CC BY
45УДК: 615.9: 615.065:616-092.9
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЛОРАТАДИНА
Проведена токсикологическая оценка антигистаминного препарата - лоратадина. Установлено, что по критерию острой пероральной токсичности лоратадин относится к веществам умеренно опасным, проявляет средневыраженный раздражающий эффект при попадании на слизистую оболочку глаз, оказывает влияние на функциональные показатели сперматогенеза. Вещество обладает сильной кумулятивной активностью, слабой или умеренной (в зависимости от концентрации и дозы) токсичностью на организменном (жизненность дафний) и клеточном (сперматозоиды быков) уровнях.
Ключевые слова: лоратадин, токсикологическая оценка, раздражающий эффект, кумулятивная активность, сперматогенез.
А.Б. Кузьминов
Львовский национальный медицинский университет им Данилы Галицкого Минздрава Украины, 79010, г. Львов, Украина
Введение. Антигистаминные препараты с действующим веществом лоратадин занимают одну из ведущих позиций по объему потребления на фармацевтическом рынке [1]. Широкое использование указанных препаратов обусловлено их доказанной эффективностью при лечении аллергического ринита и крапивницы [2, 3]. Среди зарубежных производителей на российском и украинском фармацевтическом рынке представлены препараты производства США, Великобритании, Индии, Венгрии, Швейцарии, Канады. Выпуск генериче-ских версий осуществляется на ООО НПО ФАРМВИ-ЛАР (Россия, г. Малоярославец), ЗАО «Зио-ЗДОРОВЬЕ» (Россия, г. Подольск), ЗАО «ФАРМПРОЕКТ» (Россия, г. Санкт-Петербург), ОАО «ФАРМСТАНДАРТ» (Россия, г. Москва), АКРИХИН ОАО химико-фармацевтический комбинат (Россия, г. Старая Купавна), ЗАО «Скопинский фармацевтический завод» (Россия, с. Успенское, Рязанская обл.), ПАО «Лекхим-Харьков» (г. Харьков), ПАО «Фар-мак» (г. Киев), ПАО «Киевмедпрепарат» (г. Киев), ПАО «Фармацевтическая фирма «Дарница» (г. Киев). Предель -но допустимая концентрация лоратадина в воздухе рабочей зоны производственных помещений установлена на уровне 0,05 мг/м3 [4] и свидетельствует о его чрезвычайной опасности (1-й класс опасности), как химического фактора производства. Сведения в доступной научной литературе о токсичности лоратадина носят ограниченный характер. В то время как для диагностики профессиональных заболеваний и разработки комплекса профилактических мероприятий необходимы данные о параметрах токсичности препарата, особенностях протекания острых и подострых интоксикаций, отдаленных эффектах воздействия.
В связи с этим целью работы была экспериментальная оценка токсичности лоратадина на лабораторных животных и альтернативных тест-системах.
Материалы и методы исследования. Лоратадин - этиловый эфир-4-(8-хлор-5,6-дигидро-11Н-бензо-[5,6]цикло-гепта-[1,2-Ь]пиридин-11-илиден)-1-пиперидинкарбоновой кислоты. Синонимы: Веро-Лоратадин, Кларитин, Ломелан, Лоратин, Кларотадин. CAS №: 79794-75-5. Эмпирическая формула: C22H23N2ClO2 молекулярная масса: 382,9. По внешнему виду - порошок белого цвета, умеренно растворимый в воде, мало растворим в гексане, практически нерастворим в спирте и хлороформе. Температура плавления: 131-137 °С. Содержание основного вещетва 98,5-101,0% в перерасчете на сухое вещество. Производитель субстанции «FARMACHEM SA Chem Limited», Индия.
Исследования проведены в соответствии с методическими указаниями [5, 6, 7]. Использовано 4 вида лабораторных животных: нелинейные белые крысы, мыши, морские свинки и кролики, которые содержались в условиях вивария Львовского национального медицинского университета на стандартном пищевом рационе, согласно правилам «надлежащей лабораторной практики» (GLP) и соблюдением общих этических принципов экспериментов на животных, принятых 1-м Национальным конгрессом по биоэтике (Киев, 2000).
Параметры токсичности лоратадина устанавливали при пероральном, перкутанном и интраназальном воздействии препарата на организм подопытных животных.
