CC BY
12
Доктор мед. наук В. И. ВАШКОВ
Токсичность препарата „крысид" при повторном применении для белых мышей, белых крыс, кроликов, собак, а также для серых крыс
В последние годы появился новый, весьма эффективный дератизаци-онный препарат а-нафтилтиомочевина, отличающийся от всех известных Дф сих пор препаратов не только тем, что он относится к группе веществ, до сих пор не 'применявшихся в практике, но и тем, что он обладает явно выраженной избирательной токсичностью. Препарат очень активен в отношении серой крысы и домовой мыши, действуя в то же время гораздо слабее на других животных. Между тем другие применяющиеся до сих пор в практике дератизации яды одинаково опасны как для грызунов, так и для человека: мышьяк, фосфор, соли фтора, углекислый барин, препараты с сернокислым таллием, фосфористый цпнк, растительные вещества, содержащие алкалоиды (семена белены, дурмана, мака, наперстянки, чемерицы и др., за исключением морского лука).
Благодаря специфическому действию препарат получил название «крысид». Избирательное свойство этого нового соединения указывает то направление, по которому должен осуществляться в дальнейшем синтез дератизационных препаратов, а именно изыскание избирательно действующих веществ.
В настоящее время крысид не только изучен в лабораторных условиях, но широко внедрен в дератизационную практику почти во всех городах Советского Союза.
В связи с изучением токсичности указанного препарата возникли вопросы: обладает ли он кумулятивными свойствами, а также не наблюдается ли к нему привыкания.
Для разрешения этих вопросов был поставлен ряд опытов на белых мышах, кроликах, белых крысах и собаках.
I. Опыты на белых мышах
Прежде чем приступить к решению вопроса о кумулятивных свойствах крысида при повторном введении его белым мышам, была установлена его токсическая доза для них. С этой целью определенную навеску крысида тщательно размешивали в крахмальном клейстере (4 г крахмала на 100 мл воды). Полученную таким образом суспензию вводили белым мышам через рот в количестве от 0,025 до 0,25 мг на 1 г веса животного. Общее количество вводившейся суспензии не превышало 0,5 мл. Наблюдение за подопытными животными продолжалось не менее 3—7 дней.
Полученные данные показывают, что для белых мышей токсичными являются дозы в 0,025 мг/г, причем в этом случае гибнет 18% мышей; 100,% гибель наблюдается от дозы в пределах 0,06—0,1 мг/г, 1 мг крысида вызывает гибель свыше 50°/о белых мышей (вес одной мыши принят равным 20 г).
После установления токсической дозы крысида для белых мышей мы приступили к изучению возможности привыкания животных к данному препарату. С этой целью одним и тем же мышам через каждые 6—7 дней вводили суспензию крысида в крахмальном клейстере в дозах 0,0125— 0,12 мг/г; препарат вводили одной партии мышей через рот с помощью пипетки, а другой — подкожно с помощью шприца. Каждое повторное введение препарата сопровождалось взятием в опыт новой партии контрольных мышей (10 мышей). Гибель отмечали как среди опытных, так и среди контрольных животных.
Среди мышей, которым препарат был введен через рот последовательно в дозах 0,025—0..12 мг/г, отмечалась гибель в размере 13°/о от дозы 0,035 мг/г и 23% от дозы 0,05 м/г, между тем как в группе контрольных она достигала 40—60°/о. При подкожном введении в аналогичных опытах гибель мышей достигала в опытах 26—31%, в контроле — 60%.
Полученные данные с несомненностью показывают, что крысид не только не обладает кумулятивными свойствами, но, наоборот, вызывает у мышей, которым его предварительно вводили, понижение восприимчивости к нему в 2—3 раза, т. е. у животных вырабатывается как бы некоторый иммунитет.
II. О п ы т ы на белых крысах
Желая про верить наблюдения, полученные «а белых мышах, мы поставили ряд аналогичных опытов на белых крысах. Для этого препарат смешивали с пищей и давали крысам после предварительного выдерживания их в течение суток без пищи. Обычно препарат смешивали с 5 г каши или лапши. Результаты опыта регистрировались после трехдневного наблюдения. Необходимо отметить, что белые крысы неохотно поедали приманки с крысидом; эти животные, столкнувшись впервые с приманкой, содержащей препарат, не всегда поедали ее полностью; так, например, из 16 крыс только 10 съели приманку полностью. При повторном получении такой приманки крысы, как правило, чрезвычайно редко съедали ее полностью; в наших опытах из 32 наблюдений только в одном случае приманка была съедена полностью. Этот факт указывает на то, что белые :<рысы по вкусу, а возможно, и по запаху распознают наличие крысида в приманке.
