CC BY
14
УДК 616.314.17-008.1:612.112.3
ВЛИЯНИЕ БИОТЕХНОЛОГИЙ РЕПРОГРАММИРОВАНИЯ МАКРОФАГОВ НА ИНИЦИИРОВАННУЮ ВОСПАЛИТЕЛЬНУЮ РЕАКЦИЮ В ПАРОДОНТЕ МЫШЕЙ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)
'Румянцев В.А., 2Шиманский Ш.Л., 'Гаспарян М.Г., 'Асаян А.Г., 'Рябиков М.Д., 'Моисеев Д.А., 'Юсупова Ю.И.
'ФГБОУ ВО Тверской государственный медицинский университет Минздрава России, Тверь, Россия (170100, г. Тверь, ул. Советская, 4), e-mail: info@tvgmu.ru
2ФГБОУ ВО Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова Минздрава России, Москва, Россия (127473, г. Москва, ул. Делегатская, д. 20, стр. 1), e-mail: msmsu@msmsu.ru Целью исследования являлась проверка гипотезы о подавляющем действии макрофагов фенотипа М2 на воспаление в тканях пародонта лабораторных животных. Проведено экспериментальное исследование на 35 трехмесячных мышах - самцах линии C57BL/6J. Воспалительную реакцию тканей пародонта у мышей инициировали с помощью липополисахарида, выделенного от штаммов Porphiromonas gingivalis. С помощью «сывороточной» и «цитокиновой» биотехнологий получали культуры перитоне-альных макрофагов М1 и М2 фенотипов. Макрофаги подслизистой инъецировали в области пародонта верхней челюсти мышей, разделенных на 7 равных групп: 2 контрольных и 5 опытных. Оценку выраженности воспалительной реакции проводили по коэффициенту миграции лейкоцитов на поверхность десны и по степени окраски участков воспаленной десны йод-йодистым раствором. Обнаружено, что макрофаги, репрограммированные на М1 фенотип с помощью как «сывороточной», так и «цито-киновой» технологии, достоверно увеличивали воспаление в десне по всем оцененным показателям. Различия между этими технологиями не были статистически значимы. Напротив, макрофаги, репро-граммированные на М2 фенотип с помощью как «сывороточной», так и «цитокиновой» технологии, достоверно снижали воспаление в десне. Использование репрограммированных макрофагов с противовоспалительным М2 фенотипом может оказаться перспективным в разработке эффективных персонализированных подходов к терапии больных пародонтитом.
Ключевые слова: пародонтит, защитные реакции пародонта, биотехнологии репрограммирования макрофагов.
INFLUENCE OF MACROPHAGE REPROGRAMMING BIOTECHNOLOGYON THE INITIATED INFLAMMATORY REACTION IN THE PERIODONT OF MICE (PILOT STUDY)
'Rumyantsev V.A., 2Shimansky Sh.L., 'GassparyanM.G., 'Asayan A.G., 'RybikovM.D., 'Moiseyev D.A., 'Yusupova Y.I.
'Tver State Medical University, Tver, Russia (170100, Tver, Sovetskaya St., 4), е-mail: info@tvgmu.ru 2Moscow State Medical and Dental University by A.I. Evdokimov, Moscow, Russia (127473, Moscow, Delegatskaya St., 20, p. 1), е-mail: msmsu@msmsu.ru
The aim of the study was to test the hypothesis about the overwhelming effect of the M2 macrophages on inflammation in the periodontal tissues of the laboratory animals. 35 three-month C57BL/6Jmice-males were used in the pilot study. The inflammatory reaction of periodontal tissues in mice was initiated using Porp hiromonasgingivalislipopolysaccharide. Peritoneal М1 and М2 macrophages were cultured with the help of «serum» and «cytokine» biotechnologies. The macrophages were injected in the periodontal area of the upper jaw of the mice, divided into 7 groups: 2 control and 5 experimental. The severity of the inflammatory reaction was evaluatedaccording to the leukocyte migration index and the colorationdegree of the inflamed gums with iodine-iodide solution. The macrophages, reprogrammed on Ml phenotype with the help of both «serum» and «cytokines» technology, were found to significantly increase inflammation of the gums. The differences between these technologies were not statistically significant. On the contrary, the macrophages, reprogrammed on М2 phenotype by means of both «serum» and «cytokines» technology, reliably reduced inflammation in a gum. The use of programmed macrophages with anti-inflammatory M2 phenotype may be effectively used in treatment of patients with periodontal disease.