Кумулятивные свойства изучали в субхроническом эксперименте по методике Lim et al. [8].
Иммунотоксическое действие лоратадина изучали в соответствии с методическими рекомендациями [9].
Кузьминов Александр Борисович (Kuzminov Aleksandr Borisovich), научный сотрудник Центральной научно-исследовательской лаборатории и лаборатории промышленной токсикологии Львовского национального медицинского университета им. Данилы Галицкого Минздрава Украины, 79010 г Львов, Украина, alexander.kouzminov@gmail.com
Токсикологический вестник №з (126)
Влияние лоратадина на репродуктивную функцию исследовали с учетом гонадотоксического [10] и эмбриотокси-ческого эффектов [11].
Для оценки токсичности лоратадина на альтернативных тест-системах использовали ветвистоусых рачков Daphnia magna Straus и сперматозоиды быка.
Результаты и обсуждение. Среднесмертельная доза (DL50) лоратадина при пероральном введении для белых мышей-самок установлена на уровне 1980 мг/кг, для белых мышей-самцов - 2375 (1131-4988) мг/кг, белых крыс-самок - 6150 мг/кг, белых крыс-самцов - 6230 мг/кг (3-й класс опасности - вещества умеренно опасные, ГОСТ 12.1.007-76). В клинической картине острого перорального отравления преобладают симптомы поражения центральной нервной системы.
Коэффициент видовой чувствительности составил 3,15, что свидетельствует о выраженной чувствительности лабораторных животных к действию лоратадина. Половая чувствительность не выражена.
10-кратное погружение хвостов белых мышей в насыщенный водный раствор лоратадина (время экспозиции 2 часа, 5 раз в неделю ) не вызывало гибели животных и признаков интоксикации. Изменений на коже после окончания эксперимента не наблюдалось.
Внесение 50 мг лоратадина в конъюнктивальный мешок глаза кролика вызвало средневыраженное повреждающее действие: 4 балла (отек - 3 балла, гиперемия - 1 балл). Восстановление офтальмостатуса наблюдалось на 3-и сутки без проведения медикаментозного лечения.
При субхроническом введении лоратадина в нарастающих дозах у животных развивалась клиническая картина интоксикации с симптомами поражения центральной нервной системы. Коэффициент кумуляции препарата составляет 1,92, что указывает на сильную кумулятивную активность лоратадина.
При интраназальном введении белым крысам суспензии лоратадина в стерильном физиологическом растворе в дозах 64,0-71,8 мг, что в пересчете на вдыхаемую концентрацию, составляло 2000 мг/м3, гибели животных не зафиксировано на протяжении всего периода наблюдения (14 суток). После введения препарата у белых крыс наблюдалось нарушение ритма дыхания. Состояние животных нормализовалось через 2-3 часа после окончания эксперимента.
С целью определения порога острого ингаляционного действия (Limac) лоратадина препарат вводили интрана-зально белым крысам в дозах от 1,87 мг до 24,6 мг, что в пересчете соответствовало концентрациям 100 мг/м3, 300 мг/м3 и 900 мг/м3.
У подопытных животных, которых подвергали воздействию препарата в концентрации 900 мг/м3, на вторые сутки эксперимента наблюдалось статистически достоверное увеличение сумационно-порогового показателя (С1111) и количества циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). Изменения со стороны остальных исследуемых показателей при воздействии лоратадина во всех концентрациях были недостоверны в течение всего эксперимента. Lim , установленый по критерию изменения
СПП и ЦИК, находится на уровне 900 мг/м3.
При внутрикожной сенсибилизации морских свинок ло-ратадином не выявлено достоверных изменений в периферической крови животных. Фагоцитарная активность нейтрофилов крови не изменялась. Фагоцитарный индекс находился на уровне контрольной группы. Препарат не влиял на показатели клеточного иммунитета. Со стороны гуморального звена имунитета у животных опытной группы зафиксировано достоверное повышение уровня ЦИК, однако этот показатель находился в границах колебаний физиологической нормы.