Это предположение подтверждается и тем фактом, что в некоторых случаях приманка не изменялась в весе после пребывания ее в течение суток в клетке с крысой, повторно участвовавшей в опытах. Несмотря на то, что последняя голодала уже двое суток, она отказалась от приманки, содержавшей всего 10 мг крысида в 5 г каши (0,2%). Наличие вкуса и запаха у крысида, по которому его узнают белые крысы, подтверждается еще и тем, что при увеличении содержания крысида в приманках до 20 мг в 5 г каши (0,4% препарата) белые крысы, повторно участвовавшие в опыте, совершенно отказывались принимать их. Последнее обстоятельство заставило нас вводить препарат с помощью пипетки в количестве 20 мг в 2 мл крахмального клейстера.
Человек легко может определить наличие препарата по вкусу и даже в отдельных случаях по запаху; очевидно, и животные также обладают этой способностью.
Для установления токсичности крысида для белых крыс были проведены опыты на молодых животных весом от 50 до 100 г; эти опыты показали, что препарат токсичен для них в дозе 3—3,5 мг (37,5—70 мг/кг); из 4 опытных крыс одна погибла от этой дозы. Увеличение препарата з приманке до 5 мг (57,4—58,7 мг/кг) и выше вызывало гибель всех животных.
Следует отметить, что у белых крыс, как и у белых мышей, при повторном поедании препарата повышалась устойчивость организма к нему.
Из 4 крыс, получивших препарат в дозах от 50 до 59 мг/кг, погибло 3, среди животных, получивших более высокие дозы, наблюдалась 100% гибель, а среди крыс, получивших препарат повторно, гибли только те, которым крысид был введен в количестве около 200 мг/кг.
На развитие устойчивости к препарату у крыс указывают также данные, пЬлученные при проведении опыта с 6 крысами в течение 36—42 дней. За указанный период наблюдения приманка с содержанием препарата от 3 до 20 мг давалась крысам 6—7 раз. Приманка поедалась
-крысами только частично и то до тех пор, пока количество крысида в ней не достигало 20 мг в 5 г. После этого животные совсем отказывались принимать пищу, несмотря на то, что препарат давался с разнообразной .пищей (каша овсяная, гречневая, лапша и др.). В течение указанного времени каждая крыса съела приблизительно 25—35 мг препарата. В результате животные безнаказанно переносили смертельные дозы в 7—14 мг (100—175 мг/кг). В дальнейшем эти крысы погибли после несильного введения больших количеств препарата (по 20 мг каждой); эти данные мы не берем для оценки токсичности. Если взять за основу максимальное количество препарата (100—175 мг/кг), съеденное за один раз крысой в течение периода наблюдения, то это количество примерно в 2—3 раза превышает то, которое достаточно для гибели животного при однократном поедании яда. Последний факт подтверждает развитие у животных устойчивости к токсическому действию крысида при повторном его поедании.
III. Опыты на собаках
Как уже сообщалось в прежней работе', из двух щенков {весом 1 950 и 1 750 г), получивших в апреле 1944 г. крысид (первый в количестве 75 мг/кг, второй — 150 мг/кг), первый щенок остался жив, а второй погиб. Первый продолжал в дальнейшем нормально развиваться и через месяц удвоил свой вес. После этого ему вторично был дан препарат в количестве .150 мг/кг; щенок остался жив, не обнаруживал каких-либо видимых признаков отравления, и продолжал нормально развиваться. В течение первых 6 месяцев щенку предлагалась пища с крысидом, от которой он упорно отказывался; затем в течение 20 месяцев, т. е. до февраля 1946 г., -он не использовался >в опытах. В это время, выдержав собаку (бывшего щенка) весом 14 кг без пищи в течение суток, мы дали ей крысид из расчета 200 мг/кг (2 800 мг на 300 г каши с рубленым мясом). Собака обнюхала пищу, но отказалась принять ее, несмотря «а то, что голодала уже в течение суток. Только ночью примерно после двухсуточного голодания она из 300 г пищи съела 95 г, в которых было 884 мг крысида, что составляло 63 мг/кг. Собака погибла при обильном слюнотечении.
