CC BY
37
ofleftventriculare ejection fraction.JAm Soc Ecbocardiogr 1999 May; 12:
290-9.
25• Katz SD, Radin M, Graves T et al. Effect of aspirin and ifetroban on skeleta I muscle bloodflow in patients with congestive heartfailure treated with enalapril. f Am Coll Cardiol 1999; 34' 170-6.
26. Davie AP, Love MP, McMurray JJ. Aspirin and aracbidonic acid in patients with heart failure [abstrj Circulation 1998; 98 (suppl. I): 1-319.
2 7- Lyons D, WebsterJ, Benjamin N. The effect of antihypertensive therapy on local intra-arterial NG-Monomethyl-L-Arginine in patients with essential hypertension, j Hypertens 1994; 12:1074-52.
28- Felsch A, Scbror R. Plateled activating factor-induced tissue injury in a neutrophil -perfusedpreparation is antogonised by bradykinin and ramiprilat. In: GBr Scbolkens BA^ ScicliAG. (eds). The role of bradykinin in the cardiovascular action of ramipril. Media Medica, Sussex, 1992; 69-77-29■ VanbouttePM. Other endotbelium-derivedvasoactive factors. Circ 1993; 87 (suppl. 1): V9-V17.
30. Vanboutte PM, Boulanger C, MombouliJV. Endothelium-derived relaxingfac-tors and converting enzyme inhibition. Am J Cardiol 1995; 76:3E-12E.
31 ■ Shimpo M, Ikeda U, Maeda Y et al. Effects of aspirin-like drugs on nitric oxide
synthesis in rat vascular smooth muscle cells. Hypertension 2000; 35: 1085■
32. Miller VM, Vanhoutte PM. Endothelium-dependent contractions to arachidonic acid are mediated by products of cyclooxigenase. Am j Physiol 1985; 248: H432-H437-
33-Akiere Rj, Kiritsy-Roy jF, Catravas jD et al. Acetylcholine-induced contractions in isolated rabbit pulmonary arteries: role of troboxane A2.J Pharm Exp Ther 1986; 236:535-^1.
34■ Husain S, Andrews NP, Mulcahy Detal Aspirin improves endothelial dysfunction in atherosclerosis. Circulation 1998; 97: 716-20.
35■ Ridker PM, Cushman M, StampferMJ et al. Inflammation, aspirin, and the risk of cardiovascular disease in apparently healthy men. N Englj Med 1997; 336: 973-9-
36Farivar S, Brecher P. Salicylate as a transcriptional inhibitor of inducible nitric oxyde syntase in cultured cardiacfibroblasts.]Biol Cbem 1996; 271 (49): 31585-92.
3 7. BolgerAP, Anker SD. Tumor necrosis factor in chronic heart failure: a peripheral view on pathogenesis, clinical manifestations and therapeutic implications. Drugs 2000; 60 (6): 1245-57. j
[Трансформирующий фактор-^ и маркеры
активации леикоцитов при гипертонической болезни)
Рус. Рез. англ.
0.М.Моисеева, Е.А.Лясникова, Е.Г.Семенова, О.Г.Лопатенкова, Е.В.Шляхто НИИ кардиологии им? ОТАлмазова'Минздрава Р($ Санкт-Петербург
Резмте: Цель работы - определить концентрацию активной формы трансформирующего ростового фактора^ (ТРФ-“Рд) в сыворотке крови и функциональное состояние лейкоцитов у больных гипертонической болезнью (ГБ) II стадии. Оце-
£ФЦить патогенетическое значение и возможность коррекции выявленных изменений с помощью ингибитора ангиотен-_..._зинпревращаюш,его фермента (АПФ) квинаприла.
Обследованы 30 больных ГБ II стадии и 17 практически здоровых лиц. Оценивали данные ультразвукового исследования сердца, лучевой и сонных артерий, функциональную активность лейкоцитов и концентрацию ТРФ-Pj в сыворотке крови. Из них 15 больных ГБ были обследованы повторно на фоне лечения квинаприлом (аккупро, "Pfizer", USA) в течение 12 нед в дозе 10-40 мг/сут.
