CC BY
59
Известия ТСХА, выпуск 4, 2008 год
УДК 635.1/7 578. 864.3
ВИРУС МОЗАИКИ ЦВЕТНОЙ КАПУСТЫ И ВИРУСОУСТОЙЧИВОСТЬ К НЕМУ СОРТОВ ОВОЩНЫХ КУЛЬТУР*
В.Ф. ТОЛКАЧ, к. б. н.; Р.В. ГНУТОВА, д. б. н.
Изучен изолят ВМЦК, выделенный из растений дайкона. Исследован экспериментальный круг растений-хозяев, симптоматология поражаемых растений, физические свойства вирионов, морфология и размеры вирусных частиц, возможность передачи вируса тлями и семенами, а также физико-химические и антигенные свойства капсидных белков. По кругу растений-хозяев и показателям физических свойств изолят ВМЦК из дайкона отличался от дальневосточных изоля-тов ВМЦК, выявленных ранее из цветной (2 изолята) и белокочанной (3 изолята) капусты, а также из редиса (2 изолята). Результаты сравнительного изучения биологических свойств восьми изолятов вируса позволяют предположить, что для ВМЦК, циркулирующего в агроценозах края, характерна высокая генетическая изменчивость. Согласно результатам по исследованию вирусоустойчивых сортов овощных культур семейства Brassicaceae рекомендовано использовать в селекционной работе на иммунитет сорта редиса Французский завтрак и Мохов-ской, редьки — Зимняя круглая и Марчел, репы — Петровская.
Культурные и дикорастущие виды растений семейства Brassicaceae заражаются многими фитопатогенными вирусами: мозаики редиса Radish mosaic comovirus, мозаики турнепса Turnip mosaic potyvirus, огуречной мозаики Cucumber mosaic cucumovirus, розеточ-ности турнепса Turnip rosette sobemo-virus, крапчатости турнепса Turnip crinkle carmovirus, желтой мозаики турнепса Turnip yellow mosaic tymovirus, мозаики цветной капусты Cauliflower mosaic caulimovirus, некротической желтухи брокколи Broccoli necrotic yellow cytorhabdovirus и др. [8]. Как отмечают большинство исследователей, наиболее вредоносными и распространенными среди них являются вирусы мозаики турнепса и мозаики цветной капусты (ВМЦК) [24, 25]. Передача последнего в естественных условиях происходит с помощью, по крайней
мере, 27 видов тлей [14]. Основными переносчиками вирусов оказались капустная Brevicoryne brassicae L. и персиковая Myzus persicae Sulz тли. Тля персиковая — наиболее изученный переносчик этого вируса [19]. Питаясь на растениях семейства крестоцветные, зараженных одновременно ВМЦК и вирусом черной кольцевой пятнистости капусты, она передает оба вируса, а тля полосатая M. ornatus Rond. — только ВМЦК [17]. Перенос осуществляется полуперсистентно (с помощью стилета). Инфицирующая способность, например, В. brassicae сохраняется от двух и более дней [16]. Однако не все штаммы и изоляты ВМЦК способны передаваться тлями. Так, при изучении 5 штаммов этого вируса показано, что два из них — Cabbage В и NY 8153 легко передавались тлями, штамм КК — несколько хуже, a Campbell и СМ4-184
* Биолого-почвенный институт. Дальневосточного Отделения РАН.
вообще не переносились насекомыми [10]. Многочисленными исследованиями установлено, что перенос вирио-нов ВМЦК тлями не является чисто механическим процессом, так как в нем участвует ряд вирускодируемых белков, в т.ч. и белок с м. м. 18 кДа (Р18), названный фактором переноса (aphid transmission factor — ATF), который нарабатывается в инфицированных растениях [13]. Позже в составе генома ВМЦК был выявлен участок (ОРС II), кодирующий данный белок [27]. В листьях, инфицированных изолятом СМ4-184, невозможно выявить Р18, поскольку в ОРС II имеется делеция и данный белок не образуется [9]. Листья растений, зараженных штаммом Campbell, содержали Р18, но в небольшом количестве. Остается невыясненным, то ли у этого штамма ВМЦК снижена экспрессия ОРС II, то ли Р18 не отличается стабильностью. Показана способность данного белка образовывать внутри клетки паракристаллические образования, которые связываются с системой клеточных микротубул. Какое влияние эти образования оказывают на передачу ВМЦК тлями, остается пока неустановленным [12, 15, 21].
