CC BY
37
Активность спонтанного ПОЛ в печени при профилактическом введении БК, БК-2а, ЭБК-2а в дозах 50 мг/кг на 14-е сутки через 60' и 120' инкубации снижалась на 33% и 56%, 46% и 50%, 50% и 65% соответственно по сравнению с интактным контролем (р<0,05). По мере снижения интенсивности процессов ПОЛ возрастала АОА и составляла при введении БК, БК-2а, ЭБК-2а в дозе 50 мг/кг на 14-е сутки через 60' и 120' инкубации 88% и 126%, 91% и 117%, 105% и 132% соответственно по сравнению с интактным контролем (р<0,05).
Таблица 1
Влияние бетулоновой кислоты и ее аланинамидных производных на активностьПОЛ в печени (M ± m, n = б)
Условия эксперимента Время спонтанной индукции ПОЛ, мин
МДА, нмоль/л 0' МДА, нмоль/л б0, МДА, нмоль/л 120,
Контроль (интактные животные) 0,13±0,007 0,24±0,02 0,48±0,09
ПХТ контроль, 7 сут. 0,2±0,007а 0,29±0,01а 0,39±0,05
БК+ПХТ, 7 сут. (50 мг/кг) 0,11±0,008ab 0,12±0,01 эЬ 0,2±0,02ab
2а-БК+ПХТ, 7 сут. (50 мг/кг) 0,15±0,006*ь 0,17±0,01 э,ь 0,19±0,01ab
2а-ЭБК+ПХТ, 7 сут. (50 мг/кг) 0,1±0,005ab 0,18±0,007sb 0,29±0,02ab
БК+ПХТ, 7 сут. (100 мг/кг) 0,09±0,007а'b 0,12±0,01 эЬ 0,32±0,07
2а-БК+ПХТ, 7 сут. (100 мг/кг) 0,14±0,01b 0,1б±0,01ї'b 0,4±0,02
2а-ЭБК+ПХТ, 7 сут. (100 мг/кг) 0,19±0,01а 0,3±0,02а 0,55±0,01b
ПХТ контроль, 14 сут. 0,25±0,02а 0,32±0,01а 0,45±0,01
БК+ПХТ, 14 сут. (50 мг/кг) 0,14±0,00б1> 0,1б±0,01а'b 0,21±0,01ab
2а-БК+ПХТ, 14 сут. (50 мг/кг) 0,16±0,009*ь 0,13±0,001sb 0,24±0,004аЬ
2а-ЭБК+ПХТ, 14сут. (50 мг/кг) 0,07±0,001ab 0,12±0,007sb 0,17±0,02ab
ра - достоверность различий с интактным контролем, а - (р<0,05) рь - достоверность различий с ПХТ контролем, b - (р<0,05)
Таблица 2
Влияние бетулоновой кислоты и ее аланинамидных производных на АОА ткани печени (M ± m, n = б)
Условия эксперимента Время спонтанной индукции ПОЛ, мин
АОА, отн.ед. 0' АОА, отн.ед. 60, АОА, отн.ед. 12.0’
Контроль (интактные животные) 71,9±1,11 56,2±1,73 40,0±4,98
ПХТ контроль, 7 сут. 44,1±1,8a 35,5±1,8а 30,3±2,1а
БК+ПХТ, 7 сут. (50 мг/кг) 68,9±2,2ь 55,0±2,3b 50,5±1,5аЬ
2а-БК+ПХТ, 7 сут. (50 мг/кг) 60,9±3,5аь 51,2±1,2аь 49,1±1,3аь
2а-ЭБК+ПХТ, 7 сут. (50 мг/кг) 69,6±1,1b 50,9±1,2аь 44,6±1,6b
БК+ПХТ, 7 сут. (100 мг/кг) 76,2.±1,3а-ь 64,4±1,9аь 51,9±2,2ab
2а-БК+ПХТ, 7 сут. (100 мг/кг) 59,1±2.,4a,b 51,2±2,2аЬ 40,9±1,9b
2а-ЭБК+ПХТ, 7 сут. (100 мг/кг) 51,7±2,баЬ 42,3±1,баЬ 37,5±2,2b
ПХТ контроль, 14 сут. 38,1±2,6а 28,1±1,ба 26,2±1,7a
БК+ПХТ, 14 сут. (50 мг/кг) 60,2±3,4ab 49,3±1,5аь 50,4±2,2аь
2а-БК+ПХТ, 14 сут. (50 мг/кг) 58,7±2,8аь 51,1±2,1аь 46,9±2,0b
2а-ЭБК+ПХТ, 14сут. (50 мг/кг) 74,01±1,6b 59,1±1,5b 52,б±2,2аЬ
ра - достоверность различий с интактным контролем, а - (р<0,05) рь - достоверность различий с ПХТ контролем
В большей степени ингибируют процессы пероксидации липидов и поддерживают высокую АОА производные бетулоно-вой кислоты: БК, БК-2а, ЭБК-2а, введенные профилактически однократно в дозе 50 мг/кг на фоне ПХТ и при ишемическом повреждении печени, при чем лидирующая позиция по выраженности проявления антиоксидантного эффекта и его удержанию отмечены у БК на 7-е сутки и на 14-е сутки и у ЭБК-2а.