Установлено повышение уровня ТРФ-Pj в сыворотке крови у больных ГБ и его связь с массой миокарда левого желудочка, толщиной комплекса интима-медиа общих сонных артерий и эндотелиальной дисфункцией. Показана связь между концентрацией ТРФ-Pj и функциональной активностью лейкоцитов: увеличением числа лейкоцитов в периферической крови, адгезионной способностью нейтрофилов, экспрессией антиапоптотического белка Вс1-2 и Fas-рецепторов на лимфоцитах. В процессе лечения квинаприлом снижение исходного артериального давления на 10 мм рт. ст. и более у 87% больных сочеталось с уменьшением адгезии нейтрофилов к эндотелию, увеличением Bcl-2-негативных и Fas-позитивных лимфоцитов.
Динамика уровня ТРФ-Pj в сыворотке крови связана с поражением органов-мишеней и активацией лейкоцитов при ГБ. Снижение функциональной активности лейкоцитов на фоне терапии квинаприлом не зависело от антигипертензивного эффекта препарата.
Ключевые слова: трансформирующий ростовой фактор-Pj, лейкоциты, гипертрофия левого желудочка, эндотелиальная дисфункция, квинаприл.
Transforming factor-bl and markers of leukocytic activation in hypertensive disease O.M. Moiseyeva, Ye.A. Lyasnikova, E.G. Semenova, O.G. Lopatenkova, Ye.V. Shlyakhto
Summary:. The study was undertaken to determine the serum concentration of an active form of transforming growth factor-bl (TGF-Ы) and the functional status of leukocytes in patients with Stage II hypertensive disease (HD) and to assess the pathogenetic value and capacities of correction of detected changes with the angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitor quinapril. Materials and methods. Thirty patients with Stage II HD and 17 apparently healthy individuals were examined. The data of ultrasound study of the heart, radial and carotid arteries, the functional activity of leukocytes and the concentration of (TGF-Ы) in the serum weie assessed. Of them, 15 patients with HD weie reexamined during treatment with quinapril (accupro, Pfizer, USA) in a daily dose of 10-40 mg for 12 weeks.
Results. The study established an increase in the elevated serum levels of TGF-bl of hypertensive patients with HD and its association with the mass of the left ventricular myocardium, with the thickness of an intima-media complex of the common carotid arteries, and with endothelial dysfunction. A relationship is shown between the concentration of TGF-Ы and the functional activity of leukocytes: elevated peripheral leukocytes, the adhesive capacity of neutrophils, the lymphocytic expression of the antiapoptic protein Bcl-2 and Fas-receptors. With quinapril treatment, a 10-mm Hg or more reduction in 87% of the patients was attended by the lower adhesion of neutrophils to the endothelium, with elevated Bel-2-negative and Fas-positive lymphocytes.
Conclusion. The changes in the serum levels of TGF-Ы are associated with lesions of target organs and with the activation of leukocytes in HD. The decrease in leukocytic functional activity during therapy with quinapril did not depend on the antihypertensive effect of the drug.
Key words: transforming growth factor-Ы, leukocytes, left ventricular hypertrophy, endothelial dysfunction, quinapril.
Гипертрофия миокарда и структурные изменения сосудистой стенки при гипертонической болезни (ГБ) тесно связаны с активацией ренин-ангиотензиновой системы [1]. На клеточном уровне ангиотензин II выступает в качестве па-ракринного регулятора продукции трансформирующего ростового фактора-Р! (ТРФ-р^ [2]. С действием данного ростового фактора при ГБ связывают развитие интерстициального фиброза, а также снижение эластических свойств миокарда и сосудов [3,4]. ТРФ-р1 секретируется в биологически неактивной или латентной форме большинством типом клеток. Его активация происходит под влиянием интегри-нов и белков экстрацеллюлярного матрикса. Кроме того, ТРФ~Р] является мощным регулятором иммунного ответа в
сосудистои стенке, определяющим участие леикоцитов и эндотелиальных клеток в воспалительных реакциях [5]. Уникальность данного ростового фактора состоит в плейо-тропной природе его действия: в зависимости от типа клеток он может проявлять свои про- или антиапоптотические свойства [б]. Кроме того, ТРФ-Р[ может принимать участие в регуляции воспалительных процессов, в том числе и в сосудистой стенке [7].
