CC BY
59
УДК 616.61-002.3-036.11-085.847-06:616.15-07 Кубанский научный медицинский вестник № 1 (130) 2012
А. X. КАДЕ1, В. С. ТИЛИКИН1, В. П. ЛЕБЕДЕВ2, С. А. ЗАНИН1, Е. А. ГУБАРЕВА1, А. Ю. ТУРОВАЯ1, Н. В. ИЗМАЙЛОВА3
ТЭС-ТЕРАПИЯ В КОРРЕКЦИИ ЦИТ0КИН0В0Г0 ПРОФИЛЯ У БОЛЬНЫХ С ОСТРЫМ ПИЕЛОНЕФРИТОМ
кафедра общей и клинической патофизиологии государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации,
Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4, тел. (861) 262-40-31. E-mail: [email protected];
2Центр транскраниальной электростимуляции Института физиологии им. И. П. Павлова РАН, Россия, 199034, г. Санкт-Петербург, наб. Макарова, 6;
3муниципальное бюджетное учреждение здравоохранения «Городская больница № 2» Краснодарского многопрофильного лечебно-диагностического объединения,
Россия, 350012, г. Краснодар, ул. Красных Партизан, 6
В работе рассматривается возможность использования метода ТЭС-терапии для нормализации цитокинового статуса при комплексном лечении больных ОП. В настоящей работе произведена оценка цитокинового профиля (ИЛ-1р, -2, -4, -6, -10) у 81 больной острым серозным пиелонефритом. Все пациентки были разделены на две группы: 1-я группа (n=41) - группа сравнения - получала стандартное лечение, а 2-я группа (n=40) - основная группа, которой в комплексе со стандартной терапией проводили курс ТЭС-терапии в течение 7 дней по 40 минут. Лабораторные исследования в обеих группах проводились в 1-е сутки и в динамике на 8-е сутки пребывания в стационаре. При комплексном лечении с использованием ТЭС-терапии у больных произошло достоверное снижение уровня ИЛ-1Р, ИЛ-6, ИЛ-10, более выраженное, чем при стандартном лечении. Таким образом, ТЭС-терапия позволяет снизить степень активности системного воспалительного ответа при остром серозном пиелонефрите более значительно, чем стандартное лечение, и предупредить дальнейшее повреждающее действие провоспалительных цитокинов.
Ключевые слова: острый пиелонефрит, цитокины, ТЭС-терапия.
А. Kh. KADE1, V. S. TILIKIN1, V. P. LEBEDEV2, E. A. GUBAREVA1,
S. A. ZANIN1, A. Yu. TUROVAJA1, N. V. IZMAILOVA3
TES-THERAPY IN CORRECTION OF THE CYTOKINES A PROFILE AT PATIENTS WITH THE ACUTE PYELONEPHRITIS
1 Chair of the general and clinical pathophysiology Kuban state medical university of the Ministry of health care and social development of the Russian Federation, Russia, 350063, Krasnodar, Sedina str., 4, tel. (861) 262-40-31. E-mail: [email protected];
2Pavlov institute of physiology Russian academy of sciences electrostimulation center transcranial,
Russia, 199034, St.-Petersburg, emb. Makarova, 6;
3municipal budgetary establishment of public health services city hospital № 2 Krasnodar versatile medical-diagnostic association,
Russia, 350012, Krasnodar, street Red the Guerrilla, 6
In the given work possibility of use of a method of TES-THERAPY for normalisation of a hormonal background, including cytokines the status, and increase of efficiency of complex treatment of patients AP is considered. In the present work the estimation cytokines a profile (IL-1 в, -2, -4, -6, -10) at 81 patients with a acute serous pyelonephritis is made. All patients have been divided two groups: 1 group (n=41) - comparison group - received standard treatment of disease, and 2 group (n=40) - the basic group which in a complex with standard therapy followed a policy of TES-THERAPY within 7 days for 40 minutes. Laboratory researches in both groups were spent to 1 days and in dynamics for 8 days of stay in a hospital. At complex use of TES-THERAPY patients had an authentic decrease in level IL-1P, IL-6, IL-10, more expressed, than at standard treatment. Thus, TES-THERAPY allows to lower degree of activity of the system inflammatory answer at a sharp serous pyelonephritis more considerably, than standard treatment and to warn the further damaging action proinflammatory cytokines.
