CC BY
30
«Дни Иммунологии в Санкт-Петербурге 2015» Медицинская Иммунология
Immunology Days in St. Petersburg 2015 Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
ЛЖД (СС и СР), ЧСС и интенсивность функционирования структур (ИФС) исследовали в пробах на адрено-реактивность, нагрузку сопротивлением и реоксиге-нацию. Все животные были разделены на группы: 1 (15 крыс) — интактные животные; 2 (18 крыс) — животные с ЭИЭД без препаратов; 3 и 4 (19 и 20 крыс соответственно) — с ЭИЭД, получавшие симваститин или розуваста-тин (0,05 мг/кг, внутрижелудочно, через 24 часа, №7); 5-я группа (20 крыс) — ЭИЭД, получавшие L-норвалин (10 мг/кг, внутрижелудочно, через 24 часа, №7), в 6 и 7 группах вводили комбинации статинов и L-норвалина в указанных дозировках.
Основные результаты. У крыс с ЭИЭД снижались показатели ФП, ФЧ и повышалась метаболическая активность нейтрофилов периферической крови в спонтанном и стимулированном НСТ-тестах, кроме того, снижались САД, ДАД и увеличивалась ЧСС и, как следствие, КЭД. При исследовании сократительной функции миокарда в условиях ЭИЭД повышались СС и СР, не изменялись ЛЖД, ЧСС и ИФС, однако, при проведении функциональных проб отмечалось угнетение миокардиальных сократительных резервов. Внутрижелудочное введение розувастатина или L-норвалина, по сравнению с симва-статином, эффективнее корригировало показатели фагоцитоза, НСТ-сп., НТС-ст н/з и о/з, сосудистые реакции и сократительную функцию миокарда животных с ЭИЭД. Комбинированное использование L-норвалина и розувастатина по сравнению с сочетанием L-норвалина и сим-вастатина обладало более выраженным иммуномодули-рующим, эндотелио- и кардиопротективным действием при стафилококковой модели ЭИЭД.
Заключение. Таким образом, ЭИЭД характеризуется выраженными изменениями соотношений фагоцитарной, метаболической активности нейтрофилов, сосудистых реакций и сократительной активности миокарда, увеличением коэффициента эндотелиальной дисфункции. Применение розувастатина, L-норвалина и их сочетаний оказалось эффективнее, чем симвастатин и его сочетание с L-норвалином в коррекции нарушенных показателей при моделировании ЭИЭД.
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ АНТИТЕЛ К ГИСТОНОВЫМ БЕЛКАМ И ОСНОВНОМУ БЕЛКУ МИЕЛИНА В КРОВИ ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ И БОЛЬНЫХ РАССЕЯННЫМ СКЛЕРОЗОМ
Кляус Н.А., Седых С.Е., Невинский Г.А.
Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, Россия
Введение. Выявление специфических аутоантител (ААТ) на ранних стадиях развития аутоиммунных заболеваний не всегда обладает достаточной диагностической точностью в связи с тем, что возможна их продукция и у людей без аутоиммунных заболеваний. В последние годы обнаружено, что ААТ могут обладать каталитической активностью, оценка уровня которой может рассматриваться как перспективный метод диагностики аутоиммунных заболеваний.
Цель и задачи: анализ относительного содержания ААТ к ОБМ и ГБ в крови больных РС и здоровых доноров, получение поликлональных ААТ из крови исследу-
емых лиц и исследование относительной активности гидролиза ОБМ и ГБ абзимами.
Материал и методы. Исследованы препараты плазмы крови 6 пациентов с подтвержденным ранее диагнозом РС и 6 здоровых доноров. Для определения содержания АТ к ОБМ и ГБ использовался метод прямого иммуно-ферментного анализа. Методом аффинной хроматографии на Protein G-Sepharose у исследованных лиц были получены IgG, из которых выделены фракции IgG, обладающие высоким сродством к ОБМ и ГБ, используя гистон-сефарозу и ОБМ-сефарозу. Полученными абзи-мами проведен гидролиз ОБМ и ГБ, активность которого оценивалась при помощи определения белковых фракций на электрофорезе. Для расчета достоверности различий использовались методы непараметрической статистики.