Изучение механизмов передачи вируса насекомыми-переносчиками позволило начать разработку мероприятий по защите растений от вирусной инфекции. Например, показано, что после обработки культурных растений семейства крестоцветных препаратом Pymetrozine в концентрации 100 мг/л M. persicae теряет способность переносить вирус [7].
Другой источник передачи вируса в природе — сорные растения из семейства Brassicaceae. В большинстве своем они являются резерваторами ВМЦК. Кроме того, вирус сохраняется в зараженных маточных растениях, оставленных на семена и хорошо перезимовывает в кочерыжках растений капусты, брошенных во время уборки в поле. Установлено, что ВМЦК
не передается семенами, но показано, что вирусная инфекция снижает их всхожесть. Больные растения, как правило, образуют мелкие семена с тонкой морщинистой оболочкой и если все-таки из них получены сеянцы, то они никогда не вырастут в нормальные растения [18].
О вирусах, поражающих овощные культуры семейства крестоцветных на юге Дальневосточного федерального округа России, до последнего времени было известно крайне мало. В начале исследований были выявлены только два вируса — мозаики турнепса и мозаики редиса [4, 26]. Ежегодный фито-санитарный мониторинг овощных культур, проводимый нами в последние 10 лет, показал, что в агроценозах на российском Дальнем Востоке распространены не только известные, но и ранее не выявленные вирусы. Одним из таких является ДНК-геномный кау-лимовирус мозаики цветной капусты [5, 11]. Идентифицированы изоляты ВМЦК из растений капусты цветной и белокочанной, редиса и дайкона (табл.1).
В естественных условиях растения, зараженные ВМЦК, реагируют на инфекцию посветлением жилок листьев, а позже наблюдается окаймление жилок в виде темно-зеленых полос. Растения нередко отстают в росте, молодые листья могут деформироваться. У цветной, капусты чаще всего не образуется цветонос. ВМЦК очень часто находится в смешанной инфекции с вирусами огуречной мозаики и (или) мозаики турнепса [11].
Экспериментальный круг растений-хозяев ограничен, как правило, видами растений семейства крестоцветные. Однако выявлены и описаны штаммы ВМЦК, которые заражают некоторые виды растений из семейства пасленовые. Так, штамм Cabb-B ВМЦК вызывал локальные поражения на дурмане обыкновенном Datura stramonium и табаках Бигелова Nicotiana bigelovii и Эдвардсона N. edvardsonii. Симптомы
Таблица 1
Изоляты ВМЦК, выявленные в Приморском крае на овощных культурах
Изолят
Место сбора материала
Растение-хозяин
ВМЦКо ВМЦК 1
вмцкд ВМЦК Р1 ВМЦК Р2 ВМЦК 6 ВМЦК 8 ВМЦК 7
г. Артем Приморского края, частное хозяйство ОПХ с. Пуциловка Уссурийского района Приморская опытная станция ВНИИО, г. Артем ДВ опытная станция ВИР, г. Владивосток г. Артем Приморского края, частное хозяйство
ОПХ с. Пуциловка Уссурийского района
Brassica cauliflora Br. oleracea Raphanus raphanistroides R. sativus R. sativus Br. oleracea
Br. cauliflora
Примечание. ВМЦК P1 и P 2 — изоляты из редиса, ВМЦКо и ВМЦК 7 — из цветной капусты, ВМЦК 1, ВМЦК 6 и ВМЦК 8 — из капусты белокочанной, ВМЦК Д — изолят из дайкона.