Пероральное введение лоратадина в дозе 62,3 мг/кг (1/100 DL50 ) на протяжении 5 дней вызывало статистически достоверное снижение осмотической и кислотной резистентности сперматозоидов у крыс-самцов. Изменений морфо-метрических показателей сперматогенеза при воздействии лоратадина в дозах 62,3 мг/кг (1/100 DL50 ) и 12,46 мг/кг (1/500 DL50 ) не выявлено.
Введение лоратадина в дозах 1/1250 DL50 (4,92 мг/кг) и 1/6150 DL50 (1 мг/кг) беременным самкам крыс на протяжении 20 дней беременности не оказывало влияния на эмбриогенез, показатели доимплантационной, постимпланта-ционной и общей эмбриональной летальности.
При оценке токсичности лоратадина на выживаемость дафний использовались концентрации препарата: 0,049 мг/л, 0,097 мг/л, 0,97 мг/л, 3,2 мг/л, 9,7 мг/л, 19,4 мг/л.
Наиболее интенсивное воздействие лоратадина происходило на вторые сутки. По смертности 50% и больше тест-объектов установлено, что выбранные концентрации относятся к слаботоксичным, 2-й класс токсичности (0,097 мг/л), и среднетоксичным, 4-й класс токсичности (0,97 мг/л - 19,4 мг/л). Среднесмертельные концентрации (ЛК50) лоратадина для различной продолжительности биотестирования составили: ЛК50 24 ч - 1,2 мг/л ± 0,1; ЛК50 48 ч - 0,5 мг/л ± 0,1; ЛК50 72 ч - 0,2 мг/л ± 0,1; ЛК50 96 ч - 0,1 мг/л ± 0,1.
Цитотоксическое действие лоратадина исследовалось на свежеполученных эякулятах быков, разведенных фосфат-но-солевым буфером, в который добавляли препарат в дозах 1/500 DL50 (12,3 мг), 1/100 DL50 (61,5 мг) и DL50 (6150 мг). Минимальное выживание сперматозоидов (112,0±26,15 ч) наблюдалось при воздействии лоратадина в дозе DL50 (6150 мг), что было ниже показателей контроля на 30,0%. Во всех исследуемых дозах лоратадин достоверно снижал дыхательную активность спермы по сравнению с показателями контрольной группы.
Выводы. 1. По параметрам острой токсичности лората-дин относится к веществам умеренно опасным (3-й класс опасности, ГОСТ 12.1.007-76). В клинической картине острой и субхронической интоксикации преобладают симптомы поражения центральной нервной системы.
2. Лоратадин обладает средневыраженным местно-раз-дражающим действием при попадании на слизистые оболочки. Проявляет сильную кумулятивную активность, оказывает влияние на функциональные показатели сперматогенеза.
3. Лоратадин не вызывает иммунотоксический эффект при внутрикожной сенсибилизации и эмбриотоксический
эффект при пероральном введении.
4. Лоратадин оказывает слабую либо умеренную (в зависимости от концентрации) токсичность на организменном уровне (жизнедеятельность дафний) и цитотоксическое действие, которое характеризуется сниженной интенсивностью окислительных процесов, что обуславливает потерю подвижности и уменьшение длительности выживания сперматозоидов быка.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Зайченко Г.В., Яковлева Л.В., Брюханова Т.О., Колос О.М. Сучасш протиалерпчт препараты: кшшко-фармаколопчт та фармакоекономiчнi особливостт Украшський медичний часопис. 2012; 6: 134-136.
2. Дидковский Н.А., Малашенкова И.К Лоратадин (Кларидол) в терапии аллергических и пвсевдоаллергических заболеваний // Русский медицинский журнал. 2011; 18: 1156-1160.
3. Абатуров А.Е. Лоратадин - антигистаминное средство II поколения. Здоровье ребенка. 2008; 3: 51-55.
4. ГН 2.2.5.1827-03 Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны. Дополнение № 1 к ГН 2.2.5.1313-03. М., 2004.
5. Методичт вказiвки (МВ № 544 вщ 21.10.2005) «Обгрунтування гранично допустимих концентрацш лкарських засобiв у повг^ робочо! зони i в атмосферному повг^ населених мюць». Ктв, 2005.
6. Методические указания (МУ № 2102-79 от 01.11.1979) «Оценка воздействия вредных химических соединений на кожные покровы и обоснование предельно допустимых уровней загрязнения кожи». М., 1980.