Проведенный опыт показывает, что полученные нами ранее данные на щенках в отношении токсичной для них дозы крысида в 150 мг/кг не могут быть распространены и на взрослых собак. Для собаки, с которой мы имели дело, токсическая доза равнялась всего 63 мг/кг. Однако и последняя доза также не может служить критерием для оценки токсичности крысида для других взрослых собак. Это подтверждает опыт с собакой весом 6 кг, которой был дан крысид (из расчета 75 мг/кг) с пищей; собака осталась жива. Через 4 дня ей вторично был дан препарат в количестве 100 мг/кг: приманка с препаратом была съедена, и собака снова осталась жива. Еще через 4 дня собаке после выдерживания ее без пищи в течение суток снова был дан препарат в количестве 150 мг/кг; она сначала отказалась от пищи, но через некоторое время была вынуждена ее съесть. Вскоре открылась рвота. В дальнейшем с месячными интервалами собаке вводили подкожно 3 раза препарат в дозах 75, 100, 150 мг/кг. •Собака осталась жива.
V. Опыты на серых крысах
С целью проверки того, как реагируют кролики на повторное поедание крысида, был проведен опыт на 13 кроликах, которым в течение 25— 135 дней через каждые 7—15 дней вводился через рот с помощью шприца крысид, размешанный в крахмальном клейстере в количествах от 75 до 1360 мг/кг. Из 13 кроликов 3 погибли от дозы до 500 мг/кг; 8 — от
1 Труды Центрального научно-исследовательского дезинфекционного института, Jft 2, 1946.
500 — 1 ООО мг/кг и 2 — от 1 200 — 1 360 мг/кг. Между тем среди контрольных кроликов 100%'гибель отмечалась уже от дозы 300—450 иг/кг-
Таким образом, из 13 опытных кроликов 10 погибли от дозы, превышавшей в 2—3 раза ту, которая вызывала гибель контрольных кроликов.. На основании полученных данных можно с несомненностью утверждать,, что у кроликов в результате 8—14-кратного применения крысида заметно понижается восприимчивость к нему.
V. Опыты на серых крысах
В опыте участвовало 23 крысы; из них 10 свежих, 3 кормленных один-раз крысидом до взятия в опыт и 10 получивших предварительно препарат более 2 раз. Каждая крыса содержалась в отдельной клетке. В качестве приманок животным после предварительного выдерживания их б течение суток без пищи было дано 5 г каши с 5 мг крысида. Через 24 часа погибли все 10 крыс, впервые принявших препарат, 2 крысы из 3 (6&0/о> второго опыта и 1 крыса из 10 (10%), участвовавших в опыте более 2 раз.
Полученные данные показывают, что у серых крыс, которым был ранее дан препарат, развивалась пониженная чувствительность к нему, в особенности у тех, которым.он был дан более 2 раз.
Приманки, содержавшие от 2 до 4 мг препарата на 5 г пищевого субстрата (0,04—0,07%), поедались полностью всеми крысами, участвовавшими в опытах один, два и более раз. При наличии в приманках 4,7—5 мг препарата (0,08—0,1%) все крысы, участвовавшие в опыте первый раз,, съели их полностью; из 11 крыс, участвовавших второй раз, их съели всего 2, а из 29 крыс, участвовавших в опытах более двух раз, — 14. При дальнейшем увеличении в приманке содержания препарата с 5,5 до 25 мг из 42 крыс, участвовавших в опыте первый раз, съели ее полностью* 40 крыс (95%), из 15 крыс, участвовавших в опыте второй раз, их оказалось 6 (40%), а из 66 крыс, участвовавших в опыте более двух раз,, таких было всего 17 (26%). При увеличении в приманках препарата да 50 мг (1%) ни одна крыса из участвовавших в опытах один и более раз не съела полностью приманок. Из этого не следует, что в практике нельзя применять приманки, содержащие 1—2% крысида, так как крыса недолжна обязательно съесть всю приманку; для ее гибели вполне достаточно, если она съест всего лишь 1 г приманки с 10—20 мг препарата.
