CC BY
42
УДК 619:616.995.121
ВЛИЯНИЕ АНТИГЕЛЬМИНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ НА АКТИВНОСТЬ ФРУКТОЗОБИСФОСФАТАЗЫ Bothriocephalus scorpii (Cestoda: Bothriocephalidae)
Э.А. БУРЕНИНА доктор биологических наук
Биолого-почвенный институт ДВО РАН,
690022, Владивосток, пр. 100-летия Владивостока, 159, тел. (4232) 312341,
e-mail: [email protected]
Изучены активность и свойства фруктозобисфос-фатазы (ФБФаза) митохондриальной, микросомаль-ной фракциях, цитозолях 12 тыс. g. и 105 тыс. g цестод Bothriocephalus scorpii. Фермент обладает высоким сродством к субстрату, требует присутствия двухвалентных катионов (Mg или Mn ). Изучено влияние различных эффекторов и катионов на активность фермента. Испытано действие ряда антигельминтиков на активность ФБФазы. Эффективными препаратами в цитозольной фракции являются ацемидофен и пра-зиквантел, в митохондриальной - битионол и оксинид.
Ключевые слова: цестода, Bothriocephalus scorpii,
фруктозобисфосфатаза, цитозоль, митохондрия, микросома, антигельминтные препараты.
Адаптация гельминтов к паразитическому образу жизни изменила соотношение затрат энергии на различные функции. У гельминтов отсутствуют затраты на поддержание температуры тела, так как они имеют температуру тела хозяина, энергетические расходы на мышечную деятельность тоже невелики, так как ведут малоподвижный образ жизни, а органы фиксации (присоски, крючья) позволяют противостоять перистальтике кишечника. Большая часть энергии расходуется на биосинтез, поддержание процессов жизнедеятельности. Энергия для поддержания жизни гельминтов освобождается во время диссимиляции органических веществ, в первую очередь сахаров. Превращение глюкозы в пируват представляет собой центральный путь в катаболизме углеводов. В глюконеогенезе действует обходной путь с участием фермента фруктозобисфосфатазы (ФБФазы), который катализирует практически необратимый гидролиз фруктозо-1,6-бисфосфата с отщеплением фосфатной группы. ФБФаза, являясь ключевым энзимом глюконеогенеза, была продемонстрирована во многих организмах. Ученые, изучая 40 видов позвоночных и беспозвоночных, обнаружили у различных видов Bombus исключительно высокую активность ФБФазы в летательных мышцах. Общая активность фермента была иногда в 40 раз выше, чем в тканях позвоночных [7, 24]. Фермент был обнаружен и во многих гельминтах: в нематодах Ascaris lumbri-coides [4, 5, 22], Litomosoides carinii [23], Caenorhabditis elegans [20], Setaria cervi [8]; в трематодах Fasciola hepatica [21], Gastrothylax crumenifer, Srivasta-vaua indica, Isoparorchis hypselobagri [27]; цестодах Bothriocephalus gowkon-gensis, Khawia sinensis, Schistocephalus solidus, Triaenophorus crassus [10], Moniliformis dubius [13].
Целью настоящей работы было изучение активности и свойств ФБФаз в различных субклеточных фракциях у цестод Bothriocephalus scorpii из отряда
80
Pseudophyllidea Cams, 1863, сем. Bothriocephalidae Blanch, 1849, паразитирующих в пилорических придатках бычка Брандта (Myoxocephalus brandti) из залива Петра Великого, а также установление возможности ингибирования активности ФБФазы некоторыми препаратами, обладающими антмгельминт-ной активностью.
Материалы и методы
Ботриоцефалов собирали из живых бычков на сейнерах и доставляли в лабораторию в термосах в растворе Рингера. Для приготовления ферментных экстрактов B. scorpii целиком гомогенизировали с 10 объемами среды выделения при рН 7,5 по методике, описанной ранее [26]. Гомогенат центрифугировали 15 мин при 1000 g и температуре 1 оС. Надосадочную жидкость центрифугировали 30 мин при 12 000 g - получили цитозольную фракцию. Митохондрии промывали средой выделения при 12 000 g в течение 30 мин. Для получения микросо-мальной фракции цитозоль центрифугировали при 105 000 g в течение 1 ч.
