УДК 619:636.7:616-002.32
Семанюк Н.В. *, асистент © Лъв\всъкый нацюналъныйутеерсытет ветерынарногмедыцыны та бютехнологт
Iмет С.З. Гжыцького
ТИНКТОР1АЛЬН1 ВЛАСТИВОСТ1М1КРООРГАН13М1В основних БЮТОП1В Р0Т0В01 ПОРОЖНИНИ СОБАК 3 ХРОН1ЧНИМ КАТАРАЛЬНИМ Г1НГ1В1ТОМ
Дослгджено вм1ст грампозитивних / грамнегативних аеробних / факультативно анаеробних м1крооргашзм1в у основных б1отопах ротовог порожнини собак з хротчным катаральным г/нггвгтом. Хротчный катаральный г1нг1вт (ХКГ) у собак характерызуетъся збмъшенням к\лъкост1 грамнегатывных I зменшенням вм1сту грампозытывных мтрооргашзм1в в основных б1отопахротовогпорожныны.
Найбыъшу кглъкгстъ грамнегатывных мтрооргашзм1в выявлено у ротовт ргдыт собак з важкым ступенем ХКГ, а найныжчу - у здоровых собак. Ствв1дношення грамнегатывног мтрофлоры до грампозытывног становыло у ротов1й ргдынг здоровых собак 1:5,29, за легкого ступеня важкост1 ХКГ -1:3,02, за середнъого - 1:2,64 г за важкого ступеняХКГ- 1:2,01.
Враховуючы те, щоротовар1дына постшно оновлюетъся г омываеротову порожныну, за ствв1дношенням грамнегатывногмшрофлоры до грампозытывног можна судыты про важюстъ переб1гуХКГу собак.
Розподм мтроб1в на грампозытывш г грамнегатывш е тформатывным за ХКГргзного ступеня важкост1 хворобы.
Ключое1 слова: собакы, колонгзацгя, хронгчный катаральный г1нг1вт, грампозытывш г грамнегатывн1 м1крооргашзмы
УДК 619:636.7:616-002.32
Семанюк Н.В., ассистент Лъвовскый нацыоналъныйуныверсытет ветерынарной медыцыны ы быотехнологый ымены С.З. Гжыцкого
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА МИКРООРГАНИЗМОВ ОСНОВНЫХ БИОТОПАХ ПОЛОСТИ РТА СОБАК С ХРОНИЧЕСКИМ КАТАРАЛЬНЫМ ГИНГИВИТОМ
Исследовано содержаные грамположытелъных ы грамотрыцателъных аэробных ы факулътатывно анаэробных мыкроорганызмов в основных быотопах полосты рта собак с хроныческым катаральным гынгывытом. Хроныческый катаральный гынгывыт ( ХКГ ) у собак характерызуется увелыченыем колычества грамотрыцателъных ы уменъшеныем содержаныя
© Семанюк Н.В., 2014
* Науковий кер1вник- д-р вет. наук, професор Н.М. Хомин
293
грамположителъных микроорганизмов в основных биотопах полостирта .
Наибольшее количество грамотрицателъных микроорганизмов обнаружено в ротовой жидкости собак с тяжелым степенью ХКГ , а самую низкую - у здоровых собак. Соотношение грамотрицателъной микрофлоры к грамположителъной составляло в ротовой жидкости здоровых собак 1:5,29 , за легкой степени тяжести ХКГ - 1:3,02 , при среднем - 1:2,64 и при тяжелой степениХКГ - 1:2,01.
Учитывая то, что ротовая жидкость постоянно обновляется и омывает ротовую полость , по соотношению грамотрицателъной микрофлоры к грамположителъной можно судить о тяжести течения ХКГ у собак.
Распределение микробов на грамположителъные и грамотрицателъные является информативным поХКГразличной степени тяжести болезни.
