CC BY
37
лот путем понижения активности обратных реакций малатдегидрогеназы (НАДН-МДГ) и НАД-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДН-ГДГ). У больных МКРЛ в лимфоцитах также снижена активность прямой реакции НАД-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАД-ГДГ) (1,48; 0,92-2,97, р<0,05) по сравнению с контролем (5,64; 0,46-16,76), что свидетельствует о нарушении аминокислотного и азотистого обмена. Кроме того, наряду с ингибированием аэробной реакции НАД-ЛДГ, у больных МРЛ снижена активность анаэробной реакции лак-татдегидрогеназы (НАДН-ЛДГ), что обусловливает также ингибирование гликолиза.
При сравнении уровней активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах у больных НМРЛ и МРЛ между собой выявлены статистически значимые различия. У больных МРЛ (в отличие от НМРЛ) показано повышение активностей НАД-зависимой реакции изоцитратдегидрогеназы (НАД-ИЦДГ) (28,11; 1,47-48,29, р<0,01) и НАДН-ГДГ (58,63; 35,32-72,05, р<0,01) при значительном снижении активности НАДН-ЛДГ (0,00; 0,00-9,79, р<0,05). Следовательно, у больных МРЛ про-
исходит стимулирование аэробной энергетики (повышение активности НАД-ИЦДГ) и отток субстратов на реакции аминокислотного обмена через глутаматдегидрогеназу - повышение активности НАДН-ГДГ. Однако значительное снижении активности НАДН-ЛДГ в лимфоцитах у больных МРЛ свидетельствует об ингибировании гликолитического расщепления глюкозы.
Выводы. У больных раком легкого метаболический статус лимфоцитов крови характеризуется ингибированием реакций синтеза липидов, нарушением аминокислотного обмена, разнонаправленными изменениями активности дегидрогеназ цикла трикарбоновых кислот и снижением активности притока интермедиатов в цикл Кребса с реакций аминокислотного обмена. Анализ активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах у больных НМРЛ и МРЛ позволяет не только оценить уровни активности отдельных ферментов, но и определить интенсивность и реактивность метаболических процессов в зависимости от гистологического типа рака легкого.
УРОВЕНЬ ПЕРВИЧНЫХ И ВТОРИЧНЫХ ПРОДУКТОВ ПЕРИКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В ПЛАЗМЕ КРОВИ ИНТАКТНЫХ ЖИВОТНЫХ И С ПЕРЕВИТОЙ ЛИМФОСАРКОМОЙ ПЛИССА ПОСЛЕ ВЫСОКОЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО ИМПУЛЬСНОГО
ВОЗДЕЙСТВИЯ
А.А. КИРИЛОВ, И.П. ИВАНОВА
НИИ прикладной и фундаментальной медицины, г. Нижний Новгород ГОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия Росздрава»
Актуальность. В последнее время большой интерес представляет возможность использования высокоэнергетического импульсного воздействия (ВЭИВ) в медицине. При генерации в межэ-лектродном промежутке нарабатывается большое количество высокоэнергизованных электронов, свободных радикалов, активных форм кислорода, световой поток излучает в диапазоне 180-800 нм. Воздействие этих факторов на молекулы био-
логических субстратов приводит к образованию химически активных частиц, которые участвуют в свободнорадикальных процессах организма. Это свойство ВЭИВ может быть использовано как средство торможения опухолевого роста, так как известно, что в опухоли перекисное окисление липидов (ПОЛ) понижено вследствие большого количества в ней антиоксидантов, а в организме с опухолью, наоборот, повышено.
Цель исследования. Изучение влияния ВЭИВ на уровень ПОЛ плазмы крови животных с перевитой лимфосаркомой Плиса (ЛСП).
