CC BY
83
УДК 576.08
т.в. тыринова, о.Ю. Леплина, И.А. тихонова, А.А. останин, E.F. Черных
цитотоксичЕская активность дендритных клеток против активированных cD4+ и cD8 т-лимфоцитов в культуре in vitro
НИИ клинической иммунологии СО РАМН (Новосибирск)
Целью настоящего исследования явилась сравнительная оценка цитотоксической активности IFNa-индуцированных дендритных клеток (ИФН-ДК) и. IL-4-индуцированных ДК (ИЛ4-ДК) против активированных в алло-СКЛ CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов. Показано, что в культурах с ИФН-ДК доля AnnexinV+/PI'клеток, соответствующих ранней стадии апоптоза, среди CD4+Т-лимфоцитов была ниже, чем. в культурах с ИЛ4-ДК. В то же время относительное количество AnnexinV+/PI+клеток (поздняя фаза апоптоза/некроз) среди CD4+Т-клеток после активации аллогенными ИФН-ДК и ИЛ4-ДК возрастало в равной степени. Продемонстрировано, что ИФН-ДК обладали сходной c ИЛ4-ДК способностью индуцировать апоптоз в CD3+CD8+Т-клетках.
Ключевые слова: дендритные клетки, CD4+T-лимфоциты, CD8+T-лимфоциты, апоптоз
cytotoxic activity of dendritic cells against activated cD4+ and cd8+t-lymphocytes in the culture in vitro
T.V. Tyrinova, O.Yu. Leplina, M.A. Tihonova, A.A. Ostanin, E.R. Chernykh
Institute of Clinical Immunology SB RAMS, Novosibirsk
The aim. of the present study was a comparative assessment of the cytotoxic activity of IFNa-induced. dendritic cells (IFN-DCs) and IL-4-induced DCs (IL4-DCs) against allo-MLC- activated CD4+ and CD8+T-lymphocytes. It was shown the level of AnnexinV+/PI- cells corresponding to early apoptosis among CD4+T-lymphocytes was lower in cultures with IFN-DCs compared, with IL4-DCs. At the same time the relative number of AnnexinV+/ PI+ cells (late phase of apoptosis/necrosis) among CD4+T-lymphocytes activated, by allogenic IFN-DCs and IL4-DCs increased in an equal degree. It was demonstrated, that IFN-DCs possesed similar ability to induce apoptosis of CD3+CD8+T-lymphocytes.
Key words: dendritic cells, CD4+ T-lymphocytes, CD8+T-lymphocytes, apoptosis
Дендритные клетки (ДК), будучи профессиональными антигенпрезентирующими клетками, играют ведущую роль в запуске специфического противоопухолевого и противовирусного иммунного ответа, активируя наивные Т-клетки, эффекторные CD8+Т-клетки и индуцируя анти-генспецифический иммунный ответ [15]. С другой стороны, исследования последнего десятилетия демонстрируют, что ДК способны подавлять рост и пролиферацию опухолевых клеток за счет прямого цитостатического и цитотоксического эффектов, при этом не повреждая здоровые клетки [10].
Относительно недавно была описана популяция ДК, генерируемая в культуре in vitro в условиях замены IL-4 (ИЛ4-ДК) на IFN-a (ИФН-ДК). ИФН-ДК отличаются от ИЛ4-ДК более высокой миграционной активностью, выраженной антигенпрезентирующей функцией, большей стабильностью в условиях дефицита ростовых факторов, а также способностью стимулировать как Th1-, так и ^2-ответ [12]. Кроме того, ИФН-ДК являются более эффективными стимуляторами CD8+ эффекторных Т-клеток [5]. С точки зрения эффекторной функции ИФН-ДК характеризуются более высокой киллерной активностью против TRAIL-чувствительных опухолевых клеток Jurkat и схожей с ИЛ4-ДК цитотоксичностью против TRAIL-резистентных клеток-мишеней НЕр-2 [6].
