [3, 4].
Хронические воспалительные заболевания легких (ХВЗЛ) являются актуальной проблемой детской пульмонологии. На фоне широкого арсенала агрессивных лечебно-диагностических технологий, применяемых
при ХВЗЛ, остро стоит вопрос о причинах развития часто рецидивирующих форм данной патологии и способах борьбы с этим явлением. В наших предыдущих исследованиях [1] было установлено, что у детей с ХВЗЛ в стадии ремиссии имеет место нарушение кис-лород-зависимого метаболизма гранулоцитов (снижение функционального резерва на фоне гиперпродукции супероксид-анион и гидроксил-радикалов), что проявляется формированием выраженного оксидативного стресса на клеточно-мембранном и организменном уровнях. Данное обстоятельство указывает на необходимость антиок-сидантной антирадикальной профилактики и коррекции выявленных метаболических нарушений. Учитывая роль свободнорадикальных процессов в регуляции/дизрегу-ляции структурно-функционального гомеостаза иммунной системы при воспалении, уместно предположить, что восстановление редокс-баланса на фоне применения эхинохрома А приведет к соответствующим изменениям некоторых параметров иммунного статуса при ХВЗЛ у детей.
Цель настоящего исследования состояла в изучении влияния эхинохрома А на процессы свободнорадикального окисления, а также на субпопуляционный состав Т-лимфоцитов в периферической крови у детей с ХВЗЛ в стадии ремиссии.
Материалы и методы
На базе клиники ХФ ДНЦ ФПД СО РАМН - НИИ ОМиД проведено исследование, в которое были включены 17 пациентов от 7 до 12 лет с хроническими воспалительными заболеваниями легких в периоде ремиссии. Контрольную группу составили 12 детей I, II группы здоровья. Анализируемые группы были сопоставимы по возрастно-половому составу. Диагноз ХВЗЛ установлен на основании комплексного клинического обследования по дифференциально-диагностическому алгоритму, включая трансторакальную биопсию с морфологическим исследованием биоптатов легких. В 100% подтвержден порок развития легких (гипо- и дисплазия легких). Пациенты получали эхинохром А в виде препарата «Раствор гистохрома 0,02% для инъекций», который вводили внутримышечно по 0,5 мл ежедневно. Курс составлял пять инъекций. Забор крови проводили трижды: 1) до применения эхинохрома А; 2) после применения эхинохрома А (через сутки от последней инъекции); 3) в отдаленные сроки после применения эхинохрома А (через 4-5 нед. от последней инъекции).
На проведение исследования было получено разрешение этического комитета ХФ ДНЦ ФПД СО РАМН - НИИ ОМиД. Родители всех пациентов дали информированное согласие на участие детей в исследовании.
С помощью хемилюминесцентного анализа оценивали свободнорадикальный статус сыворотки крови по методикам, описанным нами ранее [5]. Определяли: Ssp (интенсивность свободнорадикального окисления), h (содержание гидроперекисей липидов), Sind-1 (скорость накопления перекисных радикалов), Н (величину, обратную перекисной резистентности), Sind-2 (величину, обратную активности антиоксидантной антирадикальной защиты). Интенсивность хемилюминесценции (ХМЛ), измеренную в милливольтах, рассчитывали на 1 мл биосубстрата, выражали в относительных единицах.
Субпопуляционный состав Т-лимфоцитов периферической крови изучали методом проточной цито-флуориметрии на цитометре «FACSCalibur» («Becton Dickinson», USA) с использованием BD Multitest IMK Kit в режиме автоматизированного считывания резуль-
Примечания. * — р<0,05 по отношению к группе контроль, ** — р<0,05 по отношению к группе «ХВЗЛ — до лечения».
Резюме
Применение эхинохрома А в качестве монотерапии у детей с хроническими воспалительными заболеваниями легких в стадии ремиссии корригирует нарушения системного свободнорадикального статуса и вызывает позитивные изменения субпопуляционного состава Т-лимфоцитов периферической крови.
Ключевые слова: легкие, воспаление, дети, свободнорадикальное окисление, Т-лимфоциты.
V.K. Kozlov, M.V.Kozlov, О.Л. Lebedko, M.V.Yephimenko, O.E. Guseva, N.V. Morozova
INFLUENCE OF ECHINOCHROME A ON SOME PARAMETERS OF SYSTEMIC FREE-RADICAL
STATUS AND T-CELL IMMUNITY UNDER CHRONIC
INFLAMMATORY LUNG DISEASES IN CHILDREN AT THE PERIOD OF REMISSION
Khabarovsk Facility of State Founding Far-Eastern Scientific
Center of Respiratory Pathology and Physiology SB RAMS -Scientific research institute of Mother and Child Care;
Far Eastern State Medical University, FESMU, Khabarovsk
Summary
Using echinochrome A as monotherapy in children with chronic inflammatory lung diseases at the period of remission corrects disturbances of systemic free-radical status and causes positive changes of subpopulation composition T-lymphocytes in peripheral blood.