При введении БК, БК-2а в дозе 100 мг/кг выраженность антиоксидантного эффекта, хотя и была в ранние сроки спонтанной индукции ПОЛ аналогична таковым, введенным в меньшей дозе, но при увеличении времени спонтанной индукции ПОЛ их анти-оксидантный потенциал ниже.
При этом антиоксидантный эффект отсутствовал у ЭБК-2а, введенного в дозе 100 мг/кг. Выраженность антиоксидантного действия у БК и ее производных обусловливает эффективную защиту и позволяет применять их для коррекции токсических поражений печени.
Литература
1. Сафонова С.А., Гершанович М.Л. // Вопросы онкологии.- 2005.- Т.51, № 5.- С. 599-600.
2. Саратиков А.С. и др. // Экспер. и клин. фармакол.-2002.- Т.65, № 2.- С. 31-33.
3. Моисеев С.В.Н Клин. фарм. и тер.- 2005.- № 1.- С. 10.
4. Катикова О.Ю. и др. // Экспер. и клин. фармакол.-2002.- Т.65, № 1.- С. 41-43.
5. Ильичева Т.Н. и др. // Ж. микробиол. и эпидемиол.-
2001.- № 2.- С. 53-56.
6. Ле Банг Шон и др. // Вопр. биол. мед. и фарм. химии.-
2002.- № 4.- С. 31-34.
7. Zuco V. et al. // Cancer Lett.- 2002.- № 1.- P. 17-25.
8. HataK. et al. // Toxic. Lett.- 2003.- Vol.143.- P. 1-7.
9. Lowry O.H. et al. // J. Biol. Chem.- 1951.- Vol.193, № 1.-P. 265-275.
10. Мартынюк В.Б. и др. // Лаб. дело.- 1991.- №3.- С.19.
11. Клебанов Г.И. и др. // Лаб. дело.- 1988.- № 5.- С. 59.
УДК 616.127
ТЕРАГЕРЦЕВОЕ ИЗЛУЧЕНИЕ НА ЧАСТОТЕ ОКСИДА АЗОТА 240 ГГЦ И АГРЕГАЦИОННАЯ АКТИВНОСТЬ ТРОМБОЦИТОВ БЕЛЫХ КРЫС В СОСТОЯНИИ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА НА ФОНЕ ВВЕДЕНИЯ БЛОКАТОРА ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ЫО-СИНТАЗЫ
Е.В. АНДРОНОВ*
Одним из основных патогенетических факторов ишемической болезни сердца, в частности, нестабильной стенокардии, является нарушения сосудисто-тромбоцитарного звена системы гемостаза [10]. Ключевую роль в развитии микроциркуляторных нарушений и патологических изменений, возникающих в крупных сосудах, играет дисфункция эндотелия [8], в результате чего происходит нарушение баланса продукции вазоконстрикторных, проагрегантных, вазодилататорных и антиагрегантных веществ. У больных нестабильной стенокардией сдвиг в балансе происходит в сторону повышения агрегационной активности кровяных пластинок [10], что определяет прогрессирование заболеваний и развитие осложнений. Одним из биоактивных веществ, продуцируемых эндотелием, является оксид азота (N0), который обладает антиагрегантным эффектом и регулирует продукцию эндотелием факторов, принимающих участие в регуляции агрегацион-ной активности тромбоцитов, в частности простациклина. Ключевым моментом патогенеза эндотелиальной дисфункции является угнетение синтеза N0. Недостаточная продукция или ускоренный распад N0 ведет к развитию сердечно-сосудистых заболеваний, связанных с нарушением функции эндотелия, патологическим повышением сосудистого тонуса и агрегационной активности тромбоцитов [3]. Лечение этих состояний требует компенсации недостаточной продукции эндотелиального N0 [4]. Фармакологические средства коррекции дефицита N0 имеет свои отрицательные стороны. Применение донаторов N0 может усугублять эндотелиальную дисфункцию, что сопровождается развитием феномена толерантности к нитратам и перекрестной толерантности [9]. Эффект нитровазодилататоров оказывается коротким, а их применение может вызвать ускоренный атероге-нез и усугубить эндотелиальную дисфункциюи [1].