Материал и методы. Объектом исследования являлись беспородные белые крысы самцы массой 180-250 г. Воздействию ВЭИВ в течение 100 и 300 с подвергалась брюшная область ин-тактных животных и с перевитой ЛСП (размер опухоли 1х1 см). Генерация ВЭИВ проводилась однократно. Плазму крови отбирали у животных с перевитой лимфосаркомой через 6 сут, а у интактных на 1, 6 и 12-е сут после высокоэнергетического воздействия. Для контроля отбирали образцы крови интактных животных и животных с экспериментальной лимфосаркомой без воздействия ВЭИЭФ на 6-е сут после перевивки опухолевого штамма. Штамм лимфосаркомы Плисса приобретен в РОНЦ им. Блохина.
Об интенсивности ПОЛ судили по количеству образовавшихся первичных и вторичных продуктов ПОЛ диеновым и триеновым конъюгатам. Экстракцию липидов из анализируемого материала проводили методом Фолча. К пробам крови, взятым в количестве 0,1 мл, приливали по 4 мл смеси хлороформ-метанол (2:1). Затем пробирки с пробами термостатировали 15 мин при температуре 45 0С. После добавляли по 1 мл 0,75 % KCl для разделения фаз, отбрасывали верхнюю фракцию и к нижней фракции, в которой остались липиды, приливали по 5 мл смеси хлороформ:метанол:КС1 (3:47:48). Один миллилитр смеси экстрагированных липидов выпаривали на водяной бане, добавляли 4 мл смеси метанол-гексан (5:1). Для определения диеновых конъюгатов (ДК) спектрофотоме-трировали при длине волны 233 нм, триеновых конъюгатов (ТК) - 275 нм. Количество ДК и ТК выражали в относительных единицах.
Результаты. В ходе работы показано, что при обработке интактных животных ВЭИВ в течение 100 и 300 с в 1-е сут после воздействия в крови происходит интенсификация процессов ПОЛ. Увеличивается количество ТК соответственно в 3,8 и 5,5 раза, количество ДК - в 3 и
2,7 по сравнению с контрольной серией. Через 6 сут после воздействия в течение 100 с количество ДК возрастало на 37,9 %, ТК - в 2,9 раза, после воздействия в течение 300 с количество ДК не отличалось от нормальных значений, а количество ТК было выше нормы в 2,6 раза. Через 12 сут после воздействия в течение 100 с количество ДК и ТК уменьшилось соответственно в 4,7 и 2,3 раза по сравнению с животными без воздействия. При обработке ВЭИВ 300 с результаты достоверно не отличались от контроля и составили 27,6 - ДК и 12,8 - ТК. При изучении влияния ВЭИВ на животных с перевитой опухолью показано, что на 6-е сут после перевивки опухолевого штамма в крови крыс резко повысился уровень ПОЛ, что наглядно продемонстрировало увеличение количества ДК до 102 отн.ед., ТК до 35 отн.ед., в 3,6 и 3 раза соответственно по сравнению с интактными животными. После воздействия ВЭИВ в течение 100 с на животных с экспериментальной опухолью наблюдалось снижение количества ДК до уровня интактных животных без воздействия и увеличение количества ТК - на 70,6 % по сравнению с животными с экспериментальной лимфосаркомой без воздействия. В случае действия ВЭИВ в дозе 300 с в крови животных с опухолью наблюдалось восстановление количества ДК и ТК до нормальных значений и составило 29,8 - ДК и 10,1 - ТК.
Выводы. Высокоэнергетическое импульсное воздействие в течение 100 и 300 с на интактных животных вызывает интенсификацию первичных и вторичных продуктов ПОЛ в 1-е и 6-е сут, восстановление процессов ПОЛ до контрольных значений происходит к 12-м сут после воздействия. Воздействие ВЭИВ на животных с экспериментальной лимфосаркомой в течение 100 с вызывало снижение первичных продуктов ПОЛ и возрастание вторичных продуктов ПОЛ. Воздействие на животных с лимфосаркомой в течение 300 с не оказывало влияния на уровень первичных и вторичных продуктов ПОЛ в плазме крови.
