CC BY
48
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
© Н. В. Аганезова 1,
Е. Б. Морозова 2, А. Б. Чухловин 2,
В. А. Линде 1, Арег А. Тотолян 2
1 Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования;
2 Научно-методический центр по молекулярной медицине МЗ РФ на базе Санкт-Петербургского медицинского университета
СВЯЗЬ СИМПТОМАТИКИ ПРЕДМЕНСТРУАЛЬНОГО СИНДРОМА С ФУНКЦИОНАЛЬНЫМ ПОЛИМОРФИЗМОМ ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИ ЗНАЧИМЫХ ГЕНОВ
■ Наличие гиперактивных вариантов генов транспортера серотонина (5-HTT), ангиотензин превращающего фермента (АПФ), гена рецептора к прогестерону (PR) и гена рецептора к эстрогену (ER-1) предрасполагает к развитию предменструального синдрома (ПМС). При изучении частоты промоторных вариантов генов 5-НТТ, АПФ, PR у 201 больных с ПМС выявлены достоверные корреляции между вариантом S/S гена HTT, S/L PR, D/D АПФ и тяжестью течения заболевания. Таким образом, роль функциональных полиморфизмов генов НТТ, АПФ и PR следует учитывать при предменструальном синдроме.
■ Ключевые слова: генный полиморфизм; ген транспортера серотонина; ген ангиотензин превращающего фермента; ген рецептора к прогестерону; ген рецептора к эстрогену-1, предменструальный синдром
Актуальность проблемы
Предменструальный синдром (ПМС) представляет собой комплекс разнообразных симптомов, возникающих у женщин в дни, предшествующие менструации, и проходящие с началом нового менструального цикла. ПМС может проявляться в ряде нервно-психических, обменно-эндокринных и вегетативно-сосудистых нарушений, причем у каждой пациентки комбинации симптомов ПМС могут быть индивидуальными. Согласно статистике, эта «циклическая болезнь» отмечается у 20 % пациенток 19-29 лет и примерно у 50-55 % женщин после 30 лет [4, 7]. Описано около 150 симптомов ПМС, которые встречаются в разных сочетаниях. Обычно у одной и той же пациентки наблюдается более или менее устойчивая комбинация симптомов ПМС. Наиболее часто встречаются следующие клинические проявления ПМС: головная боль, увеличение массы тела, боли в низу живота и в поясничной области, тошнота, напряжение и болезненность молочных желез, повышенная утомляемость, раздражительность, плаксивость, тревожное состояние, депрессия, агрессивность и т. д. [3].
Причины, которые приводят к возникновению предменструального синдрома и факторы, определяющие его тяжесть, окончательно не выяснены. Существует несколько теорий возникновения ПМС, в том числе гормональная концепция [20, 25], согласно которой ПМС является следствием нарушения баланса эстрогенов и прогестерона в организме женщины. В рамках одной из таких теорий ПМС связывают с недостаточностью секреции прогестерона во вторую фазу менструального цикла и с наличием относительной гиперэстрогении. По другой гипотезе развитие ПМС связывают с повышением чувствительности к прогестерону. Вышеуказанные патогенетические механизмы в значительной мере обосновывают возникновение ПМС, однако не объясняют разнообразие выраженности этого синдрома. В числе факторов, определяющих индивидуальную симптоматику ПМС, можно рассматривать и полиморфные варианты генов, контролирующих синтез эстрогенов и прогестерона, а также их рецепторов.
Существующее мнение ряда авторов [1, 5, 29] о наследственной предрасположенности к ПМС основано на данных клинико-эпидемиологического анализа о повышении риска появления ПМС у больных при наличии данного синдрома у их родственниц первого поколения. Показано также, что риск ПМС возрастает, если у одного из родителей отмечена миг-
рень. Известно, что риск кризовой формы ПМС увеличивается в случае, когда у одного из родителей диагностирована гипертоническая болезнь [6]. Следовательно, есть основания предполагать, что факторы наследственности могут влиять и на вероятность возникновения ПМС, и на характер его индивидуальных проявлений, что, в свою очередь, будет определять выбор тактики ведения больных. В доступной литературе мы не обнаружили работ по изучению роли патогенетически актуальных генных вариантов в развитии синдрома предменструального напряжения.