Концентрации ионов, субстрата, ферментного экстракта, буфера и рН были выбраны такими, которые обеспечивали бы наиболее высокую скорость реакции в эксперименте. Инкубационная среда для определения ФБФазы (Д-фруктозо-1,6-бисфосфат-1-фосфогидролаза [НФ 3.1.3.11] была следующего состава (мМ): 50 трис-HCl буфера, 0,25-2,5 MgCl2, 0,01-8,0 MnCl2, 40 ФБФ. Объем пробы 1,2 мл, количество фермента 0,1-0,15 мг. Перед добавлением ФБФ пробы преинкубировали в водяной бане при 37 оС в течение 10 мин. После добавления ФБФ пробы инкубировали 30 мин, реакцию останавливали добавлением 0,5 мл 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ) и охлаждением на льду. В контрольные пробы белок вносили после добавления 20%-ного раствора ТХУ. Пробы центрифугировали 15 мин при частоте вращения 4 000 мин-1. В надосадочной жидкости измеряли содержание неорганического фосфора по Кочетову [2], определение белка проводили по Лоури [16]. Антигельминтные препараты растворяли в 96%-ном этаноле и вносили в опытную пробу в объеме 0,1 и 0,2 мл. Параллельно, чтобы исключить ингибирующее влияние этанола на фермент, ставили контроль на спирт. Активность фермента выражали в нмолях Р в мин на мг белка.
Результаты и обсуждение
Фруктозобисфосфатазная активность в субклеточных фракциях B. scorpii изучена впервые. Для определения ФБФазной активности подбирали такие концентрации субстрата, катионов, ферментного белка и величину рН, при которых скорость реакции была максимальной. Отчетливый максимум ФБФазной активности во всех субклеточных фракциях B. scorpii находится в области 8,0. У беспозвоночных оптимум рН фермента находится в пределах 7,5-7,6 [1, 7, 24]. Для гельминтов A. lumbricoides [5, 22], C. elegans [20], M. dubius [13], S. solidus [11], Strongyloides ratti [12] оптимум рН составляет 7,0, для Moniezia expansa - 8,0 [6], S. servi - 8,6-8,8 [3, 8], F. hepatica - 8,7 [21], Bunostomum trigonocephalum - 9,4 [14]. Такой разброс оптимумов рН у гельминтов обусловлен, по-видимому, особенностями ФБФаз, а также вариабельностью условий, при которых исследовали ФБФазную активность.
ФБФазная активность исследована во всех субклеточных фракциях B. scorpii и распределена следующим образом (табл. 1). Наибольшая ФБФазная активность была локализована в микросомальной и митохондриальной фракциях. Реакция требует присутствия двухвалентных катионов (Mg2+ или Mn2+). Как видно из таблицы 1, активность фермента с Mg2+ выше во всех субклеточных фракциях, чем с Mn2+. Анализируя литературные данные, можно сделать вывод, что ФБФазу изучали в основном в гомогенатах и цитозолях 12 тыс. g и 105 тыс. g [3, 6 ,9, 11, 12, 20-22, 25]. В онкосферах и цистицеркоидах
H. diminuta [17], плероцеркоидах T. crassus [10] и мирацидиях F. hepatica
81
[18] ФБФаза не обнаружена. Уменьшение активности фермента в личиночных стадий гельминтов отмечали у C.elegans [20], а в цистакантах M. dubius [13] и в личинках A. lumbricoides [22] активность была выше, чем во взрослых. В свободноживущих личинках 3-й стадии B. trigonocephalum [14] активность фермента была почти на уровне с активностью у самок. Оценка мышечной энзиматической активности показывает большие различия от вида к виду и не простую корреляцию между ФБФазой и функциональными аспектами физиологии мышц.
