CC BY
35
венным достоверным повышением численности последних, лишь при 50 И/н с сильными положительными корреляциями между ними, при 100 и 500 И/н (р<0,05), что сопровождалось противоположной реакцией митотических эпителиоцитов крипт с максимальным достоверным снижением числа митотических клеток при 100 И/н. Сильные положительные и отрицательные корреляции обнаруживались между митотическими эпителиоцитами и общим числом тучных клеток при 100 и 500 И/н (р<0,05), а также сильные отрицательные с недегранулированными тучными клетками при 100 И/н и вакуолизированными при 500 И/н (р<0,05).
Вывод. Выявленная скоррелированность взаимодействий базофильных гранулоцитов крови и тучных клеток, констатировала их участие в проявлении реакций регулирующих тканевый гомеостаз и процессы обновления кишечного эпителия слизистой при возрастании периодичности импульсов, с наибольшей выраженностью для вакуолизированных тучных клеток, выступающих в роли биомаркеров реализации эффектов воздействия импульсов электромагнитных полей.
Литература
1. Быков, В.Л. Развитие и гетерогенность тучных клеток /
В.Л. Быков // Морфология.- 2000.- № 3.- С. 86-92.
2. Григорьев, Ю.Г. Избранные вопросы теории биологического действия ЭМП / Ю.Г. Григорьев, К.А. Труханов // Электромагнитные поля и здоровье человека.- М., 2002.- С. 124-140.
3. Григорьев, Ю.Г. Электромагнитные поля и Здоровье человека / Ю.Г. Григорьев.- М.: Издательство Российского университета дружбы народов, 2002.- 177 с.
4. Должанов, А.Я. Митотическая активность кишечного эпителия при хроническом воздействии электромагнитного фактора / А.Я. Должанов, З.А. Воронцова, В.Г. Зуев // Труд. эколог. конгресса.- М. 2002.- С. 32-34.
5. Патогенные воздействия неионизирующих излучений на организм человека. / Под ред. А.А. Хадарцева и А.А. Яшина: ГУП НИИ НМТ, ООО НИЦ «Матрикс».- Москва-Тверь-Тула: ООО «Издательство «Триада», 2007.- 160 с.
6. Тучные клетки как тест состояния организма при электромагнитных воздействиях разной интенсивности / Н.А. Юрина [и др.] // Авиакосм. и экол. мед.- 1997.- № 2.- С.43^7.
BIOMARKERS EFFECTS SCORRELATION IN HOMEOSTASIS REALIZATION
AT INFLUENCE OF ELECTROMAGNETIC FIELDS IMPULSES O.A. SVIRIDOVA., Z.A. VORONTSOVA Voronezh state medical academy namedN.N. Burdenko
The experiments was made on white laboratory mail rats, with initial age 4 month, after 10-month’s exposure of the electromagnetic fields impulses. The density of the directed currents in body of the experimental animals has compounded 0,37; 0,7; 0,8; 2,7 kA/m2 with 50, 100, 500 impulses per one week (i/w), independently of their divisibility on days and duration 15-40 ns.
The correlation analysis interactions of blood basophilic granulocytes and mast cells acting in a role of biomarkers ascertained their participation in implication of reactions regulating tissue homeostasis and processes of intestinal mucosa epithelium updating at ascending of electromagnetic fields impulses periodicity.
Key words: electromagnetic fields impulses, mast cells, blood basophilic granulocytes, homeostasis, crypts mitotic epitheliocytes, jejunum mucous membrane.
УДК: 616.345-018-093/-098-053:613.633
ТОПОГРОФОЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА В ДИАГНОСТИКЕ МИКРОБИОЦЕНОЗА ТОЛСТОЙ КИШКИ У ДЕТЕЙ, ПРОЖИВАЮЩИХ В КРУПНОМ ПРОМЫШЛЕННОМ ГОРОДЕ
З.А. ВОРОНЦОВА, С.А. КОСОБУЦКАЯ, С.П. КОКОРЕВА*
Состояние микробиоценоза толстой кишки изучено у 96 детей, посещающих детские дошкольные учреждения в условиях крупного промышленного города. У половины обследованных детей выявлены значимые качественные и количественные нарушения состояния микробиоценоза, что характеризовалось изменением баланса кишечной палочки и появлением в значительных количествах условно-патогенных
микроорганизмов. Обнаружена зависимость выявленных изменений от экологической ситуации в районе проживания детей. Наиболее выраженные изменения были зафиксированы у детей, проживающих в промышленных и промышленно-транспортных зонах города. Ключевые слова: микробиоценоз, толстая кишка, часто болеющий ребенок.