Возможное наличие относительной гиперэст-рогении как одного из этиологических факторов предменструальных клинических проявлений ставит вопрос о механизмах усиления транскрипции генов ЕЯ (рецепторов эстрогенов), одним из которых может быть наличие функционального полиморфизма их регуляторных сегментов (про-моторных участков). При этом не изменяется первичная структура и активность белкового продукта, однако существенно изменяется продукция матричной РНК (мРНК) и соответственно специфического белка. В связи с этим у носителей «гиперактивных» промоторных вариантов различных генов (встречаемость в популяции до 40-50 %) может проявляться предрасположенность к различным заболеваниям [28].
Для рецептора к эстрогену известно наличие двух изоформ: ЕЯ-альфа и -бета [35]. Для гена рецептора к эстрогену-1 известно 2 генных варианта в восьмом экзоне — наличие аденина или гуанина в позиции 594. Показана их ассоциация с различными заболеваниями — раком простаты, раком молочной железы и т. д. [9, 11]. Сокоп N. е1 а1. [16], показали, что у пациентов, страдающих мигренью, гораздо чаще встречается генотип С594А по сравнению с группой контроля.
Одним из симптомов при ПМС являются циклические приступы тревожности, панического страха. В последнее время показана роль полиморфизма РЯ в возникновении данного состояния [14]. Существуют данные о том, что частота и интенсивность приступов панического страха зависят от фазы менструального цикла [13, 23]. Участие прогестерона в данной патологии косвенно подтверждается тем, что при назначении синтетических гестагенов происходит купирование этой симптоматики [18]. Известно, что рецепторы к прогестерону присутствуют во многих областях головного мозга, отвечающих за возникновение панических эпизодов [12, 27].
В связи с этим наличие у больной соответствующего генного варианта может повышать риск развития ряда заболеваний репродуктивной системы. Так, один из вариантов РЯ представля-
ет собой инсерцию (вставку) 320 пар нуклеоти-дов в интроне О и точковой мутации в экзоне 4 и 5. Известно, что инсерция в гене рецептора прогестерона приводит к его повышенной транскрипционной активности [33]. Во многих исследованиях выявлена связь между наличием инсерции и развитием различных патологических состояний. Показано, что наличие инсерции в гене рецептора к прогестерону связано с риском развития эндометриоза у женщин, с гипер-пролактинемией [24, 31].
Как уже отмечалось, у женщин, страдающих ПМС, часто наблюдаются депрессивные состояния, приступы внезапного страха. Известно, что уровень серотонина может в той или иной степени влиять на психо-эмоциональное состояние человека. В последнее время широко исследуется полиморфизм гена серотонина и его транспортера в ассоциации с различными видами психопатологий [17]. Транспортный белок серотонина (5-НТТ) является ключевым регулятором активности в серотонинергических синапсах. Для гена (транспортера серотонина) 5-НТТ известен полиморфизм (инсерция/делеция) в области промотора (5-НТТЬРЯ). Делеция (5) ассоциирована с низкой транскрипционной активностью и, соответственно, сниженной продукцией специфического белка, тогда как наличие инсерции (вариант Ь) приводит к его более интенсивной экспрессии [37]. Так, показано нарушение метаболизма серотонина в связи с генным полиморфизмом 5-НТТ у больных с патологической тревожностью [36]. Авторы установили, что гомозиготный «^-генотип достоверно чаще встречается у больных с хронической головной болью.
В некоторых случаях симптомом ПМС является кожный зуд. Существуют литратурные данные, указывающие на наличие рецепторов к серото-нину в дерме. Их повышенная экспрессия может вызывать симптоматику, схожую с аллергическим зудом [26,38]. Таким образом, очевидный интерес представляет изучение промоторного полиморфизма гена транспортера серотонина у больных с предменструальным синдромом.
Существенными симптомами ПМС могут быть повышение артериального давления и по-лиурия. Ангиотензин-превращающий фермент (АПФ) считается основным энзимом ренин-ангиотензин-альдостероновой системы. АПФ играет ключевую роль в продукции ангиотен-зина-2 (вазоконстриктор) и катаболизме бради-кинина (вазодилятатор) — двух пептидов, регулирующих тонус кровеносных сосудов и пролиферацию гладкомышечных клеток. Регуляция уровня АПФ в сыворотке и тканях находится под строгим генетическим контролем (ген АПФ).