Полученные данные показывают, что крысы, встречающие первый раз. приманки с крысидом в количестве менее 1%, поедают их полностью. Прй повторном обнаружении такой приманки они определяют по вкусу его содержание в приманках уже при наличии 0,08% и съедают приманку лишь частично (три четверти, половину или даже одну пятую часть). При-наличии крысида в количестве 1% (50 мг на 5 г пищевого субстрата) из 4 крыс, участвовавших в опытах более 2 раз, 2 крысы совершенно отказались от приманки, несмотря на то, что они голодали в течение 2 суток.. Последнее обстоятельство указывает на то, что крысы при вторичном получении приманки со значительным количеством этого препарата определяют наличие его, возможно, и по запаху.
После поедания препарата в количестве до 10 мг/кг наблюдалась гибель 22% крыс, участвовавших в опыте в первый раз, 14,3%— во второй; раз и 5,8%—в третий раз.
После поедания препарата в дозах 10—50 мг/кг установлено, что из. 63 крыс, участвовавших в опыте первый раз, погибло 44 (70%); из 27 крыс второго опыта погибло 7 (26%), а из 74 третьего опыта, погибло 10 (13,5%).
В нашем опыте дозы от 30 до 50 мг/кг вызывали гибель крыс в количестве 86—80%, между тем как от этих количеств можно было ожидать. 100% гибели животных. Это обстоятельство может быть объяснено тем„
что препарат давался крысам с пищей, остатки которой, возможно, в не* которых случаях не были полностью разысканы.
Полученные данные показывают, что после однократного поедания крысида у крыс повышается устойчивость к нему в 2,5 раза, а после двукратного поедания и больше эта устойчивость повышается в отдельных случаях до 4 раз.
Крысы, съевшие в 2—3 предварительных опытах препарат в количества 6 мг/кг, погибали от дозы 4,4 мг/кг. Крысы, съевшие в нескольких пред-! варительных опытах препарат в количестве 38,3 мг/кг, погибали от дозы 26,1 мг/кг; крысы, съевшие препарат в течение всего периода наблюдений1 в количестве 258 мг/кг, погибали от дозы 81 мг/кг. Если принять во внимание, что от дозы 20—29 мг/кг погибало около 75% крыс, участвовавших в опыте первый раз, то для животных, которые многократно принимали препарат, наивысшая летальная доза достигала 81 мг/кг, т. е. был£ примерно в 6 раза выше той, которая вызывала гибель крыс, участвовавших в опыте первый раз.
Крысы, которые предварительно получили препарат в количестве-20 мг и выше, погибали от дозы в 12,4 мг. Следовательно, в этом случае дозы, вызывавшие гибель крыс, которым предварительно был дан препарат, превышали в два с лишним раза дозы, вызывавшие гибель крыс,, которые до этого не получали препарата.
Для установления летальной дозы для серых крыс, длительно находившихся в опыте и получавших препарат через каждые 3—8 дней, 109 крыс были разделены на 7 групп по числу раздачи им препарата.
Крысы, участвовавшие в опыте первый раз, погибали от дозы 19 мг/кг. Крысы, участвовавшие в опыте четвертый раз в продолжение 22 дней-,, погибали от дозы 24,4 мг/кг, а крысы, участвовавшие в опытах 11 —18 раз в течение 48—116 дней, погибали от дозы 41,7 мг/кг. Таким образом, трехкратное предварительное поедание крысой препарата повышало летальную дозу с 19 до 24,4 мг/кг, а 10—17-кратное предварительное его поедание повышало эту дозу до 41,7 мг/кг.
С целью изучения влияния на величину летальной дозы интервалов между поеданием препарата последний давали крысам с кормом через 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10 дней. Полученные предварительные данные показывают, что устойчивость крыс к препарату начинает увеличиваться по мере удлинения интервалов до 6 дней; так, .например, летальная доза возрастает с 13,7 мг/кг при трехдневном интервале до 26,24 мг/кг при четырехдневном интервале, а при шестидневном интервале она достигает 35 мг/кг, после чего остается примерно на этом уровне при дальнейшем увеличении интервалов до 10 дней.