1. Распределение активности и кинетические параметры фруктозобисфосфа-___________таз в субклеточных фракциях Bothriocephalus scorpii _______
Исследуемая Катион Активность Субстрат (ФБФ) Катион
фракция кщ V y max кщ
Цитозоль 12 тыс. g Mg2+ Mn 149,7±б,2 35,3±1,9 33,33 20,0 266,S 55,6 0,31 51,3
Цитозоль 105 тыс. g Mg2+ Mn 4б,0±1,9 39,8±б,б 100,0 20,0 266,7 47,6 5,0 6,7
Mитохондрии Mg2+ Mn 4 4 4 4 0, б, ± ± 4, б, 1 0 50.00 20.00 1052,6 S69,7 0,2
Mикросомы Mg2+ Mn 539,1±70,4 443,1±22,2 12,12 16,7 S33,3 6S9,6 0,09
Примечание. Активность выражена в нмолях Р/мин/мг белка, Кт - в мМ, Утах -в нмолях Р/мин/мг белка; концентрация ФБФ во всех экспериментах - 40 мМ.
Скорость энзиматической реакции зависит от концентрации субстрата, которым служит фруктозобисфосфат (ФБФ). В отсутствие субстрата активность фермента во всех субклеточных фракциях B. scorpii не отмечают. Скорость реакции растет с количеством добавленного субстрата, оставаясь постоянной при концентрации его в пробе 40 мМ во всех субклеточных фракциях с ионами Mg и Mn . По данным литературы, ферменты разных исследуемых тканей нуждаются в различных количествах ФБФ: ФБФазе A. lumbri-coides, C. elegans, S. ratti, M. dubius [5, 12, 13, 20, 22] требовалось 10 мкМ, F. hepatica [21] - 1мМ, летательных мышц шмеля, M. expansa, D. dendriticum -
0,1 мМ ФБФ [6, 9, 19,], S. solides, S. cervi - 10 мМ [3, 11], B. trigonocephalum -50 мМ ФБФ [14]. Высокие уровни ФБФ ингибируют энзим из взрослых и личинок A. lumbricoides - выше 20 мМ [22].
ФБФаза, являясь одним из ключевых регуляторных ферментов, для проявления активности требует присутствия двухвалентных катионов (Mg и Mn2+). У B. scorpii в цитозоле 12 и 105 тыс. g насыщение ионами Mg2+ наступало при 2,5 мМ, ионами Mn2+ - при 8 мМ; в митохондриях и микросомах B. scorpii насыщение ионами Mn2+ наступало при 0,01 мМ, а насыщение ионами Mg - при 0,25 и 0,3 мМ соответственно. В отсутствии иона Mg активность фермента уменьшалась в цитозоле 12 тыс. g на 38,4 %, в цитозоле 105 тыс. g - на 28, в митохондриях - на 6,7, в микросомах - на 4,2 %. Зависимость величины Km ФБФаз в различных субклеточных фракциях B. scorpii от присутствия двухвалентных катионов приведена в таблице 1. По данным литературы, ФБФ у гельминтов S. cervi, A .lumbricoides, C. elegans, S. solidus, S. ratti, M. dubius, F. hepatica, D. dendriticum, M. expansa изучали в основном с добавлением Mg2+ [3, 5, 6, 8, 9, 11-13, 20-22]. В самках, самцах и личинках 3-й стадии B. trigonocephalum [14] фермент изучали с ионами Mg2+ и Mn2+. Таким образом, для проявления ФБФазной активности требуется присутствие ионов Mg2+ или Mn2+.