Общеизвестен функциональный полиморфизм данного гена, обнаруженный в интроне 16. Это наличие (инсерция-Т) или отсутствие (делеция В) 287 пар нуклеотидов. Аллель В ассоциирован с повышением содержания АПФ в тканях и плазме [34]. При этом активация ангиотензи-на-2 и инактивация брадикинина может приводить к сужению кровеносных сосудов. Поэтому носительство данного аллеля повышает риск развития сосудисто-сердечных заболеваний [32]. Доказано влияние полиморфизма гена АПФ на развитие патологии функции почек [8].
В связи с вышесказанным, целью нашей работы было исследование функциональных вариантов ряда генов, способных модифицировать развитие и выраженность симптомов в рамках различных клинических форм ПМС.
Материал и методы исследования
В исследовании принимала участие 301 женщина в возрасте от 18 до 40 лет (в среднем 28,7 ± 0,4): 201 пациентка с ПМС и 100 женщин без выраженных симптомов ПМС. Каждая женщина дала информированное согласие на участие в данном обследовании. Критериями отбора были: возраст от 18 до 40 лет, отсутствие органической патологии ЦНС и психических заболеваний, отсутствие тяжелых заболеваний, в том числе репродуктивной системы, отсутствие использования гормональной контрацепции в течение последних 3-х месяцев до включения в клиническое исследование.
Оценку формы и тяжести ПМС проводили на основе специально разработанной шкалы: «Оценка формы и тяжести ПМС» (модифицированная шкала Королевой Г. П., 1989 [2]). Форму ПМС определяли по преобладанию симптомов какой-либо группы: а) нервно-психическая (раздражительность, слабость, депрессия, агрессивность, плаксивость, нарушение сна); б) кризо-во-цефалгическая (вегето-сосудистая) (головная боль, головокружения, парестезии, повышение артериального давления, увеличение частоты сердечных сокращений, кардиалгия, одышка, тошнота, рвота, потливость); в) обменно-эндокринная (прибавка массы тела, акне, нагрубание и болезненность молочных желез, отеки, жажда, приливы, полиурия, метеоризм, боли в животе, диарея);
г) трофическая (зуд, сыпь типа крапивницы, экзема, боли в суставах, запоры, изменение аппетита, повышенная чувствительность к запахам);
д) смешанная форма (при сочетании перечисленных симптомов без преобладания симптомов групп а-г). Каждый симптом получал оценку от 0 до 3 баллов в зависимости от наличия, сроков появления перед менструациями и степени выра-
женности. Оценка 0 соответствовала отсутствию симптома; 1 — появлению симптома за 1-2 дня до менструации и легкой степени его выраженности; 2 — появлению симптома за 3-5 дней до менструации при умеренной выраженности; 3 — появлению симптома более чем за 5 дней до менструации и значительной степени выраженности симптома. Диагноз «Предменструальный синдром» ставили при наличии оценки от 4 баллов и выше. Женщины контрольной группы в ряде случаев также отмечали наличие некоторых циклически появляющихся перед менструациями симптомов, но индивидуальная оценка не превышала в целом 3 баллов.
Нервно-психическая форма ПМС наблюдалась у 32 (15,9 ± 2,6 %) женщин; у 108 (53,7 ± 3,5 %) женщин отмечена обменно-эндокринная форма ПМС; кризово-цефалгическую (вегето-сосудис-тую) форму ПМС регистрировали у 5 женщин (2,3 ±1,1 %); смешанная форма была зафиксирована у 54 пациенток (26,9 ± 3,1 %); трофическая форма ПМС была выявлена у 2 женщин (1,0 ± 0,7 %).
