Науковий в^ник Львiвського нацiонального унiверситету ветеринарно! медицини та бютехнологш iMeHi С.З. Гжицького.
CepiH: Вeтeринарнi науки
Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series: Veterinary sciences
ISSN 2518-7554 print doi: 10.32718/nvlvet9516 ISSN 2518-1327 online_http://nvlvet.com.ua
UDC 619:616:579.8:577
Determination of bactericidal properties of the drug "Saroflox" in relation to museum test cultures of microorganisms
A.M. Golovko1, N.G. Pinchuk1, T.I. Fotina2, Zh.E. Klishchova2
1State Scientific Control Institute of Biotechnology and Microorganism, Kyiv, Ukraine 2Sumy National Agrarian University, Sumy, Ukraine
Golovko, A.M., Pinchuk, N.G., Fotina, T.I., Klishchova, Zh.E. (2019). Determination of bactericidal properties of the drug "Saroflox" in relation to museum test cultures of microorganisms. Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series: Veterinary sciences, 21(95), 89-92. doi: 10.32718/nvlvet9516
Everyone knows that test cultures are used to control and quality the growth properties of nutrient media, to check the activity of antiseptics and disinfectants, as well as to assess the adequacy of the sensitivity of the tested microorganisms to new antibacterial drugs, which are currently produced by rapid temp. with the development of antibiotic resistance of microorganisms to most of the active substances used in new drugs. Moreover, it is the understanding that most antibiotics are clinically useless in treating infectious diseases because of their long-term use for chemotherapy purposes - a major problem not only in Ukraine but worldwide. In this article the results of researches sensitivity museum strains, namely : Escherichia coli ATCC 25922 (F-50), Pseudomonas aeruginosa ATCC 2853 (F), Proteus vulgaris HX 19 number 222, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterobacter aerogenes 10006, Enterococcus faecalis ATCC 19433 to the antibacterial drug "Saroflox". We find that Saroflox inhibited the growth of all test cultures at different dilution rates. Using different concentrations of the antibiotic (2.5 mg, 1.25 mg, 0.625 mg, 0.3125 mg, 0.1562/200 ^l), it was found that all test cultures under study were highly sensitive to Saroflox. most from 38.0 ± 1.0 to 20.0 ± 1.0 mm. The results of studies show that the new antibacterial drug "Saroflox" has bactericidal properties to most cultures that cause bacterial diseases of various species of animals and birds, which only confirms its effectiveness against gram-negative microorganisms (Enterobacter spp. , Staphylococcus aureus E. coli and others) including beta-lactam antibiotic resistant, tetracyclines, macro-lides and aminoglycosides.
Key words: sensitivity, microorganisms, test cultures, bactericidal, Saroflox drug.
Визначення бактерицидних властивостей препарату "Сарофлокс" щодо музейних тест-культур мiкроорганiзмiв
А.М. Головко1, Н.Г. Пшчук1, Т.1. Фотша2, Ж.е. Клщова2
1Державний науково-контрольний тститут бiоmехнологii i штамiв мiкроорганiзмiв, м. Кшв, Украна 2Сумський нацюнальний аграрний ^верситет, м. Суми, Украна
BciM вiдомо, що тест-культури використовують для контролю i R^omi ростових властивостей живильних середовищ, для перевiрки акmивноcmi антисептикв i дезiнфекmанmiв, а також для оцтки адекваmноcmi проведення методик чуmливоcmi дослi-джуваних мiкроорганiзмiв до нових анmибакmерiальних препараmiв, як нит виробляються стрмкими темпами у зв 'язку з розвит-ком анmибiоmикорезиcmенmноcmi мiкроорганiзмiв до бiльшоcmi застосовуваних активно дтчих речовин нових препараmiв. I саме розумтня того, що бтьшкть антибютишв е miшчно марними в л^ванж тфекцшних хвороб через довготривале ине застосу-вання з хтютерапевтичною метою - велика проблема не ттьки в УкраЫ а й в усьому cвimi. У нашш cmаmmi наведено результа-ти до^джень чуmливоcmi музейних шmамiв мiкроорганiзмiв, а саме: Escherichia coli ATCC 25922 (F-50), Pseudomonas aeruginosa
НАУКОВИЙ В1СНИК
шшмшгашфзшшщщН^Н
етшшшшщшдашшщмшш!