Необходимо подчеркнуть, что дозы крысида очень невелики и уступают только натрию фтор-ацетату и стрихнину.
По данным Диэка и Рихтера, летальные дозы дератизационных препаратов для крыс в мг на 1 кг веса таковы:
1) Натрий фтор-ацетат.......... 0,22 + 0,01
2) Стрихнин сульфат............ 4,8 + 0,4
3) Альфа-нафтилтиомочевина (крысид) . . . 6,9^0,5
4) Таллий-сульфат............. 15,8±0,9
5) Цинк-фосфид.............40,5 + 2,9
6) Триоксид мышьяка...........138 ^ 13
7) Морской лук — для самок.......188 + 10
. самцов....... 276' 29
8) Карбонат бария............. 1 480 - + 340
Таким образом, по данным названных авторов, альфа-нафтилтиомочевина в 2—6 раз токсичнее таллий-сульфата и цинк-фосфида; последние два препарата начинают внедряться в настоящее время в широкую дера-тизационную практику и являются новыми препаратами для Советского Союза.
К отрицательным качествам крысида относится прежде всего то обстоятельство, что серые крысы, встречавшие ранее этот препарат, определяют его наличие в приманках. Это необходимо всегда иметь в виду при проведении практических работ. Другим отрицательным качеством препарата является повышение у крыс невосприимчивости к нему в 2—3 раза в результате его поедания, так что при повторной работе летальную дозу необходимо соответственно увеличивать. Кроме того, время гибели крысы, ранее принимавшей препарат, затягивается в большинстве случаев до 48 часов, а в отдельных случаях даже до 96 часов вместо обычно наблюдаемой гибели через 24 часа среди крыс, которые*не принимали предварительно крысида.
Необходимо подчеркнуть, что, несмотря на выявленные отрицательные стороны крысида, он остается в настоящее время лучшим препаратом в дератизационной практике.
Выводы
1. Испытание крысида на белых мышах, белых крысах, кроликах и собаках показало, что крысы и собаки, принимавшие ранее препарат, узнают наличие его в приманке по вкусу. Белые крысы, участвовавшие в опытах более одного раза, редко поедали полностью приманки с препаратом.
2. Аналогичные данные получены при повторном введении препарата собакам. Последние хорошо определяли наличие его в пище по запаху. Сходное определение наличия препарата в приманке по запаху отмечалось в редких случаях и среди белых крыс, которые в некоторых опытах совершенно отказывались от поедания предлагаемой им пищи.
3. Результаты опытов показали, что крысид при повторных применениях не обладает кумулятивными свойствами, а, наоборот, приводит к развитию невосприимчивости, в результате чего у животных понижается чувствительность к нему в 2—3 раза. Пониженная восприимчивость к препарату сохраняется свыше 15 дней после его введения.
4. Белые крысы хорошо определяют наличие препарата по вкусу, на что указывают результаты 32 наблюдений, во время которых только •одно животное из участвовавших повторно в опыте съело полностью всю приманку.
5. Собаки хорошо определяют по запаху наличие крысида в приманке, как показывают опыты по повторному применению его с твердой пищей {мясо, каша). В отдельных случаях и белые крысы определяют по запаху наличие препарата в приманках.
6. Опыты, проведенные на 150 серых крысах, показывают, что крысид не обладает кумулятивными свойствами при повторном его применении. Наоборот, у животных вырабатывается невосприимчивость к нему.
7. При повторном применении препарата у серых крыс понижается восприимчивость к нему в 2—4 раза, в зависимости от предварительно ■съеденного количества препарата, длительности опыта и размера данной животным дозы.
8. Приманки, содержащие препарат в количествах до 0,07i%i, полностью поедались крысами, участвовавшими в опыте 1—2 и более раз. При дальнейшем увеличении содержания препарата до 0,5>°/о1 поедаемость приманок была такова: при даче препарата впервые их брали 95%, при вторичной даче — 40%!, а при даче свыше 2 раз ее съедали полностью только 269/ol крыс.
9. При наличии в приманках препарата до 1%* серые крысы, участвовавшие в опытах более одного раза, устанавливали его наличие, повиди-¡мому, по вкусу, а при 'более высоких количествах и по запаху.