В рамках молекулярно-биологического обследования проводилось генотипирование делеци-онно-инсерционных аллелей 5-НТТ, АПФ, PR, а также генного варианта ER-1 594G/A. Геномную ДНК выделяли из лейкоцитов крови больных и доноров с применением набора «ДНК-Сорб» («Ли-тех», Москва). Инсерционно-делеционный функциональный полиморфизм генов АПФ (I/D), PR (S/L) и 5-HTT (S/L) оценивали методами ПЦР, используя ранее описанные ДНК-зонды [10, 17, 33]. Полиморфизм гена рецептора эстрогенов ER-1 (594A/G) определяли с помощью аллель-специфической ПЦР ДНК с применением оригинальных ДНК-зондов. Праймеры конструировали с помощью программы Primer Express (Applied Biosystems, США), причем искомый точечный полиморфизм располагали на З'-конце смысловых праймеров. Смысловой праймер для гена ER-1 аллеля -594А был следующим: 5"- agg gtt tcc ctg сса ca -Ъ\ для аллеля G-5" agg gtt tcc ctg cca cg 3\ и общий антисмысловой праймер: 5" ggc tgt tcc caa cag aag ac3\
Реакционная смесь для ПЦР содержала следующие компоненты: 5х ПЦР-буфер («Ампли-сенс», Москва); смесь дезоксинуклеотидов (MBI Fermentas, Каунас, Литва), праймеры (от 0,05 до 0,3 цМ) производства «Синтол» (Москва), ДНК-Taq полимеразу («ДНК-Технология», Москва, 1,0 ферм. ед. в пробе) и геномную ДНК (2,5 мкл в пробе), в общем объеме 20 мкл. ПЦР проводили в амплификаторе ICycler (Bio-Rad, США). Режим ПЦР был следующим: 94 °С, 5 мин; 36 циклов ПЦР: денатурация: 95 °С, 30 с; отжиг в течение 30 с: 65 °С (5-НТТ), 67 °С (АСЕ),
66 °С (ER-1), 52 °С (PROGINS); элонгация: 72 °С, 30 с (36 циклов); 72 °С, 5 мин. Продукты ПЦР оценивали после электрофореза в 1,5%-ном агарозном геле, окрашенном бромистым этидием. Визуализацию специфических продуктов осуществляли с помощью УФ-трансиллюминатора. Изображения фиксировали с помощью цифровой фотокамеры Canon PowerShot А70. Статистический анализ проводился путем непараметрического анализа (тест хи-квадрат), с помощью пакета программ Winstat.
Результаты исследования
У пациенток с ПМС клинические симптомы были разнообразны, с разным сроком возникновения перед менструациями и различной степенью выраженности (табл. 1). Реже других регистрировали парестезии, рвоту, сыпь, экзему.
У здоровых пациенток из циклически возникающих симптомов чаще отмечали нагрубание молочных желез, тянущие боли в низу живота, раздражительность, слабость, изменение (обычно увеличение) аппетита. Указанные симптомы появлялись практически всегда только за 1-2 дня до менструации и были выражены незначительно. При этом, как упоминалось выше, общая оценка была не более 3 баллов, но данные симптомы также учитывались при оценке ассоциаций «генотип-симптом».
Данные генотипирования больных
У всех обследованных пациенток были изучены генотипы следующих генов: АПФ (I/D, D/D, I/I), 5-НТТ (S/S, L/L, S/L), PR (S/S, L/L, S/L), ER-1 (А/А, A/G, G/G) (табл. 2).
При анализе результатов молекулярно-биоло-гического исследования выявлено, что генотип S/S гена 5-HTT достоверно чаще (41,5 ± 7,8 %) наблюдался у женщин с более ранним появлением перед менструациями и большей выраженностью агрессивности, по сравнению с пациентками, у которых данный симптом отсутствовал (20,4±4,1%) (табл. 3). Указанные различия были достоверны при р = 0,01, что говорит о связи между наличием генотипа S/S 5-НТТ и сроком возникновения и степенью выраженности агрессивности при ПМС.
Частота генотипа S/S гена транспортера се-ротонина (5-HTT) оказалась также, в среднем, повышенной (33,3 ± 9,2 %) у больных с наличием симптома предменструальной головной боли (как при возникновении головной боли за 1-2 дня до наступления менструаций, так и при более выраженном проявлении данного симптома) по сравнению с пациентками, у которых данный симптом отсутствовал (16,9±3,4%)
(р = 0,01). Это вполне согласуется с ранее упомянутой корреляцией данного маркера и наличием агрессивности. Исходя из предположения того, что генотип S/S связан с меньшей выработкой транспортера серотонина, можно допустить, что оба упомянутых клинических симптома могут быть связаны с недостатком данного генного продукта.
Обнаружено также, что генотип S/S гена 5-HTT встречается достоверно чаще (50 ± 10,7 %) у пациенток с повышенной возбудимостью кишечника (метеоризмом) по сравнению с группой, у которой данный симптом отсутствовал (19,8 ± 3,6 %) (р = 0,006). Как показано в таблице 3, метеоризм выявлен в 50± 10,7 % случаев у носителей данного генотипа, что достоверно чаще, чем у пациенток с отсутствием данного симптома. Известно, что серотонин вырабатывается энтерохромато-финными клетками кишечника, и его недостаток непосредственно влияет на перистальтику и секрецию кишечника.