заражения другим штаммом ВМЦК-Б4 на этих тест-растениях проявлялись в виде локальных хлоротичных поражений и системной крапчатости. Этот штамм не заражал горчицу черную Brassica nigra и редис посевной Raphanus sativus. Штамм W260 у этих испытуемых видов растений вызывал только крапчатость на листьях [9, 23].
Показатели физических свойств ви-рионов ВМЦК: ТТИ — 75-80°С, ПРС — Ю-3, ПСИ — 7-15 сут [9].
Вирионы изометрические, диаметром 50 нм. В световом микроскопе в эпидермисе клеток зараженных ВМЦК растений выявляются вирусные включения в виде некристаллических Х-тел, которые концентрируются в ядрах в период наиболее яркого проявления симптомов заражения на листьях растений.
Цель данной работы заключалась в сравнительной характеристике изоля-та каулимовируса мозаики цветной капусты, впервые обнаруженного в России на семенных растениях дайкона и изолятов вируса, выделенных нами из растений других овощных культур семейства Brassicaceae на юге Приморского края (см. табл. 1). Кроме того, ставилась задача выявить вирусоустой-чивые сорта наиболее популярных в Приморском крае сортов цветной и белокочанной капусты, редиса, репы, редьки и дайкона.
Методика
Круг растений-хозяев и симптоматологию заболевания изучали на растениях 44 видов и сортов из семейств: Aizoaceae, Amaranthaceae, Brassicaceae, Chenopodiaceae, Compositae, Cu-curbitaceae, Fabaceae, Solan aceae.
Определение физических свойств изолята ВМЦК из дайкона — точку термической инактивации (ТТИ), предельное разведение сока (ПРС) и период сохранения инфекционности вируса при комнатных условиях (ПСИ) — проводили по методике А. Гиббса и А. Харрисона [1].
Препараты для электронно-микроскопического исследования готовили из листьев растений редиса и цветной капусты, пораженных вирусом, по известному методу погружения. Для обнаружения вирусных включений срезы нижнего эпидермиса инфицированных листьев редиса и цветной капусты окрашивали толуидиновым синим и просматривали при увеличении хЗОО в световом микроскопе [3].
В качестве переносчика вируса использовали тлю персиковую. Размножали ее на молодых растениях дурмана обыкновенного и бобов конских Faha bona. Для того чтобы убедиться в стерильности тлей, их переносили на здоровые растения дурмана и бобов, которые затем проверяли на наличие ви-
русной инфекции, используя индикаторные растения. Тлей собирали в стеклянные бюксы и держали в темноте без пищи около 3 ч. Затем их осторожно мягкой кисточкой помещали на зараженное растение. В течение 1 ч тли питались соком, после чего насекомых переносили на здоровое тест-растение на сутки, затем насекомых уничтожали. О передаче вируса насекомыми судили визуально по появлению симптомов, а затем проверяли на индикаторных растениях и электронно-микроскопическим методом.
Для контрольного тестирования на отсутствие в испытуемых растениях вируса огуречной мозаики (ВОМ) использовали гомологичную антисыворотку в реакции двойной диффузии (РДД).
Для получения препарата изолята ВМЦК из дайкона применяли методику Морриса в нашей модификации, которую использовали ранее для получения очищенных препаратов других дальневосточных изолятов ВМЦК [11]. Вирус накапливали в листьях редиса посевного Ra.pha.nus за^иэ в течение 30—35 сут, которые использовали с хорошо выраженными симптомами заболевания. Гомогенизацию материала проводили в 0,5 М калийно-фосфат-ном буфере, рН 7,5 с добавлением 0,2% 2-меркаптоэтанола и 0,005% ЭДТА. Первичное осветление осуществляли с помощью смеси хлороформа и бутанола (27 и 7% соответственно) с последующим центрифугированием при 4000 g. Концентрировали вирус ПЭГ (полиэти-ленгликолем м.м. 6000) в присутствии 0,1 ЫаС1 (в течение ночи при 4°С). Дальнейшую очистку проводили, используя дифференциальное центрифугирование (осаждение — 95000 ё, последующие экстракции — 3000 g). Затем в препарат добавляли хлороформ до 1% и через сутки вируссодержащую жидкость осветляли низкоскоростным центрифугированием. Концентрацию вируса в препарате и качество полученных вирусных препаратов опреде-
ляли спектрофотометрически. Препарат использовали для получения по-ликлональной кроличьей антисыворотки.