Результаты. Содержание АТ к ГБ у здоровых доноров — 0,59+0,09 А^50 , в сравнении с пациентами с РС — 0,77+0,10 А,50 (р < 0,05). Содержание АТ к ОБМ у группы исследованных здоровых доноров 0,56+0,19 А^о значимо не отличалось в сравнении с больными РС — 0,6+0,12 А^50, (р < 0,05). Выделенные из плазмы крови здоровых доноров АТ не продемонстрировали значимой гидролитической активности. Фракции IgG из плазмы крови больных РС, связывающие ГБ, в 28 раз более активны в гидролизе ГБ, чем ОБМ. Фракции, не связывающие ГБ, но имеющие сродство к ОБМ в 62 раза более активны в гидролизе ГБ, чем ОБМ. Фракции IgG из плазмы крови больных РС, связывающие ОБМ, в 1,3 раза более активны в гидролизе ОБМ, чем ГБ. Фракции, не связывающие ОБМ, но имеющие сродство к гистон-сефарозе более активны как в гидролизе ОБМ, так и ГБ; гидролиз ГБ этими фракциями в 1,1-2,4 раза более эффективен, чем ОБМ.
Заключение. Впервые показано, что плазма крови больных РС и здоровых доноров содержит АТ к ГБ и ОБМ, обладающие каталитической активностью. Выделенные препараты АТ из крови больных РС, но не здоровых доноров, эффективно гидролизуют ГБ. АТ, взаимодействующие с иммобилизованными ОБМ и ГБ, гидролизуют как ОБМ, так и ГБ. Эффективность гидролиза ГБ существенно выше, чем ОБМ.
ЦИТОКИНОВЫЙ СПЕКТР ПЛАЗМЫ КРОВИ БОЛЬНЫХ С ВНЕБОЛЬНИЧНОЙ ПНЕВМОНИЕЙ ДО И ПОСЛЕ СТАНДАРТНОГО ЛЕЧЕНИЯ
Поляков Д.В., Солошенко В.В., Конопля Е.Н., Локтионов А.Л.
Курский государственный медицинский университет, Курск, Россия
Введение. Цитокины являются одной из наиболее мощных систем регуляции и интеграции врожденных и адаптивных форм иммунного ответа. Кроме того, исследование концентрации цитокинов в плазме крови больных с различной соматической патологией позволяет предполагать наличие новых механизмов развития болезни и разрабатывать в этой связи эффективные фармакологические и нефармакологические способы лечения. Одним из актуальных заболеваний, характеризуемых высокими показателями летальности, несмотря на имеющиеся методы диагностики, а также появление новых ле-
2015, Т. 17, № 4 2015, Vol. 17, No 4
«Дни Иммунологии в Санкт-Петербурге 2015» Immunology Days in St. Petersburg 2015
карственных средств с антибактериальной активностью, является внебольничная пневмония (ВП), патогенез которой все еще недостаточно изучен (Караулов А.В., Ка-люжин О.В., 2013).
Цель и задачи — оценка системы цитокинов до и после стандартного лечения у больных внебольничной пневмонией средней степени тяжести.
Материалы и методы. Под постоянным наблюдением в ОБУЗ «Городская клиническая больница №6» г. Курска находился 51 пациент с ВП средней степени тяжести. Средний возраст больных составлял 46,2±7,4. Все пациенты подвергались комплексному клиническому и ла-бораторно-инструментальному обследованию: проводились сбор жалоб и анамнеза, физикальное обследование, электрокардиография, рентгенография грудной клетки, клинический и биохимический анализы крови, бактериологический анализ мокроты. На момент госпитализации больные, в подавляющем большинстве, предъявляли жалобы на сухой или влажный кашель с мокротой, повышение температуры тела до 38-39 °С на фоне прогрессирующей слабости, сонливости, снижения аппетита. У всех вошедших в исследование больных диагноз пневмонии был подтвержден наличием инфильтративных изменений при рентгенографии органов грудной клетки. Всем пациентам проводилось лечение в строгом соответствии с национальными рекомендациями (Российское респираторное общество/МАКМАХ, 2010), которое включало антибактериальные препараты, муколитики, инфузионную дезинтоксикационную и симптоматическую терапию. При помощи наборов для ИФА в плазме крови больных ВП до и после различных методов лечения оценивали концентрацию провоспалительных (TNF, IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-18), противовоспалительного (IL-4) цитокинов, GM-КСФ, IL-2, IFNy, рецепторного антагониста к IL-1 (РАИЛ). Контрольная группа состояла из 12 здоровых доноров того же возраста.