Key words: lung, inflammation, children, free radicals oxidation, T-lymphocytes.
татов с помощью программы МикЦез! Определяли зрелые Т-лимфоциты (СБ3+), Т-хелперы/индукторы (СБ4+), Т-супрессоры/киллеры (СБ8+), соотношение СБ4+/СБ8+ или иммунорегуляторный индекс (ИРИ). Полученные данные обработаны статистически с использованием 1> критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение
Анализ хемилюминограмм сыворотки крови детей с ХВЗЛ в стадии ремиссии (табл. 1) свидетельствовал о том, что все исследуемые параметры достоверно превышали контрольные значения. Интенсивность свободнорадикального окисления (8зр) была увеличена в 2,7 раза, концентрация гидроперекисей липидов (Ъ) — в 2,9 раза, скорость образования перекисных радикалов (8тё-1) — в 2,8 раза. Активность антиоксидантной антирадикаль-ной защиты и перекисная резистентность были снижены, о чем свидетельствовало увеличение соответствующих параметров: 8тё-2 в 2,5 раза и Н в 3,1 раза. После монотерапии эхинохромом А величины всех исследуемых ХМЛ-показателей хотя и сохраняли статистически значимые отличия от контрольных, но при этом достоверно снижались в сравнении с аналогичными показателями в группе «ХВЗЛ — до лечения». Так, уровни 8тё-2 и Н снизились в 1,6 и 1,9 раза, что свидетельствовало о соответствующем повышении активности антиоксидантной антирадикальной защиты и перекисной резистентности.
Таблица 1
Параметры хемилюминесценции (отн. ед.) сыворотки крови у детей с ХВЗЛ в стадии ремиссии до и после применения эхинохрома А (М±m)
Группа наблюдения
Пара- метры контроль ХВЗЛ -до лечения ХВЗЛ - после лечения ХВЗЛ -отдаленные сроки после лечения
Ssp 0,047 0,127 0,087 0,075
±0,003 ±0,005* ±0,005*,** ±0,005*,**
h 0,055 0,161 0,096 0,088
±0,004 ±0,008* ±0,008*,** ±0,006*,**
Sind-1 0,104 ±0,007 0,297 ±0,008* 0,182 ±0,010*,** 0,170 ±0,009*,**
H 0,131 0,410 0,221 0,215
±0,007 ±0,010* ±0,009*,** ±0,008*,**
Sind-2 0,180 ±0,010 0,451 ±0,016* 0,290 ±0,008*,** 0,282 ±0,006*,**
Таблица 2
Состояние Т-лимфоцитарного звена системного иммунитета у детей с ХВЗЛ в стадии ремиссии до и после применения эхинохрома А (М±m)
На этом фоне интенсивность свободнорадикальных процессов (8зр) снизилась в 1,5 раза, концентрация гидроперекисей липидов (Ь) — в 1,7 раза, скорость образования перекисных радикалов (8тё-1) — в 1,6 раза (табл. 1).
ХМЛ анализ сыворотки крови, проведенный в отдаленные сроки после применения эхинохрома А, продемонстрировал устойчивость последствий корригирующего эффекта препарата, даже через 4-5 нед. после монотерапии эхинохромом А все показатели системного редокс-баланса не имели достоверных отличий от аналогичных, зарегистрированных в ранние сроки после лечения (табл. 1).
В метаболическом эффекте эхинохрома А значимую роль может играть выраженная способность этого вещества корригировать липидный обмен [2, 4]. Особенности структурно-функциональной организации воздухоносной системы (наличие сурфактанта и большого количества мембранных структур, содержащих высокие концентрации фосфолипидов) свидетельствуют в пользу того, что в механизмах формирования устойчивого метаболического ответа на воздействие эхинохрома А при ХВЗЛ, помимо антирадикальной активности и хелаторных свойств, участвует широкий спектр корригирующих эффектов, основанных на липотропности этого соединения.
Известно, что активные формы кислорода (АФК), радикальной и нерадикальной природы, являются важнейшими медиаторами меж- и внутриклеточной сигнализации Т-звена иммунитета [6, 7, 11, 12]. Регулируя генную экспрессию представителей семейства №-кВ, активные формы кислорода контролируют Т-лимфопоэз [10, 13, 14].