Key words: periodontitis, protective reactions of periodontal disease, biotechnology of the macrophage reprogramming.
Введение
В патогенезе пародонтита важную роль играют токсическое действие бактерий и ответная иммунная реакция [1]. Патогенность пародонто-специфиче-ских бактерий, таких как РогрЫготопа' gingivalis, связана с липополисахаридом (ЛПС) мембран этих бактерий. ЛПС активирует реакции системы комплимента и воспалительную активность иммунных
клеток, и прежде всего - макрофагов. Кроме того, па-родонтоспецифические бактерии выделяют разные токсические вещества, такие как Н^, а также гидролитические и протеолитические ферменты, включая коллагеназы. Эти ферменты разрушают ткани па-родонта и благодаря этому еще больше активируют моноциты и остеокласты, которые начинают продуцировать собственные тканевые коллагеназы [2]. Это
приводит к формированию порочного круга, который еще больше усиливает воспаление и повреждение окружающих тканей.
Таким образом, бактериальная инфекция и ответная чрезмерная воспалительная реакция иммунных клеток играют ключевую роль в патогенезе паро-донтита. В связи с этим разработка новых способов эффективного ограничения воспаления в тканях па-родонта является одной из приоритетных задач современной пародонтологии.
Интенсивность воспаления и продукция про-теиназ в значительной мере зависят от активности макрофагов. При этом макрофаги в зависимости от микроокружения могут приобретать либо провос-палительный М1, либо противовоспалительный М2 фенотип.
Имея ввиду все эти данные, мы предположили, что увеличение количества М2 макрофагов в зоне бактериального инфицирования может ограничить воспаление в тканях пародонта. Эту гипотезу косвенно поддерживают полученные нами ранее данные о том, что у мышей линии BALB/c с генетически детерминированным М2 фенотипом макрофагов, возможность развития воспаления в тканях пародонта существенно снижена по сравнению с мышами линии C57/BL6 с генетически детерминированным М1 фенотипом макрофагов [3].
Цель исследования заключалась в проверке гипотезы о подавляющем действии макрофагов фенотипа М2 на воспаление, индуцированное в десне лабораторных мышей с помощью липополисаха-рида штамма пародонто-специфических бактерий Porphiromonas gingivalis.
Для достижения цели мы решили две задачи: 1) репрограммировали макрофаги in vitro на М2 фенотип и 2) оценили in vivo влияние М2 макрофагов на ЛПС-индуцированное воспаление в десне мышей.
Материал и методы
Исследование проведено на 35 трехмесячных мышах - самцах линии C57BL/6J весом 22-24 г. Мыши были получены в питомнике животных «Ан-дреевка» (http://andreevka.msk.ru/index.htm). Эксперименты проводились в соответствии с рекомендациями ВОЗ для биомедицинских исследований (http:// www.cioms.ch/publications/guidelines/1985_texts_of_ guidelines.htm).
Воспалительный компонент пародонтита воспроизводили с помощью ЛПС, выделенного от штаммов Porphiromonas gingivalis (Sigma, США) [4]. Животных наркотизировали эфиром и инъецировали им ЛПС в дозе 40 мкг справа в десну в области верхней челюсти между первым и вторым малярами. Для контроля слева в десну верхней челюсти инъецировали между первым и вторым малярами физиологический раствор (PBS). Через 9б часов оценивали локальное воспаление с помощью функционального маркера - показателя миграции лейкоцитов на поверхность десны [5] и клинически - с помощью модифицированного индекса РМА.
Для оценки показателя миграции лейкоцитов мышь наркотизировали эфиром. Ватным тампоном брали мазок c десны и наносили на стекло. Затем стекло помещали в закрепитель (спирт) на 5 минут и после высушивали. Далее стекло помещали в краситель Романовского-Гимза на 30 мин. После окрашивания препарат промывали и высушивали. Под-
считывали количество лейкоцитов и эпителиальных клеток в 5 разных полях зрения. Коэффициент миграции лейкоцитов выражали как отношение лейкоцитов к числу эпителиальных клеток.