Для коррекции повышенной агрегационной активности тромбоцитов при разных формах кардиологической патологии -нестабильной и стабильной стенокардии применяют терагерце-вые электромагнитные волны на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения (МСИП) N0 150,176-150,664 и 240 ГГц [5-7], так как N0 является вазодилататором, мощным фактором гемостаза и ингибитором агрегации тромбоцитов.
Цель - анализ влияния терагерцевых электромагнитных волн на частоте МСИП N0 240 ГГц на функциональную активность тромбоцитов крыс в состоянии оксидативного стресса и выявление роли эндотелиальной N0-синтазы в реализации влияния терагерцевого излучения на нарушенные агрегационные свойства тромбоцитов.
Материалы и методы. Опыты велись на беспородных белых крысах-самцах массой 180-240 г. Для моделирования окси-дативного стресса применяли доксорубицин в дозе 7.5 мг/кг,
* Саратовский ГМУ, каф. нормальной физиологии, 8(845-2) бб-97-57
вызывающий рост концентрации активных форм кислорода в клетках. Для выяснения действия терагерцевого излучения на нарушенные агрегационные свойства тромбоцитов крыс использовался блокатор эндотелиальной NO-синтазы L-Name (фирма Sigma) в конечной концентрации 4 мг/кг.
Облучение крыс с оксидативным стрессом терагерцевыми волнами на частоте МСИП NO 240 ГГц проводили на впервые разработанном в ОАО ЦНИИИА (г. Саратов) квазиоптическом КВЧ-генераторе детерминированных шумов. Крысам облучали выбритую поверхность кожи площадью 3 см2 над областью мечевидного отростка грудины. Облучатель располагался на расстоянии 1,5 см над поверхностью тела. Плотность мощности на участке кожи размером 3 см2 равна 1 мВт/см2. Доза облучения определялась плотностью мощности и суммарным временем облучения. Агрегацию тромбоцитов изучали в обогащенной тромбоцитами плазме [2]. В качестве индуктора агрегации использовали раствор АДФ в концентрации 2.5мкМ.