Результаты и их обсуждение
На Приморской овощной опытной станции ВНИИО ранней весной из семенных растений дайкона сорта Белый клык по результатам визуального обследования были отобраны растения, на листьях которых наблюдали вирусные симптомы в виде яркого хлороза жилок и карликовости растений.
Изучен экспериментальный круг растений-хозяев исследуемого изолята вируса. Инокулировали растения 43 видов и сортов из 8 семейств: Aizoaceae, Amaranthaceae, Brassicaceae, Cheno-podiaceae, Compositae, Cucurbitaceae, Fabaceae и Solan aceae. Одновременно с определением круга растений-хозяев вируса проверяли на устойчивость к вирусу наиболее популярные в Приморском крае сорта цветной и белокочанной капусты, редиса, репы, редьки и дайкона. Вирусом удалось заразить только растения семейства Brassicaceae (табл. 2).
На дайконе Raphanus raphanistroides сортов Дубинушка и Миноваси через 2 нед после заражения проявлялась хлоротичная крапчатость, а к концу месяца у сорта Дубинушка наблюдали яркий хлороз жилок, у сорта Миноваси — зеленую мозаику (рисунок).
Была изучена реакция на инфицирование ВМЦК различных сортов растений редиса посевного Raphanus sativus. Из 15 сортов, используемых в эксперименте, заразились вирусом 13, причем симптомы варьировали от хло-ротичной крапчатости и мозаики (сорта Розово-красный с белым кончиком, Красный великан) до яркого хлороза жилок (сорта Дунканский, Злата), зеленой кольцевой мозаики, хлороза жилок, хлоротичной пятнистости (сорт Saksa), хлоротичной пятнистости, хлоротичной крапчатости, хлороза жилок
Таблица 2
Реакция тест-растений на заражение изолятом вируса из дайкона
Семейство Род, вид и сорт растений Симптомы поражения
Aizoaceae Tetragonia expanse _
Amaranthaceae Gomphrena globosa —
Brassicaceae Brassica cauliflora, сорта Снежный шар S(CIMot,GrBbVe,CIVe)
Альфа S(CIVe)
Гарантия S(CI,CISp,CIBdVe)
Br. oleraceae сорт Беларусская-455 S(CI)
Br. rapoasiatica сорт Петровская —
Br. rapa сорт Остерзундомский S(CIVe,CISp, DisVe)
Br. napobrassica сорт Далибор S(CIVe, GrBdVe)
Raphanus raphanistroides, сорта Дубинушка S(CIMot,CIVe)
Миноваси S(GrMot)
R. sativus, сорта: Жара S(CIMot, GrM)
Saksa S(GrRM, CIVe.CISp)
Розово-красный с белым кончиком S(CIMot)
Французский завтрак —
Красный великан S(CIM)
18 дней S(CISp,CIMot,CIVe)
Злата S(CIVe)
Саратовский S(CIVe,CISp)
Илке S(CI,CIMot)
Сосулька S(CIM, CIMot, CIVe)
Моховской —
Заря S(CIMot,CISp)
Чайн Роуз Винтер S(CISp, GrMot, CIVe)
Дунканский S(CIVe)
R. sativus subsp. hybemus, сорта: Марчел —
Маргеланская S(CIVe)
Зимняя круглая —
Sinapis alba S: GrM, Stu
Chenopodiacea Chenopodium quinoa —
Compositae Lactuca sativa сорт Одесский кучерявец —
Zinnia elegans —
Cucurbitaceae Cucurbits maxima —
Cucurbits pepo var.patisson —
Fabaceae Faba bona —
Lens culinaris —
Solanaceae Capsicum annuum —
Datura stramonium —
Nicotiana alata —
N. debneyi
N. rustica —
ЫАаЬасит от.Хап№1 —
Примечание. Прочерк — не заражается, Э — системное поражение; С1Мо1 — хлоротичная крапчатость; йгВЬУе — зеленое окаймление жилок; С1\/е — хлороз жилок; вгМ — зеленая мозаика;
— задержка роста; Ою\/е — деформация жилок; С13р — хлоротичная пятнистость, С1 — хлороз листа; вгМо1 — зеленая крапчатость.