В ходе исследования мы установили, что достоверно чаще (50± 10,7 %) зуд в предменструальные дни встречался у больных — носителей генотипа S/S гена 5-HTT (р = 0,002) по сравнению с группой больных с отсутствием данного симптома (20,8 ± 3 %) (табл. 4). Подобная взаимосвязь ранее не описывалась в литературе.
Среди больных ПМС нами изучались частоты аллелей гена АПФ. Было обнаружено, что генотип D/D встречался в 100 % случаев у больных с более ранним (более чем за 5 дней до менструации) возникновением и большей выраженностью полиурии (р = 0,007) (табл. 5). Частота генотипа D/D гена АПФ была чаще (59 ± 10,5 %) также у пациенток с наличием зуда в предменструальные дни по сравнению с пациентками, не отмечавшими данного симптома (30,7 ± 3,4 %) (р = 0,004) (табл. 4).
У этого же контингента больных нами изучались частоты аллелей A/G гена ER-1. По нашим данным, частоты аллелей гена ER-1 в контингенте больных не отличались существенно от нашей контрольной выборки и ранее опубликованных данных для европейской популяции [30], и не было выявлено статистически достоверных различий между пациентками с различной клиникой ПМС.
Обсуждение результатов
При анализе результатов выявлено, что ранняя и более выраженная агрессивность при ПМС чаще встречается у женщин с генотипом S/S гена 5-HTT. Как известно, данный вариант гена транспортера серотонина (делеция участка ДНК) ассоциирован с более низким уровнем продукции
ЖУРНАЛЪ Ш'ИГЕРСТВА и ЖЕНСКИХЪ БОШНЕЙ
ТОМ LVI ВЫПУСК 2/2007
ISSN 1684-0461 ■
Клиническая характеристика обследованных женщин
Таблица 1
Симптом Отсутствие симптома Появление симптома за 1-2 дня до менструации Появление симптома за 3-5 дней до менструации Появление симптома более чем за 5 дней до менструации
Без ПМС (11= 100) С ПМС (11 = 201) Без ПМС (11= 100) С ПМС (11 = 201) Без ПМС (11= 100) С ПМС (11 = 201) Без ПМС (11= 100) С ПМС (11 = 201)
абс. М ± га, % абс. М ± 111, % абс. М ± га, % абс. М ± га, % абс. М ± 111, % абс. М ± га, % абс. М ± 111, % абс. М ± га, %
Раздражительность 69 69,0 ± 4,6 41 20,4 ± 2,8 31 31,0 ±4,6 71 35,3 ± 3,4 0 0 64 31,8 ±3,3 0 0 24 11,9 ±2,3
Депрессия 92 92,0 ± 2,7 119 59,2 ±3,5 8 8,0 ± 2,7 51 25,4 ±3,1 0 0 19 9,5 ±2,1 0 0 12 6,0 ± 1,7
Агрессивность 96 96,0 ± 2,0 99 49,3 ± 3,5 4 4,0 ± 2,0 61 30,3 ± 3,2 0 0 41 20,4 ± 2,8 0 0 0 0
Головная боль 91 91,0 ±2,9 124 61,7 ±3,4 8 8,0 ± 2,7 50 24,9 ±3,0 0 0 27 13,4 ±2,4 0 0 0 0
Головокружения 100 100 135 67,2 ±3,3 0 0 55 27,4 ±3,1 0 0 9 4,5 ± 1,5 0 0 2 1,0 ±0,7
Одышка 100 100 168 83,6 ±2,6 0 0 30 14,9 ±2,5 0 0 2 1,0 ±0,7 0 0 1 0,5 ± 0,5
Тошнота 97 97,0 ± 1,7 129 64,2 ± 3,4 3 3,0 ± 1,7 56 27,9 ± 3,2 0 0 11 5,5 ± 1,6 0 0 5 2,5 ± 1,1
Потливость 100 100 129 64,2 ± 3,4 0 0 51 25,4 ±3,1 0 0 15 7,5 ± 1,9 0 0 6 3,0 ± 1,2
Увеличение массы тела 90 90,0 ± 3,0 100 49,8 ±3,5 9 9,0 ± 2,9 64 31,8 ±3,3 0 0 26 12,9 ±2,4 0 0 11 5,5 ±1,6