Цель настоящей работы - определить концентрацию активной формы трансформирующего ростового фактора-р 1 (ТРФ-Р[) в сыворотке крови и функциональное состояние лейкоцитов у больных ГБ II стадии. Оценить патогенетическое значение и возможность коррекции выявленных изме-
Таблица 1. Клиническая характеристика обследованных групп
Таблица 2. Концентрация ТРФ-1', в сыворотке крови и маркеры функциональной активности лейкоцитов
Показатель Больные ГБ II стадии (п=30) Контрольная группа (п=15)
Возраст, лет 48,6±1,2 45,4+1,4
Индекс массы тела, кг/м2 28,2±0,7 25,3±0,9
Давность ГБ, лет 10,5±1,9 -
АДс, "офисное", мм рт. ст. 162,1 ±4,7* 118,7+1,6
АДд, "офисное", мм рт. ст. 102,9+2,8* 75,0±1,7
индекс ММЛЖ, г/м2 144,9±6,2* 112,1 ±2,8
Диаметр лучевой артерии, 2,89+0,08 2,61±0,08
исходный, мм
Скорость кровотока в лучевой 0,48±0,03 0,49±0,04
артерии,исходная, м/с
Прирост скорости кровотока 136,0±13,7 106,4+11,4
в лучевой артерии, %
ЭЗВД, % 12,5±0,7 14,3±0,3
Толщина комплекса интима- 0,85±0,03* 0,65±0,03
медиа сонных артерий, мм
Показатель Больные ГБ Контрольная
II стадии (п=30) группа (п=15)
Концентрация активной 79,2+5,1” 41,9±6,8
формы ТРФ-р1, пг/мл Лейкоциты, ■ 109/л
7,1±0,3** 5,5±0,5
Вс1-2+, % 24,0±1,7** 10,6±1,7
СР95+, % 52,0± 1,0** 42,2±1,8
Адгезия нейтрофилов к 17,4± 1,8*** 4,8±0,6
эндотелию, клеток/мм
Примечание. Здесь и в табл. 3, 4: * - р<0,05; ** - р<0,01; ’ р<0,001. Данные представлены как М±т.
Таблица 3. Зависимость сывороточной концентрации ТРФ-р, и функциональной активности лейкоцитов от уровня систолического и диастолического АД
Примечание. Здесь и в табл. 2: достоверность различий оценивалась по методу Вилкоксона-Манна-Уитни.
* - р<0,001. Данные представлены как М±т.
АДс - систолическое АД, АДд - диастолическое АД.
нений с помощью ингибитора ангиотензинпревращающе-го фермента (АПФ) квинаприла.
Материал и методы
В исследование включены 30 больных (25 мужчин и 5 женщин) с верифицированной ГБ II стадии (табл. 1). Пациенты не имели ишемической болезни сердца, сопутствующих острых или хронических воспалительных заболеваний, потенциально влияющих на функциональную активность лейкоцитов. Пациентам, ранее получавшим антиги-пертензивную терапию, за 14 дней до включения в исследование отменяли все препараты. Контрольную группу составили 15 практически здоровых лиц, сопоставимых по возрасту и индексу массы тела с основной группой. После первичного обследования 15 больных методом случайной выборки в качестве антигипертензивной терапии получали квинаприл (аккупро, "Pfizer", USA) в течение 12 нед в дозе 10-40 мг/cyx Дозу квинаприла титровали каждые 2-4 нед с учетом цифр артериального давления (АД) и индивидуальной переносимости препарата.
Измерение АД осуществляли с помощью ртутного сфиг-моманометра после 5 мин отдыха в положении сидя, трижды с интервалом 3 мин. Среднее значение трех измерений принимали за уровень АД на текущем визите. Всем больным проводили эхокардиографическое обследование на аппарате VINGMED, System Five ("General Electric", США) по стандартному протоколу. Массу миокарда левого желудочка (ММЛЖ) рассчитывали по формуле Devereux [8] и индексировали к площади поверхности тела. За нормальные значения индекса ММЛЖ принимали цифры менее 134 г/м2 для мужчин и менее 110 г/м2 у женщин [9].