Полученные нами результаты исследования динамики субпопуляционного состава Т-лимфоцитов периферической крови детей с ХВЗЛ в стадии ремиссии, подвергнутых монотерапии антиоксидантом эхинохромом А (табл. 2), косвенно подтверждают участие АФК в процессах иммуногенеза. Так, на фоне достоверного увеличения процентного содержания лимфоцитов в периферической крови (до лечения — 37,9±0,8%, после лечения — 46,6±0,9%; р<0,05) статистически значимо повышалась экспрессия СБ3+ — маркера лимфоцитов, как в ранний, так и в отдаленный периоды после применения антиоксиданта. Динамика регуляторных пулов лимфоцитов и иммунорегуляторного индекса (ИРИ) отсутствовала в раннем периоде после лечения. Через 4-6 нед. после монотерапии эхинохромом А относительное содержание СБ4+-лимфоцитов достоверно повысилось,
в то время как величина аналогичного показателя CD8+-лимфоцитов статистически значимо снизилась. В связи с этим соотношение CD4+/CD8+ и соответственно иммуно-регуляторный индекс достоверно повысились более чем в 1,5 раза.
Таким образом, если положительные изменения системного редокс-баланса наблюдались непосредственно после монотерапии эхинохромом А и сохранялись, как минимум, в течение 4-5 нед., то изменения субпопуляционно-го состава Т-лимфоцитов были отсрочены во времени и в рамках нашего исследования зарегистрированы на 4-5 нед. после медикаментозного воздействия. Вероятно, в данном случае реакция Т-лимфопоэза является проявлением таких отсроченных долговременных биологических эффектов, какими являются все морфогенетические эффекты.
Полученные нами данные свидетельствуют о том, что модулирование системного биогенеза АФК с помощью антиоксиданта нового поколения эхинохрома А перспективно в аспекте управления процессами Т-лимфопо-эза и, следовательно, целенаправленного формирования Т-опосредованного иммунного ответа у детей с ХВЗЛ в стадии ремиссии.
Выводы
1. Применение антиоксиданта эхинохрома А в качестве монотерапии у детей с ХВЗЛ в стадии ремиссии корригирует нарушения системного свободнорадикального статуса. Данный эффект сохраняется, как минимум, в течение 4-5 нед. после воздействия препарата.
2. Через 4-5 нед. после монотерапии эхинохромом А, на фоне коррекции системного свободнорадикального статуса, у детей с ХВЗЛ в стадии ремиссии наблюдались изменения субпопуляционного состава Т-лимфоцитов периферической крови: увеличение относительного содержания CD3+- и CD4+-клеток, снижение CD8+-клеток, рост иммунорегуляторного индекса.
3. Направленность эффектов эхинохрома А в отношении исследуемых параметров свободнорадикального и иммунного статусов свидетельствует о целесообразности применения препарата при ХВЗЛ в стадии ремиссии у детей.
Литература
1. Лебедько О. А., Гусева О.Е., Козлов В.К. Нарушения оксидативного метаболизма при хронических брон-хобструктивных заболеваниях легких у детей // Бюл. физиологии и патологии дыхания СО РАМН. - 2007. -№ 27. - С. 12-13.
2. Кривошапко О.Н., Попов A.M., Артюков А.А. Применение биоантиоксидантов при нарушениях липидного и углеводного обмена // Здоровье. Медицинская экология. Наука, 2009. - №4-5 (39-40). - С. 86-89.
3. Мищенко Н.П., Федореев С.А., Багирова В.Л. Новый оригинальный отечественный препарат «Гистохром» // Хим.-фармацевт. журнал. - 2003. - Т. 37, № 1. - С. 49-53.
4. Мищенко Н.П., Федореев С.А., Догадова Л.П. Препарат «Гистохром» для офтальмологии // Вестник ДВО РАН. - 2004. - №3. - С. 111-119.
5. Приезжева Е.Ю., Лебедько О.А., Рыжавский Б.Я. и др. Влияние введения нитрата свинца беременным крысам на почки их потомства // Дальнев. мед. журнал.
- 2007. - № 3. - С. 30-32.
Показатель Дети с ХВЗЛ в стадии ремиссии
до лечения после лечения отдаленные сроки после лечения
CD3+, % 59,28±0,6 62,2±1,2* 67,5±0,17*
CD4+, % 35,33±0,5 35,0±1,0 45,0±0,02*,**
CD8+, % 19,66±0,3 19,2±0,2 16,0±0,01*,**
CD4+/CD8+, ИРИ 1,89±0,05 1,8±0,04 2,78±0,01*,**
Примечания. * — р<0,05 по отношению к группе до лечения; ** — р<0,05 по отношению к группе после лечения.
6. Griffiths H.R. ROS as signalling molecules in Т cells-evidence for abnormal redox signalling in the autoimmune disease, rheumatoid arthritis // Redox. Rep. - 2005. - Vol. 10, №6. - P. 273-280.
7. Larbi A., Kempf J., Pawelec G. Oxidative stress modulation and Т cell activation // Exp. Gerontol. - 2007. -Vol. 42, №9. - P. 852-858.