Нагрубание молочных желез-1 58 58,0 ± 4,9 33 16,4 ±2,6 37 37,0 ± 4,8 59 29,4 ± 3,2 5 5,0 ± 2,0 66 32,8 ±3,3 0 0 43 21,4 ±2,9
Нагрубание молочных желез-2 0 0 33 16,4 ±2,6 0 0 59 29,4 ± 3,2 0 0 109 54,2 ± 3,5 0 0 0 0
Отеки 99 99,0 ± 1,0 120 59,7 ±3,5 1 1,0 ± 1,0 55 27,4 ±3,1 0 0 15 7,5 ± 1,9 0 0 11 5,5 ± 1,6
Жажда 93 93,0 ± 2,6 129 64,2 ± 3,4 7 7,0 ± 2,6 50 24,9 ± 3,0 0 0 14 7,0 ± 1,8 0 0 8 4,0 ± 1,4
Приливы 98 98,0 ± 1,4 160 79,6 ±2,8 2 2,0 ± 1,4 26 12,9 ±2,4 0 0 13 6,5 ± 1,7 0 0 2 1,0 ±0,7
Полиурия 97 97,0 ± 1,7 131 65,2 ±3,4 3 3,0 ± 1,7 49 24,4 ± 3,0 0 0 21 10,4 ±2,2 0 0 0 0
Метеоризм 95 95,0 ± 2,2 127 63,2 ±3,4 5 5,0 ± 2,2 49 24,4 ± 3,0 0 0 24 11,9 ±2,3 0 0 0 0
Боли в животе 72 72,0 ± 4,5 52 25,9 ±3,1 27 27,0 ± 4,4 94 46,8 ±3,5 1 1,0 ± 1,0 38 18,9 ±2,8 17 8,5 ± 2,0
Зуд 100 100 179 89,1 ±2,2 0 0 22 10,9 ±2,2 0 0 0 0 0 0 0 0
Боли в суставах 98 98,0 ± 1,4 154 76,6 ±3,0 2 2,0 ± 1,4 34 16,9 ±2,6 0 0 12 6,0 ± 1,7 0 0 1 0,5 ± 0,5
Запоры 100 100 174 86,6 ± 2,4 0 0 18 9,0 ± 2,0 0 0 6 3,0 ± 1,2 0 0 3 1,5 ±0,9
Изменение аппетита 83 83,0 ±3,8 82 40,8 ±3,5 16 16,0 ±3,7 62 30,8 ±3,3 1 1,0±1,0 39 19,4 ±2,8 0 0 18 9,0 ± 2,0
Повышение чувствительности к запахам 98 98,0 ± 1,4 136 67,7 ±3,3 2 2,0 ± 1,4 43 21,4 ±2,9 0 0 17 8,5 ± 2,0 0 0 5 2,5 ± 1,1
О ч
К —
и-
=Г
гп
К
О
Р №
О
£
Таблица 2
Распределение по генотипам у пациенток с ПМС (п = 201) и без ПМС (п = 100)
Гены Генотипы
Без ПМС (п=100) спмс (п = 201) Без ПМС (п=100) СПМС (п = 201) Без ПМС (п = 100) СПМС (п = 201)
АСЕ S/S L/L S/L
28 (28,0 ± 4,5 %) 68 (33,8 ± 3,3 %) 19(19,0±3,9%) 39 (19,4 ± 2,8 %) 53 (53,0 ± 5,0 %) 94 (46,8 ± 3,5 %)
HTT S/S L/L S/L
19 (19,0 ± 3,9 %) 48 (23,9 ± 3,0 %) 26 (26,0 ± 4,4 %) 53 (26,4 ± 3,1 %) 57 (57,0 ± 5,0 %) 99 (49,3 ± 3,5 %)
PR S/S L/L S/L
58 (58,0 ± 4,9 %) 106(52,7±3,5%) 15 (15,0±3,6%) 19 (9,5 ± 2,1 %) 27 (27,0 ± 4,4 %) 76 (37,8 ± 3,4 %)
ER А/А G/G A/G
0 (0 %) 1 (0,5 ± 0,5 %) 63 (63,0 ± 4,8 %) 123(61,2±3,4%) 37 (37,0 ± 4,8 %) 76 (37,8 ± 3,4 %)
Таблица 3
Ассоциация НТТ S/S с агрессивностью, головной болью, метеоризмом
Симптом Генотип НТТ Отсутствие симптома Возникновение симптома за 1-2 дня до менструации, незначительная выраженность Возникновение симптома за 3-5 и более дней до менструации, умеренная и значительная выраженность Р
0 1 2
Агрессивность S/S 20 (20,4 ± 4,1 %) 11 (18,0±5,0%) 17 (41,5 ± 7,8 %) Ро_1<0,05 Pi_2<0,05
S/L 49 (50,0 ± 5,1 %) 34 (55,7 ± 6,4 %) 16 (39,0 ± 7,8 %) -
L/L 29 (29,6 ± 4,6 %) 16 (26,2 ± 5,7 %) 8 (19,5 ± 6,4 %) -
Число обследованных лиц в группах 98 61 41 -
Головная боль S/S 21 (16,9±3,4%) 18 (36,7 ± 7,0 %) 9 (33,3 ± 9,2 %) Po-i<0'05
S/L 64 (51,6±4,5 %) 22 (44,9 ± 7,3 %) 13 (48,1 ± 9,8 %) -
L/L 39 (31,4±4,2%) 9(18,4±5,4%) 5 (18,5 ± 7,6 %) -
Число обследованных лиц в группах 124 49 27 -
Метеоризм S/S 25 (19,8±3,6%) 11 (22,4 ± 6,0 %) 12 (50,0 ± 10,7 %) р0_2 <0,001
S/L 67 (53,2 ± 4,5 %) 25 (51,0±7,2%) 6 (25,0 ± 9,0 %) -