Результаты и обсуждение. До лечения у больных ВП в плазме крови установлено повышение концентрации провоспалительных (TNF, IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-18), противовоспалительного (IL-4) цитокинов, GM-КСФ, IL-2, IFNy, снижение концентрации РАИЛ. Стандартное лечение больных ВП корригировало содержание TNF, IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-18, G-КСФ, РАИЛ, в большей степени повышало концентрацию IL-4 и IL-10.
Заключение. Полученные результаты позволяют констатировать провоспалительную направленность изменений в системе цитокинов, о чем свидетельствует повышение концентрации основных медиаторов воспалительной реакции, инициирующих этот процесс (TNF, IL-1ß, IL-6, IL-18), обеспечивающих мобилизацию гранулоцитарно-го и моноцитарно-макрофагального звеньев (IL-8, IL-18, GM-КСФ), регуляторных факторов (IL-2, IFNy). Отмечается компенсаторное повышение содержания IL-4, направленное на контроль генерализации воспалительной реакции. Лечение больных ВП в соответствии состандар-том не позволяет нормализовать большинство нарушенных показателей цитокинового статуса, что обосновывает включение в комплексное лечение ВП различных методов фармакологической и нефармакологической имму-нореабилитации.
ИММУННЫЙ ГОМЕОСТАЗ И ЭНДОТЕЛИАЛЬНАЯ ДИСФУНКЦИЯ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ ПАНКРЕАТОБИЛИАРНОЙ ОБЛАСТИ; КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ
Рагулина В.А.
Курский государственный медицинский университет, Курск, Россия
Введение. Различные виды патологии, в том числе панкреатобилиарной области, сопряжены с нарушениями иммунного гомеостаза и эндотелиальной дисфункцией. В связи с тем, что недостаточно изучены взаимосвязь возникновения и развития эндотелиальной дисфункции и иммунных нарушений, особого внимания заслуживают исследования, в которых изучаются механизмы регулирования иммунного гомеостаза, играющего немаловажную роль в патогенезе эндотелиальной дисфункции.
Цель и задачи — оценить иммунные нарушения, степень эндотелиальной дисфункции и эффективность их коррекции производными 3-гидроксипиридина (3-ГП) в условиях экспериментальной патологии органов пан-креатобилиарной области.
Материалы и методы. Эксперименты проведены на 84 здоровых крысах Вистар, массой 180-200 г с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных. Острое токсическое поражение печени (ОТПП) моделировали внутрибрюшинным введением 3 мл/кг четыреххлористого углерода (ЧХУ) в виде 50% раствора в оливковом масле, трехкратно, через 24 часа или внутрижелудочным введением индометацина (трехкратно, с интервалом 24 ч., по 5 мг/кг). Острый деструктивный панкреатит (ОДП) моделировали по R.N. Wang. Производные 3-ГП вводили пятикратно, через 24 часа, внутрибрюшинно в экспериментально подобранных дозах: соединение ХС-9 — 35 мг/кг, «Этоксидол» и «Мек-сидол» по 50 мг/кг. Степень эндотелиальной дисфункции у экспериментальных животных, а также степень ее коррекции исследуемыми препаратами оценивали по расчетному коэффициенту эндотелиальной дисфункции (КЭД). Выраженность гуморального иммунного ответа (ГИО) на эритроциты барана (ЭБ) оценивали путем определения в селезенке числа иммунных АОК (Зауэр Х., 1989). Формирование реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) индуцировали ЭБ (Федосеева ТВ. и др., 1993). Группа контроля состояла из 15 здоровых животных.
Основные результаты. У животных с ОТПП, вызванным введением ЧХУ, наблюдалась стимуляция развития как ГИО, так и ГЗТ При ОТПП, вызванном введением ЧХУ, применение «Мексидола» корригировало, но не до контрольных значений, а «Этоксидола» и соединения ХС-9 — нормализовало количество иммунных АОК на ЭБ в селезенке отравленных животных и показатели, характеризующие ГЗТ У крыс с ОТПП, вызванным введением индометацина, в большей степени у животных с ОДП, наблюдалось угнетение ГИО и ГЗТ на ЭБ. При острой токсической гепатопатии, вызванной поступлением в организм индометацина, применение «Мексидола» не влияло, соединения ХС-9 корригировало, а «Этоксидола» нормализовало показатели иммунной реактивности. В условиях ОДП «Мексидол» корригировал, но не до показателей здоровых животных, а «Этоксидол» и соеди-