Макрофаги выделяли из перитонеальной жидкости мышей по методике Х. Zhang et al. [6]. Мышей наркотизировали хлоралгидратом (32,5 нг на 100 г массы тела, в/б). Перитонеальные макрофаги выделяли из перитонеального смыва с помощью центрифугирования при 1000 об/мин, 4 мин. Супернатант отделяли, а осадок ресуспендировали в среде RPMI-1640 с 10% сывороткой с 100 U/мл пенициллина и 100 цг/мл стрептомицина. После выделения макрофаги помещали в плоскодонные лунки 48-ми луночных культуральных планшетов в среде RPMI-1640 с 10% сывороткой (FBS) с 100 U/мл пенициллина и 100 цг/мл стрептомицина при 37°С и 5% СО2. Макрофаги распределяли из расчета 0,5 млн. клеток на лунку в 0,5 мл среды.
Для in vitro репрограммирования макрофагов были использованы две разных биотехнологии: «сывороточная» [7] и «цитокиновая» [8]. Кратко, при репрограммировании макрофагов с помощью «сывороточной» модели, макрофаги культивировали в течение 36 часов в бессывороточной среде для получения М1 фенотипа или при 40% сыворотки для получения М2 фенотипа. При репрограммиро-вании макрофагов с помощью «цитокиновой» модели макрофаги культивировали также в течение 36 часов, но в среде с нормальным содержанием сыворотки (10%) и добавлением в среду 20 нг/мл интер-ферона-гамма (IFN-y) для получения М1 фенотипа или интерлейкина-4 (IL-4) - 20 нг/мл для получения М2 фенотипа. Нерепрограммированные макрофаги имели М0 фенотип, они культивировались 36 часов в нормальных условиях 10% сыворотки без добавления репрограммирующих факторов (0 или 40% сыворотки, IL-4 или IFN-g).
Были сформированы 5 групп макрофагов:
Группа «М0» - макрофаги, которые культивировались в стандартных условиях c 10% FBS в течение 36 часов. Макрофаги этой группы использовали в качестве контроля.
Группа «М1-сыв» - макрофаги, которые культивировались 36 часов при 0% FBS.
Группа «М2-сыв» - макрофаги, которые культивировались 36 часов при 40% FBS.
Группа «М1-цит» - макрофаги, которые культивировались 36 часов при 10% FBS с добавлением IFN-y в концентрации 20 нг/мл.
Группа «М2-цит» - макрофаги, которые культивировались 36 часов при 10% FBS с добавлением IL-4 в концентрации 20 нг/мл.
Для снятия макрофагов со дна культуральной лунки использовали трипсин [9]. Из лунок с макрофагами удаляли старую среду и затем добавляли по 1 мл 0,25% раствора трипсина с 0,03% ЭДТА. Плашки инкубировали при 37°С в течение 3 мин. Затем плашки встряхивали. Дальше в каждую лунку, добавляли по 1 мл среды и плашку вновь встряхивали. Далее жидкость из лунки сливали в пробирку и добавляли в лунку 1 мл среды, еще раз встряхивали и сливали жидкость в ту же пробирку. Пробирки центрифугировали в течение 5 мин при 1000 об/мин. После этого надосадочную жидкость удаляли из пробирки, а к осадку макрофагов добавляли 1 мл среды и пипетировали до получения гомогенной суспензии
макрофагов. С помощью среды RPMI-1640 доводили концентрацию макрофагов до 1 млн. клеток/1 мл среды (раствор А).
Из раствора А готовили суспензию 250 тыс. макрофагов в 100 мкл PBS (раствор Б). После введения в десну слева ЛПС 40 мкг (для инициации воспаления) через 24 ч инъецировали 250 тыс. макрофагов в 100 мкл PBS. Были сформированы 7 групп мышей по 5 мышей в каждой:
1. «Контроль» - мыши, которым не вводили ни ЛПС, ни макрофаги (интактные мыши).