На сегодняшний день уже доказано, что состояние здоровья человека не может рассматриваться без учёта особенностей адаптации организма к окружающей среде. Человек и окружающая среда представляют единую экологическую систему, находящуюся в состоянии биологического равновесия [1,2,3]. Микроорганизмы, населяющие различные биотопы макроорганизма, формируют определённый микробиоценоз, принимают непосредственное участие в регуляции многих физиологических реакций и процессов. Однако, при превышении пороговой величины, воздействующих на организм экзо- и эндогенных факторов микробиоценозы выходят из состояния биологического равновесия. Это приводит к угнетению нормофлоры в биотопе и доминированию потенциально патогенных микробов. Этот процесс может привести к серьезным последствиям как функционально, так и структурного характера, то есть к возникновению дисбактериоза
[1,4].
Доказано, что естественная микрофлора человека играет важную пусковую роль в механизме формирования иммунитета и неспецифицеских защитных реакций макроорганизма. Изменения качественного и количественного состава кишечной микрофлоры нарушают защитно-компенсаторные механизмы организма, что, в свою очередь, способствует нарушениям микроэкологического статуса. Этот причинно-следственный комплекс описан при развитии инфекционных, аутоиммунных и онкологических заболеваниях. Отсутствие нормальной микрофлоры ведёт к количественным и качественным иммуноморфологическим изменениям в лимфоидной ткани, которые приводят к функциональным сдвигам в системе иммунитета [1,5]. И хотя неоспорим тот факт, что дисбактериоз не болезнь, и не всегда требует коррекции, но он может иметь клинические последствия. Поэтому коррекция микробиоценоза направлена, прежде всего, на профилактику возможных заболеваний.
Микрофлора кишечного тракта является своеобразной высокочувствительной индикаторной системой, которая изменяется при самых разнообразных обстоятельствах. Внешние воздействия на организм: техногенное загрязнение окружающей среды, стрессовые ситуации, погрешности в питании, бесконтрольное применение антибактериальных препаратов и многие другие факторы сопровождаются качественными и количественными изменениями микробиоценоза кишечника [1,2,3,7,8].
В настоящее время большинство жилых микрорайонов крупных городов находятся в зоне влияния производственных объектов. Исходя из степени и характера загрязнения атмосферного воздуха, в городской среде, выделяют зоны гигиенического комфорта: условно-чистая зона - жилая застройка вне промышленных зон и вдали от главных транспортных магистралей; промышленная зона - территория города,, подверженная значительному воздействию промышленных выбросов в атмосферу, но расположенная вдали от транспортных магистралей; промышленно-транспортная или смешанная зона, характеризующаяся сочетанием загрязнения атмосферного воздуха транспортными и промышленными выбросами.
На территории города Воронежа сложилась два крупных промышленно-производственных комплекса, расположенные на окраинах города. Смешанная зона (центр города) характеризуются преимущественно «старой», ранней застройкой, отличающиеся умеренным техногенно-промышленным прессингом на среду обитания, более высоким озеленением. Но эти районы нельзя считать экологически безопасными, так как на их территории находятся предприятия различного профиля. Кроме того, в последние годы в связи с резким увеличением транспорта на улицах в «старой» части города пропускная способность дорог не соответствует интенсивности движения (перегруженность в 2-3 раза), что приводит к повышенному загрязнению окружающей среды. По экологическому состоянию окружающей среды в районе новостроек основными вредными веществами в атмосфере являются пылевые частицы, здесь нет промышленных предприятий, транспортные магистрали построены с учётом современных требований, что позволяет отнести этот район города к «условно чистым».