Key words: a acute pyelonephritis, cytokines, TES-THERAPY.
Введение
Острый пиелонефрит (ОП) представляет собой инфекционное заболевание почек воспалительной природы, которое сопровождается поражением интерстиция, чашечек и лоханок. Воспалительный процесс при ОП
является полностью обратимым, однако при переходе в хронический пиелонефрит воспаление становится персистирующими, а потому приводит к развитию не-фросклероза. Заболеваемость ОП составляет порядка 16 человек на 100 тыс. населения в год. При этом
заболеванием в 5 раз чаще страдают девочки и женщины. Развитие воспалительного процесса в почках сопровождается развитием системной воспалительной реакции с изменением цитокинового профиля у таких больных. Определение цитокинов (про- и противовоспалительных) в клинической практике преследует следующие цели:
оценку тяжести течения заболевания;
оценку эффективности терапии;
прогнозирование развития различных осложнений.
Бактериальная инвазия почечной ткани вызывает миграцию в очаги воспаления гранулоцитов, макрофагов и других иммунокомпетентных клеток, которые, с одной стороны, усиливают антибактериальную защиту, а с другой, продуцируют цитокины и другие биологически активные вещества, тем самым могут вызвать деструкцию почечной ткани. Именно поэтому так важно корригировать происходящие изменения в цитокино-вом каскаде у таких больных.
ТЭС-терапия имеет ограниченный спектр противопоказаний: судорожные состояния, эпилепсия, травмы и опухоли головного мозга, инфекционные поражения ЦНС, острые психические расстройства, гидроцефалия, гипертоническая болезнь III стадии, гипертонический криз, гипертиреоз, мерцательная аритмия, наличие повреждений кожи в местах наложения электродов, наличие вживлённых электростимуляторов, в частности кардиостимуляторов, возраст до 5 лет. Учитывая наличие противовоспалительных эффектов ТЭС-терапии [1], мы включили её в комплексное лечение острого серозного пиелонефрита (ОСП) с целью нормализации цитокинового гомеостаза.
Материалы и методы исследования
В работе произведена оценка цитокинового профиля (ИЛ-1Р, -2, -4, -6, -10) у 81 больной с ОСП, находившейся на стационарном лечении в урологическом отделении МБУЗ «ГБ № 2 КМЛДО» города Краснодара. Диагноз был установлен на основании типичных признаков ОСП (боли в поясничной области, болезненное учащенное мочеиспускание, фебрильная температура тела, лейкоцитоз в общем анализе крови и лейкоцитурия в общем анализе мочи, положительный симптом «поколачивания»). При постановке диагноза руководствовались Международной статистической классификацией болезней (МКБ-10, 1992; русский перевод - 1995) и рекомендациями экспертов ВОЗ, 1998.
Сформулированы следующие критерии включения пациентов в исследование:
1) возраст пациенток не моложе 18 лет и не старше 40 лет;
2) отсутствие беременности у пациенток;
3) наличие неосложненного ОСП;
4) отсутствие противопоказаний к проведению ТЭС-терапии;
5) добровольное согласие на участие в исследовании.
Все больные с ОСП в соответствии с заданными
целями и поставленными задачами случайным образом были разделены на две группы: 1-я группа -группа сравнения (п=41) - больные ОСП, получавшие стандартное лечение заболевания. 2-я группа -основная группа (п=40) - больные ОСП, которым в комплексе со стандартной терапией проводили курс ТЭС-терапии в течение 7 дней по 40 минут. Лабораторные исследования в обеих группах проводились
в 1-е сутки и в динамике на 8-е сутки пребывания в стационаре.
Курс ТЭС-терапии проводили импульсным электростимулятором «ТРАНСАИР-03» (ООО «Центр транскраниальной электростимуляции», г. Санкт-Петербург) в анальгетическом режиме. Особенностью электрического воздействия, проводимого с помощью аппаратов «ТРАНСАИР-03», является стимуляция специальными электрическими прямоугольными импульсами тока фиксированной частоты и длительности. Сеансы ТЭС-терапии проводили со второго дня стационарного лечения в режиме биполярного импульсного тока ежедневно в дневные часы. Сеансы проводили в режиме биполярного импульсного тока ежедневно в течение 6-7 дней, силу тока подбирали индивидуально (от 1 до 2 мА, в среднем 1,7 мА). Постоянными оставались частота (77 Гц) и длительность прямоугольных импульсов (3,5-4 мс). Длительность 1-го сеанса во всех случаях составляла 15 минут, всех последующих - 40 минут.