Ключевые слова: собаки, колонизация, хронический катаральный гингивит, грамположителъные и грамотрицателъные микроорганизмы
UDC 619:636.7:616-002.32
N.V. Semaniuk
Lviv national university of veterinary medicine and biotechnologies named after
S.Z. Gzhytskyj
TINCTORIAL PECULIARITIES OF MICROORGANISMS OF GENERAL BIOTOPES OF ORAL CAVITY IN DOGS WITH CHRONICAL CATARAL
GINGIVITIS
It was studied the content of grampositive and gramnegative aerobic and facultatively anaerobic microorganisms is in general biotopes of oral cavity in dogs with chronical cataral gingivitis.
The largest number of gram-negative microorganisms found in oral fluid of dogs with severe HKH exponent and the lowest - in healthy dogs. Value gramnegative gram-positive microorganisms in the oral fluid was healthy dogs 1:5,29, in light of the severity of HKH - 1:3,02, on average - 1:2,64 and severe HKH - 1:2,01.
Given that oral fluid is constantly updated and mouth washes, the ratio of gram-negative gram-positive microorganisms can judge the severity of HKH flow in dogs.
Chronical cataral gingivitis in dogs is characterized by the increased quantity of gramnegative and decrease of grampositive microorganisms in the general biotopes of oral cavity.
Key words: dogs, colonization, chronic catarrhal gingivitis, Gram-positive and Gram-negative bacteria
Вступ. Вщомо, що у сучаснш наущ ротова порожнина розглядаеться як мжроекосистема, вщкрита для найр1зномаштшших м1крооргашзм1в. Мжрофлора ротово! порожнини пщтримуе на надежному piBHi мкцеву ¿мунну
294
систему i забезпечуе onip оргашзму собак колошзаци його патогенними i умовно-патогенними мжрооргашзмами [1]. Мжрофлора порожнини рота розглядаеться як первинна мшень для будь-якого чинника, який прямо або опосередковано впливае на адгезш i резистентшсть колошзаци резидентно!, транзиторно! i додатково! мжрофлори [3]. До складу нормофлори ротово! порожнини собак входять грампозитивш i грамнегативш мжрооргашзми, м1ж якими, а також тканинами встановлюеться динам1чна р1вновага. Фарбування за Грамом виявилося таким принциповим, що до цього часу використовуеться як основний етюлопчний тест у мжробюлоги.
Грампозитивш мжрооргашзми мають лшополюахаридну капсулу, a ix кл1тинна стшка - фосфолшщну мембрану, оточену пептидоглжаном. На поверхн1 кл1тин розташовуються таю специф1чш антигени, як стафшококовий протеш A i стрептококовий проте!н М. Грампозитивш бактерп за рахунок токсичних субстанцш, як1 вони продукують, пщвищують проникшсть судинно! стшки i цитоплазматичних мембран, викликаючи розвиток цитол1зу [2]. Грамнегативш бактерп у кл1тиннш оболонщ, на вщмшу вщ грампозитивних, мають лшщш компоненти i лшополюахариди (ЛПС). ЛПС бактершно! кл1тини мютять О-антигени, що несуть у co6i сайти зв'язування для антибактер1альних антитш та рецептори для бактерюфапв. Лшщний компонент або лшщ A ycix грамнегативних м1крооргашзм1в вщповщальний за ендотоксичний ефект, мае щентичну оргашзацш та стереотипш бюлопчш ефекти, зокрема, niporeHHicTb, летальну токсичшсть, ¿муногеншсть, мпюгеншсть, зв'язуеться з мембраною кл1тин еукар1от1в, стимулюе альтернативний шлях активаци комплемента та систему мононуклеарних фагоцит1в. BiH також бере участь у звшьненш макрофагами л1зосомальних фермешпв, токсичних радикал1в кисню, оксиду азоту, активуе прокоагулянтну систему i систему ф1бринол1зу [2].
Слщ вщм1тити, що вивчення колошзаци мжрооргашзмами р1зних еколопчних Him порожнини рота i бшьш поглиблене дослщження критерив !х патогенносп е необхщною умовою для об'ективно! д1агностики етюлопчно! значущост1 м1крооргашзм1в за стоматолопчно! патологи [4], зокрема хрошчного катарального гшпв1ту у собак.