(сорт 18 дней), яркого хлороза листьев и хлоротичной крапчатости (сорт Илке), хлоротичной пятнистости, зеленой крапчатости и хлороза жилок (сорт Чайн Роуз Винтер). Устойчивыми в ВМЦК оказались лишь два сорта
редиса — Французский завтрак и Мо-ховской.
Из 3 испытанных сортов редьки ЛарНапш заИтя шЪзр. куЪегпш (Мар-чел, Маргеланская и Зимняя круглая) на заражение вирусом реагировал толь-
Лист даикона сорта Дубинушка с симптомами яркого хлороза жилок; слева — лист здорового растения
ко сорт Мэргеланская, а сорта Мар-чел и Зимняя круглая были устойчивыми к ВМЦК.
У цветной капусты Brassica caulif-lora вирусоустойчивых сортов выявлено не было, так как используемые в эксперименте сорта (Снежный шар, Альфа и Гарантия) поражались ВМЦК. У растений капусты сорта Снежный шар реакция на инфицирование проявлялась в виде хлоротичной крапча-тости, зеленого окаймления жилок листа и хлороза всех жилок; растения капусты сорта Гарантия отвечали на заражение системным хлорозом, хлоротичной пятнистостью, разбросанной по всей пластинке листа, и ярким хло-ротичным окаймлением жилок листа, а у растений сорта Альфа наблюдался только хлороз жилок.
Кроме того, к ВМЦК восприимчивыми оказались капуста огородная Brassica oleraceae сорта Беларусская-455, турнепс Вг. гара сорта Остерзундом-ский, брюква Br. napobrassica сорта Да-либор, горчица белая Sinapis alba. Единственный вид из растений семейства Brassicacp.ae — репа Br. rapoasiatica
сорта Петровская был устойчивым к заражению вирусом.
Характерным свойством изучаемого изолята ВМЦК из дайкона являлось то, что летом при высокой температуре (2Ь°С и выше) симптомы инфицирования не проявлялись, а маскировались. Поэтому изучение экспериментального круга растений-хозяев мы проводили только осенью или весной.
Дальневосточные изоляты ВМЦК имели довольно узкий круг экспериментально поражаемых растений, который был ограничен только видами растений семейства крестоцветные, а также низкую стабильность в соке по сравнению с известными в литературе штаммами этого вируса [9]. Чаще всего у дальневосточных изолятов ПСИ была не более 1 сут, в то время как описанные в литературе штаммы ВМЦК сохраняли инфекционность при комнатных условиях до 2 недель.
В дальнейшем интересно было бы с помощью молекулярно-генетических методов выявить механизмы, лежащие в основе отличий биологических свойств изученного нами изолята ВМЦК из дайкона, от многочисленных штаммов этого вируса, известных по литературным источникам.
Ранее изученные нами изоляты ВМЦК, также как и изолят ВМЦК из дайкона, заражали растения только из семейства Вгазэ^асеа«3 [2]. Однако круг растений-хозяев и симптоматология для всех изолятов были различны. Сравнительный анализ данных показал, что среди дальневосточных изолятов ВМЦК наиболее широкий круг поражаемых растений выявлен нами для изолятов ВМЦК из дайкона и цветной капусты (ВМЦК 7). Практически все использованные в эксперименте виды и сорта растений семейства крестоцветных заражались вирусом. Изолят ВМЦК из белокочанной капусты (ВМЦК1) несколько уступал по количеству зараженных видов и сортов растений семейства крестоцветных, из 21 вида и сорта заразилось только 13.
