CC BY
44
¥
УДК 616-006
В.В. Новицкий, Н.В. Рязанцева, Л.С. Литвинова, Ю.В. Колобовникова, Е.Н. Кнутарева, Е.С. Григорьева, Е.В. Суворова
ЦИТОКИНОПОСРЕДОВАННЫЕ МЕХАНИЗМЫ ФОРМИРОВАНИЯ СИНДРОМА ЭОЗИНОФИЛИИ ПРИ ГЕМОБЛАСТОЗАХ
ГОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет, Томск
Проведено исследование продукции эозинофилстимулирующих цитокинов (1Ь-3, 1Ь-5) мо-нонуклеарными клетками, содержания эотаксина в сыворотке крови методом иммунофер-ментного анализа; экспрессии рецепторного аппарата эозинофильных клеток методом проточной цитофлюориметрии у больных неходжкинскими лимфомами. Выявлено увеличение уровня конституциональной продукции мононуклеарньши клетками медиаторов — 11.-3,
11.-5, при неизменной концентрации эотаксина в сыворотке крови. Вместе с тем, у данной категории пациентов регистрировалось повышенное количество эозинофильных клеток, несущих 1Ь-5Я и еоїахіпЯ; содержание ІЬ-ЗЇІ-позитивньїх клеток оказалось, напротив, сниженным.
Ключевые слова: лимфоциты, эозинофилы, цнтокины, рецепторы, межклеточная кооперация
В последние годы в клинической практике врачей различных специальностей все чаще обращается внимание на заболевания и синдромы, сопровождающиеся развитием феномена эозино-филии [2, 4, 5]. Наиболее часто больные с эози-нофилией выявляются в практике пульмонологов и аллергологов [5]. Однако эозинофилия не является редкостью при заболеваниях сердца и сосудов (системные васкулигы) [4]. Весьма часто вышеназванный синдром встречается у больных с паразитарными (описторхоз, трихинеллез, шистосомоз и др.), грибковыми (аспергиллез) и вирусными (гепатиты А, В и С, инфекционный мононуклеоз) заболеваниями [2,4,5].
С явлением эозинофилии нередко ассоциированы злокачественные (миело- и лимфопролиферативные) заболевания системы крови [2, 4, 5, 6]. Суждения о значении гемической и тканевой эозинофилии при гемобластозах до последнего времени носили весьма противоречивый характер. Ранее высказывались предположения о ее защитной роли, мотивированные тем, что эозинофилы способны продуцировать активные компоненты противовоспалительного действия [5, 9]. Однако в настоящее время большинство исследователей сходятся во мнении о повреждающем действии эозинофилии и особенно гиперэозинофилии [2, 4, 5, 15]. Вместе с тем известные на сегодняшний день механизмы формирования синдрома эозинофилии не позволяют создать целостного представления о патогенезе этого феномена.
Принципиальным аспектом в изучении пусковых механизмов развития любого патолох'ичес-
кого процесса является исследование природы кооперативных взаимодействий эффекторных клеток, к которым с полным основанием можно отнести клетки крови. Важнейшую роль в установлении и стабилизации контактов между им-муноцитами и другими клетками организма, в частности эозинофилами, играет цитокинрецеп-торная сеть [8, 15]. Именно посредством цитокинов, синтезируемых и секретируемых клеткой, осуществляются лигандрецепторные взаимодействия за счет связывания растворимых веществ с аффинным рецептором на клеточной поверхности. Так, особое влияние на процессы пролиферации, дифференцировки и активации лейкоцитов эозинофильного ряда оказывают медиаторы, вырабатываемые преимущественно Т-хелнер-2-(ТЬ) лимфоцитами, такие, как интерлейкин (1Ь)-3, 1Ь-4, 1Ь-5, гранулоцитар-но-макрофагальный колониестимулирующий фактор (СМ-СБР) и др. [1, 2, 4, 15]. Следует отметить, что нарушение реализации механизмов межклеточной кооперации иммунокомпетент-ных клеток и эозинофилов может обусловливать дизрегуляцию процессов клеточного гомеостаза лейкоцитов эозинофильного ряда, что способствует пролонгированному пребыванию последних в периферической крови.