Интересно было выяснить, как различные эффекторы и катионы влияют на активность ФБФаз B. scorpii в различных субклеточных фракциях. Результаты исследований приведены в таблице 2. Природа ингибирования фермента АМФ предполагает, что ФБФаза принадлежит к классу аллостерических эн-
82
зимов и модуляция ее активности имеет важное значение в регуляции углеводного обмена. Фермент B. scorpii в реакции с ионами Mn2+ интенсивно ингибирован АМФ в цитозоле 105 тыс. g, митохондриях и микросомах, а в реакции с ионами Mg - в цитозоле 12 тыс. g и митохондриях. Физиологические уровни АМФ могут вызывать значительное ингибирование ФБФазы F. hepatica [15, 21], D. dendriticum [9], мышц и личинок A. lumbricoides [22]. При низкой концентрации АМФ, что соответствует высоким концентрациям АТФ, клетка может понизить интенсивность гликолиза и переключиться на регенерацию глюкозы из предшественников с меньшей молекулярной массой. Когда система переключается на глюконеогенез, снижение содержания АМФ ведет к деингибированию ФБФазы.
Было исследовано влияние одновалентных катионов (K+, Na+, Li+ и NH4+) на активность ФБФаз B. scorpii во всех субклеточных фракциях (табл. 2). Катион Li+ ингибировал активность фермента во всех субклеточных фракциях, катионы Na+ и K+ - в цитозолях 12 тыс. g и 105 тыс. g, катион NH4+ - в цитозоле 105 тыс. g и микросомах. Фермент из летательной мышцы шмеля был ингибирован Li+ на 95 % и менее интенсивно катионом Na+ - на 50 %. Энзимы из летательной мышцы водяного клопа, саранчи, мышцы ноги таракана и лягушки были ингибированы Li+ на 60, 83, 78 и 50 % соответственно; катион Na+ менее интенсивно ингибировал фермент из этих мышц, а эффект K+ был незначительным [19]. Данных по ингибированию ФБФазы у других гельминтов не обнаружили.
Двухвалентные катионы Cu2+ и Zn2+ ингибировали активность ФБФаз B. scorpii во всех субклеточных фракциях в реакциях с Mg2+ и Mn2+ (табл. 2). Катион цинка - наиболее сильный ингибитор фермента. Наши данные согласуются с данными, полученными на летательной мышце шмеля Bumble-Bee, фермент ингибирован на 95 % [19].
2. Влияние различных эффекторов на активность фруктозобисфосфатаз в _______________ различных ^ фракциях B. scorpii (в %) _____________
Инкубационная среда Цитозоль 12 тыс. g Цитозоль 105 тыс. g Митохондрии Микросомы
g + Mn2+ Mg2+ Mn2+ g + Mn2+ Mg2+ Mn2+
+ Cu2+ 10 мМ -81,4 -42,5 -86,5 -12,0 -100 -100 -92,5 -97,0
+ Zn2+ 1,5 мМ -58,0 -100 -100 -100 -77,0 -90,2 -73,5 -100
+ К+ 100 мМ +13,9 -55,8 -80,5 -24,3 +11,8 +27,2 +36,1 +33,6
+ Na+ 50 мМ -33,7 -76,7 -86,0 -100 +50,8 -16,6 +1,8 -23,0
+ Li+ 1,5 мМ -20,0 -59,1 -71,4 -75,6 -68,0 -31,6 -41,1 -31,4
+ NH4+ 2 мМ +35,0 -55,4 -84,0 -36,1 +18,3 -2,7 +31,9 +30,4
+ АМФ 3мМ -42,7 -6,7 +88,3 -100 -55,0 -100 +170,3 -51,6
+ АДФ3 мМ -100 +9,0 +127,5 +53,8 -36,7 -2 -100 -14,3
+ АТФ 3 мМ -50,0 +81,7 +23,4 +68,0 +3,3 -76,7 +42,4 -92,0
+ Цитрат 10мМ -30,2 -69,7 +35,5 -34,8 -43,1 -58,0 -100 72,5
+ ДТТ 0,1 мМ +24,8 -52,2 -52,1 +32,4 -26,5 +23,5 -13,1 +8,2
+ ПХМБ 5мМ +71,6 -34,6 -14,8 -100 +56,9 -100 +32,8 -16,0
+ ЭДТА 0,2 мМ -68,0 -67,0 -69,0 -100 -71,7 -63,6 -75,5 -76,9
+ NaF 10мМ -57,7 -77,6 -79,9 -53,0 -51,3 -51,6 -53,1 -73,5
Для стимуляции активности ФБФазы некоторые авторы вносили в инкубационную среду Ь-цистеин [3, 9]. Мы исследовали влияние Ь-цистеина в концентрации 5 мМ на ФБФазу B. scorpii в реакции с Mg2+ и обнаружили, что фермент в цитозоле 12 тыс. g был ингибирован на 81,6 %, в цитозоле 105 тыс. g - на 86,6, в митохондриях - на 94,0 и в микросомах - на 91,1 %. Поэтому мы его не вносили в инкубационную среду. Фторид натрия и ЭДТА ингиби-