Изоляты из белокочанной капусты (ВМЦК 6) и редиса (ВМЦК Р1) сильно отличались от других изолятов тем, что имели довольно ограниченный круг поражаемых растений. Из растений 21 вида и сорта семейства ВгаББкасеае эти изоляты ВМЦК заразили только 4 и 7 соответственно.
Согласно результатам проведенного нами эксперимента по выявлению устойчивых сортов овощных культур семейства ВгазБшасеае к ВМЦК можно рекомендовать для использования в селекционной работе такие сорта редиса, как Французский завтрак и Мо-ховской, редьку сорта Зимняя круглая и Марчел и репу сорта Петровская.
Изучение физических свойств ВМЦК из дайкона показало, что в соке пораженных вирусом растений в комнатных условиях он сохранялся, как и большинство дальневосточных изолятов ВМЦК не более 1 сут, ПРС, способного заразить тест-растения, составило 10"1—10"2, что свидетельствовало о низкой концентрации вируса в растении, ТТИ была равна 65~70°С.
В электронном микроскопе обнаружены сферические частицы размером около 50 нм. В световом микроскопе в цитоплазме инфицированных клеток редиса и цветной капусты вирусных включений обнаружено не было. Листья брали с разных ярусов растения и в различные периоды развития симптомов. Патологические изменения в ядрах не обнаружены, хотя в литературе описаны штаммы, которые образуют небольшие внутриядерные агрегаты вирионов [6]. Мембранная система пластид в клетках, пораженных изучаемыми штаммами растений, также не содержала цитопатологических изменений. В них не обнаружены ви-рионы, отмеченные в [20].
Установлена передача вируса тлей персиковой.
Проверена возможность передачи изолята ВМЦК из дайкона семенами зараженных растений. Тестировали
80 семян дайкона сорта Дубинушка и 15 семян редиса посевного сорта Саратовский. Растения, выросшие из инфицированных вирусом семян, выглядели внешне здоровыми, без симптомов вирусного характера. Таким образом, было показано для изучаемого изолята ВМЦК, как и для других дальневосточных изолятов вируса, отсутствие семенной передачи в искусственных условиях.
Для исключения присутствия ВОМ в первоначальном образце из дайкона была поставлена реакция РДД. В качестве антигена использовали инфекционный сок, а в качестве антител — антисыворотку против ВОМ. Иммунный комплекс в виде полос преципитации не наблюдали.
Препараты вируса обладали типичным нуклеопротеидным спектром поглощения с максимумом при 260 нм и минимумом при 240 нм. А2бо/2во был 1,3. Методы электронной микроскопии и результаты спектрофотометрических исследований показали, что полученный препарат изолята ВМЦК из дайкона был высокой степени чистоты. Максимальный выход вируса составил при первоначальной очистке 6 мг/кг при выделении из растений редиса, что соответствует литературным данным [22]. Есть сообщения о более высоких концентрациях (10-15 мг/кг) [9]. По последним результатам эта концентрация соответствует 30 мг/кг ВМЦК. Такая высокая концентрация вируса в очищенном препарате, вероятно, связана с особенностями растения-накопителя и (или) конкретного изолята вируса.
Очищенные препараты ВМЦК из дайкона были использованы в качестве антигена для получения поликлональ-ной кроличьей антисыворотки. Антиген вводили по схеме, используемой нами ранее для сферических вирусов [2}. Кроличья поликлональная антисыворотка имела титр 1:128 по результатам РДД.