В связи с вышеизложенным целью настоящей работы явилось изучение механизмов нарушения цитокинрецепторного взаимодействия иммуно-цитов и эозинофильных гранулоцитов при развитии синдрома эозинофилии у больных с неходжкинскими лимфомами.
Материал и методы
Обследовали 23 пациента с неходжкинскими лимфомами (рубрики С82 и С83 по МКБ-10) в возрасте от 18 до 50 лет; 13 мужчин и 10 женщин: 20 человек с лимфомой из периферических (зрелых) клеток (12 — со зрелоклеточной лимфомой,
2 — с пролимфоцитарной, 2 — с лимфоцитарной, 4
— с В-мелкоклеточной), 3 пациента — с фолликулярной. При этом у 16 пациентов с неходжкинскими лимфомами отмечали III Аб стадию процесса, у 7 — III Бб стадию. При диагностике неходжкин-ских лимфом обязательной являлась гистологическая оценка субстрата опухоли, дополненная иммунологическим и цитогенетическим методами исследования. Клинически и анамнестически у всех обследованных были исключены обострение хронических воспалительных процессов, наследственные и психические болезни, а также злоупотребление алкоголем и наркотическая зависимость. Все пациенты были обследованы до назначения терапии при поступлении в стационар. Группу сравнения составили 22 практически здоровых донора с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту. Материалом исследования являлась венозная кровь обследованных лиц, взятая утром до приема пищи (кровь стабилизировали гепарином — 25 Ед/мл). Подсчет отдельных морфологических форм лейкоцитов проводили общепринятыми методами.
Мононуклеарные клетки выделяли, используя градиент плотности фиколл-верографнна (1,077 г/см3) (Amersham Biosciences, Sweden). Эозинофильные гранулоциты выделяли, используя прерывистый градиент плотности Percoll (р= 1,133 г/л) (Amersham Biosciences АВ», Sweden). Для получения супернатантов выделенные мононуклеарные лейкоциты ресуспендировали в полной питательной среде, состоящей из 90% RPMI-1640, 10% инактивированной эмбриональной телячьей сыворотки («Sigma», USA), 0,3 мг/мл L-глутамина, 100 мкг/мл гентамицина, 2 мМ/мл HERPES («Flow», GB). Стандартизировали количество клеток в суспензии до 2,5х106/мл. Для стимуляции секреторной способности мононук-леаров в пробы вносили 10 мкг/мл фитогема-глютинина (ФГА) («Sigma», США). Клеточные суспензии в количестве 1,5 мл инкубировали при 37 °С и 5% СО., на протяжении 24 ч. Супернатанты собирали и использовали для количественного определения цитокинов.
Для оценки продукции интерлейкинов (IL) IL-
3 и IL-5 (спонтанной и ФГА-стимулированной) мононуклеарными . клетками периферической крови, содержание в сыворотке крови эотаксина использовали твердофазный иммунофермент-ный «сэндвичевый» метод (ELISA). Процедуру
выполнения ИФА проводили по инструкции, предлагаемой производителем тест-систем «Biosource» (Бельгия). Для определения резервных способностей клеток секрегировать цито-кины рассчитывали индекс стимуляции (ИС), равный отношению стимулированной продукции мононуклеарами цитокинов к базальной.
Выделенные эозинофилы периферической крови (2x10’ в лунке) культивировали в условиях, аналогичных для мононуклеарных клеток. Для стимуляции экспрессии рецепторного аппарата эозинофильных клеток в отдельные пробы добавляли 10'8 г/мл — рекомбинантного (г) IL-3 (r-IL-3) («Biosource», Бельгия), 10-8 г/мл r-IL-5 («Biosource», Бельгия) и 10~8 г/мл r-eotaxin («Biosource», Бельгия).