L/L 34 (27,0 ± 4,0 %) 13 (26,5 ± 6,4 %) 6 (25,0 ± 9,0 %) -
Число обследованных лиц в группах 126 49 24 -
мРНК и, соответственно, сниженной экспрессией транспортера серотонина на клеточных мембранах, тогда как другой вариант (наличие инсерции) приводит к его более интенсивной продукции [37]. Следовательно, полученные нами результаты согласуются с общими воззрениями на биологию мембранного транспорта серотонина.
Относительный дефицит транспортного белка серотонина может быть связан с возникновением различных психопатологических состояний. Park J. W. et al. (2004) [36] установили, что достоверно чаще ««-генотип встречается у больных с хронической головной болью. Эти же авторы
показали нарушение метаболизма серотонина и дисрегуляцию его транспортера у больных с патологической тревожностью.
Кроме того, в нашей работе обнаружено, что генотип S/S гена 5-HTT достоверно чаще встречается у больных с наличием метеоризма (повышенная мобильность кишечника) при ПМС. Эта зависимость согласуется, например, с данными Gershon M. D. [21]. Известно, что в кишечнике синтезируется до 90 % всего серотонина. Продукция серотонина осуществляется энтерохро-маффиновыми клетками слизистой оболочки кишечника. Серотонин действует в качестве мес-
Таблица 4
Ассоциация HTTS/S, АПФ D/D и зуда
Генотип Отсутствие симптома Наличие симптома
0 1
Генотип HTT
HTTS/S 37 (20,8 ± 3,0 %) 11 (50,0±10,7%)*
HTTS/L 93 (52,2 ± 3,7 %) 6 ( 27,3 ± 9,5 %) **
HTTL/L 48 (27,0 ± 3,3 %) 5 (22,7 ± 8,9 %)
Число обследованных лиц в группах 178 22
Генотип АПФ
АПФ D/D 55 (30,7 ± 3,4 %) 13 (59,1 ± 10,5 %) ***
АПФ D/I 90 (50,3 ± 3,7 %) 4(18,2±8,2%)
АПФ1/1 34 (19,0 ± 2,9 %) 5 (22,7 ± 8,9 %)
Число обследованных лиц в группах 179 22
*—р = 002, **—р = 0,008; ***_р = 0,004
Таблица 5
Ассоциация АПФ D/D и полиурии
Генотип АПФ Отсутствие симптома Возникновение симптома за 1-2 дня до менструации, незначительная выраженность Возникновение симптома за 3-5 дней до менструации, умеренная выраженность Возникновение симптома более чем за 5 дней до менструации, значительная выраженность
0 1 2 3
АПФ D/D 42 (32,1 ± 4,1%) 15 (30,6±6,6%) 5 (33,0 ± 12,2%) 6 (100%) *
АПФ D/I 62 (47,3 ± 4,4%) 26 (53,1 ± 7,1%) 6 (40,0 ± 12,6%) 0%
АПФ I/I 27 (20,6 ± 3,5%) 8 (16,3 ± 5,3%) 4 (27,0 ± 11,4%) 0%
Число обследованных лиц в группах 131 49 15 6
*—р0_3 <0,001
тного регулятора, способствуя ауторегуляции кишечной перистальтики. Показано, что дефицит секреции серотонина связан с усилением перистальтики и секреторной функции кишечника [21]. Результаты нашего исследования соответствуют данным фактам, так как, если генотип S/S 5-НТТ ассоциирован с недостаточным переносом серотонина в клетки, то вполне обосновано более частое возникновение кишечной симптоматики. Следует отметить, что в лечебной практике уже давно активно используют 5НТЗ антагонисты и 5НТ4 агонисты для лечения синдрома раздраженной кишки [19].