7. Методические указания (МУ № 2196-80 от 11.08.1980) «Методические указания к постановке исследований по изучению раздражающих свойств и обоснованию предельно допустимых концентраций избирательно действующих раздражающих веществ в воздухе рабочей зоны». М., 1980.
8. LimR.K., RinkK.G., GlassH.G., Soaje-EchagueE.A. A method for the evaluation of cumulation and tolerance by the determination of acute and subchronic median effective doses. Arch. Intern. Pharm. Ther. 1961; 130: 336-352.
9. Методичт рекомендацп (МР 8.1.4.104-2003 вщ 25.07.2003) «Дослщження iмунотоксичноï ди потенцшно небезпечних хiмiчних речовин при гiгi\нiчнiй регламентацiï». Киïв, 2003. - 30 с.
10. Стефанов О.В., ред. Докштчт дослщження лкарських засобiв (методичнi рекомендацiï). Киïв: Авщена, 2001.
11. Методические указания (МУ № 1744-77 от 10.07.1977) «Методы экспериментального исследования по установлению порогов действия промышленных ядов на генеративную функцию с целью гигиенического нормирования». М., 1978.
REFERENCES:
1. Zajchenko G.V., JakovljevaL.V., Brjuhanova T.O., KolosO.M. Modern antiallergic drugs: clinical and pharmacological and pharmacoeconomical characteristics. Ukrai'ns'kyj medychnyj chasopys. 2012; 6: 134-136 (in Ukrainian).
2. Didkovskiy NA., Malashenkova I.K. Loratadin (Klaridol) in therapy of allergic and pseudo-allergic diseases. Russkiy meditsinskiy zhurnal.2011; 18: 1156-1160 (in Russian).
3. AbaturovA.E. Loratadine - II generation antihistamine. Zdorov'e rebenka. 2008; 3: 51-55 (in Russian).
4. GN 2.2.5.1827-03 Maximum allowable concentration (MAC) of harmful substances in the air of the working area. Supplement 1 to GN 2.2.5.1313-03. Moscow, 2004.
5. Methodical guidelines (MV No 544 of 21.10.2005) «Substantiation of the maximum permissible concentration of drugs in the air of the working area and the air of populated areas». K., 2005.
6. Methodical guidelines (MU No. 2102-79 of 01.11.1979) «An assessment of influence of harmful chemical compounds on integuments and justification of maximum permissible levels of pollution of skin». Moscow, 1980.
7. Methodical instructions (MI No. 2196-80 of 11.08.1980) «Methodical instructions to statement of researches on studying of irritating properties and justification of maximum permissible concentration of selectively operating irritating substances in air of a working zone». Moscow, 1980.
8. Lim R.K., Rink K.G., GlassH.G., Soaje-Echague EA. A method for the evaluation of cumulation and tolerance by the determination of acute and subchronic median effective doses. Arch.Intern. Pharm.Ther.1961; 130: 336-352.
9. Methodical guidelines (MR 8.1.4.104-2003 of 25.07.2003) «Research of immunotoxic effect of potentially dangerous chemicals at their hygienic regulation». K., 2003.
10. Stefanov O.V ed. Preclinical studies of drugs. Kyiv: Avicenna, 2001 (in Russian).
11. Methodical instructions (MI No. 1744-77 of 10.07.1977) «Methods of a pilot study on establishment of thresholds of effect of industrial poisons on generative function for the purpose of hygienic rationing». Moscow, 1978.
A.B. Kuzminov
TOXICOLOGICAL CHARACTERISTICS OF LORATADINE
Danylo Halitsky Lviv Medical National University , Ministry of Health of Ukraine. 79010 Lviv, Ukraine
A toxicological evaluation of an antihistamine preparation Loratadine was conducted. It was found out that based on the criterion for acute peroral toxicity , Loratadine refers to moderately hazardous substances, shows an average irritation effect when contacting conjunctiva, produces impact on spermatogenesis functional indicators. The substance has a strong cumulative activity, is slightly or moderately toxic on the organism level ( daphnia vitality) and cellular level ( bull sperm cells). Key words: Loratadine, toxicological evaluation, cumulative activity, irritation effect, spermatogenesis.
Материал поступил в редакцию 13.03.2014 г