Для определения количества эозинофилов, несущих рецепторы к IL-3, I L-5 и eotaxin, в интак-тной и стимулированной в условиях инкубации с рекомбинантными белками (rh-IL-3,5,eotaxin) культурами эозинофильных гранулоцитов применяли метод проточной лазерной двухцветной цитометрии. Использовали метод, основанный на взаимодействии соответствующих моноклональных антител (МКАТ) с мембранным рецептором к IL-3, IL-5 и Eotaxin на эозинофилах (согласно протоколу фирмы производителя «R&D Systems», США). После культивирования клетки дважды отмывали фосфатно-солевым буфером (РН=7,4). Для определения содержания EotaxinR- и IL-5R-позитивных клеток к культуре эозинофильных гранулоцитов добавляли 10 мкл биотинилирован-ных антител («R&D Systems», США) (в случае эотаксина дополнительно ставили пробы с негативным контролем) и инкубировали 45-60 мин при 2-8 °С. Затем в каждую пробирку добавляли по 10 мкл МКАТ FITC-меченных к eotaxinR («R&D Systems», США) и IL-5R («Caltag Laboratories», США). Инкубировали в темноте в течение 30 мин при 2-8 °С. Дважды отмывали фосфатно-солевым буфером (РН=7,4), ресуспендировали клетки в 400 мкл буфера. Для оценки уровня экспрессии IL-3R на эозинофилах после инкубации к культуре клеток добавляли 10 мкл МКАТ, меченных фи-коэритрином. Инкубировали 45 мин при 2-8 °С. После двукратных циклов промывки фосфатносолевым буфером (РН=7,4) клеточную культуру ресуспендировали в 400 мкл фосфатно-солевого буфера (РН=7,4). Исследуемые пробы подвергали проточной цитофлуометрии на цитометре Epics XL («Beckman Coulter», Франция). Анализ проводили на основе определения малого углового светорассеяния (ESC), характеризующего размер клетки, и бокового светорассеяния (SSC), характеризующего цитоплазматические, а также мембранные особенности клетки. Анализировали
параметры зеленой (Р1ТС — 530 нм) и оранжевой (РЕ — 585 нм) флюоресценции в гейте эозинофильных клеток, выявляемых на БЫ-канале.
При оценке полученных данных использовали методы статистического описания и проверки статистических гипотез. Проверку нормальности распределения количественных показателей проводили с использованием критерия 5Ьар1го-'№гПк,8. При соответствии нормальному закону распределения признака в исследованных выборках проверку гипотезы о равенстве средних выборочных величин проводили с использованием 1-критерия Стьюдента для независимых групп. Для оценки достоверности различий выборок, не подчиняющихся критерию нормального распределения, использовали критерий Манна-Уитни для независимых групп. Различие двух сравниваемых величин считали достоверным при уровне значимости р<0,05 | 3].
Результаты и обсуждение
В гематологической практике нередко сталкиваются с проблемой интерпретации причин возникновения синдрома эозинофилии у больных с гемобластозами, происходящими из клеток-предшественниц как лимфо-, так и миелопоэза (острый миелолейкоз, лимфогранулематоз, не-ходжкинские лимфомы, острый лимфобластный лейкоз, эозинофильная лейкемия) [2, 4, 5, 14]. В проведенном нами исследовании у больных неходжкинскими ли мфомами регистрировалось повышение относительного и абсолютного количества эозинофилов до 15,18+2,66% и 0,69+0,02 г/л соответственно (при норме 2,18+0,06% и
0,10±0,01 г/л; р<0,001).