Исследовали цитокиновый фон (ИЛ-1Р, -2, -4, -6, -10) в крови пациенток с ОСП. Забор крови в группах I, сравнения и II, основной, производили из локтевой вены натощак в 6-7 часов утра в количестве 10 мл. Охлажденные до 4° С пробирки «Vacuette» объемом 4 и 3 мл с ЭДТА наполняли частью крови (7 мл) и центрифугировали ее в течение 10-15 минут со скоростью 1500 оборотов в минуту. Полученную плазму замораживали до -20° С в эпиндорфах. Цитокины в плазме крови определяли методом иммунофермен-тного анализа (ИФА) с помощью специализированных тест-систем «Bender MedSystems, BMS224/2 IL-1ß», «Bender MedSystems, BMS221 IL-2», «Bender MedSystems, BMS225/2 IL-4», «Bender MedSystems, BMS213/2 IL-6» и «Bender MedSystems, BMS215/2 IL-10» (ЗАО «БиоХимМак», г. Москва, Ленинские горы) на микропланшетном ридере «Multiscan Multisoft» фирмы «Labsystems» на базе клинико-диагностической лаборатории МБУЗ «ГБ № 2 КМЛДО» города Краснодара.
Статистическую обработку полученных данных осуществляли методами непараметрической статистики с помощью программы «Statistika 6». Данные работы представлены в виде M (средних значений) и m (стандартного отклонения средних величин). Сравнение выборок проводилось по непараметрическому критерию Вилкоксона, с установлением уровня значимости *p<0,05 и **p<0,01.
Результаты исследования и обсуждение
Содержание цитокинов определяли у пациенток обеих групп. Группа I - стандартное лечение ОСП -сравнения (n=41). Группа II - стандартное лечение ОСП+ ТЭС-терапия - основная) (n=40). За время лечения пациенты группы II получали курс ТЭС-терапии, состоящий из 7 процедур. Результаты исследования представлены в таблице.
ИЛ-1 - провоспалительный цитокин, продуцируется клетками воспаления, вызывает высвобождение и экспрессию других воспалительных медиаторов (цитоки-нов/факторов роста, хемокинов, биоактивных липидов, металлопротеиназ и реактивных радикалов кислорода, адгезивных рецепторов), пролиферацию резидентных клеток, накопление экстрацеллюлярного матрикса [3, 6]. В группе I - пациенток, получающих только стандартное лечение, не отмечалось достоверного
Кубанский научный медицинский вестник № 1 (130) 2012
Кубанский научный медицинский вестник № 1 (130) 2012
Динамика уровня исследуемых цитокинов в сыворотке крови больных ОСП на фоне стандартного лечения и в комплексе с ТЭС-терапией
Показатель Группа I (1-е сутки), n=41 Группа I (8-е сутки) Группа II (1-е сутки), n=40 Группа II (8-е сутки)
ИЛ-1Р, пмоль/л 3,6±0,3 1,4±0,2 3,4±1,35 0,1±0,08*
ИЛ-2, пмоль/л 3,8±0,23 3,8±0,32 4,3±0,23 4,8±0,32
ИЛ-4, пмоль/л 2,7±0,16 2,5±0,69 3,7±0,58 5,3±1,13*
ИЛ-6, пмоль/л 44,3±5,9 3,1±0,64** 44,3±8,4 1,2±0,42**
ИЛ-10, пмоль/л 4,7±0,43 0,3±0,08* 5,4±1,14 0,1±0,04**
Примечание: * - р < 0,05 в сравнении между показателями при поступлении и через 8 суток лечения в каждой группе, ** - р < 0,01 в сравнении между показателями при поступлении и через 8 суток лечения в каждой группе.
снижения уровня ИЛ-1 в (р>0,05). При использовании ТЭС-терапии в комплексном лечении у больных группы II происходило достоверное снижение уровня этого цитокина (р<0,05) (таблица).
ИЛ-4 - противовоспалительный цитокин - ингибирует цитотоксическую активность Т-лимфоцитов, макрофагов. Совместно с другими цитокинами ИЛ-4 способствует пролиферации тучных клеток. ИЛ-4 - ци-токин, отвечающий за активность гуморального звена. Он не только участвует в развитии провоспалительных реакций, но и играет значительную роль в процессах хронизации [3]. В группе I отмечается только тенденция к повышению уровня ИЛ-4 (таблица) в плазме крови к концу лечения (р>0,05). В группе II отмечено достоверное увеличение уровня этого цитокина (р<0,05).