Таким образом, полученные экспериментальные результаты по изучению круга растений-хозяев дальневосточного изолята ВМЦК из дайкона, симптоматологии поражаемых растений, физических свойств вирионов, морфологии и размеров вирусных частиц, возможности передачи вируса тлями, а также некоторые физико-химические и антигенные свойства капсидных белков указывают на то, что исследуемый изолят относится к вирусу мозаики цветной капусты Cauliflower mosaic virus рода Caulimovirus семейства Caulimoviridae. Этот вирус впервые на дайконе обнаружен и идентифицирован на юге Дальнего Востока России. Так как культурные виды растений семейства Brassicaceae в Дальневосточном регионе по климатическим условиям не могут вегетировать круглый год, то вероятнее всего вирус был перенесен с помощью тлей первоначально с многолетних диких видов растений крестоцветных на посадки семен-
Физические свойства изолятов
ников дайкона, которые в дальнейшем стали источником ВМЦК. Из этого следует, что необходимо на ранних этапах развития растений (даже в рассадный период) проводить регулярные обработки их инсектицидами от тлей и обязательно удалять посадки семенников от посадок растений культурных видов крестоцветных.
В России на Дальнем Востоке в Приморском крае ВМЦК был впервые нами выявлен на растениях цветной капусты с симптомами хлоротичной мозаики и линейного узора на листьях. Цветонос у сильно пораженных растений иногда не образовывался. Позже ВМЦК идентифицирован на белокочанной капусте (3 изолята), редисе (2 изолята) и цветной капусте (1 изолят). Из всех изученных дальневосточных изолятов ВМЦК изолят из дайкона оказался наименее термоустойчив (65-70°С), с низкой концентрацией вируса в соке (10"1_10"2) и инактивацией при комнатных условиях в течение суток (табл. 3).
Таблица 3 фуса мозаики цветной капусты
Параметр Изоляты вируса
ВМЦКД ВМЦКо ВМЦК 1 ВМЦК 6 ВМЦК 8 ВМЦК 7 ВМЦК Р1 ВМЦК Р2 ВМЦК*
ТТИ, °С 65-70 80 85 80 75 80 80 80-85 75-80
ПСИ 1 1 3 4 1 4 2 2 4
ПРС 10"1-10"2 10"4 Ю"6 10^ ю-2 10"3 101-10"2 1О"4-!0"5
Примечание. * по[9].
Заключение
На юге Дальневосточного федерального округа России в Приморском крае идентифицировано 8 изолятов ВМЦК на культурных растениях семейства крестоцветных — редисе, цветной и белокочанной капусте и на дайконе. Результаты сравнительного изучения биологических, физико-химических и антигенных свойств изолятов вируса позволяют предположить, что для ВМЦК, циркулирующего в крае в агроцёнозах, характерна высокая мутация. Выявлены вирусоустойчивые сорта культурных
видов растений овощных культур семейства ВгаББ^асеае — сорт редиса Французский завтрак и Моховской, редька сортов Зимняя круглая и Мар-чел и репа сорта Петровская, которые рекомендовано использовать в селекционной работе.