Механизмы реализации синдрома эозинофилии при гемобластозах до конца не известны. По мнению ряда исследователей, формирование дан-
ного синдрома при злокачественных новообразованиях может иметь прямой механизм развития, связанный с продукцией опухолевыми клетками факторов, опосредующих хемотаксис эозинофилов [2, 5]. Так, предполагаемым механизмом реализации эозинофилии при лимфопролиферативных заболеваниях системы крови может явиться повышенная продукция моноклональной популяцией опухолевых Т-клеток IL-5, опосредующего усиление мобилизации эозинофилов из костного мозга в кровь [12, 14, 15]. В то же время эозинофильная реакция может рассматриваться как своеобразный ответ иммунной системы на антигенную стимуляцию опухолевой тканью [4, 5]. По данным ряда исследователей, эозинофилия, ассоциированная с неопластическими заболеваниями системы крови, может быть связана с продукцией иммунокомпетентными клетками эозинофилсти-мулирующих цитокинов, таких, как IL-5, IL-3 и GM-CSF 19, 11,14].
IL-5 (эозинофилопоэтин) — ключевой медиатор, модулирующий функциональную активность эозинофилов, избирательно стимулирует образование эозинофилов из их комм «тированного предшественника КОЕ-Эо. IL-5 наряду с 1L-3 и GM-CSF активирует их дегрануляцию и высвобождение цитотоксичных протеинов, регулирует экспрессию интегриновых молекул (CDllb, CD18), приводящих к увеличению количества циркулирующих эозинофилов, и посредством ингибирования апоптотической гибели лейкоцитов эозинофильного ряда пролонгирует время их пребывания в кровотоке [1,2, 14, 15]. В ходе проведенного нами исследования цитокин-продуцирующей способности мононуклеариых клеток периферической крови у больных НХЛ нами было выявлено значимое увеличение уров-
Таблица 1
Базальная и стимулированная продукция цитокинов мононуклеарными клетками (пг/мл), индекс стимуляции (ИС) и содержание эотаксина (пг/мл) в сыворотке крови у больных неходжкинскими лимфомами, ассоциированных с эозинофилией (Ме (0,1-03))
Продукция цитокинов Здоровые доноры Пациенты с лимфомами (неходжкинскими)
IL-5 Базальная 96,5(89,0-105,0) 195,5 (161,0-269,0) р<0,05
ФГА- стимулированная 164,0(158,0-190,0) 292,5 (280,0-394,0) р<0,05
И С 2,03(1,88-2,36) 1,08(0,96-1,28) р<0,05
IL-3 Базальная 13,27 (12,08-23,04) 29,68 (9,60-33,71) р<0,05
ФГА- стимулированная 28,12 (23,77-42,31) 30,22 (10,14-36,40) р>0,05
И С 1,96(1,68-2,30) 1,02 (0,56-1,28) р<0,05
Эотаксин 58,95(50,11-66,95) 48,66(43,35-67,71) р>0,05
Примечание, р - достоверность различии по сравнению с аналогичными показателями у здоровых доноров.
ней конституциональной продукции 1Ь-3 и 1Ь-5 (Таблица 1).
Кроме того, формирование синдрома эозинофилии при НХЛ может быть обусловлено влиянием эотаксина, мощного хемоаттрактанта, специфично действующего в отношении лейкоцитов эозинофильного ряда [7,13,15]. Основными продуцентами данного хемокина являются эпителиальные клетки: П>-4 в дозовременной зависимости стимулирует тИКА эотаксина в фибробластах кожи, что при комплексном воздействии с 1Ь-5, ТКРа, (32-интегринами и молекулами адгезии сосудов приводит к десятикратному увеличению содержания трех различных биохимических форм эотаксина [4, 7]. Однако исследуемая концентрация эотаксина в сыворотке крови у пациентов с неходжкинскими лимфомами, ассоциированными с высокой эозинофилией, не отличалась от таковой у здоровых доноров (Таблица 1).