Исследование эндотелийзависимой вазодилатации (ЭЗВД) лучевой артерии проводили в пробе с реактивной гиперемией и изучение эндотелийнезависимой вазодилатации лучевой артерии (ЭНЗВД) в пробе с нитроглицерином с использованием ультразвука высокого разрешения с применением 8 МГЦ линейного датчика (VINGMED, "System Five", США). Толщину комплекса интима-медиа (КИМ) сонных артерий оценивали с помощью дуплексного сканирования общих сонных артерий.
Количество лейкоцитов измеряли в пробах цельной венозной крови с помощью гематологического анализатора Sysmex, КХ-21 ("Kobe", Япония). Фракции мононуклеарных лейкоцитов и нейтрофилов получали из богатой лейкоцитами плазмы методом дифференциального центрифугирования в градиенте плотности 1,077 (Histopaque, "Sigma", США). Адгезионные свойства нейтрофилов исследовали с помощью эндотелиальной клеточной линии человека ECV304, полученной из российской коллекции культур клеток позвоночных Института цитологии РАН [10-12]. После окраски препаратов по Май-Грюнвальд-Романовскому подсчитывали среднее число нейтрофилов на 1 мм2 моно-слойной культуры эндотелия в 10 полях зрения. Количество лимфоцитов, экспрессирующих антиапоптотический белок Вс1-2 в лимфоцитах, оценивали методом непрямой иммуногистохимии с помощью моноклональных антител 1А4 и системы визуализации LSAB2 ("DAKO", Дания). Число лимфоцитов, несущих Fas-рецепторы (CD95/APO-1), определяли в цельной гепаринизированной кровью с помощью ме-
Показатель АДс АДд
Концентрация активной г= 0,375 R=0,429
формы ТРФ-р1 в сыворотке р=0,03 р=0,01
крови Адгезия нейтрофилов к эндотелию г=0,470 R=0,386
р=0,002 р=0,02
Число Вс1-2+ лимфоцитов г=0,492 R=0,386
р=0,001 р=0,08
Число Раз+ лимфоцитов г=0,345 Я=0,220
р=0,04 р=0,120
ченных F1TC моноклональных антител ("DAKO", Дания) методом проточной цитометрии (Becton Dickinson FACScan). Дня оценки количества апоптотических клеток лимфоциты ресуспендировали в лизирующем буфере, содержащем 50 мкг/мл пропидиума йодата, и после инкубации анализировали методом проточной цитометрии.
Для определения ТРФ-Р; использовали сыворотку пациентов, хранившуюся при -70°С до проведения исследования. После ацидификации сыворотки, концентрацию биологически активной формы ТРФ-Pj определяли иммунофер-ментным методом (Amersham Pharmacia Biotech). Чувствительность метода - 4 пг/мл.
Статистическую обработку данных проводили с помощью параметрических и непараметрических методов анализа с использованием программы Statistica 6.0 for Windows.
Результаты
В процессе обследования выявлено увеличение содержания активной формы ТРФ-р [ в сыворотке крови у больных ГБ по сравнению с контрольной группой (табл. 2). Уровень ТРФ-pj при ГБ зависел от ММЛЖ (г=0,42Ъ\ р=0,02), а также толщины КИМ сонных артерий (»=0,381;р=0,03) и ЭЗВД лучевой артерии (г=-0,375; р=0,03). Однако увеличение КИМ сонных артерий и снижение ЭЗВД как маркера эндотелиальной дисфункции при ГБ в большей степени говорят о роли ТРФ-р [ в иммуновоспалительных процессах, к которым относится атеросклеротическое поражение сосудистой стенки. Этот факт подтверждается достоверным снижением ЭЗВД у больных ГБ с атеросклеротическими бляшками в общих сонных артериях по сравнению с пациентами без признаков атеросклеротического поражения (9,7±0,5% и 13,1±0,7%,р<0,05).
