CC BY
17
32
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ
ным для диагностики, чем применение одного маркера, даже самого чувствительного, что позволяет с высокой точностью диагностировать опухолевый процесс.
Новая технология биочипов, позволяющая анализировать сыворотки крови больного по многим параметрам, позволит резко увеличить эффективность диагностики злокачественных новообразований.
Цель исследования. Разработка белкового микрочипа для определения следующих опухолевых маркеров: простатаспецифического антигена (ПСА), главного маркера рака простаты; альфа-фетопротеина (АФП), главного маркера рака печени; раковоэмбрионального антигена (РЭА), главного маркера рака толстой и прямой кишки; СА 125, главного маркера рака яичников; СА 19-9, главного маркера рака поджелудочной железы; СА 15-3, главного маркера рака молочной железы.
Методы. В работе использовали биочипы на основе гидрогелей, разработанные в ИМБ им. В. А. Эн-гельгардта РАН. Белковый микрочип представлял собой матрицу полусферических гелевых элементов, расположенных на предметном стекле. Диаметр гелевой капли составлял 50-300 мкм. Иммобилизацию антител в гелевые элементы проводили методом со-полимеризации. На биочипе проводили «сэндвич»-вариант иммуноанализа, при котором использовали
два специфических моноклональных антитела, одно из которых метили флуоресцентным красителем Су 3. Флуоресцентные сигналы от гелевых элементов микрочипа регистрировали с помощью специального анализатора, сопряженного с компьютером. Строили калибровочные кривые зависимости флуоресцентного сигнала от концентрации антигена в растворе и по этим кривым определяли концентрацию каждого антигена в сыворотке крови.
Результаты. С помощью микрочипа возможно определение малых концентраций ПСАобщ, РЭА, АФП, ПСАс во6 СА 19-9. Минимальная концентрация антигенов, определяемая в «сэндвич»-варианте иммуноанализа, составляла 0,5 нг/мл и менее. Сыворотки больных раком простаты были проанализированы с помощью нового белкового микрочипа, полученные данные сравнены с данными, полученными в стандартной тест-системе фир-мы Hoffman La Roche. Коэффициент корреляции для ПСА составил 0,99 (р< 0,01).
Заключение. Существует принципиальная возможность одновременного определения нескольких опухолевых маркеров на одном белковом микрочипе. Этот метод открывает возможность одновременного анализа сывороток больных с использованием многих опухолевых маркеров, что значительно расширяет возможности диагностики злокачественных новообразований.
ВЛИЯНИЕ СОКТООВАСТЕМиМ РАКУЦМ НА ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ АКТИВНОСТЬ ЦИСТОСТАТИКОВ
Н.С. Сапрыкина, А.М. Козлов ГУ РОНЦим. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
Цель исследования. Экспериментальная оценка влияния иммунномодификатора бактериального происхождения СОІШчГОВАСТЕШиМ РАРУІЖ (КОР) на противоопухолевую и антиметастатическую активность цитостатиков.
Методы. Исследование выполнено на мышах ВБР1 с подкожно трансплантированной карциномой легкого Льюис (ІХС). КОР , инактивированный нагреванием, (1 х105-106 клеток/мышь), вводили мышам п/к 5- кратно с интервалом 24 или 72 ч, начиная со 2-х сут опыта. Рубомицин (РУБ) в дозе 3,5 мг/кг, циспла-тин (ДДП) в дозах 8-10 мг/кг и циклофосфан (ЦФ) в дозах 100 - 300 мг/кг вводили животным в/бр однократно на 2-й день после прививки ІХС. ЦФ в дозе 20 мг/кг вводили мышам в/бр в те же сроки, что и КОР.
П/о и антиметастатический эффекты оценивали по общепринятым методикам.
Результаты. КОР при монотерапии не влиял на рост и метастазирование ІХС, При комбинированном приме-
нении КОР +РУБ эффективность цитостатика не усиливалась (торможение роста опухоли ТРО) в группах мышей, леченных РУБ и КОР +РУБ равно 63 % и 71 % соответственно). КОР не влиял также на п/о эффект ЦФ при всех использованных дозах и режимах введения ЦФ. При комбинированном применении с ДЦП КОР повышал уровень и продолжительность п/о эффекта цитостатика (максимальный уровень ТРО в группе мышей, леченных только ДДП, достигал 86 %, а леченных КОР +ДДП - 92 %). При этом в группе мышей, леченных ДДП и КОР + Д ДП, отмечено УПЖ на 20 % и 31 % соответс-венно. При более длительном введении иммунномодуля-тора (в течение всего опыта до начала гибели животных) УПЖ повышалось до 42 %. Влияния КОР на анти-метастатическое действие Д ДП не отмечено.
Выводы. Полученные результаты свидельствуют о способности СОКУКОВАСТЕШиМ РАКУНЫ, инактивированного нагреванием, повышать противоопухолевую активность цисплатина.
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
№2/томЗ/2004