Таблица 1
Показатели агрегатограмм крыс-самцов при оксидативном стрессе и облучении ЭМИ ТГЧ частотой МСИП N0 240 ГГц в естественном электромагнитном поле в течение 15 минут
Показатели агрегации Контроль (n=40) Оксидативный стресс (n=20) Оксидативный стресс совместно с облучением в течение 15 минут (n=20)
Макс. размер образующихся тромбоцитарных агрегатов, у.е. 2.02 (1.68;2.21) 2.51 (2.29;2.7б) Pl=0.004639 Z1=2.83 2.03 (1.8;2.6) P2=0.003888 Z2=2.88 Z3=0.47 P3=0.637223
Макс. скорость образования наибольших тромбоцитарных агрегатов, у.е. 2.11 (1.39;2.57) 2.71 (2.22;3.07) Pl=0.036390 Zl=2.09 2.0б (1.8;2.4) P2=0.057266 Z2=1.9 Z3=0.33 P3=0.739270
Максимальная степень агрегации, % 41.3 (32.7;47.7) б8.8 (б5.4;б9.2) Pl=0.000049 Zl=4.06 60.8 (56.4;62) P2=0.010163 Z2=2.57 Z3=4.1 P3=0.000036
Максимальная скорость агрегации, % мин. 54.7 (45.6;64) 91.3 (80.2;100) Pl=0.000049 Zl=4.06 75.3 (71.3;80.8) P2=0.002462 Z2=3.02 P3=0.001065 Z3=3.27
Примечание: в каждом случае приведены средняя величина (медиана -Ме), нижний и верхний квартили (25%;75%); Р1, Z1 - интактные тромбоциты и тромбоциты животных в состоянии оксидативного стресса; Р2, Z2 -тромбоциты животных, находящихся под оксидативным стрессом и тромбоциты, подвергнутые облучению в течение 15 минут Р3Д3 - интактные тромбоциты и подвергнутые 15- минутному облучению
Исследования проведено на 5 группах белых крыс-самцов по 15 особей в каждой: 1-я группа контрольная; 2-я группа -животные в состоянии оксидативного стресса; 3-я группа - животные, облученные терагерцевыми волнами на частоте 240 ГГц в течение 15 минут на фоне оксидативного стресса; 4-я группа включала животных с оксидативным стрессом, которых облучали терагерцевыми волнами на частоте 240 ГГц 15 минут на фоне введения блокатора NO-синтазы L-Name. Эксперименты на животных проводились в соответствии с требованиями Женевской конвенции «International Guiding principles for Biomedical Research Involving Animals» (Geneva , 1990).
Статистическая обработка данных велась по программе Sta-tistica б.0. Проверялись гипотизы о виде распределений (критерий Шапиро - Уилкса). Большинство наших данных не соответствуют закону нормального распределения, поэтому для сравнения значений использовался U-критерий Манна - Уитни.
Результаты. Установлен рост агрегационной активности тромбоцитов у крыс-самцов, находящихся в состоянии оксида-тивного стресса. При этом обнаружено достоверное увеличение показателей агрегатограммы. Максимальный размер образующихся тромбоцитарных агрегатов вырос до 2.51 у.е. (Р=0.004б39), максимальная скорость образования наибольших тромбоцитарных агрегатов возрасла до 2.71 у.е. (Р=0.03б390), максимальная степень агрегации - до б8.8 (Р=0.000049), а максимальная скорость агрегации - до 91.3 % мин. (Р=0.000049).
Воздействие терагерцевого излучения на частотах МСИП NO в течение 15 минут на животных, находящихся в состоянии оксидативного стресса, вызывает частичное восстановление нарушенной функциональной активности тромбоцитов (табл. 1). Максимальный размер образующихся тромбоцитарных агрегатов
понизился до 2.03 у.е. (Р2=0.003888), то есть происходит полное его восстановление. Максимальная скорость образования наибольших тромбоцитарных агрегатов понизилась до 2.06 у.е. (Р2=0.057266), т.е. происходило также полное ее восстановление. Максимальная степень агрегации тромбоцитов снизилась до 60.8% (Р2=0.010163), но не достигала значений этого показателя в группе контроля (Р3=0.000036). Максимальная скорость агрегации снизилась до 75.3% мин. (Р2=0.001065), но также не соответствовала данным группы контроля (Р3=0.001065).
Облучение особей в состоянии оксидативного стресса тера-герцевыми волнами на частоте МСИП N0 240 ГГц в течение 15 минут ведет к полному или частичному восстановлению нарушенных показателей агрегации тромбоцитов. Для выявления эффекта терагерцевых волн на частоте МСИП N0 240 ГГц на нарушенную агрегационную способность тромбоцитов, была проведена серия экспериментов на фоне введения блокатора эндотелиальной N0-синтазы Ь-№ше.