Закономерно возникает вопрос, распространяется ли цитотоксический эффект ДК на иммунокомпетентные клетки. Согласно немногочисленным данным литературы в качестве клеток-мишеней цитотоксической активности ДК могут выступать активированные Т-лимфоциты. Поскольку Т-клетки могут экспрессировать рецепторы к цитотоксическим лигандам TNF- семейства (Fas, TRAIL-R1, TRAIL-R2, TNF-R1) [3], можно предположить, что иммунокомпетентные клетки действительно могут выступать в качестве потенциальных мишеней к цитотоксической активности ИФН-ДК.
Так, показано, что плазмацитоидные ДК (пДК) способны индуцировать апоптоз CD4+^ лимфоцитов ВИЧ-инфицированных больных через TRAIL-зависимый сигнальный путь [14]. Интересно отметить, что ВИЧ-стимулированные пДК также проявляют цитотоксическую активность против ФГА-активированных CD4+Т-клеток здоровых доноров. Эти данные позволяют предположить, что, с одной стороны, цитотоксическая активность ДК необходима для элиминации пораженных клеток, но, с другой стороны, может индуцировать гибель здоровых клеток и приводить к истощению T-клеток на ранней стадии заболевания. Недавние исследования показали, что миелоидные ДК участвуют в элиминации активированных, но не покоящихся CD4 + и CD8+Т-лимфоцитов, и данная функция опосреду-
ется через механизм FasL/Fas-индуцированного апоптоза [4].
Тем не менее, сведения о цитотоксическом эффекте ИФН-ДК против иммунокомпетентных клеток в сравнении с цитотоксической активностью миелоидных ДК, генерируемых в стандартном протоколе, практически отсутствуют. В связи с этим целью настоящего исследования явилась сравнительная оценка апоптоз-индуцирующей активности ИФН-ДК и ИЛ4-ДК против активированных CD4 + и CD8 + Т-лимфоцитов.
материалы и методы
В исследование были включены 15 здоровых доноров крови. Мононуклеарные клетки (МНК) выделяли центрифугированием гепаринизиро-ванной венозной крови в градиенте плотности фиколла-верографина. ИФН-ДК получали путем культивирования прилипающей фракции МНК в 6-луночных планшетах (Nunclon, Дания) в течение 3 — 4 сут. в среде RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, США), дополненной 0,3 мг/мл L-глютамина, 5 мМ HEPES-буфера, 100 мкг/мл гентамицина и 2,5% сыворотки плодов коровы (БиолоТ, Санкт-Петербург) в присутствии GM-CSF (40 нг/мл, Sigma-Aldrich) и IFN-a (1000 Ед./мл, Роферон-А, Roche, Швейцария) с последующим дозреванием в течение 24 ч с липополисахаридом (10 мкг/мл, LPS Е. coli 0114:B4, Sigma-Aldrich). Для генерации ИЛ4-ДК прилипающую фракцию МНК инкубировали в полной культуральной среде в присутствии GM-CSF (40 нг/мл) и IL-4 (40 нг/мл, Sigma-Aldrich) в течение 5 суток. Конечное созревание ИЛ4-ДК индуцировали путем дополнительного культивирования клеток в течение 48 ч в присутствии ЛПС (10 мкг/мл).
Уровень апоптоза CD3 + CD4 + и CD3 + CD8 + Т-лимфоцитов оценивали в смешанной культуре лимфоцитов (СКЛ) при культивировании в течение 3 суток МНК доноров (0,1 х 106/лунку) в 96-луночных круглодонных планшетах в присутствии аллогенных ИФН-ДК в соотношении 10:1. Культуры дублировали в 12 идентичных повторах, с целью получения клеток в количестве, достаточном для проведения цитофлуориметри-ческого анализа. Для этого, 25 мкл МНК (1,0 х 106), полученных после культивирования в алло-СКЛ, инкубировали в течение 45 мин при 4 °С в темноте с 5 мкл АРС-коньюгированных анти-CD3-антител и 5 мкл PerCP-коньюгированных анти-CD4 (Becton Dickinson, США). После двукратной отмывки холодным забуференным физиологическим раствором, клетки суспендировали в 100 мкл 10Х-буфера (Becton Dickinson, США) и добавляли по 5 мкл An-nexin V-FITC и PI (Becton Dickinson, США). Клетки инкубировали в течение 15 мин в темноте при комнатной температуре, затем добавляли 400 мкл буфера 10X и измеряли на проточном цитофлуо-риметре FACS Calibur (Becton Dickinson, США).
