CC BY
23
количества проб. Если для постановки зарубежных исследователей (7,8). При
классического ИФА требуется не менее 3-х массовых исследованиях возможно
часов, то для ИФА в дот-варианте около нанесение раствора конъюгата и
одного часа. Аналогичные заключения субстратной смеси методом флотации, что
делают также ряд отечественных и не влияет на чувствительность метода.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Бреус Ю.В. Разработка и конструирование экспресс-теста для диагностики лейкоза крупного рогатого скота / Ю.В. Бреус, О.Д.Небещук, Я.В.Хоменко и др. // Вестник науки Казахского агротехнического университета им. С.Сейфуллина. - 2013. - №4 (79). - C. 15-21. 2. Иванов А.П. Разработка и применение экспериментальных и промышленных иммуноферментных тест-систем для лабораторной диагностики вирусных инфекций /А.П.Иванов // Автореферат дисс. д.мед.н., Москва - 1998 г. 3. S, S Deshpande. Enzyme immunoassays—From concept to product development: Chapman & Hall, London., p.464. 1996 ISBN 0-412-0560101. 4. Владыко А.С. Разработка и апробация диагностической тест-системы для выявления антител к ВИЧ методом дот-иммуноанализа / А.С.Владыко, Т.В.Школина, Л.Е.Сурикова и др.// Рубрики:76.03.41, 76.35.33. Сроки выполнения НИР:1996-1998; 5. Таранин А.В. Способ выявления антител к вирусу алеутской болезни норок / А.В.Таранин, С.М.Мирошниченко, ВВ. Перемыслов // Патент. № 2074393 от 27.02.1997; 6. Аронова Н.В. Использование препаратов липополисахарида Fracisella Tularensis в точечном твердофазном иммуноферментном анализе/ Н.В.Аронова, Н.В.Павлович, Н.Л.Пичурина и др.// Ростов-на-Дону. Патент 2362170 от 20.07.2009. 7. T. Anand, T.A. Narasa Raju, C. Vishnu, L.V. Venkateswar Rao, G. Sharma.Development of Dot-ELISA for the detection of human rotavirus antigen and comparison with RNA-PAGELett Appl Microbiol., 3 (2001), pp. 176-180. 8. Hemmatzadeh, F., F. Amini : Dot-blot enzyme immunoassay for the detection of bovine viral diarrhea virus antibodies. Vet. arhiv 79, 343-350, 2009.
РАЗРАБОТКА И АПРОБАЦИЯ ДОТ-БЛОТ ИФА ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ
АНТИТЕЛ К ВЛКРС
Джакаит Д.А, Якупов Т.Р.
Резюме
Разработана тест-система дот-блот ИФА с использованием вирусных частиц, выделенных из сыворотки крови больных лейкозом коров. Оптимизированы условия проведения и доказана возможность использования метода для диагностики лейкоза у крупного рогатого скота.
DEVELOPMENT AND TESTING OF THE DOT BLOT ELISA TEST-SYSTEM TO DETECT
ANTIBODIES TO BLV
Jakait J.A, Yakupov T.R.
Summary
The developed test system of the dot-blot ELISA was based on the use of viral particles isolated from sera of cows infected with bovine leukemia virus. The conditions for conducting analysis were optimized and the possible use of the method for the diagnosis of leucosis in cattle was proved.
УДК 619:612.325:636.5
УЛЬТРАМИКРОСТРУКТУРА КЛЕТОК ПОВЕРХНОСТНОГО ЭПИТЕЛИЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ЖЕЛЕЗИСТОЙ ЧАСТИ ЖЕЛУДКА КУР
Дышлюк Н.В. - к. вн., доцент Национальный университет биоресурсов и природопользования Украины, г. Киев
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: куры, электронная микроскопия, железистая часть желудка, поверхностный эпителий, эпителиоциты, М-клетки.
Key words: chickens, electron microscopy, proventriculus, superficial epithelium, epithelial cells, M-cells.