Article info
Received 11.09.2019 Received in revised form
14.10.2019 Accepted 15.10.2019
State Scientific Control Institute of Biotechnology and Microorganism, Donetska, Str., 30, Kyiv, 03151, Ukraine.
Sumy National Agrarian University, G. Kondratieva Str., 160, Sumy, 40021, Ukraine. Tel. :+38-095-572-24-98 E-mail: kgejp1990@gmail.com
ATCC 2853 (F), Proteus vulgaris HX19 № 222, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterobacter aerogenes 10006, Enterococcus faecalis ATCC 19433 до антибактерiального препарату "Сарофлокс". Нами встановлено, що "Сарофлокс" пригтчувавpicm ecix до^дних тест-культур в ргзному ступеш розведення. Використовуючи при цьому р1зну концентрацт антибютика (2,5 мг, 1.25 мг, 0,625 мг, 0,3125 мг, 0,1562/200мкл) було встановлено що вы до^джуваш тест-культури проявляли високу чутливкть до препарату "Сарофлокс " зона затримки яких становила здебтьшого вiд 38,0 ± 1,0 до 20,0 ± 1,0 мм. В результатi отриманих до^джень можна сказати, що новий антибактерiальний препарат "Сарофлокс" володie бактерицидними властивостями до бiльшостi культур, як1 спричиняють бактерiальнi захворювання рiзних видiв тварин i птищ, що лише тдтверджуе його ефективтсть до грамнегативних мiкроорганiзмiв (Enterobacter spp., Pseudomonas spp., Streptococcus spp., Staphylococcus aureus E. coli та т.), в тому чиmiрезистентних до бета-лактамних антибютитв, тетрациклшв, макролiдiв та амiноглiкозидiв.
Ключовг слова: чутив^ть, мтрооргатзми, тест-культури, бактерицидтсть, препарат "Сарофлокс ".
Вступ
Проблема антибютикорезистентносп мжрооргань зм1в визнана глобальною i в даний час належить до одного 3i стратепчних завдань у всьому свт щодо стримування розвитку i розповсюдження антибюти-корезистентних мiкроорганiзмiв. Але швидшсть, з якою формуеться i розповсюджуеться стшшсть шк-роорганiзмiв до антибага^альних препарапв, вра-жае. Препарати, яш були ефективними дониш, втра-чають сво! властивостi, тому використання !х виму-шено обмежуеться (Levy, 1997; Homeniuk et al., 2010). I це обумовило появу нових форм бактерш, вiрусiв, мiкоплазм, xламiдiй, що радикально замшило мжроф-лору у тварин, птищ, навггь людини на агресивну з утворенням бактерiй-мутантiв (Hunter & Hart, 1993; Jacobs-Rejstma et al., 1994). 1.П. Павлов, росiйський вчений, лауреат Нобелiвськоi премп сказав: "Дшчи на мiкроорганiзми, не сл1д забувати, що вони мають також сво! штереси". Антибiотикорезистентнiсть сьогоднi виходить за рамки суто медично! проблеми, мае величезне соцiально-економiчне значения й у розвинених кра!нах розглядаеться як загроза нацюна-льно! безпеки. Тому для кожно! кра!ни постае питання виршення проблеми антибiотикорезистентностi, не залежно ввд того, чи це створення спещальних комгге-тiв (в Англи е спещальний комiтет, який займаеться проблемою антибютишв), чи розголос проблеми в сучасних мас-медiа, та з огляду на це все лабораторнi дослвдження з метою визначення чутливостi мшроор-ганiзмiв - збудникiв iнфекцiйниx хвороб до АБП на-бувае все важлившого значення (Chemych et al., 2012; Daineka, 2013; Klishheva, 2016). Ршення проблеми антибiотикорезiстентностi складаеться з трьох скла-
Рис.1, 2. Визначення чутливосл E. coli
goBux - nomyK hobhx aHTH6ioTHKiB, KoM6iHa^a amu-6aKTepianbHHx npenapaTiB Ta poTa^a npenapaTiB b roc-nogapcraax. ycnix TepaneBTHHHoro e^eKry 3&ieKHTb Big 3acTOcyBaHHH npenapaTiB hobhx K^aciB Ta MiKpo6io-^oriHHoro o6rpyHTyBaHHH Bu6opy aHTH6aKrepiaibHoro npenapaTy (Ministerstvo okhorony zdorovia Ukrainy. Nakaz №167 vid 05.04.2007).