Таблица 2
Влияние терагерцевого излучения на частоте МСИП N0 240 ГГц на показатели агрегационной активности крыс, находящихся в состоянии оксидативного стресса на фоне введения блокатора эндотелиальной N0-синтазы Ь-№ше
Показатели агрегации Контроль (n=40) Оксидативный стресс (n=20) Облучение 15 минут (n=20) Облучение при введении L-Name (n=20)
Максимальный размер образующихся тромбоцитарных агрегатов, у.е. 2.02 (1.68;2.21) 2.51 (2.29;2.76) Pl=0.004639 Z1=2.83 2.03 (1.8;2.б) P2=0.003888 Z2=2.88 P3=0.637223 Z3=0.47 2.4 (2.27;2.47) P4=0.035559 Z4=2.1 P5=0.019611 Z5=2.33
Максимальная скорость образования наибольших тромбоцитарных агрегатов, у.е. 2.11 (1.39;2.57) 2.71 (2.22;3.07) Pl=0.036390 Zl=2.09 2.06 (1.8;2.4) P2=0.057266 Z2=1.9 P3=0.739270 Z3=0.33 2.8 (2.5;3.1) P4=0.293271 Z4=3.11 P5=0.012607 Z5=2.49
Максимальная степень агрегации, % 41.3 (32.7;47.7) б8.8 (65.4;69.2) Pl=0.000049 Zl=4.06 60.8 (5б.4;б2) P2=0.010163 Z2=2.57 P3=0.000036 Z3=4.1 78.1 (73.9;84.2) P4=0.001846 Z4=3.11 P5=0.001658 Z5=3.14
Максимальная скорость агрегации, % мин. 54.7 (45.6;64) 91.3 (80.2;100) Pl=0.000049 Zl=4.06 75.3 (71.3;80.8) P2=0.002462 Z2=3.02 P3=0.001065 Z3=3.27 94.5 (87.2;104) P4=0.061708 Z4=1.86 P5=0.009237 Z5=2.6
Примечание: в каждом случае приведены средняя величина (медиана -Ме), нижний и верхний квартили (25%;75%); Рь Ъ1 - интактные тромбоциты и тромбоциты животных в состоянии оксидативного стресса; Р2, Ъ2 -тромбоциты животных в состоянии оксидативного стресса, и тромбоциты, подвергнутые 15-минутному облучению Р3, Ъэ - интактные тромбоциты и подвергнутые 15-минутному облучению; Р4Д4 - тромбоциты животных в состоянии оксидативного стресса и животных в состоянии оксидативного стресса, подвергшихся облучению в течение 15 мин на фоне введения блокатора К0-синтазы Ь-КДМЕ; Р5,Ъ5 - тромбоциты животных с оксида-тивнымо стрессом, облучавшихся в течение 15 минут и группы животных при оксидативном стрессе, подвергшихся 15-минутному облучению на фоне введения блокатора К0-синтазы Ь-КДМЕ
Облучение крыс в состоянии оксидативного стресса на фоне введения блокатора эндотелиальной N0-синтазы не вело к восстановлению показателей, характеризующих агрегационную активность тромбоцитов (табл. 2). Максимальный размер образующихся тромбоцитарных агрегатов равен 2.4 у.е. (при оксида-тивном стрессе 2.51 у.е.), скорость образования наибольших тромбоцитарных агрегатов 2.8 у.е. и 2.71 у.е., максимальная степень агрегации78.1 % и 68.8%, максимальная скорость агрегации 94.5% мин и 91.3 % мин соответственно.
Выводы. Введение блокатора эндотелиальной N0-синтазы Ь^аше белым крысам-самцам, находящимся в состоянии остро -го оксидативного стресса и облученным в течение 15 минут терагерцевыми волнами на частоте МСИП N0 240 ГГц, препятствовало нормализующему эффекту терагерцевого излучения на показатели агрегационной способности тромбоцитов, что доказывает роль эндогенного N0 и эндотелиальной N0-синтазы в механизмах потенцирования положительного корригирующего влияния облучения на частоте МСИП N0 240 ГГц на показатели
внутрисосудистого компонента микроциркуляции у белых крыс-самцов в состоянии острого оксидативного стресса.
Литература
1.Бокарев И.Н. // Тромбоз, гемостаз и реология.- 2000.-№1.- С.6-7.
2.Габбасов З.А. и др. // Лабор. дело.- 1989.- №10.- С.15-18.
3.Журавлева И.А. и др. // Клин. медицина.- 1997.- №4.-С. 18-21.
4.Зефиров А.Л. и др. // Рос. физиол. ж. им. И.М. Сеченова.-2001.- №4.- С.499-50б.