ИЛ-6 относится к провоспалительным мультифун-кциональным цитокинам. По многообразию клеточных источников продукции и мишеней биологического действия ИЛ-6 является одним из наиболее активных ци-токинов, участвующих в реализации иммунного ответа и воспалительной реакции. Уровень ИЛ-6 повышается при воспалительных процессах; его определение и мониторинг являются более чувствительным тестом, чем С-реактивный белок, особенно на ранних стадиях воспалительного процесса [3, 4]. Повышение уровня ИЛ-6 в крови и моче наблюдается у больных с гломерулонефритами [5]. Имеется корреляция между уровнем ИЛ-6 в моче и стадией гломерулонефрита. Увеличение его концентрации в плазме крови при пиелонефрите сочетается с генерализованным повреждением эндотелия [2], что запускает основные звенья патогенеза этого заболевания: преобладание синтеза эндотелием вазоконстрикторных веществ, увеличение проницаемости сосудистой стенки, активация свертывающей системы крови, повышение вязкости крови, нарушения микроциркуляции. По литературным данным, при ОСП происходит активация провоспалительного звена ци-токинов: ФНО-а, ИЛ-1Р, ИЛ-6, ИЛ-8 [2, 4]. Увеличение концентрации этих веществ в крови пропорционально степени тяжести пиелонефрита [4, 5]. В группе I и в группе II содержание ИЛ-6 в крови к концу лечения достоверно уменьшилось (р<0,01) (таблица). Однако в группе II этот показатель уменьшился в 38 раз по сравнению с исходным уровнем, а в группе I содержание этого интерлейкина уменьшилось только в 14 раз.
ИЛ-10 также относится к числу противовоспалительных цитокинов. Он снижает продукцию провос-палительных интерлейкинов - ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8, ингибирует экспрессию рецепторов к ним, уменьшает антигенпредставляющую способность моноцитов и макрофагов [4, 5].
В плазме крови у больных ОСП в группе I уровень ИЛ-10 на фоне стандартного лечения достоверно снижался в 17 раз при уровне значимости p<0,05. В группе II также отмечается достоверное снижение уровня ИЛ-10, но в 26 раз при уровне значимости p<0,01 (таблица). Полученные данные свидетельствуют о более значительном уменьшении уровня ИЛ-10 на фоне проводимого комплексного лечения ОСП с использованием ТЭС-те-рапии. Эти изменения цитокинового статуса возникают компенсаторно и связаны со снижением активности воспалительного процесса (уменьшение уровня ИЛ-6).
Таким образом, ТЭС-терапия позволяет снизить степень активности системного воспалительного ответа при ОСП более значительно, чем стандартное лечение, т. е. предупредить дальнейшее повреждающее действие провоспалительных цитокинов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Александрова В. А. Транскраниальная электростимуляция в терапии хронических гастродуоденитов у детей / В. А. Александрова, С. В. Рычкова, В. П. Лебедев // Междунар. мед. обзоры. -1994. - Т. 2. № 3. - С. 204-209.
2. Кетлинский С. А., Калинина Н. М. Цитокины мононуклеар-ных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета // Иммунология. - 1995. - № 3. - С. 30-44.
3. Dimitrakova E., Kostov I. Studies on the level of proinflammatory cytokines IL-1 a, IL-1 b, IL-6, TNF-a in pregnant women with acute pyelonephritis // Akush. ginekol. - 2011. - Vol. 50. № 2. - P. 3-6.
4. Gurgoze M. K. etal. Proinflammatory cytokines and procalcitonin in children with acute pyelonephritis // Pediatr. nephrol. - 2005. -Vol. 20. № 10. - P. 1445-1448.
5. Rodriguez L. M. et al. Urinary interleukin-6 is useful in distinguishing between upper and lower urinary tract infections // Pediatr. nephrol. -2008. - Vol. 23. № 3. - P. 429-433.
6. Sheu J. N. et al. Urine interleukin-1 beta in children with acute pyelonephritis and renal scarring // Nephrology. - 2007. - Vol. 12. № 5. - P. 487-493.
Поступила 03.02.2012
