CC BY
8
УДК 616-008.825.6 + 616.925.61-074
УСКОРЕННЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕДИ В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ
С. И. Бурыкина
Институт гигиены труда и профзаболеваний, Ленинград
Метод основан на способности ионов меди образовывать в кислой среде комплекс, окрашенный в желтый цвет, с реактивом диэтилдитио-фосфатом (ДЭДТФ) никеля (А. И. Бусев и М. И. Иванютин).
Образующийся комплекс ДЭДТФ меди экстрагируется четырех-хлористым углеродом. Растворы ДЭДТФ меди в органических растворителях устойчивы. Определению меди не мешают другие элементы, но мешает образование комплекса одновалентной меди из комплекса двухвалентной меди, наступающее при большом ее содержании, а также избыток реактива (А. И. Бусев и М. И. Иванютин).
Разработанный нами ускоренный и несколько измененный метод в отличие от описанного в литературе (А. И. Бусев и М. И. Иванютин, 1958; В. С. Грюнер и Л. А. Евменова) позволяет при достаточной точности определения сократить время, необходимое для анализа, до 3 часов. Это достигается использованием мокрого метода сжигания биологического материала в смеси серной и азотной кислот, экстракцией комплекса ДЭДТФ меди в сернокислой среде при оптимальном для полноты экстракции рН растворов (0,6—1,2). Чувствительность реакции 1 мкг в 10 мл раствора. Количество меди в определяемой пробе не должно превышать 10 мкг.
Необходимые реактивы: 1) соляная кислота, удельный вес 1,19, химически чистая; 2) азотная кислота, удельный вес 1,40, химически чистая; 3) смесь соляной и азотной кислот, 3:1; 4) серная кислота, в разведении химически чистая, 1:5 (6 н.); 5) четыреххлористый углерод; 6) диэтилдитиофосфат никеля —0,005 М раствор (0,2146 г в 100 мл дистиллированной воды). Раствор устойчив продолжительное время (30—35 дней); 7) стандартный раствор меди: 0,3928 г химически чистой сернокислой меди растворяют в литровой мерной колбе. Раствор доводят до метки дистиллированной водой. Раствор № 1 содержит в 1 мл 100 мкг меди; 1 мл стандартного раствора № 1 растворяют в мерной колбе емкостью 100 мл. Раствор доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают; 1 мл раствора № 2 содержит 1 мкг меди; 8) индикаторная бумага «Рифан» (рН 0,3—2,2).
Медь в моче и крови определяют следующим образом. Из суточного количества мочи 100 мл ее помещают в колбу Эрленмейера емкостью 250 мл из термостойкого стекла (медь определяют в крови с объемом ее 1—2 мм); затем приливают 80 мл смеси соляной и азотной кислот, тщательно перемешивают и выпаривают на открытой плитке до объема ( 5 мл. Прибавляют 10 мл серной кислоты в разведении 1 : 5. Полученный раствор перемешивают и осторожно, при постоянном помешивании выпаривают на асбесте до выделения паров БОз. В процессе выпаривания периодически, осторожно, из капельницы добавляют азотную кислоту до полного обесцвечивания раствора. После этого пары 503 должны выделяться еще в течение 1—2 мин. Потом раствор охлаждают на воздухе до комнатной температуры, и в содержимое колбы добавляют 50 мл дистиллированной воды. Колбу нагревают до полного растворения солей. Охлажденный прозрачный раствор количественно переносят в делительную воронку емкостью 100 мл (рН раствора в пределах 1 0,6—1,2).
Далее приливают из бюретки точно 10 мл четыреххлористого углерода и 1,5—2 мл раствора ДЭДТФ никеля, и делительную воронку энергично встряхивают в течение 2 мин. При этом слой четыреххлористого углерода приобретает желтую окраску. Нижний слой фильтруют в сухую пробирку через сухую воронку и сухой фильтр Пробирку закрывают притертой пробкой. Интенсивность окраски четыреххлористого углерода измеряют на фотоколориметре ФЭК.-Н-57 в кювете 10 мм (с закрытой крышкой) с синим светофильтром (длина волны 413 ммк) по отношению к воде. Содержание меди рассчитывают по стандартной кривой. Для определения меди в реактивах проводят холостую пробу.
Для построения стандартной кривой отбирают 1, 2, 3, 4, 5 и 10 мл стандартного раствора № 2. В каждую пробу прибавляют по 50 мл дистиллированной воды и по 2 мл серной кислоты 1 : 5 (рН растворов 0.6—1,2). Растворы переводят в делительную воронку; дальнейшие операции совпадают с ходом анализа. Медь в крови определяют по той же методике без изменений.
При использовании описанного метода установлено, что в крови человека находится медь в количестве 140—150 мкг%, в крови крыс — 0,075—0,153 мкг°/о, а в моче здорового человека — 30—72 мкг за сутки. Найденные количества совпадают с теми, которые приведены в литературе (А. И. Войнар; В. С. Асатиани; й. Тодоров).
ЛИТЕРАТУРА
Асатиани В. С. Биологические таблицы. Тбилиси, 1960, ч. 1. — Б у сев А. И., Иванютин М. И. Ж- аналит. химии, 1956, Л"» 5, с. 523. — Они же. Вести. Московск. ун-та. Серия математика — механика, 1957, № 5, с. 157. — Они же. Там же, 1958, № 2, с. 177. — Войнар А. И. Биологическая роль микроэлементов в организме животных и человека. М., 1960. — Грюнер В. С., Евменова Л. А. Вопр. питания, 1961, № 4, с. 66. — Тодоров Й. Клинические лабораторные исследования в педиатрии. София, 1963.
Поступила 4/VIII 1965 г.
УДК 612-08+613-07
ПРИСПОСОБЛЕНИЕ ДЛЯ КРЕПЛЕНИЯ НА КОЖЕ ЧЕЛОВЕКА КОМПЛЕКТА ДАТЧИКОВ ПРИ ГИГИЕНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
I
С. П. Райхман, К. А. Рапопорт
Всесоюзный научно-исследовательский институт железнодорожного транспорта и Институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
Результаты многочисленных физиологических и физиолого-гигиени-ческих исследований человека в значительной степени определяются способом крепления датчиков на нем. Большинство применяемых теперь способов (приклеивание, крепление с помощью резинок и тесемок и т. д.) требует продолжительного времени, что нарушает фоновое состояние испытуемого, особенно при изучении теплообмена. Крайне нежелательно длительное закрепление датчиков в ходе производственного эксперимента, так как время испытуемых — рабочих — обычно строго регламентировано. Приходится ограничивать количество используемых датчиков. Кроме того, при существующих способах крепления датчики нередко смещаются с точек замеров из-за перемещения и натяжения подводящих проводов во время движения испытуемого. Это не позво-
1 Все операции с четыреххлористым углеродом проводят в вытяжном шкафу при отсутствии в нем нагревательных приборов.