8. Lebedev A.V., Ivanova M.V., Levitsky D.O. Echinochrome, a naturally occurring iron chelator and free radical scavenger in artificial and natural membrane systems // Life Sci. - 2005. - Vol. 76, №8. - P. 863-875.
9. Lebedev A.V., Ivanova M.V., Levitsky D.O. Iron chelators and free radical scavengers in naturally occurring polyhydroxylated 1,4-naphthoquinones // Hemoglobin. -2008. - Vol. 32, №1. - P. 165-179.
10. Papa S., Zazzeroni F., Pham C.G. et al. Linking JNK signaling to NF-kappaB: a key to survival // J Cell. Sci. -2004. - Vol. 117, Pt. 22. - P. 5197-5208.
11. Rada В., Leto T.L. Oxidative innate immune defenses by Nox/Duox family NADPH oxidases // Contrib. Microbiol.
- 2008. - Vol. 15. - P. 164-187.
12. Tsukahara H. Current status of redox markers in immunological and inflammatory diseases // Rinsho Byori.
- 2005. - Vol. 53, №8. - P. 759-767.
13. Verweij C.L., Gringhuis S.I. Oxidants and tyrosine phosphorylation: role of acute and chronic oxidative stress in T- and B-lymphocyte signaling // Antioxidants and Redox Signaling. - 2002. - Vol. 4, №3. - P. 543-551.
14. Williams M.S., Kwon J. Т cell receptor stimulation, reactive oxygen species and cell signaling // Free Radic. Biol. Med. - 2004. - Vol. 37, №8. - P. 1144-1151.
Координаты для связи с авторами: Козлов Владимир Кириллович — доктор мед. наук, профессор, директор НИИ охраны материнства и детства ДНЦ физиологии и патологии дыхания СО РАМН, тел.: 8-(4212)-98-05-91, e-mail: [email protected];
Козлов Максим Владимирович — гл. врач клинического подразделения НИИ охраны материнства и детства ДНЦ физиологии и патологии дыхания СО РАМН, тел.: 8-(4212)-98-05-91, e-mail: [email protected]; Лебедько Ольга Антоновна — доктор мед. наук, вед. науч. сотр., зав. клинико-диагностической лабораторией НИИ охраны материнства и детства ДНЦ физиологии и патологии дыхания СО РАМН, тел.: 8-(4212)-98-05-91, e-mail: [email protected]; Ефименко Марина Викторовна — ст. науч. сотрудник, зав. клинической лабораторией НИИ охраны материнства и детства ДНЦ физиологии и патологии дыхания СО РАМН, тел.: 8-(4212) 98-05-91, e-mail: [email protected]; Гусева Ольга Евгеньевна — науч. сотр. НИИ охраны материнства и детства ДНЦ физиологии и патологии дыхания СО РАМН, тел.: 8-(4212)-98-05-91, e-mail: [email protected];
Морозова Нина Викторовна — канд. мед. наук, доцент кафедры детских болезней педиатрического факультета ДВГМУ, тел.: 8-(4212)-32-63-93
□□□
УДК 616 - 053.2(571.56)
В.Г. Часнык1, Т.Е. Бурцева2, С.Л. Аврусин2, Г.Г. Дранаева1, В.П. Шадрин1, Е.В. Синельникова2
АНТРОПОМЕТРИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ДЕТЕЙ РЕСПУБЛИКИ САХА (ЯКУТИЯ)
Якутский научный центр комплексных медицинских проблем СО РАМН1,
677019, Сергеляхское шоссе, 4, г. Якутск;
Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия2, ул. Литовская, 2, г. Санкт-Петербург
Известная полигенность народов, населяющих суровые в климатическом и геофизическом отношении регионы Крайнего Севера, позволяет предположить наличие своеобразия антропометрических и физиологических характеристик популяции. Результаты исследований динамики физического развития детей на территориях Европейского и Азиатского севера Российской Федерации [1-3, 6, 7, 9-11] свидетельствуют о наличии этнических и региональных особенностей. Исследования последних лет [4, 5, 8] подтвердили наличие и этнически обусловленных особенностей физического развития и артериального давления у детей некоторых коренных малочисленных
народностей Ямало-Ненецкого автономного округа. В изданных ранее стандартах физического развития детей Республики Саха (Якутия) детально описаны рост, вес, артериальное давление детей малочисленных народов Севера, саха и русских в малой выборке, без построения центильных шкал [2, 9]. Особенности роста, веса детей коренных малочисленных народов Севера Якутии ранее детально не описаны.
Необходимость разработки нормативов антропометрических характеристик детей коренных национальностей, проживающих в регионах Крайнего Севера, была выявлена в ходе 13-летней работы выездных врачебных бригад в