Количество апоптотических клеток определяли по связыванию FITC-меченного Annexin V с клеточной мембраной (в диапазоне зеленого света) и PI с
ДНК клетки (в диапазоне красного света) в гейтах CD3+CD4+ или CD3+CD8+ (CD4-) Т-лимфоцитов. Количество клеток, находящихся в ранней стадии апоптоза, регистрировалось по связыванию с Annexin V-FITC и отсутствию связывания с PI. Флуоресценция клеток в обоих диапазонах свидетельствовала о поздней стадии апоптоза или о некрозе клетки. Жизнеспособные клетки соответствовали Annexin V-FITC'/PI' зоне на цитограмме. Результаты выражались в виде процентного соотношения позитивных клеток к общему количеству CD3 + CD4 + , CD3+CD8 + Т-лимфоцитов. В каждом образце анализировали не менее 1 х 104 клеток; для обсчета результатов использовали программы Cell Quest.
Статистическую обработку данных проводили при помощи пакета прикладных программ Statistica 6.0 для Windows. Для выявления значимых различий сравниваемых показателей использовали непараметрический U-критерий Вилкоксона — Манна — Уитни. Различия считали достоверными при уровне значимости p < 0,05. Данные приведены в виде среднего арифметического значения (М) и стандартной ошибки среднего (S.E.).
результаты и обсуждение
Как видно и данных таблицы 1, ДК индуцируют в СКЛ апоптоз Т-лимфоцитов, активированных аллоантигенами. Так, совместное культивирование ЛПС-стимулированных ИФН-ДК с аллогенными МНК доноров сопровождалось почти двукратным возрастанием уровня AnnexinVVP! клеток среди CD3 + CD4+Т-лимфоцитов в 3-суточных культурах по сравнению с относительным количеством CD4+/AnnexinV+/PI- Т-клеток среди нестимулированных МНК (pU= 0,01). Подобные изменения отражают увеличение экспрессии CD3 + CD4+Т-клетками раннего маркера апоптоза
— фосфатидилсерина, появление которого на наружной мембране клеток связывают с начальной стадией апоптоза. Аналогичные изменения наблюдались и в случае активации МНК в алло-СКЛ ЛПС-стимулированными ИЛ4-ДК. Количество AnnexinWPT клеток в популяции CD3 + CD4 + Т-лимфоцитов возрастало в 2,5 раза. При этом регистрировалась отчетливая тенденция к более выраженной способности ИЛ4-ДК индуцировать ранний апоптоз CD4+Т-лимфоцитов по сравнению с ИФН-ДК (11,0 ± 0,9 vs 8,5 ± 0,9 %; pv = 0,09). Кроме того, мы провели анализ уровня Т-лимфоцитов в стадии позднего апоптоза (или некроза), которая проявляется не только потерей ассиметричности клеточной мембраны за счет перестройки фос-фолипидных компонентов, но и нарушением ее целостности, обусловливающей проникновение внутрь клетки ДНК-связывающего красителя PI. Относительное количество AnnexinV+/PI+ клеток среди CD4+Т-лимфоцитов в контрольных культурах было незначительным, однако увеличивалось в 2 раза после активации аллогенными ИФН-ДК и ИЛ4-ДК в СКЛ (pv = 0,01 и pv = 0,03, соответственно).