Мета роботи. Вивчити особливост1 колошзаци грампозитивними i грамнегативними аеробними i факультативно анаеробними мжрооргашзмами ротово! порожнини собак за хрошчного катарального гшпв1ту для встановлення причини виникнення хвороби та визначення ступеня важкост1ХКГ.
Матер1али та методи. Дослщження мжрофлори ротово! порожнини проведено у 40 дорослих безпородних домашшх собак в1ком 5,0-6,0 роюв вагою 10-30 кг, яю за клмчним проявом патолопчного процесу в яснах були роздшеш на 4 групи (по 10 тварин у кожнш): контрольну - здоров! тварини, I-шу дослщну - з легким ступенем ХКГ, II-гу - з середшм i III-тю дослщну групу - з важким ступенем nepe6iry хвороби. Розподш м1крооргашзм1в на грамнегативш i грампозитивш проводили шляхом фарбування мазюв, виготовлених з ¿зольованих м1крооргашзм1в за Грамом [6].
295
Результати дослщження та Тх обговорення. Зубш вщкладення (зубна бляшка) являють собою м'який, прозорий, клейкий матер1ал, який щшьно фжсуеться на поверхш зуба I майже повшстю складаеться з бактерш I продукпв 1х життед1яльносп [5]. У результат! дослщження тинктор1альних властивостей м1крооргашзм1в, ¿зольованих ¿з зубних вщкладень (рис. 1), встановлено, що у здорових собак частка грампозитивних бактерш становила 88,7%, а грамнегативних - лише 11,3%.
Контрольна I група II група III група
_група_
□ Грампозитивш бактерй' ПГрамнегативш бактерй'
Рис. 1. Тинктор1альш властивосл мжрофлори, ¡зольовано*1 ¡з зубних вщкладень собак за ХКГ, %
У собак з легким ступенем ХКГ склад мжрофлори змшювався. Так, у зубних вщкладеннях вщбувалося зменшення майже на 6% кшькост1 грампозитивних бактерш, пор1вняно ¿з здоровими собаками, I збшьшення бшьше як на третину вмкту грамнегативних мкрооргашзм1в. Очевидно, саме так1 змши сшввщношення кшькост1 грампозитивних I грамнегативних м1крооргашзм1в у зубних вщкладеннях собак е причиною запального процесу та 1х тривалого персистування за ХКГ. 1з наростанням важкост1 ХКГ кшьюсть грамнегативних бактерш у зубних вщкладеннях з середшм ступенем хвороби виявилася майже удв1ч1 бшьшою, шж у здорових собак. Найбшьшу кшьюсть грамнегативних мжрооргашзм1в встановлено у собак з важким ступенем ХКГ, а саме 28,4% вщ загально! кшькост1 мезофшьних аеробних I факультативно анаеробних мжрооргашзм1в.
Тинктор1альш властивост1 мжрофлори, ¿зольовано! ¿з зубоясенно! борозни собак за ХКГ представлено на рисунку 2. 3 наведених на рисунку даних видно, що зубоясенна борозна бшьшою м1рою заселена грампозитивними бактер1ями, а кшьюсть грамнегативних мжрооргашзм1в виявилася у 2,13 раза меншою, шж у зубних вщкладеннях. Таке сшввщношення м1ж грампозитивними I грамнегативними мкрооргашзмами у даному бютош ймов1рно забезпечуе ф1зюлопчну д1яльшсть зубоясеннного апарату. У ясеннш борозш собак за легкого ступеня ХКГ на 7,9% зменшуеться кшьюсть грампозитивно! мжрофлори I майже утрич1 збшьшуеться вмют грамнегативних мкрооргашзм1в.
296
Саме останш, як вщомо, викликають ¿мунну вщповщь, що проявляеться синтезом цитокмв та активащею ¿мунно! системи. Звичайною реакщею на синтез цитокмв е запалення, що також може призвести до збшьшення кшькост1 токсичних речовин в оргашзмь Збшьшення вмюту грамнегативних м1крооргашзм1в у зубоясеннш борозш собак бшьш як у чотири \ п'ять раз1в ускладнювало важюсть переб1гу ХКГ.