2. «ЛПС» - мыши, которым вводили ЛПС.
3. «ЛПС + M0» - мыши, которым вводили ЛПС, а через 24 часа М0 макрофаги.
4. «ЛПС + M1-сыв» - мыши, которым вводили ЛПС, а через 24 часа М1-сыв макрофаги.
5. «ЛПС + M1^m» - мыши, которым вводили ЛПС, а через 24 часа М1-цит макрофаги.
6. «ЛПС + M2-сыв» - мыши, которым вводили ЛПС, а через 24 часа М2-сыв макрофаги.
7. «ЛПС + M2^rn» - мыши, которым вводили ЛПС, а через 24 часа М2-цит макрофаги.
Для клинической оценки степени воспаления
десны у экспериментальных животных использовали адаптированный к данному исследованию индекс РМА, который оценивали после окрашивания десны йод-йодистым раствором Шиллера-Писарева. Результаты выражали в баллах от 0 до 3 в зависимости от площади поверхности десны, окрашенной раствором.
Статистический анализ проводили с помощью программы Statistica 8.0 (Statsoft). Данные представлены в виде средних значений полученных показателей (М) и их ошибок (±m).
Результаты и их обсуждение
Результаты оценки миграции лейкоцитов на поверхность десны в контроле, при экспериментальном пародонтите и при введении экзогенных макрофагов в зону воспаления представлены в таблице 1. Видно, что до введения ЛПС в десну, лейкоциты практически не обнаруживались на поверхности десны и коэффициент миграции был близок к нулю. Такая же картина наблюдалась через 96 часов в месте введения PBS (данные в таблице не представлены). Это означает, что сама процедура прокола десны и введения «носителя» не вызывает воспаления.
Таблица
Коэффициенты миграции лейкоцитов (Л/Э) на поверхность десны и клинический показатель степени ее воспаления (РМА) у экспериментальных животных в контроле, при экспериментальном пародонтите и при искусственном введении макрофагов в зону воспаления (М±т, р)
Группы мышей Коэффициент миграции лейкоцитов (отношение числа лейкоцитов и эпителиальнх клеток в отпечатке с десны, Л/Э) Модифицированный индекс РМА воспаления десны (баллы)
Контроль 0,08±0,02 0,03±0,01
р=0,002 p=0,001
ЛПС 0,21±0,02 0,20±0,05
р=0,002 p=0,02
ЛПС+М0 0,53±0,04 0,43±0,06
р=0,0001 p=0,0005
ЛПС+M1-сыв 1,32±0,13 1,11±0,10
р=0,58 p=0,41
ЛПС+M1-цит 1,42±0,11 1,24±0,14
р=0,00001 p=0,00001
ЛПС+M2-сыв 0,36±0,01 0,21±0,03
р=0,06 p=0,43
ЛПС+M2-цит 0,41±0,02 0,18±0,02
Через 96 часов после введения пародонтоспеци-фического ЛПС отмечалась миграция лейкоцитов на поверхность десны мышей со средним коэффициентом миграции 0,21±0,02. Это явление характеризует начальную воспалительную реакцию при экспериментальном пародонтите.
Дальше данные таблицы показывают, что после введения в область воспаления нерепрограммирован-ных М0 макрофагов коэффициент миграции лейкоцитов увеличился. С большой вероятностью это связано с тем, что в этом случае на поверхность десны также выходят и введенные М0 макрофаги, которые под микроскопом подсчитываются как лейкоциты. Другими словами, при световой микроскопии при подсчете мигрировавших лейкоцитов (показатель воспаления) нет возможности различить вышедшие в область воспаления собственные лейкоциты мыши и экзогенные макрофаги, введенные нами в десну. Это обстоятельство делает целесообразным использовать группу «ЛПС+М0» в качестве группы сравнения при
оценке эффектов М1 и М2 макрофагов. Такой подход является допустимым, поскольку во всех группах с введенными макрофагами вводилось одно и то же количество макрофагов, и соответственно на показатель воспаления могла влиять лишь функциональная активность введенных макрофагов. Коэффициент миграции лейкоцитов в группе «ЛПС+М0» составлял в среднем 0,53±0,04. Именно это значение мы использовали как значение сравнения при оценке про- и антивоспалительного действия М1 и М2 макрофагов. Такое сравнение средних значений показателей между группами «ЛПС+М0» и «ЛПС+М2-сыв» показало величину р=0,004, а между группами «ЛПС+М0» и «ЛПС+М2-цит» - р=0,03. То есть имелось достоверное влияние макрофагов фенотипа М2 на коэффициент миграции лейкоцитов.