Таблица 1
Влияние ДК на апоптоз CD3+CD4+ Т-лимфоцитов
Показатель Контроль +ИФН-ДК +ИЛ4-ДК
Аппехіп У+/РГ 4,4 ± 1,1 8,5 ± 0,9 ' 11,0 ± 0,9 *
Аппехіп У+/РГ 0,5 ± 0,1 1,1 ± 0,3 ' 1,3 ± 0,3 *
Аппехіп У-/РГ 1,3 ± 0,4 2,8 ± 1,6 4,2 ± 1,7
примечание: представлено относительное количество (%, М ± SE) апоптотических CD3+CD4+ Т-лимфоцитов (п = 8), среди нестимулиро-ванных МНК здоровых доноров (контроль) и среди МНК, активированных в течение 3 суток в СКЛ в присутствии аллогенных ЛпС-стимулированных ИФН-ДК (+ИФН-ДК) и ИЛ4-ДК (+ИЛ4-ДК) в соотношении 10:1.
* - ри< 0,05 - достоверность различий по сравн ению с контролем.
10
10
10-
10
10
2,71% 1,59%
: ■■■■} ч.уСТол 91 П7#'ТЗт'- " 4,64%
10-
РИ-Н
В качестве примера на рисунке 1 приведены данные гистограмм распределения клеток в зависимости от их жизнеспособности в популяции СОЗ + С04+Т-лимфоцитов у одного из обследованных нами доноров. В контроле исследуемая клеточная популяция была представлена преимущественно живыми клетками и небольшой примесью АппехшУ+/РГ апоптотических клеток (91,07 и 4,64 %, соответственно). Активация МНК аллоантигенами сопровождалась возрастанием относительного количества апоптотических С04+Т-лимфоцитов по сравнению с контролем. Однако в культурах с ИФН-ДК доля апоптотических Ап-пехтУ+/РГ С04+Т-лимфоцитов была ниже, чем в культурах с ИЛ4-ДК. Количество АппехшУ+/Р1 + С04+Т-клеток в культурах с ИФН-ДК и ИЛ4-ДК возрастало в равной степени.
Сравнительный анализ цитотоксической активности ЛПС-стимулированных ИФН-ДК и ИЛ4-ДК (табл. 2) против CD3 + CD8+Т-лимфоцитов показал, что ИФН-ДК обладали сходной с ИЛ4-ДК способностью индуцировать апоптоз в CD8+Т-клетках. Так, относительное количество CD8+Т-лимфоцитов в стадии раннего апоптоза возрастало в среднем в 1,5 раза. При этом активация CD8+Т-клеток не сопровождалась увеличением относительного количества клеток в стадии позднего апоп-тоза/некроза. Как в контрольных культурах, так и культурах СКЛ уровень AnnexinV+/PI+-клеток среди CD8+Т-лимфоцитов составлял в среднем 1 %.
Таблица 2
Влияние дк на апоптоз CD3+CD8+ т-лимфоцитов
Показатель Контроль +ИФН-ДК +ИЛ4-ДК
Аппехіп У+/РГ 13,2 ± 1,0 20,9 ± 1,6 ' 20,7 ± 3,0 '
Аппехіп У7РГ 1,1 ± 0,9 1,0 ± 0,1 1,0 ± 0,2
Аппехіп У7РГ 0,6 ± 0,3 1,0 ± 0,2 2,5 ± 0,5
примечание: представлено относительное количество (%, M±SE) апоптотических CD3+CD8+ Т-лимфоцитов (п = 8), среди нестимулиро-ванных МНК здоровых доноров (контроль) и среди МНК, активированных в течение 3 суток в СКЛ в присутствии аллогенных ЛпС-стимулированных ИФН-ДК (+ИФН-ДК) и ИЛ4-ДК (+ИЛ4-ДК) в соотношении 10:1.
* - ри < 0,05 - достоверность различий по сравн ению с контролем.
10
1:4 н г,-
_1 10
10
10
0,00% 2,43%
87,52^1І^ ■ ■ Аі.- Ів І ' 10,05%
10-
РИ -Н
10 4,26% 2,19%
103
X
гч 10-
іі-
10і :Ч •
77,42%'" '.і 16,13%
■1 П° ^ .