Известно, что железистая часть желудка птиц имеет форму веретенообразной трубки и состоит из вершины, тела и промежуточной зоны (перешейка). Она соединяется с пищеводом более узкой вершиной, направленной краниально, а с мышечной его частью соединена короткой промежуточной зоной, расположенной каудально. Стенка всех частей желудка образована слизистой, мышечной и серозной оболочками [2,4]. Характерной особенностью слизистой оболочки является наличие в ней поверхностных и глубоких желез, продуцирующих слизь. Их выводные протоки открываются на поверхность этой оболочки [1, 3].
Слизистую оболочку железистой части желудка птиц покрывает простой столбчатый железистый эпителий, который находится в непосредственном контакте с вместимым этого органа [3]. Его ультрамикроструктура у кур изучена недостаточно, что и стало целью этого исследования.
Материал и методика. Объектом исследования был поверхностный эпителий слизистой оболочки железистой части желудка 3 голов кур кросса Шевер 579 в возрасте 6 месяцев. При выполнении работы использовали общепринятые классические методы электронно-микроскопических исследований [5]. Исследования проводились с помощью электронного микроскопа SELMI ПЕМ -125К.
Результаты исследований.
Проведенными исследованиями
подтверждено, что поверхностный эпителий слизистой оболочки железистой части желудка кур - простой столбчатый (цилиндрический) железистый. Он образован одним слоем эпителиоцитов, который лежит на базальной мембране. Последняя сформирована гомогенным основным веществом и нежной сетью волокон. Между эпителиоцитами выявляются М-клетки.
Эпителиоцитов больше всего. Отдельные из них находятся в состоянии митоза. Эпителиоциты имеют столбчатую форму, их высота значительно превышает
ширину (рис. 1). Они плотно расположены друг к другу и соединены между собой различными типами контактов: плотными, простыми, интердигитальными и по типу демосом. В эпителиоцитах четко выражены два полюса: апикальный (направлен к внешней среде) и базальный (находится на базальной мембране). На их апикальном полюсе заметны микроворсинки. Однако в эпителиоцитах, которые перенаполнены секретом, микроворсинки единичные и апикальная поверхность этих клеток почти гладкая. Ядро одно, расположено в области базального полюса и имеет округлую, реже грушевидную форму (рис. 2). В нем есть одно ядрышко, гетерохроматин
преимущественно сосредоточен в нуклеоплазме и местами локально фиксирован к нуклеолеме. Перинуклеарное пространство неравномерной ширины и неодинаково выраженно по периметру ядра. В ядерной оболочке заметны поры.
Цитоплазма эпителиоцитов средней электронной плотности. Вблизи ядра в ней четко выражены канальцы гранулярной и агранулярной эндоплазматической сети, рибосомы и их скопления - полирибосомы. Митохондрии преимущественно
сосредоточены в средней части цитоплазмы и у апикального полюса. Они имеют овальную, палочковидную, округлую, веретеновидную форму с матриксом средней электронной плотности. Над ядром находится своеобразная зона округлой или овальной формы, контуры которой ограничены митохондриями. В ней заметны элементы комплекса Гольджи, среди которых преобладают цистерны, расположенные вместе с вакуолями и пузырьками. В среднем участке цитоплазмы эпителиоцитов содержится много секреторных включений в виде гранул округлой, удлиненно-овальной, веретеновидной формы и различной электронной плотности. Они расположены свободно. Секреторные гранулы ограничены мембраной. Некоторые из них, которых много в области апикального полюса, сливаются между собой или соединяются с плазмолеммой клетки. Из них секрет выделяется в просвет желудка. В участках цитоплазмы, в которой нет
секреторных включении, хорошо заметны отдельные тонофибриллы, которые переплетаются между собоИ и реже формируют пучки.
М-клетки (микроскладчатые)
расположены локально между
эпителиоцитами (рис.3). Считают, что они являются специализированными
эпителиальными клетками, которые способны захватывать антиген из просвета органов пищеварительного канала и
передавать его лимфоцитам.