83
ровали ФБФазу B. scorpii во всех субклеточных фракциях в реакциях с Mg2+ и Мп2+. В поддержании активности ФБФаз существенную роль играют 8И-группы фермента. Так, парахлормеркурибензоат (ПХМБ), являясь ингибитором сульфгидрильных групп ферментов, ингибировал фермент из B. scorpii, но незначительно, а в некоторых фракциях даже активировал. Дитиотрейтол (ДТТ), являясь сульфгидрильным реагентом, ингибировал ФБФазу B. scorpii в цитозоле 105 тыс. g, митохондриях и микросомах в реакции с Mg2+, в цитозоле 12 тыс. g в реакции с Мп2+, а в остальных фракциях - активировал. Цитрат ингибировал активность фермента во всех фракциях B. scorpii, кроме фермента цитозоля 105 тыс. g в реакции с М^+.
Подводя итог проведенным экспериментам, можно сделать вывод, что все субклеточные фракции B. scorpii обладают ФБФазной активностью. Особенности свойств ФБФазы тканей B. scorpii свидетельствуют о наличии активного глюконеогенеза - упорядоченного процесса, объединенного регуляторными системами с циклом трикарбоновых кислот, гликолизом и системой окисления жирных кислот. Свойства ФБФаз из различных гельминтов аналогичны свойствам фермента из позвоночных. Условия обитания и питания B. scorpii (паразит не имеет пищеварительной системы и питается через покровы) сказались на характере ферментативных процессов. Это является одним из признаков адаптации всей ферментативной системы к условиям среды обитания. ФБФаза B. scorpii обладает высоким сродством к субстрату, но ингибируется его высокими концентрациями. Фермент требует присутствия двухвалентных катионов (Mg2+ или Мп2). Сравнительное изучение ФБФаз у гельминтов из разных классов и с разной локализацией могло бы дать интересный материал для понимания биохимической эволюции при адаптации к паразитизму.
Испытано действие ряда антигельминтных препаратов из разных групп активных соединений на активность ФБФаз в цитозольной и митохондриальной фракциях B. scorpii. Результаты исследований приведены в таблице 3. Среди средств лечения цестодозов заслуживает внимания празиквантел, обладающий высокой активностью по отношению к молодым и половозрелым цестодам. Действие антигельминтных препаратов на активность ФБФаз изучал Кумар [14]: он испытал влияние 15 препаратов (в т. ч. празиквантела) на активность 8 ферментов у самок, самцов и свободноживущих личинок B. М-gonocephalum. Празиквантел на активность ФБФаз не оказывал никакого влияния. Других данных по влиянию антигельминтиков, изучаемых нами, на активность ФБФаз не обнаружили.
3. Влияние антигельминтных препаратов на активность ФБФ ________________B. scorpii (в ^ ' от контроля ) ________
Антигельминтный препарат (10-4М) Цитозоль 12 тыс. й с Mg + Митохондрии с Mg2+ Митохондрии с Mn2+
Битионол -42,2 -70,4 -16,0
Оксинид -8,8 -80,0 -86,3
Г-937 -38,5 -0,8 -33,4
Г-1028 -10,3 -16,0 -15,4
Празиквантел -65,0 +10,3 +5,2
Трихлорофен -17,0 -3,5 -32,6
Ацемидофен -78,0 +17,7 -10,7
Тиабендазол -23,0 +0,5 -12,0
Фенбендазол -23,7 +12,2 +1,4
Политрем -64,5 -1,4 -15,4
Анализируя данные о действии антигельминтных препаратов на ФБФаз-ную активность B. scorpii, можно сделать вывод, что наиболее эффективными
84
препаратами при ингибировании фермента являются в цитозольной фракции ацемидофен и празиквантел, а в митохондриальной - битионол и оксинид.