При ГБ II стадии выявлено увеличение числа лейкоцитов в периферической крови, адгезионной способности нейтрофилов, экспрессии антиапоптотического белка Вс1-2 и Fas-рецепторов на лимфоцитах. Тогда как базальный уровень апоптоза в лимфоцитах был достоверно не изменен по сравнению с группой практически здоровых лиц (0,65±0,079Й и 0,41±0,0б%,р>0,05).
Степень адгезии нейтрофилов, экспрессия Вс1-2 в лимфоцитах, а также сывороточный уровень ТРФ-pj были тесно связаны с уровнем систолического и диастолического АД, что является показателем активации различных типов клеток в условиях повышенного напряжения сдвига и циклического растяжения (табл. 3). Причиной экспрессии гена ТРФ-(5 j в условиях повышенного АД является увеличение концентрации ангиотензина 11 и эндотелина-1 [13]. Однако нельзя исключить прямое действие гемодинамических факторов на уровень ТРФ-Pj [14]. Корреляционная связь между содержанием ТРФ-pj и маркерами активации лейкоцитов: адгезией нейтрофилов (г^0,487; р=0,02), экспрессией Вс1-2 (^0,358;р=0,03) и Fas-рецепторов на лимфоцитах (г=0,429;
Таблица 4. Динамика уровня АД и маркеров функциональной активности лейкоцитов на фоне терапии квинаприлом
Показатель До терапии На фоне терапии(через 12 нед)
АДс, "офисное", мм рт. ст. 150,8+6,7 135,4+4,3*
АДд, "офисное", мм рт. ст. 100,2±2,8 90,5+3,9
Адгезия нейтрофилов к 16,9±1,2 9,7+1,5***
эндотелию, клеток/мм2
Вс1-2+, % 24,1 ±3,2 15,3±3,5**
CD95+, % 56,2+3,4 68,0±3,3**
/)=0,008), свидетельствует, что активированные лейкоциты могут быть основным источником повышения сывороточной концентрации ростового фактора.
В процессе лечения квинаприлом достигнута нормализация или снижение исходного АД на 10 мм рт. ст. и более у 87% больных (табл. 4). На фоне проводимой терапии выявлено уменьшение адгезионной способности нейтрофилов, числа Вс1-2-позитивных клеток и увеличение экспрессии Рав-рецепторов на лимфоцитах. Эти изменения не сопровождались достоверным повышением ЭЗВД лучевой артерии (12,3±1,6% и 11,1±2,3%; />>0,05) и приростом линейной скорости кровотока в пробе с реактивной гиперемией (118,9±2б,0% и 141,7±29,2%; р>0,05). Экспрессия анти- и проапоптотических белков не зависела от уровня снижения АД, тогда как степень адгезии нейтрофилов (как клеток наиболее чувствительных к изменению скорости кровотока) была тесно связана с уровнем систолического (г=0,769; /|=0,009) и диастолического АД (г=0,742;/>=0,01).
Обсуждение
Гипертрофия миокарда и медиального слоя сосудов при ГБ сопряжена с развитием интерстициального и периваску-лярного фиброза. Кардиоваскулярный фиброз является в основном гуморально-зависимым событием, центральную роль в котором играет ангиотензин II, эндотелии-1 и альдо-стерон [15]. На клеточном уровне ангиотензин II опосредованно через ангиотензиновые рецепторы вызывает экспрессию гена ТРФ-(51 [16]. Ростовой фактор в свою очередь способствует хемотаксису макрофагов и фибробластов, пролиферации клеток стромы и их фенотипической трас-формации в миофибробласты [17]. С появлением миофиб-робластов связывают образование соединительной ткани, так как эти клетки способны секретировать все типы коллагена, гликопротеидов, протеогликанов и матриксмодифи-цирующих белков. ТРФ-р} является основным пептидным ростовым фактором, регулирующим продукцию и деградацию соединительной ткани через экспрессию матричных РНК, контролирующих синтез коллагена и металлопротеаз.
В настоящей работе выявлено повышение уровня циркулирующего ТРФ-р1 у больных ГБ и его связь со структурными изменениями сердца и крупных сосудов. Полученные данные согласуются с работой 1ду1ас1ез и соавт. о связи ТРФ-|31 с поражением органов-мишеней при ГБ [18].