1(?
1 о1
10"
РИ -Н
10і
1ГЇ
рис. 1. Распределение апоптотических и жизнеспособных CD4+Т-лимфоцитов. Представлены индивидуальные значения распределения апоптотических и жизнеспособных нестимулированных CD3+CD4+Т-лимфоцитов (а) и активированных аллогенными ИФН-ДК (б) и ИЛ4-ДК (в) в СКЛ. По оси абсцисс ^1)
- интенсивность флуоресценции Аппех^^ІТС. По оси ординат ^2) - интенсивность флуоресценции РІ. Левый нижний квадрант - Аппехіп ^/Рі- - жизнеспособные клетки; правый нижний квадрат - Аппехіп V+/PI- - ранняя стадия апоптоза; правый верхний квадрант - Аппехіп V+/PI+ - поздняя стадия апоптоза или некроз; левый верхний квадрант - Аппехіп V-/ РІ+ - некроз.
а
б
в
заключение
Цитотоксическая активность является важной эффекторной функцией клеток иммунной системы и играет ключевую роль в элиминации опухолевых и инфицированных вирусом клеток. Недавние исследования показали, что наряду с NK-клетками и цитотоксическими CD8 + Т-лимфоцитами, прямым цитотоксическим действием обладают также и ДК [10]. В представленной работе, по сути, впервые продемонстрировано, что ДК, генерированные в культуре in vitro, могут индуцировать апоптоз не только в трансформированных клетках, но и в популяциях CD4 + и CD8 + Т-лимфоцитов, активированных аллоантигенами. При этом сравнение ИФН-ДК и ИЛ4-ДК свидетельствует о схожей цитотоксичности указанных типов ДК против активированных Т-лимфоцитов.
Согласно данным литературы цитотоксиче-ская активность ДК может опосредоваться различными апоптоз-индуцирующими молекулами, относящимся к TNF-семейству (TRAIL, FasL, TNF-a) [10]. Известно, что IFN усиливают экспрессию эффекторными клетками различных проапопто-генных молекул, в частности FasL и TRAIL [8, 10]. Поскольку Т-лимфоциты в условиях активации экспрессируют рецепторы к соответствующим проапоптогенным лигандам, можно предположить, что ИФН-ДК, обладающие более высокой цитотоксической активностью против TRAIL- и FasL-чувствительной опухолевой линии Jurkat по сравнению с ИЛ4-ДК [6], также будут проявлять более высокую проапоптотическую активность против активированных лимфоцитов. Однако данная гипотеза не подтвердилась. Согласно полученным нами данным, уровень AnnexinVVP! и AnnexinV+/PI+ среди CD4 + и CD8+Т-лимфоцитов в культурах, стимулированных ИФН-ДК, не превышал соответствующих показателей в культурах МНК, стимулированных ИЛ4-ДК.
По-видимому, в реализации цитотоксиче-ской активности ДК против активированных Т-лимфоцитов могут быть вовлечены другие механизмы. Согласно данным литературы, запуск программы апоптоза Т-лимфоцитов, активированных через Т-клеточный рецептор, может осуществляться через рецептор клеточной смерти (PD-1) [13]. Одним из двух известных к нему лигандов является молекула B7-H1 (PD-L1), которая экспрессируется на ДК. Кроме того, ранее нами было показано, что ЛПС-стимулированные ИЛ4-ДК характеризуются более высокой экспрессией B7-H1, чем ИФН-ДК [1]. Поэтому включение сигнального пути PD-1/ B7-H1 при взаимодействии ИФН-ДК и ИЛ4-ДК с Т-лимфоцитами может быть еще одним возможным механизмом, посредством которого ДК могут индуцировать апоптоз Т-лимфоцитов.