Mema i 3aedaHH% docMdwenHH. BH3HaneHHa nyrau-BOCTi genoHOBaHux TecT-mTaMiB MiKpoopraHi3MiB go aHTH6aKTepia^bHoro npenapaTy "Capo^noKc".
MaTepia. i MeTogu goc.ig:»:eHb
^oc^ig^eHHa npoBogu^uca Ha 6a3i ,3,epKaBHoro Ha-yKOBO-KOHTpo^bHoro iHCTHTyTy 6ioTexHo^orii i mTaMiB MiKpoopraHi3MiB. 3 Meroro BUBneHHa 6aктepнцнgннx B^acTHBocTen aHTH6aKTepianbHoro npenapaTy "Capo$-tokc" BHKopucToByBa^u genoHoBaHi TecT-mTaMH MiKpo-opraHi3MiB, a caMe Escherichia coli ATCC 25922 (F-50), Pseudomonas aeruginosa ATCC 2853 (F), Proteus vulgaris HX 19 № 222, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterobacter aerogenes 10006, Enterococcus faecalis ATCC 19433. ^yraHBicrb MiKpoopraHi3MiB go npenapaTy "Capo^^oKc" BH3Hana^u MeTogoM cepinHux po3Be-geHb b 6ynbHom Ta MeTogoM cepinHux po3BegeHb b arapi 3rigHo 3 MyK 4.2.1890-04 (Opredelenie chuvstvitel'nosti mikroorganizmov..., 2004).
MeTog cepinHux po3BegeHb b arapi Bigpi3H_aeTbca nume thm ^o, iHoKyn^iro npenapaTy "Capo^noKc" 3giHcHMBaflu y nyHKH Ha arapi b KinbKocri 200 mk^ 3 KoH^Hipa^ero aHTH6aKTepianbHoro npenapaTy b kok-HoMy HacTynHoMy po3BegeHHi b 2 pa3H HHKKie, hdk b nonepegHiH (puc. 1, 2).
25922 (F-50) до препарату "Сарофлокс"
HayKOBHH BicHHK .HHyBME iMeHi C.3. i^h^koto. Cepia: BeTepHHapHi HayKH, 2019, t 21, № 95
Poöohhh po3HHH "Capo^noKCy" roTyBanH i3 p03pa-xyHKy 100 r npenapaTy Ha 200 mj gHCTHjbOBaHoi BogH, mo CTaHOBHTb, 3rigH0 3 jHCTiBKoro-BKjagKoro Ha npena-paT, 50 Mr "Capo^noKCy" b 1 cm3 gHCTHjbOBaHOi BogH.
Pe3ymTaTH Ta ix oßroBopeHHH
npu gocmg^eHHi gyTjHBOCTi My3enHHx mTaMiB MiK-
poopraHi3MiB go npenapaTy "Capo^noKC" MeTogoM CepiHHHx po3BegeHb BCTaHOBjeHO, mo npenapaT npurHi-gyBaB piCT yCix mTaMiB MiKpoopraHi3MiB, aje b pi3HOMy CTyneHi (Ta6n. 1).