Процессы гипертрофии и пролиферации при ГБ тесно связаны с программируемой гибелью клеток, или апопто-зом. Увеличение образования супероксидных анионов, оказывающих повреждающее действие на кардиомиоциты и эндотелий, показано на экспериментальных животных с артериальной гипертензией, вызванной введением ангиотензина II [19]. Свободные радикалы, источником которых при ГБ являются активированные лейкоциты и эндотелий, запускают воспалительный каскад. Он включает в себя экспрессию адгезионных молекул, цито- и хемокинов, пептидных ростовых факторов, в том числе и ТРФ-р^ Маркером свободнорадикального повреждения клеток служит экспрессия Рав-рецепторов [20].
Существует два основных пути запуска программируемой гибели клеток [21]. Первый реализуется через систему мембраносвязанных рецепторов семейства фактора некроза опухолей, к которым относятся Газ-рецепторы. Белки семейства Вс1-2, расположенные в митохондриях, участвуют в регуляции и блокаде Ра5-связанного апоптоза. Кроме того, через дисфункцию митохондрий опосредуется второй путь программируемой гибели клеток. Нами выявлено увеличение экспрессии Вс1-2 в лимфоцитах у больных ГБ. Подобные изменения следует рассматривать как адаптивную реакцию, направленную на защиту клеток от апоптоза в условиях повышенного образования ими супероксидных анионов [22]. При отсутствии увеличения базального уровня апоптоза при ГБ рост числа Раэ-позитивных лимфоцитов свидетельствует только о готовности клеток к программируемой
гибели. Поэтому экспрессия Fas-рецепторов наряду с HLA-DR и IL-2-рецепторами (CD25) может рассматриваться как активационный маркер лимфоцитов [23]. Повышение функциональной активности лейкоцитов связано с увеличением продукции провоспалительных цито- и хемокинов, которые принимают участие в развитии интимальной гиперплазии, лежащей в основе атеросклеротического процесса [24, 25].
Активный синтез коллагена в тканях сопряжен с высокой плотностью ангиотензиновых рецепторов и повышением содержания АПФ. Поэтому антигипертензивные препараты, подавляющие активность АПФ, рассматриваются как препараты выбора для коррекции нарушений вязкоэластических свойств сосудов и диастолической дисфункции при ГБ [26]. В последние годы процессы ремоделирования миокарда и сосудов при ГБ связывают с активацией лейкоцитов и воспалительными реакциями в сосудистой стенке. Поэтому кви-наприл опосредованно через блокаду тканевого АПФ может влиять на процессы воспаления при ГБ, модифицируя функциональные свойства лейкоцитов.
В заключение следует отметить, что динамика уровня ТРФ-р L в сыворотке крови у больных ГБ связана с поражением органов-мишеней и активацией лейкоцитов. На фоне терапии квинаприлом выявлено снижение функциональной активности лейкоцитов, которое не зависело от антигипер-тензивного эффекта препарата.
Литература
1. Williams В. Angiotensin II and the pathophysiology of cardiovascular remodeling. Am] Cardiol 2001; 87 (8A): 10C-17C.
2. Ford CM, Li S, PickeringjC. Angiotensin 11 stimulates collagen synthesis in human vascular smooth muscle cells. Involvement of the ATI receptor, transform-ing growth factor-fi, and tyrosine phosphorylation. Arterioscler Thromb Vase Biol 1999; 19:1843-51-
3- Villarreal Ff, Dillmann WH. Cardiac hypertrophy-induced changes in mRNA levels for TGF,fibronectin, and collagen. Am f Physiol 1992; 262: HI 861 -HI 866. 4. Intengan HD, Schiffrin EL. Vascular remodeling in hypertension: roles ofapopto-sis, inflammation, andfibrosis. Hypertension 2001; 38:581-7.