Известно, что клетки воспринимают цитоки-новые сигналы через соответствующие рецепторы на их плазматической мембране [7, 8]. При этом каждый цитокин связывается со своим специфическим рецепторным комплексом, посредством которого и осуществляется его биологическая функция. Высокоаффинные рецепторы, как правило, не экспрессируются постоянно, а появляются на поверхности клетки только в состоянии ее активации — при взаимодействии клетки с антигеном или самим цитокином [7, 9]. В связи с этим исследование молекулярных механизмов межклеточной кооперации заключается не только в изучении группы медиаторов, опосредующих
кооперативное взаимодействие клеток: обязательным этапом подобных исследований является анализ клеточных рецепторных структур.
Мембрана эозинофилов несет на своей поверхности разнообразные антигенные структуры, среди которых несомненный интерес представляют рецепторы для цитокинов: IL-3 (IL-3R), IL-4 (IL-4R), IL-10 (IL-10R), IL-5 (IL-5R), TNF-a (TNF-R), Eotaxin (CCR3) и GM-CSF (GM-CSFR) [2, 9, 11]. При этом стимуляция эозинофильных лейкоцитов антигенными детерминантами приводит к синтезу определенного набора медиаторов, экспрессии соответствующих цитокино-вых рецепторов и активации опосредуемых ими функций [10]. Так, специфические для клеточных линий эффекты медиаторов на дифференцированные эозинофильные клетки, несущие на своей поверхности гемопоэтические рецепторы, приводят к «активации» или «включению» фенотипа «IL-З, IL-5, GM-CSF» [2]. В связи с этим нами было высказано предположение, что одним из механизмов, лежащих в основе длительного пребывания эозинофильных гранулоцитов в периферической крови при изучаемой патологии, может быть дисбаланс рецепторного аппарата эозинофилов.
Проведенное нами исследование презентации рецептора IL-5 в культуре интактных и стимулированных одноименным рекомбинантным цитокином (r-IL-5) эозинофилов in vitro, полученных у больных неходжкинскими лимфомами, позволило выявить достоверное увеличение количества IL-5R-позитивных эозинофильных клеток
Таблица 2
Содержание рецептор-позитивных клеток в интактной и стимулированной одноименными рекомбинантными цитокинами культурах — эозинофилов периферической крови у больных неходжкинскими лимфомами (X ±т)
Презентация изучаемых рецепторов Здоровые доноры Пациенты с неходжкинскими лимфомами
Базальная 1,29±0,07 0,63±0,01 р<0,05
IL-3R Стимулированная r-IL-3 4,70+0.03 2,73±0,01 р<0,05
ИС 3,99+0,07 4,03±0,42 р>0,05
Базальная 1,44±0,02 4,34±0,05 р<0,001
IL -5R Стимулированная r-IL-5 3,57±0,11 20,41+2,35 р<0,001
ИС 2,50±0,01 14,96±2,35 р<0,001
Базальная 15,49± 1,02 34,20±3,22 р<0,01
Eotaxin-R Стимулированная r-eotaxin 33,46±4,21 56,54±7,34 р<0,001
ИС 2,29+0,04 1,72±0,01 р>0,05
Примечание, р - достоверность различий по сравнению с аналогичными показателями у здоровых доноров.
по сравнению с таковым в культуре клеток у здоровых доноров (Таблица 2). Эти факты согласуются с результатами других исследователей. По данным P.J. Barnes et al. [2003], злокачественные новообразования, ассоциированные с высокой эозинофилией, в ряде случаев сопровождаются повышением презентации на эозинофильных лейкоцитах IL-4R, IL-5R и GM-CSFR, что коррелирует с неблагоприятным прогнозом заболевания [9]. Данное обстоятельство может быть связано со способностью одноименных медиаторов через цитокинрецепторную кооперацию увеличивать выживаемость эозинофилов in vivo, задерживая апоитоз [15]. Кроме того, при миелопроли-феративных заболеваниях, сопровождающихся гиперэозинофилией, клегки-предшественницы эозинофильного ряда несут на своей поверхности высокоаффинные рецепторы для IL-5, что обусловливает их высокую цитотоксичность [2,10,12,
14].