.3k BHgHO 3 Ta6flHm 1, KyjbTypa Escherichia coli ATCC 25922 (F-50) BHaBjana BHCOKy gyTjHBiCTb go npenapaTy "Capo^noKC" He3ane®H0 Big CTyneHa po3Be-geHHa Ta BjaCHe noro концeнтpaцii, 3OHa 3aTpuMKH CTaHOBuna Big (38,0 ± 1,0) mm go (24,0 ± 1,0) mm. npo-
goB^yMHH aHani3 iHgHBigyajbHoi gyTjHBOCTi goCnigHHx TeCT-KynbTyp, HaMH 6yno BHaBjeHO, mo mTaMH Staphylococcus aureus ATCC 25923, Pseudomonas aeruginosa ATCC 2853 (F) 6yjiu gyTjiHBHM go npenapaTy y TaKux концeнтpaцiaх: 2,5 Mr, 1,25 Mr, 0,625 Mr, 0,3125 Mr, 0,1562/200 mkj 3OHa 3aTpHMKH - Big (32,0 ± 1,0) go (20,0 ± 1,0) mm Ta Big (28,0 ± 1,0) go (20,0 ± 1,0) mm BignoBigHO. AHanorigm iHri6yrogi BjaCTHBOCTi npenapaT "Capo^noKC" npoaBjaB go iHmux gBOx goCnig^yBaHHx KyjbTyp Proteus vulgaris HX 19 № 222 Ta Enterobacter aerogenes 10006 30Ha 3aTpuMKH aKHx - Big (30,0 ± 1,0) go (22,0 ± 1,0) Ta Big (26,0 ± 1,0) go 20,0 ± 1,0) Ha Big-MiHy Big KyjbTypu Enterococcus faecalis ATCC 19433 aKa 6yja gyTjHBa TijbKH go Tpbox KOH^HTpamn (2,5 Mr, 1,25 Mr, 0,625 Mr/200 mkj) npenapaTy "Capo$-JOKC".
1
Pe3yjbTaTH BHBgeHHa gyTjHBOCTi gen0H0BaHHx TeCT-KyjbTyp MiKpoopraHi3MiB go aHTu6aKTepiajbHoro 3aCo6y "Cap0$J0KC"
Bnnpo6HHH MiKpoopraHi3M
Ko^ernpa^a
Ee3 po3BegeHHa 5Mr/CM3
ffiaMemp 30hu 3ampuMKU pocmy, mm npenapaTy "Capo^noKc " b KOXHOMy nogajbmoMy po3BegeHHi b 2 pa3H HH^ga, Hm: b nonepegHbOMy_
1
2,5 Mr
2
1.25 Mr
3
0,625 Mr
4
0,3125 Mr
5
0,1562
Escherichia coli ATCC 25922 (F-50) (40,0 ± 1,0) (38,0 ± 1,0) (34,0 ± 1,0) (32,0 ± 1,0) (30,0 ± 1,0) (24,0 ± 1,0)
Pseudomonas aeruginosa ATCC 2853 (F) (30,0 ± 1,0) (28,0 ± 1,0) (26,0 ± 1,0) (24,0 ± 1,0) (20,0 ± 1,0) (20,0 ± 1,0)
Proteus vulgaris HX 19 № 222 (32,0 ± 1,0) (30,0 ± 1,0) (28,0 ± 1,0) (26,0 ± 1,0) (24,0 ± 1,0) (22,0 ± 1,0)
Staphylococcus aureus ATCC 25923 (34,0 ± 1,0) (32,0 ± 1,0) (30,0 ± 1,0) (26,0 ± 1,0) (24,0 ± 1,0) (20,0 ± 1,0)
Enterobacter aerogenes 10006 (28,0 ± 1,0) (26,0 ± 1,0) (24,0 ± 1,0) (22,0 ± 1,0) (21,0 ± 1,0) (20,0 ± 1,0)
Enterococcus faecalis ATCC19433_(20,0 ± 1,0) (18,0 ± 1,0) (16,0 ± 1,0) (14,0 ± 1,0) (12,0 ± 1,0) (10,0 ± 1,0)
Ehchobkh
^OBegeHO 6aктepнцнgнy aKTHBHiCTb npenapaTy "Capo^noKC" go gen0H0BaHHx mTaMiB TeCT-KyjbTyp
Escherichia coli ATCC 25922 (F-50), Staphylococcus aureus ATCC 25923, Pseudomonas aeruginosa ATCC 2853 (F), Proteus vulgaris HX 19 № 222, Enterobacter aerogenes 10006 ma Enterococcus faecalis ATCC.