100 80 60 40 20 0
-94,7-
"5,3"
Контрольна трупа
"85,8"
14,2
3
77,6
VI
22,4
I трупа
II трупа
71,9
28,1
III трупа
□ Грампозитивш бактерй' ШГрамнегативш бактерй
Рис. 2. Тинктор1альш властивосл мжрофлори, ¡зольовано*1 ¡з зубоясенноТ
борозни собак за ХКГ, %
Тинктор1альш властивост1 аеробно! \ факультативно анаеробно! мжрофлори, ¿зольовано! ¿з ротово! рщини собак за ХКГ показан! на рисунку 3. За кшькютю грамнегативних бактерш дослщжуваний бютоп був найбагатшим, пор1вняно ¿з бютопами, представленими вище, очевидно, вш е резервуаром непатогенних, умовно-патогенних, а, можливо, I патогенних м1крооргашзм1в.
Контрольна I група II група III група
група
п Грампозитивш бактерй пГрамнегативш бактерй
Рис. 3. Тииктор1альш властивосл мжрофлори, ¡зольовано*1 ¡з ротовоТ рщини собак за ХКГ, %
297
Найбшьшу кшьккть грамнегативних м1крооргашзм1в виявлено у ротовш рщиш собак з важким степенем ХКГ, а найнижчу - у здорових собак. Сшввщношення грамнегативно! мжрофлори до грампозитивно! становило у ротовш рщиш здорових собак 1:5,29, за легкого ступеня важкост! ХКГ - 1:3,02, за середнього - 1:2,64 i за важкого ступеня ХКГ - 1:2,01.
Враховуючи те, що ротова рщина постшно оновлюеться i омивае ротову порожнину, за сшввщношенням грамнегативно! мжрофлори до грампозитивно! можна судити про важюсть nepeöiry ХКГ у собак.
Отже, розподш мшроб!в на грампозитивш i грамнегативш дае можливкть виявляти ХКГ у собак та визначати стутнь важкост! хвороби.
Висновки.
1. Хрошчний катаральний гшпв!т у собак характеризуемся збшьшенням кшькост! грамнегативних i зменшенням вмкту грампозитивних м1кроорган1зм1в в основних 6ioTonax ротово! порожнини.
2. Розподш м!кроб!в на грампозитивн1 i грамнегативн1 е досить ¿нформативним для визначення ступеня важкост1 хвороби.
3. У перспектив! це дасть можливкть розробити ефективн! методи л!кування собак, хворих на ХКГ з р!зним ступенем важкост!.
Л1тература
1. Воробьев А. А. Иммуносупрессивное действие патогенных грамотрицательных бактерий / А. А. Воробьев, Е. В.Борисова, О. С.Моложавая // ВестникРАМН. 2001. - № 2. -С. 21-25.
2. Воробьев А. А. Бактерии нормальной микрофлоры: биологические свойства и защитные функции / А. А.Воробьев, Е. А. Лыкова // Журнал микробиологии. 1999. - № 6. - С. 102-105.
3. Савичук Н. О. Колошзацшна резистентшсть слизово! оболонки порожнини рота / Н. О. Савичук // Современная стоматология. - 2/2011. - С. 6672.
4. Чуйкина О. В. Условно патогенные микроорганизмы в микробиоценозе полости рта при дисбактериозе кишечника их персистентные свойства: Автореф. дис. канд. мед. наук: Волгоград, -2002. - 19 с.
5. Paster B. J. Bacterial diversity in human subgingival plaque // Paster B. J., S. K.Bosches, J. L. Galvin et al. J. Bacteriol. - 2001; 183: 3770-3783.
6. Gram H. C. Über die isolierte Färbung der Schizomyceten in Schnitt - und Trockenpräparaten // Fortschritte der Medizin. - T. 2. - (1884), - C. 185-89.
Рецензент - д.вет.н., професор Гуфрш Д.Ф.
298