Представленные в настоящей работе данные демонстрируют, что популяции CD4 + и CD8 + Т-клеток, активированных в алло-СКЛ, характеризуются разной чувствительностью к цитоток-сическому действию как ИФН-ДК, так и ИЛ4-ДК. Так, активированные CD4+Т-лимфоциты в ответ
на аллоантигены в большей степени подвержены цитотоксическому действию ДК, чем CD8+^ лимфоциты.
Действительно, ряд исследователей отмечают различную чувствительность CD4+ и CD8+ Т-клеток к тем или иным проапотогенным лигандам. Bosque A. и соавт. показали, что IL-2-активированные субпопуляции CD4+ и CD8+Т-лимфоцитов характеризуются одинаковой чувствительностью к Fas/FasL регуляции, тогда как CD8+ T-лимфоциты более чувствительны к APO2L/TRAIL опосредованному пути [2]. Другие исследователи, наоборот, демонстрируют, что активированные CD8 + Т-клетки, несмотря на экспрессию проапоптогенного рецептора TRAIL-R2, все же остаются резистентными к цитотоксическому действию TRAIL за счет повышения экспрессии антиапоптотических рецепторов TRAIL-R3 и TRAIL-R4, а также за счет экспрессии внутриклеточного протеина с-FLIP, ингибирующего каскад клеточных реакций при апоптозе [9]. Недавние исследования на экспериментальных моделях показали, что толерогенные CD11с+CD8+ДК способны подавлять аллергическое кожное воспаление через TNF-опосредованный киллинг аллерген-специфичных эффекторных CD8+^ клеток, не нарушая при этом генерацию и функции регуляторных Т-клеток. [7]. Этот эффект связан с повышением экспрессии рецептора TNF-R2^75) на CD8+Т-клетках сенсибилизированных мышей, что обуславливает чувствительность этих клеток к TNF-медиированному апоптозу.
Можно полагать, что цитотоксическая активность ИФН-ДК, направленная против активированных лимфоцитов, имеет определенное значение при физиологических условиях, например при ограничении иммунного ответа. Однако чрезмерно высокий уровень экспрессии проапоптогенных молекул на ИФН-ДК может приводить к усилению их киллерной активности против иммуннокомпетентных клеток и способствовать развитию различных иммунопатологических процессов. Подобный эффект описан для ИЛ4-ДК при цито-мегаловирусной инфекции [11]. В этом случае ДК индуцируют апоптоз как пораженных вирусом, так и здоровых активированных CD4+T-клеток через TRAIL- и FasL-медиируемые пути.
В целом, проведенные нами исследования позволили ответить на важный вопрос о цитоток-сической функции ИФН-ДК против активированных Т-лимфоцитов. Несмотря на более высокую противоопухолевую цитотоксическую активность ИФН-ДК, данный тип клеток обладает схожей с ИЛ-4ДК цитотоксичностью против активированных лимфоцитов, что обосновывает целесообразность использования ИФН-ДК при проведении иммунотерапии у больных с онкопатологией.
литература
1. Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Тырино-ва Т.В. Сравнительная характеристика фенотипа и цитокин-секреторной активности дендритных клеток человека, генерируемых in vitro в присут-
ствии IFN-альфа и IL-4 // Иммунология. — 2012.
- № 1. - С. 36-46.
2. Bosque A., Pardo J., Martmez-Lorenzo M.J. Human CD8+T cell blasts are more sensitive than CD4+T cell blasts to regulation by APO2L/TRAIL // Eur. J. Immunol. - 2005. - Vol. 35. - P. 1812-1821.
3. Gupta S., Su H., Bi R. Life and death of lymphocytes: a role in immunesenescence // Immunity & Ageing. - 2005. - Vol. 2. - P. 12.
4. Hoves S., Krause S.W., Herfarth H. Elimination of activated but not resting primary human CD4 + and CD8+T cells by Fas ligand (FasL/CD95L)-expressing killer-dendritic cells // Immunobiology. - 2004. -Vol. 208. - P. 463-475.