Цель исследования — изучить влияние неблагоприятных экологических факторов в условиях крупного промышленного города на состояние микробиоценоза толстой кишки у детей дошкольного возраста.
Материалы и методы исследования. Изучено состояние микропейзажа толстой кишки у 96 детей, посещающих организованные коллективы города Воронежа. Результаты 24 здоровых детей того же возраста были взяты за норму. При лабораторном обследовании детей оценивалось состояние микробиоценоза толстой кишки стандартной микробиологической методикой. Оценивалась степень дисбиотических нарушений. Нами проводилось изучение содержания редуцирующих углеводов в копро-фильтратах классическим методом Бенедикта (ВОЗ, Женева, 1993), позволяющим констатировать мальабсорбцию при количестве углеводов, превышающем 5 г/л.
Результаты и их обсуждение. Согласно данным лабораторного обследования нарушения микробиоценоза толстой кишки различной степени выраженности выявлены у 88 детей (91,7%). При этом изменения значимые (дисбиотические нарушения II-III степени) зафиксированы у 54,2% дошкольников (52 ребенка). Выявлено снижение содержания лактобактерий у 29 детей (30,2%), при этом снижение меньше Lg5 - у 17 детей (17,7%). Более чем у трети наблюдаемых дошкольников отмечалось умеренное снижение бифидофлоры (менее Lg7). У 9,4% детей (9 человек) бифидобактерии выделялись из минимальных разведений. У двух из них имелась полная элиминация бифидофлоры из нормальных разведений. Остальные дети имели бифидобактерий в пределах нормы -Lg 9,9±0,9КОЕ/г.
Обращает на себя внимание значительный дисбаланс в содержании полноценной кишечной палочки, которой наблюдался у 76 дошкольников (72,2%). У 31 (40,8%) из них определенно выраженное снижение колониальных единиц в 1 г, у 45 (59,2%) -повышение её количества. Лишь у 20,8% детей соответствовало норме. Эшерихии со сниженной ферментативной активностью определялись у 49 детей (51,0%). Гемолизирующие формы кишечной палочки выделялись у трёх человек. Отмечен незначительный рост гемолизирующих форм энтнрококка у 1 ребенка.
На фоне снижения штаммов облигатных представителей микрофлоры у 47 детей (49,0%) диагностирована контаминация локуса толстой кишки условно-патогенной флорой. Полиморф-ность её состава характеризовалась типированием следующих представителей: Proteus-19,8%, из него 89,5% - Proteus vulgaris, Proteus mirabilis - 10,5%, S.faecalis и S. aureus по 3,1%, грибы рода Candida - 38,5%. У 17 детей (17,7%) зафиксирован ассоциированный дисбиоз толстого кишечника. Из них у 11,8% отмечалась ассоциация трёх представителей УПФ (у 2 детей), а у 88,2% (15 детей) характеризовались выделением двух условнопатогенных штаммов.
При дисбиозах толстой кишки происходит нарушение переваривания за счёт ферментативной супрессии. Наиболее репрессируемый фермент - лактаза. При её дефиците происходит накопление нерасщеплённых дисахаридов в кишке, что приводит к развитию метеоризма, диарейного синдрома. Всё это играет большую роль в патогенезе воспалительных заболеваний ЖКТ. У 9,4% детей (9 дошкольников) выявлено изменение содержания углеводов кала: у 7,3% он составил 5-10 г/л, у 2,1% - повышался до 25 г/л.
При сопоставлении полученных лабораторных данных и результатов клинического наблюдения за детьми было выявлено, что дисбиотические нарушения II степени отмечались у 42,7% детей, III степени - у 11,5%. При этом практически у половины этих детей (53,4%) отмечался компенссированный дисбиоз кишечника, у остальных дошкольников - субкомпенссированный.
Мы изучали состояние микрофлоры толстой кишки у детей, проживающих в разных районах города. В нашем исследовании в промышленной зоне проживали 30 детей, в промышленнотранспортной (смешанной) - 44 дошкольника и условно чистой -22. Результаты частотного анализа микробиологических изменений в толстой кишке дошкольников в зависимости от экологической зоны города представлены на рис.