5.Киричук В.Ф. и др. // Кардиоваскул. тер. и профилактика.- 2005.- № 4(б).- Ч.2.- С. 53-б0.
6.Киричук В.Ф. и др. // Биомед. технол. и радиоэлектроника
- 2004.- №12.- С. 10-15.
7.Киричук В.Ф. и др. // Цитол.- 2001.- №1.- С. 27-33.
8.Киричук В.Ф., Воскобой И.В. // Тер. архив.- 2000.- Т.72, №12.- С. 47-50.
9.Киричук В.Ф. и др. // Тромбоз, гемостаз и реология.-2001.- №1.- С.31-34.
10.Киричук В., Шварц ЮЛ Кардиол.- 1998.- Т.38(5).- С.14.
УДК 616.381-002.3-085
СЛИЗИСТАЯ ОБОЛОЧКА ТОНКОЙ КИШКИ КРЫС ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБАХ ПРОФИЛАКТИКИ ВОЗНИКНОВЕНИЯ ТОНКОКИШЕЧНЫХ НЕСФОРМИРОВАННЫХ СВИЩЕЙ
В.А.ГОЛОВНЕВ, К.В.АТАМАНОВ, Д.В.МОРОЗОВ, Н.В.ГОРЛОВ, О.А.ЗАРУБЕНКОВ, Е.В.ЛЕВЧЕНКО, Н.М.КОЛОТОВА,
А.В.ВАНХАЛЬСКИЙ, С.А. ФУРСОВ, И.В.МАЙБОРОДИН*
Несформированные кишечные свищи сопровождаются гнойными процессами в брюшной полости, нагноением ран брюшной стенки с частой эвентерацией органов. При этом характерны интоксикация и быстрое развитие раневого и алиментарного истощения. Непрерывное поступление в рану агрессивного кишечного содержимого делает практически невозможной и без того сложную адекватную санацию гнойных очагов. Симптомы вторичного иммунодефицита обнаружены у 37 из 84 больных с кишечными свищами [7]. При подготовке к реконструктивным операциям необходимо проведение иммунокоррекции для восстановления иммунного потенциала и достижения хорошего результата хирургического вмешательства [8]. Кишечные свищи
- серьезная хирургическая проблема [11]. Нужны методы профилактики формирования кишечных фистул.
По данным [13], этиологически 85% свищей являются постхирургическими, 9% - посттравматическими, 3% сформировались в результате туберкулезного поражения и 3% были образованы при воспалительных заболеваниях различных отделов кишечника. 52% больных были пониженного питания, у 60% диагностирована анемия. Подобные результаты были получены и в США. В отделениях хирургии 2 учебных госпиталей университета Луисвилла, Кентукки, с 1997 по 2005 год находилось 106 пациентов со свищами желудочно-кишечного тракта (исключая аноректальную область). Из них 67 больных имели фистулы тонкой кишки, 26 - толстой, 8 - желудка и 5 - 12-перстной кишки. По происхождению эти свищи у 81 пациентов были послеоперационными, у 15 - посттравматическими, в 6 случаях - из-за эрозии грыжевого мешка, у 2 - результат дивертикулитов и у 2 -последствие радиационного облучения [11]. В Мексике большинство кишечных свищей также имеют послеоперационную этиологию [14]. Сепсис, нарушения питания и водно'-электролитный дефицит -важные осложнения кишечных свищей. За последние 10 лет из 174 пациентов 90 были с фистулами тонкой кишки (48 тощей и 42 подвздошной), 50 больных - со свищами толстой кишки. У 151 (86%) пациента фистула образовалась после хирургического вмешательства.
Цель работы - изучение строения стенки тонкой кишки крыс при различных условиях наложения кишечного шва и разлитом гнойном перитоните.
Материалы и методы. Изучение структурной организации стенки тонкой кишки при различных способах профилактики формирования тонкокишечных свищей проводили на 36 крысах-
самках породы Вистар массой тела 250-300 г, полученных из вивария Новосибирского ГМУ. Животные были разделены на 3 равные группы. Одна группа животных служила интактным контролем, у остальных одновременно моделировали разлитой гнойный перитонит по методу Ф.Ф.Усикова и соавт. [б]: под эфирным наркозом выполняли нижнесрединную лапаротомию.