5. Lapenta C., Santini S., Spada M. IFN-a-conditioned dendritic cells are highly efficient in inducing cross-priming CD8 + T cells against exogenous viral antigens // Eur. J. Immunol. - 2006. -Vol. 36. - P. 2046-2060.
6. Leplina O., Tyrinova T., Tikhonova M. Direct Antitumor Activity of Interferon-Induced Dendritic Cells of Healthy Donors and Patients with Primary Brain Tumors // Glioma - Exploring Its Biology and Practical Relevance. - 2011. - P. 325-342.
7. Luckey U., Maurer M., Schmidt T. T cell killing by tolerogenic dendritic cells protects mice from allergy // J. Clin. Invest. - 2011. - Vol. 121, N 10. -P. 3860-3871.
8. Maciejewski J., Selleri C., Anderson S., Young N.S. Fas antigen expression on CD34 + human marrow cells induced by interferon-y and tumor
necrosis-a and potentiated cytokine mediated hemopoietic suppression in vitro // Blood. — 1995. — Vol. 85. - P. 3183-3190.
9. Mirandola P., Ponti C., Gobbi G. Activated human NK and CD8 + T cells express both TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) and TRAIL receptors but are resistant to TRAIL-mediated cytotoxicity // Blood. - 2004. - Vol. 104, N 8. - P. 2418-2424.
10. Rissoan M.C., Duhen T., Wesa A.K., Storkus W.J. Killer dendritic cells: mechanisms of action therapeutic implications for cancer // Cell Death Differ. - 2008. - Vol. 15. - P. 51-57.
11. Raftery M.J., Schwab M., Eibert S.M. Targeting the function of mature dendritic cells by human cytomegalovirus: a multilayered viral defense strategy // Immunity. - 2001. - Vol. 15. - P. 997-1009.
12. Santini S., Pucchini T., Lapenta C. A new type 1 IFN-mediated pathway for the rapid differentiation of monocytes into highly active dendritic cells // Stem cells. - 2003. - Vol. 21. - P. 357-362.
13. Sharpe A.H., Wherry E.J., Ahmed R., Freeman G.J. The function of programmed cell death 1 and its ligands in regulating autoimmunity and infection // Nature Immunology. - 2007. - Vol. 8. - P. 239-245.
14. Stary G., Klein I., Kohlhofer S. Plasmacytoid dendritic cells express TRAIL and induce CD4 + T-cell apoptosis in HIV-1 viremic patients // Blood. -2009. - Vol. 114. - P. 3854-3863.
15. Steinman R.M. The dendritic cell system and its role in immunogenicity // Annu. Rev. Immunol. -1991. - Vol. 9. - P. 271 -296.
Сведения об авторах
Тыринова Тамара Викторовна - младший научный сотрудник ФГБУ «НИИ клинической иммунологии» СО РАМН (630079, г Новосибирск, ул. Степная, д. 63/1, кв. 15; тел.: +7-913-892-25-59; e-mail: tyrinova@bk.ru)
Леплина Ольга Юрьевна - старший научный сотрудник ФГБУ НИКИ СО РАМН, доктор медицинских наук (630005, г. Новосибирск, ул. Некрасова, д. 55 кв. 61: тел.: 383 228-21-01; e-mail: oleplina@mail.ru)
Тихонова Марина Александровна - ведущий научный сотрудник ФБГУ НИИКИ СО РАМН, кандидат биологических наук Останин Александр Анатольевич - главный научный сотрудник лаборатории клеточной иммунотерапии НИИ клинической иммунологии СО РАМН, доктор медицинских наук, профессор
Черных Елена Рэмовна - заведующая лабораторией клеточной иммунотерапии, заместитель директора НИИКИ СО РАМН, чл.-корр. СО РАМН, доктор медицинских наук, профессор (630110, г. Новосибирск, ул. Б. Хмельницкого, 62, кв. 4; тел.: 8-(383)-228-57-49; e-mail: bmt-novosibirsk@mail.ru)