Дальше был получен главный результат работы. Макрофаги, репрограммированные на М1 фенотип с помощью как «сывороточной», так и «цитокиновой» технологии, достоверно увеличивали воспаление в
десне по показателю миграции лейкоцитов. Различия между этими технологиями не были статистически значимы. Напротив, макрофаги, репрограммирован-ные на М2 фенотип с помощью как «сывороточной», так и «цитокиновой» технологии, достоверно снижали воспаление в десне.
Полученные данные о выраженности степени воспаления в десне экспериментальных животных были также подтверждены показателями, полученными с помощью модифицированного индекса РМА (таблица). Клинически наиболее выраженное воспаление наблюдали у мышей групп «ЛПС+М1-сыв» и «ЛПС+М1-цит». Также не обнаружено статистически значимых различий между «сывороточной» и «цитокиновой» технологиями репрограммирова-ния макрофагов. Введение в десну мышей макрофагов фенотипа М2 способствовало уменьшению клинических признаков воспаления десны. Так, при сравнении средних значений показателя в группах «ЛПС+М0», «ЛПС+М2-сыв» и «ЛПС+М2-цит» показало значения р=0,04 и р=0,006 соответственно.
Несмотря на определенный прогресс в разработке способов лечения и профилактики пародонти-та, число людей с этим заболеванием не снижается. Это означает, что патогенез пародонтита до конца не изучен, а методы лечения недостаточно эффективны. Существующая концепция патогенеза пародон-тита предполагает ведущую роль бактерий, таких как Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Treponema denticola и разных факторов риска, как например, плохая гигиена, наличие ретенционных зон в полости рта, снижение общего иммунитета и др. Па-тогенность этих бактерий, как предполагается, связана с прямым токсическим действием и/или с инициацией воспаления в тканях пародонта [10].
Наше исследование было сконцентрировано на возможности ограничения воспаления с помощью репрограммированных на противовоспалительный М2 фенотип макрофагов тканей пародонта.
Использование репрограммированных макрофагов с антивоспалительным М2 фенотипом может оказаться весьма перспективным в разработке эффективных персонализированных подходов к терапии больных хроническим и острым пародонтитом. Однако для полного доказательства роли М2 макрофагов в повышенной устойчивости тканей пародонта к воспалению необходимо продолжить оценку антивоспалительного эффекта М2 макрофагов в десне по дополнительным критериям воспаления, например, в гистологических исследованиях [11] и/или по оценке про- и противовоспалительных цитокинов [12].
Продолжение таких исследований в клинике позволит инициировать новое направление стоматологии - лечение пародонтита с помощью фармакологической или биотехнологической коррекции функционального фенотипа макрофагов.
Выводы
Полученные результаты позволяют сделать три важных вывода:
1. Репрограммированные на М1 фенотип макрофаги усугубляют воспаление в тканях пародонта, индуцированное пародонтоспецифическим ЛПС.
2. Репрограммированные на М2 фенотип макрофаги снижают выраженность воспалительной реакции, индуцированной пародонтоспецифическим ЛПС.
3. Эффект репрограммированных макрофагов не зависит от способа репрограммирования фенотипа и достоверно не различается при репрограммиро-вании макрофагов с помощью «сывороточной» или «цитокиновой» модели.
Литература/References
1. Ушаков Р.В., Царев В.Н. Антимикробная терапия в стоматологии (Принципы и алгоритмы). М.: Практическая медицина. 2019. 238 с. [Ushakov R.V., Tsarev V.N. Antimicrabnaya terapiya v stomatologii (Printsipy i algoritmy) Moscow: Practical Medicine. 2019. 238 p. (In Russ.)]