В то же время ири исследовании содержания IL-3R-rio3HTHBHbix клеток в интактной и стимулированной r-IL-З культурах эозинофильных лейкоцитов, полученных у пациентов с НХЛ, регистрировалось выраженное снижение количества эозинофилов, несущих IL-3R по сравнению с аналогичными показателями в контрольной группе (Таблица 2). Следует отметить, что в современной литературе имеется недостаточное i количество фактических данных, свидетельс-! твующих об изменении презентации изучаемого ; рецептора на эозинофильных гранулоцитах при j неопластических заболеваниях [13]. Факт сни-j жения презентации IL-3R может быть обуслов-! лен функциональной неполноценностью эозинофильных гранулоцитов, в результате которой они неадекватно воспринимают активационные ; сигналы от «панспецифического» гемопоэтина, несмотря на высокий уровень продукции последнего мононуклеарными клетками.
Установлено, что эозииофилы человека в норме экспрессируют большое число рецепторов CCR3 для эогаксина [7, 13]. Связывание последнего с одноименным рецептором стимулирует ряд биохимических изменений, включая повышение концентрации внутриклеточного кальция, перестройку цитоскелета, активацию G-белков и митоген-активизированного белка (КАРТА) киназного пути [13].
Проведенное нами исследование наличия ; рецепторов к эотаксину на поверхности эозинофилов в интактной и стимулированной r-eotaxin культурах, полученных у пациентов с неходжкин-скими лимфомами, позволило выявить увеличение (в 2,3 и 1,6 раза соответственно) количества клеток, несущих eotaxin-R (ССЗ), по сравнению
с аналогичными показателями в группе здоровых доноров (Таблица 2). Повышенная презентация указанного рецептора на эозинофильных гранулоцитах при неходжкинских лимфомах может быть обусловлена, по-видимому, способностью эозинофилов самостоятельно секретировать данный хемокин, избыточные концентрации которого вызывают усиление адгезии эозинофилов и базофилов к эндотелию сосудов, привлекая в очаг воспаления дополнительные порции лейкоцитов эозинофильного ряда [1, 2, 7, 13].
Таким образом, в ходе проведенного исследования у больных неходжкинскими лимфомами было выявлено увеличение уровня конституциональной продукции мононуклеарными клетками эозинофилстимулирующих цитокинов — 11.-3, 1Ь-5, при неизменной концентрации эотаксина в сыворотке крови. Вместе с тем у данной категории пациентов регистрировалось повышенное количество эозинофильных клеток, несущих IL-5R и eotaxmR; содержание IL-ЗR-пoзитивныx клеток оказалось, напротив, сниженным.
В заключение следует отметить, что нарушение цитокининдуцированного кооперативного взаимодействия эозинофилов и иммуноцитов может явиться одним из основных механизмов, лежащих в основе пролонгированного пребывания эозинофильных гранулоцитов в периферической крови при неходжкинских лимфомах. Углубленное исследование закономерностей нарушений цитокинрецепторной кооперации им-мунокомпетентных клеток и эозинофильных гранулоцитов позволит расширить существующие на сегодняшний день представления о патогенезе синдрома эозинофилии при патологических процессах разного генеза и предоставит возможность разработать новые подходы к патогенетически оправданной коррекции данного феномена.
Исследование выполнено в рамках Федеральной целевой научно-технической программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники на 2002-2006 годы» (Государственные контракты №02.442.11.7056, №02.445.11.7110 и №02.445.11.7419), а также при финансовой поддержке Совета по грантам Президента Российской Федерации для поддержки ведущих научных школ Российской Федерации №НШ-4153.2006.7.