5- Topper]N. TGF-p in the cardiovascular system: molecular mechanisms of a context-specific growth factor. Trends Cardiovasc Med 2000; 10:132-7-
6. Ни X, Zuckerman KS. Transforming growth factor: signal transduction pathways, cell cycle mediation, and effects on hematopoiesis. f Hematotherapy Stem Cell Resear 2001; 10: 67-74-
7. Koyanagi M, Egashira K, Kubo-Inoue M et al. Role of Transforming Growth Factor-fi2 in Cardiovascular Inflammatory Changes Induced by Chronic Inhibition of Nitric Oxide Synthesis. Hypertension 2000; 35:86.
8. Devereux RB, Reinchek N. Echocardiographic determination of left ventricular mass in man. Anatomic validation of the method. Circulation 1977; 55:613-8.
9- Devereux RB, Lutas EM, Casale PN et al. Standartisation ofM-mode echocardiographic left ventricular anatomic measurements.] Amer Coll Cardiol 1984; 4: 1222-30.
10. Ley K, Lundgren E, Berger E,Arfors K-E. Shear-dependent inhibition of granulocyte adhesion to cultured endothelium by dextran sulfate. Blood 1989; 73 (5)-1324-30.
11. Beauchamp Ph, Richard V, Tamien F et al. Protective effects of preconditioning in cultured rat endothelial cells. Effects on neutrophil adhesion and expression of ICAM-1 after anoxia and reoxygenation. Circulation 1999; 100 (5): 541-6.
12. Suda K, Rothen-Rutishauser B, GunthertM, Wundetii-Allenspach H. Phenotypic characterization of human umbilical vein endothelial (ECV304) and urinary carcinoma (T24) cells: endothelial versus epithelial features. In vitro cell dev boil anim2001;37 (8): 505-4-
13. Friedrich C, Luft FC, Mervaala E, Dominik N et al. Hypertension-induced end-organ damage a new transgenic approach to an old problem. Hypertension 1999;33:212-8.
14. Wolf G, Schneider A, Wenzel U et al. Regulation ofTGF-beta expression in the contralateral kidney of two-kidney, one-clip hypertensive rats. J Am Soc Nephrol 1998;9:763-72.'
15- Weber KT, Sun Y, Katwa LC, CleutjensJPM. Connective Tissue: a metabolic entity (if Mol Cell Cardiol 1995; 27:107-20.
16. Ford CM, Li S, Pickering JC. Angiotensin 11 stimulates collagen synthesis in human vascular smooth muscle cells. Involvement of the AT 1 receptor, transforming growth factor-fi, and tyrosine phosphorylation. Arterioscler Thromb Vase Biol 1999; 19:1843-51.
17. Powell DW, Mifflin RC, Valentich]D et al. Myofibroblastsl. Paracrine cells important in health and disease. Am f Physiol. 1999; (Cell Physiol 46): Cl -Cl9-
18.LaviadesC, VaroN,Dnezf. Transforming growth factor in hypertensives with cardiorenal damage. Hypertension 2000; 36:517.
19- Luft FC, Mervaala E, Muller DN et al. Hypertension-induced end-organ damage: a new transgenic approach lo an old problem. Hypertension 1999; 33: 212-8.
20. Um HD, Orenstein]M, Wahl SM. Fas mediates apoptosis in human monocytes by a reactive oxygen intermediate dependent pathway.f Immunol 1996; 156: 3469-77-
21. Kockx MM, Knaapen MWM. The role of apoptosis in vascular diseaseJ Pathol 2000; 190:267-80.
22. Schindowski K, Leutner S, Muller WE, Eckert A Age-related changes of apoptot-ic cell death in human lymphocytes. NeurobiolAging 2000; 21:661 -70.
23. Leucocyte typing white cell differentiation antigens. Proceedings of the fifth international workshop and conference. Oxford, New York, Tokyo: Oxford University Press; 1995-
24. Dorffel Y, Latsch C, Stublmidler В et al. Preactivated peripheral blood monocytes in patients with essential hypertension. Hypertension 1999, 34 (1): 113-7.
25- Ross R. Atherosclerosis - an inflammatory disease. New Englandf Med 1999; 340(2): 115-24-
26. Frohlich ED, Horinaka S. Cardiac and aortic effects of angiotensin converting enzyme inhibitors.Hypertension 1991; 18 (suppl.II): II-2-II-7- J