nepcneKmueu docnidweHh. BH3HageHHa 6aктepнцн-gHHx BjaCTHBOCTeH npenapaTy "Capo^noKC" go MiKpoo-praHi3MiB i30Jb0BaHHx b maxiBHngHx roCnogapCTBax yKpaiHH.
References
Chemych, M.D., Kozko, V.M., ta in. (2012). Antybioty-korezystentnist ta shliakhy yii podolannia: Materialy Vse-ukrainskoi naukovo-praktychnoi konferentsii i plenumu "Asotsiatsii infektsionistiv Sumshchyny" Sumy, SUMDU, 104 (in Ukrainian). Daineka, S. (2013). Antybiotykorezystentnist. Bukovynskyi derzhavnyi medychnyi universytet [Elektronnyi resurs]: https://www.bsmu.edu.ua/uk/news/digest/1131-antibiotikorezistentnist (in Ukrainian). Golovko, A.N., Ushkalov, V.A., Stegnij, B.T ta in. (2007). Mikrobiologicheskie i virusologicheskie me-
tody issledovanij v veterinarnoj medicine. Harkiv: NTMT (in Russian).
Homeniuk, M.I., Denysov, O.S., & Feshchenko, Yu.I. (2010). Antybiotykorezystentnist mikroorhanizmiv. Stan problemy ta shliakhy vyrishennia. Ukrainskyi khimioterapevtychnyi zhurnal, 1-2(23), 4-10. https://www.uf.ua/wp-content/uploads/2015/12/ 8337fd820b2a2669fd8c4fb3b8549041.pdf (in Ukrainian).
Hunter, J.E., & Hart, C.A (1993). Human isolates of apramisin resistant E. coli which contain thegenes for the AAC IV enzyme. Epidem. Infect., 110(2), 253259. doi: 10.1017/S0950268800068175.
Jacobs-Rejstma, W.F., Kan, C.A., & Bolder, N.M. (1994). The induetion of guinoloxe resistant Campylobacter-bacteria in broilers bu quinolone treatment Lett. Appl. Microbiol., 19(4), 228-231. doi: 10.1111/j.1472-765X.1994.tb00950.x.
Klishheva, Zh.E. (2016). Chuvstvitel'nost' vozbuditelej bakterial'nyh boleznej pticy k antibakterial'nym prepa-ratam. Mat. Mezhd. nauchn.-prakt. konf. "Prioritety veterinarnoj nauki i innovacionnyj opyt", posvjash-hennoj 115 letiju obrazovanija Azerbajdzhanskogo VNII, 14-15 dekabrja 2016. VNII. g. Baku, 287-291 (in Russian).
HayKOBHH BicHHK .HHyBME iMeHi C.3. I^H^Koro. Cepia: BeTepHHapHi HayKH, 2019, t 21, № 95
Levy, S.B. (1997). Antibiotic resistance: an ecological imbalance. Ciba Found Symp., 207, 1-9. doi: 10.1002/9780470515358.ch1.
Ministerstvo okhorony zdorovia Ukrainy. Nakaz №167 vid 05.04.2007. Metodychni vkazivky "Vyznachennia chutlyvosti mikroorhanizmiv do antybakterialnykh
preparativ". https://zakon.rada.gov.ua/rada/show/ v0167282-07 (in Ukrainian).
Opredelenie chuvstvitel'nosti mikroorganizmov k antibak-terial'nym preparatam (2004). Metodicheskie ukazani-ja. M.: Federal'nyj centr gossanjepidnadzora minzdra-va Rossii (in Russian).