2. Hansen H.B. Role of matrix metalloproteinases in human periodontal diseases. J. Periodontol. 1993; 3:474-483.
3. Martinez F.O., Sica A., Mantovani A., Locati M. Macrophage activation and polarization. Front Biosci. 2008; 1 (13): 453-461.
4. Jiang H., Chen W., Zhu G. et al. RNAi-mediated silencing of Atp6i and Atp6i haploinsufficiency prevents both bone loss and inflammation in a mouse model of periodontal disease. PLoS One. 2013; 8 (4): e58599.
5. Кузнецов Е.В., Царев В.Н. Терапевтическая стоматология: учебное пособие. М.: МЕД-пресс-информ. 2003. [Kuznetsov EV, Tzarev VN. Terapevticheskaya stomatologiya: the textbook. Moscow: Medpress-Inform. 2003. (In Russ.)]
6. Zhang X., Goncalves R., Mosser D.M. The isolation and characterization of murine macrophages. Curr. Protoc. Immunol. 2008. chapter: unit-14.1.
7. Лямина С.В., Веденикин Т.Ю., Бородови-цына О.А., Суворова И.А., Шимшелашвили Ш.Л., Круглов С.В., Малышев И.Ю. Репрограммирование механизмов синтеза оксида азота у М1 и М2 фенотипов перитонеальных макрофагов мышей in vitro в присутствии разных концентраций сыворотки // Медицинская иммунология. 2012. № 1-2. Том 14. С. 127-132. [Liamina S.V., Vedenikin T.Yu., Borodovitsina
0.A., Suvorova I.A., Shimshelashvili Sh.L., Kruglov S.V, Malyshev I.Yu. Reprogramming of the mechanisms of synthesis of nitric oxide in M1 and М2 phenotypes of peritoneal macrophags of mice in vitro in the presence of different serum concentrations. Meditsinskaya immunologiya. 2012; 14 (1-2): 127-132. (In Russ.)]
8. Лямина С.В., Круглов С.В., Веденикин Т.Ю. Бородовицына О.А., Суворова И.А., Шимшелашвили Ш.Л., Малышев И.Ю. Альтернативное репрограмми-рование М1/М2 фенотипа перитонеальных макрофагов мышей in vitro с помощью интерферона-гамма и интерлейкина-4 // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2011. № 4. С. 235-242. [Liamina S.V, Kruglov S.V, Vedenikin T.Yu., Borodovitsina O.A., Suvorova
1.A., Shimshelashvili Sh.L., Malyshev I.Yu. Alternative reprogramming of M1/M2 phenotypes of peritoneal macrophags of Mice In vitro with the help of gamma-interferon and interleukin -4. Kletochnye tekhnologii v biologii i meditsine. 2011; 4: 235-242. (In Russ.)]
9. Rey-Giraud F., Hafner M., Ries C.H. In vitro generation of monocyte-derived macrophages under serum-free conditions improves their tumor promoting functions. PLOSone. 2012; 7 (8): e42656.
10. Nisengard R., Bascones A. Bacterial invasion in periodontal disease: A workshop. J. Periodontol. 1987; 58: 331-332.
11. Юсупова Ю.И., Румянцев В.А., Шиманский Ш.Л., Егорова Е.Н., Будашова Е.И. Влияние репро-
граммирования макрофагов на морфофункциональ-ные изменения тканей пародонта у больных хроническим пародонтитом // Вятский медицинский вестник. 2018. № 2(58). С. 76-80. [Yusupova Yu.I., Rumyantsev VA., Shimanskiy Sh.L., Egorova E.N., Budasova E.I. Influence of the reprogramming of macrophages on morphofunctional changes of periodontal tissues in patients with chronic periodontitis. Vyatskii meditsinskii vestnik. 2018; 58 (2): 76-80. (In Russ.)]
12. Румянцев В.А., Шиманский Ш.Л., Будашова Е.И., Юсупова Ю.И., Афоненкова В.С., Моисеев Д.А. Современная концепция поляризации макрофагов и ее значение для пародонтологии (обзор литературы) // Пародонто-логия. 2018. № 3. С. 64-69. [Rumyantsev VA., Shimanskiy Sh.L., Budashova E.I., Yusupova Yu.I., Aphonenkova VS., Moiseev D.A. The modern concept of polarization of macrophages and its significance for Periodontology (literature review). Parodontologiya. 2018; 3: 64-69. (In Russ.)]