Библиографический список
1. Гиббс А-РСаррисон Б. Основы вирусологии растений. М.: Наука. 1978. — 2. Гнутое а Р.В., Толкач В.Ф. Вирусы и их штаммы, поражающие овощные культуры (Дальневосточные изоляты) / / Аг-роеколопчний ж. 2002. С. 6-14. — 3. Голъ-
дин М. Вирусные включения в растительной клетке и природа вирусов. М.: Изд. АН. 1963. — 4. Крылов А.В., Малевич В.М., Сапоцкий М.В. и др. Вирус мозаики редиса — новый для СССР комо-вирус // Биол. науки, 1981. N 3. С. 2430. — 5. Толкач В.Ф., Богунов Ю.В., Гну-това Р.В. Вирус мозаики цветной капусты в Приморском крае // Вестник защ. раст. Санкт-Петербург, 2002. N 1. С. 5157. — 6. Bassi М., Favali М.А., Conti G.G. Ц Virology, 1974. Vol. 60. P. 353-358. —
7. Bedford I., Kelly A., Blank G. et al. // Ann. AppL BioL, 1998. VoL 132. P. 453-462. —
8. Brunt A.A., Crabtree K., Dallwitz M.J. et al. II Viruses of Plants Descriptions and Lists from the VIDE Database, 1997. P. 352-35. — 9. Carrett R. // CMI/AAB Descriptions of Plant Viruses, 1982. — 10. Espinosa A. M., Markham P.G., Maule A J., Hull R. U J. Gen. Virol, 1988. VoL 69. P. 1819-1830. — 11. Gnutova R.V., Tol-kach V.F., Bogunov Y.V. // Plant Protection ScL, 2002. N 2. P. 258-260. — 12. Gong Z.X., Wu H., Cheng R.H. et al. //Agronomi, 1990. VoL 10. N 9. P. 749-758. — 13. Howarth A.J., Gardner R.C., Messing J., Shepherd R.J. // Virology, 1981. Vol. 112. P. 678-685. — Ы. Kennedy J., Day M., Eastop V. // Entomo-
logy. London, 1962. P. 38-51. — 15. Ka-steel D.T.,Perbal M.C.,Boyer J.C. et al. // J. Gen. Virol., 1996. Vol. 77. P. 2857-2864. —
16. Lung M.C.Y., Pirone T.P. // Phytopathology, 1973. Vol. 63. N7. P. 910-914. —
17. Markham P.G., Pinner M.S., Raccah B., Hull R. H Ann.Appl. Biol., 1987. Vol. 111. P. 551-587. — 18. Melcher U. // Botanical gazette, 1989. Vol. 150. N2. P. 139-147. —
19. Namba R., Sylvester E. // J. Econ. Entomol. 1981. Vol.74. N5. P. 546-551. —
20. Shalla T.A., Shepherd R.J., Petersen LJ. II Virology, 1980. Vol. 102. N2. P. 381388. — 21. Shepherd R.J., Richins R.D., Shalla T.A. // Virology, 1980. Vol. 102. N2. P. 389-400. — 22. Schoelz J.E., Shepherd R.J. 11 Virology, 1988. Vol. 162. P. 30-37. — 23. Schoelz J.E., Shepherd RJ., Richins R.D. II Phytopathology, 1986. Vol. 76. P. 51-456. — 24. Shukla D.D., Schmelzer K. // Acta Phytopathol. Acad. Sei. Hung., 1972. Vol. 7. N4. P. 332-342. — 25. Tomlinson J.A., Walker V.M. // Ann. Appl., 1973. Vol. 73. N1. P. 293-298. — 26. Gnutova R.V., Tolkach V.F. //Arch. Phyto-path. Pflanz., 2000. Vol. 33. P. 187-205. — 27. Woolston C.J., Czaplewsku L.G., Mar-ham P.G. et al. H Virology, 1987. Vol. 160. P. 246-251.
Рецензент — к. б. н., д. с.-х. н. Г.Ф. Говорова SUMMARY
For the first time the Cauliflower mosaic virus (CaMV) has been studied in Raphanus raphanistroides. Experimental range of plant-hosts, symptomatology of infectious plants, properties of particles in sap, particle morphology, transmission by aphids, seeds and also physico-chemical and antigenic properties of capsid proteins have been analyzed. Plant-hosts, and physical properties isolate CaMV from R. raphanistroides differ from isolates CaMV discovered in Brassica cauliflora (2 isolates), Br.oleraceae (3 isolates) also from R. sativus (2 isolates) earlier by range. Results of comparative study of biological properties of 8 natural viruses isolates allow to suppose that for CaMV circulatory in agrocoenoses character has high genetic changeability. According to results of revealing stable for virus kinds of the family Brassicaceae we recommend to use such varieties as: R. sativus Franzuzskiy zavtrak and Mohovskoiy, R. sativus subsp. hybernus kinds Zimnay kruglauy, Marchel and Br. rapoasiatica variety Petrovskaya in selection work.