Литература
1. Горомосова С.А., Шапиро А.З. Ключевые ферменты гликолиза и глю-конеогенеза. В кн. «Основные черты биохимии энергетического обмена мидий». - M., 19S4. - С. 47^.
2. Кочетов Г.А. Mетод определения неорганического фосфора. Практическое руководство по энзимологии. - M., 19S0. - С. 21З-216.
3. Anwar N., Ansari A.A., Ghatak S. et al. Setaria cervi: enzymes of glycolysis and PEP-succinate // Z. Parasitenkd. - 1977. -V. З1, N. 2. - P. 275-283.
4. Barrett J., Beis I. Studies on glycosis in the muscle tissue of Ascaris lum-bricoides (Nematoda) // Comp. Biochem. Physiol. - 1973. - V. 44, N. 3B. - P. 7З1-761.
З. Barrett J., Ward C.W., Fairbairn D. The glyoxylate cycle and the conversion of triglycerides to carbohydrates in developing eggs of Ascaris lumbricoides // Comp. Biochem. Physiol. - 1970. - V. ЗЗ, N. 3. - P. З77-З86.
6. Behm C.A., Bryant C. Studies of regulatory metabolism in Moniezia expan-sa: general considerations // Int. J. Parasitol. - 197з. - V. З, N. 2. - P. 209-217.
7. Crabtree B., Higgins S.J., Newsholme E.A. The activities of pyruvate carboxylase, phosphoenolpyruvate carboxylase and fructose diphosphatase in muscles from vertabrates and invertebrates // Biochem. J. - 1972. - V. 1З0, N. 2. - P. 391396.
5. Khatoon H., Baqui W.A., Ansari J.A. Effect of anthelmintics on the enzyme activities of Setaria cervi (Nematoda: Filarioidea) // Angew. Parasitol. - 19S3. -V.
24, N. 2. - P. 72-7З.
9. Kohler P., Hanselmann K. Intermediary metabolism in Dicrocoelium den-driticum (Trematoda) // Comp. Biochem. Physiol. - 1973. - V. 4З, N. 4. - P. 82З-845.
10. Korting W. Metabolism in parasitic helminths of freshwater fish. In «Bio-chemistry of parasites and host-parasite relationships» H. Van den Bossche ed. -1976.- P. 9З-100.
11. Korting W., Barrett J. Carbohydrate catabolism in the plerocercoids of Schistocephalus solidus (Cestoda: Pseudophyllidea) // Int. J. Parasitol. - 1977. - V. 7, N. З. - P. 411-417.
12. Korting W., Fairbairn D. Changes in beta-oxidation and related enzymes during the life cycle of Strongyloides ratti (Nematoda) // J. Parasitol. - 1971. - V. З7, N. б. - P. ШЗ^Ш.
13. Korting W., Fairbairn D. Anaerobic energy metabolism in Moniliformes dubius (Acanthocephala) // J. Parasitol. - 1972. - V. 58, N. 1. - P. 4З-З0.
14. Kumar S. Bunostomum trigonocephalum: the in vitro effects of anthelmintics on the enzyme activities // Helminthol. - 1987. - V. 24, N. 2. - P. 133-140.
1З. Lloyd G.M. Kinetic properties of phosphofructokinase (and fructose bis-phosphatase) of the liver fluke Fasciola hepatica // Int. J. Parasitol. - 1983. - V. 13, N. З. - P. 47З-481.
16. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L. et al. Protein measurement with the folin phenol reagent // J. Biol. Chem. - 19З1. - V. 193, N. 1. - P. 26З-27З.
17. Moczon T. Histochemical studies on the enzymes of Hymenolepis diminu-ta. II. Nonspecific and specific phosphatases in oncospheres and cysticercoids // Acta Parasitol. Pol. - 1973. - V. 21, N. 1-10. - P. 99-106.
18. Moczon T. Oxido reductases and phosphatases in miracidia of Fasciola hepatica as revealed by histochemical methods // Acta Parasitol. Pol. - 1983. - V. 28, N. 2З. - P. 267-272.
8З
19. Newsholme E.A., Crabtree B., Higgins S.J. et al. The activities of fructose diphosphatase in flight muscles from the Bumble-Bee and the role of this enzymes in heart generation // Biochem. J. - 1972. - V. 128, N. 1. - P. 89-97.
20. 0‘Riordan V.B., Burnell A.M. Intermediary metabolism in the dauer larva of nematode Caenorhabditis elegans. I. Glycolysis, gluconeogenesis, oxidative phosphorylation and the tricarboxylis acid cycle // Comp. Biochem. Physiol. -1989. - V. 92B, N. 2. - P. 233-238.
21. Prichard P.K., Schofield P.J. The glyoxylate cycle, fructose-1,6-diphosphatase and gluconeogenesis in Fasciola hepatica // Comp. Biochem. Physiol. - 1969. - V. 29, N. 2. - P. 581-590.
22. Saz H.j., Lescure O.L. Gluconeogenesis, fructose-1,6-diphosphatase and phosphoenolpyruvate carboxykinase activities of Ascaris lumbricoides adult muscle and larvae // Comp. Biochem. Physiol. - 1967. - V. 22, N. 1. - P. 15-28.
23. Srivastava V.M.L., Chatterjee R.K., Len A.B. et al. Glycolysis in Litomo-soides carinii - the filarial parasite of the cotton rat // Exper. Parasitol. - 1970. - V. 28, N. 2. - P. 176-185.
24. Surholt B., Newsholme E.A. Maximum activities and properties of glu-cose-6-phosphatase in muscles from vertebrates and invertebrates // Biochem. J. -1981.- V. 198, N. 3. - P. 621-629.
25. Tielens A.G.M., Van der Meer P., Van den Heuvel J.M. et al. The enigmatic presence of all gluconeogenic enzymes in Schistosoma mansoni adults // Parasi-tol. - 1991. - V. 102, N. 2. - P. 267-276.
26. Vykhrestyuk N.P., Burenina E.A., Yarygina G.V. Fermentation and the properties of some enzymes of carbohydrate metabolism in the trematode Calico-phoron ijimai // Mol. Biochem. Parasitol. - 1984. - V. 3, N. 2. - P. 20-38.
27. Yusuf A.N.K., Siddiqi A.h. Some aspects of carbohydrate metabolism of digenetic trematodes from Indian water buffalo and catfish // Z. Parasitenkd. -1978. - V. 56, N. 1. - P. 47-53.
Influence of anthelmintic preparations on activities of fructose bisphosphatase of Bothriocephalus scorpii (Cestoda: Bothriocephalidae)
E.A. Burenina
Activities and properties of fructose bisphosphatase (FBFase) in mitochondrial, microsomal fractions, cytosols of 12000 g and 105000 g of cestodes Bothri-ocephalus scorpii were studied. FBFase have high affinity with substrate, demand of presence of cations (Mg2+ or Mn2+). Influence of different effectors and kations on activities of enzyme were studied. The action of 10 anthelmintic preparations on activity of FBFase was investigated. In cytosol fraction the effective preparations are acemidophene and praziquantel, in mitochondrial fraction - bitionol and oxi-nide.
Keywords: cestoda, Bothriocephalus scorpii, fructose bisphosphatase, cytosol, mitochondrion, microsoma, anthelmintic preparations.
_____________________________________________________________________________________87
Российский паразитологический журнал, 2010, № 2