УДК 613.2.03-616-093/-098
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ОЧИСТКИ ЗУБОВ ЗУБНЫМИ ЩЕТКАМИ И ЗУБНЫМИ ТРЕНАЖЕРАМИ
ЯковлеваМ.В., Поздеев О.К., Морозова Л.Г., Ксембаев С.С., Салахов А.К.
ФГБОУ ВО Казанский государственный медицинский университет Минздрава России, Казань, Россия (420012, г. Казань, ул. Бутлерова, 49), e-mail: albert-salahov@yandex.ru
Кариес зубов и заболевания тканей пародонта являются самыми распространенными заболеваниями. В полости рта создаются благоприятные условия, такие, как влажность и температура, наличие пищевых остатков для колонизации и размножения различных микробов. На уровень гигиенического состояния рта также влияет и снижение жевательной нагрузки. Для компенсации жевательной нагрузки нами был разработан зубной тренажер.
Цель исследования: определение эффективности очистки зубов с помощью зубных щеток и зубных тренажеров путем оценки микробной обсемененности.
Определена микробная обсемененность ротовой жидкости у 30 детей, разделенных на 3 группы: 1-я -стандартная чистка зубов; 2-я группа - использование жевательной резинки; 3-я - использование зубного тренажера, а также смывов с 5 головок зубных щеток и 5 зубных тренажеров. Определялось общее содержание мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов (600 измерений). Определялись средние величины с расчетом среднеквадратичных отклонений. После использования зубных тренажеров (группа 3) общая микробная обсемененность ротовой жидкости увеличилась в среднем в 2 раза (р<0,01), в 1-й группе (после стандартной чистки зубов) - в 1,7 раза, а во второй группе (после использования жевательной резинки) - в 1,4 раза (р<0,05). При сравнении полученных показателей у представителей трех групп достоверное различие установлено только между показателями 2-й и 3-й групп (р<0,05). Установлено достоверное (р<0,001) преобладание общего микробного числа на использованных зубных щетках в отличие от использованных зубных тренажеров в 1,75 раза. Установлено, что зубочелюстной тренинг, как и стандартная чистка, приводит к очищению поверхности зубов от микробного налета. Использование зубного тренажера в дополнение к стандартной чистке зубов способствует повышению уровня индивидуальной гигиены полости рта.
Ключевые слова: зубной тренажер, зубная щетка, микробная обсемененность, индивидуальная гигиена рта.
COMPARATIVE EVALUATION OF THE EFFECTIVENESS OF CLEANING TEETH WITH A TOOTHBRUSH AND DENTAL EQUIPMENT
Yakovleva M.V., Pozdeev O.K., Morozova L.G., Kembaev S.S., Salakhov A.K.
Kazan State Medical University, Kazan, Russia (420012, Kazan, Butlerov St., 49), e-mail: albert-salahov@yandex.ru
Dental caries and periodontal diseases are the most common. Appropriate humidity and temperature as well as presence of food pieces in the mouth favour colonization and reproduction of various microbes. also affects the hygienic condition of the oral cavity. To compensate for the reducedmastication, a dental simulatorhas been developed.
The purpose of the research is todetermine the effectiveness of tooth cleaning with toothbrushes and dental simulators by assessing microbial contamination.
Microbial contamination of the oral fluid in 30 children has been determined.The childrenwere divided into 3 groups.Group 1 used standard teeth cleaning; group2 used a chewing gum; group3 used a dental simulator. Microbial contamination of the oral fluidwas confirmed by washes from 5 toothbrushes and 5 dental simulators. The total number of mesophilic aerobic and facultatively anaerobic microorganisms has been determined (600 calculations). The average with calculation of standard deviation have been determined. The total microbial countinthe oral fluid has increased in group 3 on average twice, if compared with the microbial concentration before the use of dental simulators (p<0.01), while in group 1 (after standard brushing)-by 1.7 times, and in group 2(after the use of a chewing gum) - by 1.4 times (p<0.05). When comparing the obtained indicators in