По результатам частотного анализа во всех районах города у дошкольников, посещающих организованные коллективы, отмечается дисбаланс кишечной палочки, E. Coli со сниженными ферментативными свойствами и достаточно высок уровень обнаружения УПМ, преимущественно протея и грибов рода Candida.
Наиболее выраженные изменения микробиоценоза кишки
имели место у детей, проживающих в промышленной зоне города, где достоверно чаще, чем у детей условно чистой экологической зоны города зафиксирован рост условно-патогенных микроорганизмов (у 63,3% против 31,8%) и их ассоциаций. В этой зоне несколько больше процент детей с высевом золотистого стафилококка, грибов рода Candida, обнаружения кишечной палочки со сниженными ферментативными свойствами. У детей, проживающих в смешанной зоне города, отмечается снижение лактобактерий (40,9%) и частое обнаружение эшерихий с нарушенной ферментативной активностью (63,6%) в сравнении с группой дошкольников из условно экологически чистого района (18,2% и 36,4% соответственно).
1 0 А
. /Л 1 •
/XV
/_>
V4
А \ У>:
\ у *
ГЧ'
і & 11 І = І І І - f ї ■1 Г- і «;• 5S 3 § 1 ш % С £ і к £ 1 і г і 5 І 1 * V
Рис. Частота нарушений микробиоценоза толстой кишки у детей в зависимости от экологической зоны города.
Примечание: А - Промышленная зона, Б - Смешанная зона (промышленно^-транспортная), В - Условно чистая зона.
* - достоверность отличий от уровня нормы при р<0,05;
# - достоверность отличий от показателей детей из условно чистой экологической зоны города при р<0,05
Таким образом, у половины детей, посещающих детские дошкольные учреждения, выявлены значимые нарушения состояния микробиоценоза толстой кишки, при этом, у каждого четвертого ребёнка имело место различной степени выраженности клиническое проявление субкомпенссированного дисбиоза. Наиболее часто выявлялся дисбаланс количества полноценной кишечной палочки, присутствие кишечной палочки со сниженной ферментативной активностью. Практически у половины обследованных детей обнаружены условно-патогенные микроорганизмы. Из них чаще других регистрировались протей, грибы рода Candida. Ассоциации условно-патогенных микроорганизмов имели место в виде двух или трёх микробов у 17,7% детей.
Выводы. Выявленные особенности нарушения микробиоценоза толстой кишки у детей, посещающих организованные коллективы в промышленной зоне города, зависят от экологической ситуации района их проживания, и требуют необходимости проведения реабилитационной терапии адаптировано топографической ситуации.
Литература
1. Альбицкий, В.Ю. Часто болеющие дети. Клиникосоциальные аспекты: пути оздоровления / А.А. Альбицкий, А.А. Баранов, М.Л. Камаев, М.Л. Огнева.- Нижний Новгород: Изд-во Нижегородской государственной медицинской академии.- 2005.-180 с.
2. Куропал, С.А. Оценка риска для здоровья населения при техногенном загрязнении городской среды / С.А. Куропал, Н.П. Мамчик, О.В. Клепиков.- Воронеж: Воронежский гос. Ун-т, 2006.- 220 с.
3. Боев, В М. Антропогенное загрязнение атмосферного воздуха и здоровье населения / В.М. Боев, В.В. Быстрых // Санитарный врач.- 2005.- №3.- С. 81-91.
4. Кузнецова, Г.Г. Оценка дисбиотических отклонений в кишечной микрофлоре / Г.Г. Кузнецова // Индивидуальные подходы к проблеме дисбактериоза: тезисы докладов научнопрактического семинара.- М., 2005.- С. 19-25.
5. Reuter, G. The lactobacillus and bifidobacterium microflora of the human intestine: Composition and succession Curr.Issues Intest.- 2001.- Vol.2.- Suppl.2.- P.-43-53.
6. Беляков, ИМ. Иммунная система слизистых / И.М. Беляков // Иммунология.-1997.- №4.- С.7-13.
7. Гриневич, В.Г. Проблема дисбиоза кишечника в общетерапевтической практике / В.Г. Гриневич // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология.- 2004.- №1.- С.97.