CYTOKINEMEDIATED MECHANISMS OF FORMATION SYNDROME OF EOSINOPHILIA AT HEMOBLASTOSIS
V.V. Novitskij, N.V. Rjazantseva, L.S. Litvinova,
J.V. Kolobovnikova, E.N. Knutareva,
E.S. Grigor’eva, E.V. Suvorova
Research of production eosinophilstimulating cytokines (IL-3, IL-5) by mononuclear cells, the contents of eotaxin in whey of blood a method of immune-enzyme assay and expression of receptor the device eosinophilic cells a method flowing cyto-phluorometry at patients with non-Hodgkin’s lymphomas is spent. The increase of a level constitutional production mediators - IL-3, IL-5 is revealed by mononuclear cells, at constant concentration eotaxin in whey of blood. At the same time, at the given category of patients the increased amount the eosinophilic cells carrying IL-5R and eotaxinR was registered; contents IL-3R-positive of cells, appeared, on the contrary, reduced.
Литература
1. Бережная Н.М. Интерлейкины и формирование иммунологического ответа при злокачественном росте/' Н.М. Бережная // Аллергология и иммунология.
- 2000. - Т. 1. - №1. - С. 45-61.
2. Бережная Н.М. Эозпнофилы, базофилы и иммуноглобулин Е в противоопухолевой защите / Н.М. Бережная, В.Ф. Чехун, Р.И. Сепиашвили // Аллергология и иммунология. — 2005. — Т. 6. — №1. — С. 38-49.
3. Боровиков В. Statistics. Искусство анализа данных на компьютере / В. Боровиков. — С.-П. — М. — Харьков -Минск.-2001.-306 с.
4. Воробьев А.И. Руководство по гематологии / А.И. Воробьев. - Т. 1. - М., 2002. - 280 с.
5. Гриншпун Г.Д. Эозинофилы и эозинофилии / Г.Д.
Гринпшун, Ю.Е. Виноградова // Терапевтический архив. - 1983. - № 10. - С. 87-90.
6. Поддубная И.В. Неходжкшгские лимфомы маргинальной зоны / И.В. Поддубная, O.A. Москаленко, Ю.Н. Балакирева // Современная онкология. — 2006. -Т. 8. -№1.-С. 8-12.
7. Роль хемокинов и их рецепторов в иммунорегуляции / A.A. Тотолян // Иммунология. — 2001. — №5. -С. 7-10.
8. Фрейдлин И. С. Паракринные и аугокрин-ные механизмы цитокиновой иммунорегуляции / И.С. Фрейдлин // Иммунология. — 2001. — №5. — С. 4-15.
9. Barnes P.J. Differential regulation of human eosinophil IL-3, IL-5, and GM-CSF receptor alpha-chain expression by cytokines / P.J. Barnes // J. Immunol. — 2003.
- Vol." 1. - №5. - P. 167-175.
10. Bochner B.S. Systemic activation of basophils and eosinophils: markers and consequences / B.S. Bochner //J. Allergy Clin. Immunol. — 2000. — Vol. 5. — № 2. — P. 292-302."
11. Lampinen M., Carlson M„ Hakansson L.D. Cyto-kine-regulated accumulation of eosinophils in inflammatory disease // Allergy. — 2004. — Vol. 8. — №10. — P. 425-430.
12. Mordvinov V.A. Regulation of IL-5 expression / V.A. Mordvinov, C.J. Sanderson // Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz). — 2001. — Vol. 5. — №1. — P. 345-351.
13. Nagase H. Regulation of chemokine receptor expression in eosinophils / H. Nagase, M. Miyamasu, M.Yamaguchi // Int. Arch. Allergy Immunol. — 2001. -Vol. l.-№ 10. - P. 29-32.
14. Ohmiya N. Interleukin (1L) 5 levels and eosinophil-ia in patients with malignant hemopathies / N. Ohmiya,
S. Ustun, N. Turgay //J. Exp. Med. — 1997. — Vol. 172.
- №7. - P. 1563-1572.
15. ZangrilliJames G. Regulation of Eosinophil Viability by Cytokines / James G. Zangrilli // Cell Mol. Biol.
- 2002. - Vol. 26. - №4. - P. 388-390.