С целью предупреждения развития спаечного процесса и предупреждения перитонита резецировали большой сальник, жировые образования в области семенников. Червеобразный отросток перевязывали у основания двумя лигатурами на расстоянии 0,5 см друг от друга, между ними отросток отсекали. Ампутированный отросток погружали в свободную брюшную полость, после чего послойно ушивали переднюю брюшную стенку, при этом конец нити на культе аппендикса для простоты удаления его впоследствии оставляли в подкожной клетчатке.
Через 12 часов выполняли релапаротомию, погруженный червеобразный отросток (источник перитонита) удаляли, выпот эвакуировали. Пересекали тонкую кишку на расстоянии 5 см от слепой кишки, накладывали анастомоз бок в бок с трехслойными узловыми швами. В одной из этих групп участок кишки со швами оставляли в свободной брюшной полости. В другой - помещали между париетальной брюшиной и мышцами передней брюшной стенки (экстраперитонизация участка кишки со швами). Оперированным перед ушиванием брюшины в брюшную полость вводили 1 г канамицина, растворенного в 3 мл физраствора. Крыс декапитировали через 5 сут. после санирования брюшной полости. Все манипуляции проводили под эфирным наркозом.
Фрагменты тонкой кишки крыс, забранные на расстоянии 5-7 см от слепой кишки, фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина не менее суток, обезвоживали в градиенте этанола возрастающей концентрации, просветляли в ксилоле и заключали в парафин. Срезы толщиной 5-10 мкм окрашивали гематоксилином и эозином по Ван-Гизону и по Романовскому. Определение структурной организации слизистой оболочки кишки вели при увеличении светового микроскопа до 1200 раз. Применяли квадратную тестовую систему, совмещаемую на экране компьютера с изображением, полученным при помощи цифровой видеокамеры микроскопа. Для изучения показателей микроциркуляции (использование объектива,х4) конечная площадь тестового квадрата равна 14400 мкм2 (сторона квадрата 120 мкм), при подсчете цитограммы клеток (применение объектива с ув.х40) - 144 мкм2 (сторона квадрата 12 мкм) [3]. Статобработку данных вели на программе MS Excel (Microsoft, USA), определяли ср. арифметическое и стандартное отклонение. Различия между средними считали достоверными при p<0,05.
Результаты. Во всех группах после ушивания повреждения тонкой кишки в условиях перитонита на срезах данного органа увеличилась относительная площадь сосудистого компонента. Объемная плотность кровеносных сосудов в группе с простым ушиванием тонкой кишки и в группе с экстраперитонизацией была больше в 5,7 и 3,б раза, соответственно, по сравнению с состоянием у интактных крыс. При этом в контроле (погружение участка кишки со швами в брюшную полость) величина значения данного показателя была достоверно больше, чем у животных с экстраперитонизацией, на 59,2% (рис. 1-4) (табл. 1).
Относительная площадь лимфососудов в группе с ушиванием тонкой кишки и погружением ее в свободную брюшную полость и в группе с экстраперитонизацией шва тонкой кишки была больше в 2,б и 3 раза, соответственно, относительно состояния у интактных крыс. Можно отметить меньшее значение площади лимфатических сосудов в контроле на 15,4%, по сравнению с группой после экстраперитонизации. Площадь межклеточных щелей в группе с ушиванием раны тонкой кишки без экстрапери-тонизации и в группе с экстраперитонизацией больше в 2,9 и 2,1 раза, соответственно, чем у интактных крыс.После погружения участка кишки со швами в брюшную полость объемная плотность интерстициальных пространств была больше, относительно животных с экстраперитонизацией, на 41,2% (табл. 1).
После хирургической операции и развития перитонита развивается воспалительная реакция на повреждение тканей. Из-за воспалительного процесса в тканях оказывается множество биологически активных (гистамин, брадикинин и др.), антигенных и токсических веществ из разрушенных собственных клеток и тканей (в т.ч. - из лизосом фагоцитов [2]) и лизированных микроорганизмов, которые резко повышают проницаемость
* Новосибирский ГМУ, б30091, Красный проспект, 52, imai@mail.ru