8. Жуков, С. Проблемы экологического состояния Воронежского водохранилища и влияния на окружающую среду /
С. Жуков // Санитарный врач.-2005.-№7.-С.27-32.
TOPOGROFOEKOLOGICHESKAYA SCORE IN DIAGNOSTICS OF INTESTINAL MICROBIOTA IN CHILDREN LIVING IN A LARGE INDUISTRIAL TOWN
Q.A. VORONTSOVA, S.A. KOSOBUTSKAYA, S.P. KOKOREVA Voronezh state medical academy the name of N.N. Burdenko
The state of microbiocenosis of colon is studied for 96 children, visitant child's preschool establishments in the conditions of large industrial city. At the half of the inspected children meaningful high-quality and quantitative violations of the state of microbiocenosis are exposed, that was characterized by the change of balance of collibacil-lus and appearance in the fars of conditional-pathogenic microorganisms. Found out dependence of the exposed changes on an ecological situation in the district of residence of children. The most expressed changes were fixed for children, resident in the industrial areas of city. Key words: microbiocenosis, thick gut, often ill child.
УДК 616.2-084-053.4
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА И МЕТОДОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРОФИЛАКТИКИ ОРВИ В ДЕТСКИХ ОРГАНИЗОВАННЫХ КОЛЛЕКТИВАХ
Д.В. ЛЯДОВ, А.А. ЗУЙКОВА, О.Н. КРАСНОРУЦКАЯ,
Д.Ю. БУГРИМОВ*
Профилактика острых респираторных вирусных инфекций в детских организованных коллективах является наиболее важной проблемой современной сезонной педиатрической практики. Меры профилактики у детей требуют основательного методологического обоснования, и любое использование препаратов должно соответствовать главному принципу - не навредить детям.
Ключевые слова: профилактика, острые респираторные вирусные инфекции, организованные коллективы.
Острые респираторные вирусные инфекции и заболевания остаются одной из самых актуальных проблем здравоохранения во всем мире. Стабильно высокий уровень заболеваемости ОРИ сохраняется в настоящее время среди всех возрастных групп населения. Около 70% этих инфекций поражают верхние дыхательные пути, лимфоэпителиальное кольцо, вызывают воспаление среднего уха, придаточных пазух. В результате ОРИ формируются гиперсенсибилизация, аллергические состояния. У детей с предрасположенностью к аллергии или атопии ОРИ нередко сопровождаются обструкцией дыхательных путей (крупом, об-структивным бронхитом). В 20-30% случаев течение ОРИ осложняется пневмонией либо обострением хронических заболеваний легких, сердечно-сосудистой системы и почек. Частые и особенно тяжело протекающие ОРИ, следующие одно за другим, оказывают на организм ребенка негативное воздействие, способствуя снижению функциональной активности иммунитета, важными составляющими которого являются фагоцитарная система и ин-терфероногенез. Таким образом, наиболее актуальным на сегодняшний день является разработка профилактических программ, направленных на повышение сопротивляемости организма ребенка, повышения иммунорезистентности часто болеющих детей к наиболее распространенным инфекциям, улучшение качества здоровья детей в целом. Особое значение в программах сезонной неспецифической профилактики ОРИ придается иммуномодулирующим средствам. В настоящее время интересным препаратом этой группы является Деринат.
Цель исследования - разработать профилактическую программу и оценить эффективность и безопасность применения в ней препарата Деринат у детей организованных коллективов.
Деринат (компания-производитель ЗАО «ФП «Техномед-сервис», Россия) относится к группе иммуномодуляторов, активизирующих клеточный и гуморальный иммунитет, имеет природное происхождение. В отличие от синтетических препаратов, обладает более мягким и естественным действием на организм. Оптимизирует специфические реакции против грибковой, вирусной и бактериальной инфекции. Представляет собой стерильный 0,25% раствор натриевой соли высокоочищенной деполимеризо-
ванной (т.е. расщепленной на отдельные составляющие - дезок-сирибонуклеотиды) низкомолекулярной нативной (естественной) дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК).