М-клетки имеют светлую цитоплазму и круглое, реже неправильной формы ядро. В ядре есть одно ядрышко. Гетерохроматина в нуклеоплазме мало, он преимущественно фиксирован к
нуклеолеме. Цитоплазма содержит единичные митохондрии, рибосомы, элементы эндоплазматической сети. Она образует микроскладки (выросты цитоплазмы).
Рис. 2. Микроворсинки на апикальном полюсе эпителиоцита поверхностного эпителия слизистой оболочки железистой части желудка курицы. Электроннограмма, х7000: 1 - ядро; 2 -цитоплазма; 3 - микроворсинки
Рис. 1. Эпителиоциты поверхностного эпителия слизистой оболочки железистой части желудка курицы. Электроннограмма, х6000: 1 - ядро; 2 -цитоплазма
Рис. 3. Эпителиоцит и М-клетка поверхностного эпителия слизистой оболочки железистой части желудка курицы. Електроннограмма, х6000: 1 -эпителиоцит; 2 - М-клетка
Выводы: 1. Поверхностный эпителий слизистой оболочки железистой части
желудка кур простой столбчатый (цилиндрический) железистый. Он
образован эпителиоцитами, которые синтезирующих органелл и секреторных
расположены в один слой, лежащий на включений.
базальной мембране. 3. Между эпителиоцитами
2. Для эпителиоцитов свойственна выявляются отдельные М-клетки.
высокая синтезирующая активность, Последние имеют светлую цитоплазму с
которая обусловлена наличием в их микроскладками и слаборазвитые
цитоплазме хорошо развитых органеллы.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Королева Н.А. Микроморфология железистого отдела желудка кур / Н.А. Королева // Макро - микроморфология и гистохимия сельскохозяйственных животных в сравнительно - видовом аспектах. - Омск, 1987. - С.88 - 94. 2. Крашенинникова Е.Н. Микроструктура стенки желудка кур в норме и при вирусном гепатите Е: автореф. дис. на соискание учен. степени канд. биол. наук: спец. 06.02.01 - Диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных /Е.Н. Крашенинникова. - Саранск, 2013. - 22 с. 3. Крок Г.С. Микроскопическое строение органов сельскохозяйственных птиц с основами эмбриологии /Г.С. Крок - К.: Изд-во Укр. академии с.-х. наук, 1962. - 187 с. 4. Троянчук О.В. Морфолопчш особливосп шлунка курей у постнатальному перiодi онтогенезу / О.В. Троянчук // Вюник Житомирського нацюнального агроеколопчного ушверситету. - 2014. -№2 (46). - Т.5. - С. 280 - 286. 5. Уикли В. Электронная микроскопия для начинающих /Пер. с англ. /Уикли В. - М.: Мир, 1975. - 324 с.
УЛЬТРАМИКРОСТРУКТУРА КЛЕТОК ПОВЕРХНОСТНОГО ЭПИТЕЛИЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ЖЕЛЕЗИСТОЙ ЧАСТИ ЖЕЛУДКА КУР
Дышлюк Н.В.
Резюме
Поверхностный эпителий слизистой оболочки железистой части желудка кур простой столбчатый (цилиндрический) железистый. Он образован эпителиоцитами, которые расположены в один слой, лежащий на базальной мембране. Для них характерна высокая синтезирующая активность, которая обусловлена наличием в цитоплазме этих клеток хорошо развитых синтезирующих органелл и секреторных включений. Между эпителиоцитами выявляются единичные М-клетки. Последние имеют светлую цитоплазму с микроскладками и слаборазвитые органеллы.
ULTRAMICROSTRUCTURE CELLS OF MUCOSA SUPERFICIAL EPITHELIUM OF
CHICKENS PROVENTRICULUS
Dyshlyuk N.
Summary
The superficial epithelium of the proventriculus in chickens is simple columnar (cylinder) and glandular. Its cells are arranged in one layer, which lies on the basal membrane. They are characterized by a high synthesizing activity which is caused by means of well developed synthesizing secretory organelles and inclusions presented in the cytoplasm. There are isolated M-cells between epithelial cells. M-cells have a light cytoplasm with mikrofolds and poorly developed organelles.