Деринат содержит нуклеотидный мотив цитозин-гуанин (СО), сходный с таковым у большинства бактерий и вирусов. Рецепторы, воспринимающие этот мотив, содержатся в дендритных клетках, макрофагах, В-лимфоцитах. Они называются Толл-подобные рецепторы 9 типа. Клетки, несущие этот рецептор воспринимают нуклеотидный мотив СО дерината за бактериальную агрессию и отвечают на неё развёрнутым иммунным ответом в виде усиления фагоцитоза макрофагами, синтеза ими 1БК а и р, окиси азота, фактора некроза опухоли а, активирующего нейтро-филы. Стимуляция ТЬЯ 9 макрофагов, а также их стимуляция №N7, приводит к активации трёх уровней противовирусного макрофагального ответа:
- Фагоцитоз вирусов и вирус инфицированных клеток;
-Киллинг инфицированных клеток;
-Продукция противовирусных молекул: ТОТ а, окись азота, ^ а.
Стимуляция толл-подобных рецепторов в дендритных клетках повышает их способность влиять на дифференцировку Т-хелперов, в сторону образования Т-хелперов 2 типа (ТЪ2)/ Под влиянием ТЪ 2 происходит дифференцировка В-лимфоцитов в плазматические клетки, секретирующие ^ О2, ^О4, ^М. Таким образом стимуляция деринатом толл-рецепторов 9 типа иммуннокомпетентных клеток приводит к активации клеточного и гуморального имунитета.
В двойное слепое плацебо-контролируемое рандомизированное клиническое исследование в параллельных группах эффективности и безопасности иммуномодулирующего препарата Деринат при профилактики ОРВИ и ОРЗ у детей (IV фаза) и повышения иммунорезистентности часто болеющих детей в организационных коллективах с сентября 2011 года по апрель 2012 г были включены 120 детей в возрасте от 2 до 7 лет здоровые и часто болеющие. Исследование проводится на базе МДОУ «Детский сад общеразвивающего вида №46» г Воронежа в соответствии с Правилами проведения качественных клинических испытаний в РФ и Европейскими Предписаниями о ОСР [1]. Продолжительность профилактической программы составляет 8 месяцев.
После подписания формы информированного согласия законным представителем ребенка на участие в клиническом исследовании было проведено начальное обследование ребенка, включающее оценку состояния здоровья, сбор анамнеза, анализ посещения детского учреждения, взятие мазка из зева и носа на патологическую флору. При соответствии критериям включения и отсутствии критериев исключения - табл.1 методом случайной выборки ребенок был включен в одну из групп (согласно списку рандомизации).
Критериями эффективности проводимой профилактической программы является отсутствие клинических проявлений сезонного заболевания, результаты динамических лабораторных исследований. Профилактическая эффективность препарата оценивалась на основании отсутствия или уменьшения числа возникновения и длительности повторных инфекций, определения индекса I = Р1/ Р2 и коэффициента Е = (Р1-Р2/Р1)х100 профилактической эффективности, где Р1 - частота заболеваемости группе, получающей плацебо, гриппферон, интерферон, Р2 частота заболеваемости в группе детей, получавших Деринат. Безопасность применения препарата оценивается путем динамического наблюдения за детьми, а также наличия нежелательных явлений и их характера.
В исследовании использовался метод стратификационной рандомизации, что обеспечило однородность выборок групп по всем основным признакам: возрасту, полу, частоте заболеваний за период исследования, фоновой патологии.
Группа 1 - 30 пациентов, которые ежедневно получали де-зоксирибонуклеат натрия (Деринат, производитель ЗАО «ФП «Техномедсервис»», Россия) по 2 капли в каждый носовой ход 2 раза в день в течение 3 недель.
Группа 2 - 30 пациентов получали интраназальное закапывание интерферона альфа (Гриппферон, производитель Биотехнологическая компания ФИРН М) по 2 капли 2 раза в день в течение 3 недель.
Группа 3 - 30 пациентов получали интерферон лейкоцитарный человеческий жидкий по 2 капли в каждый носовой ход 2 раза в день в течение 3 недель.
Группа 4 (контрольная) - 30 пациентов получали плацебо в