По нашим данным, генотип S/S гена 5-HTT достоверно чаще встречается у больных с наличием зуда в период развития ПМС. Известно, что рецепторы к серотонину есть в кожной дерме [26]. Показано, что серотонин вовлечен в патогенез некоторых заболеваний, сопровождающихся зудом [22]. Периферический эффект серотонина связан
с высвобождением гистамина из тучных клеток дермы. Таким образом, ««-генотип 5-НТТ, характеризующийся недостаточным поступлением серотонина в клетки, может приводить к дисрегу-ляции серотонин-гистаминового комплекса в тучных клетках и избыточным эффектам гистамина, в том числе и зуду.
В нашей работе мы обнаружили, что генотип D/D (делеция/делеция) гена АПФ достоверно чаще встречается у больных с полиурией. Аллель D ассоциирован с повышением активности АПФ в тканях и плазме. В ряде работ показана ассоциация генотипа D/D АПФ с развитием почечной патологии. Повышенная продукция АПФ приводит к увеличению концентрации ангиотензи-на-2, повышению уровней почечной фильтрации и вследствие этого к полиурии. То есть высокоп-родуцирующий вариант DD гена АПФ может быть связан с развитием полиурии при ПМС. В лечебной практике успешно применяются ингибиторы
АПФ. При их использовании наблюдается снижение циркуляции почечной плазмы и фильтрации в почечных клубочках [15].
Таким образом, результаты исследования функционального полиморфизма патогенетически значимых генов в развитии симптомов ПМС подтвердили существенную роль наследственного фактора в патогенезе и особенностях сим-поматики синдрома предменструального напряжения. Типирование патогенетически значимых генов у женщин с ПМС может иметь значение для уточнения биологических механизмов данного синдрома, прогнозирования его течения и, возможно, обоснования тактики ведения больных с ПМС.
Литература
1. Колгушкина Т. М. Актуальные вопросы гинекологии / Кол-гушкинаТ. М. — Минск: Выш. шк., 2000. —332 с.
2. Королева Г. П. Рефлексотерапия женщин с раздраженной толстой кишкой на фоне предменструального синдрома: автореф. дис. ... канд. мед. наук. — Волгоград, 1989. — 23 с.
3. Линде В. А. Предменструальный синдром / Линде В. А., Татарова Н. А. — СПб.: Гиппократ+, 2005. — 216 с.
4. Марторано Дж. Предменструальный синдром / Дж. Мар-торано, М. Морган, У. Фрайер: пер. с англ. — СПб.: ИК «Комплект», 1998. — 218 с.
5. НовотныП. П. Предменструальный синдром: пер. с англ. / Новотны П. П. — М.: КРОН-ПРЕСС, 1995. — 128 с.
6. СметникВ. П. Неоперативная гинекология / Сметник В. П., Тумилович Л. Г. — М.: МИА, 2001. — 592 с.
7. Татарчук Т. Ф. Принципы применения половых стероидных гормонов в клинической практике и их системные эффекты / Татарчук Т. Ф., Сольский Я. П. //Эндокринная гинекология. — Киев: Заповит, 2003. — С. 254-271.
8. Angiotensin-converting enzyme gene polymorphism in chronic allograft nephropathy / Biselli P. M., Abbud-Filho M., Ferreira-Baptista M. A. [et al.] //Transplant. Proc. — 2006. — Vol.38, N5. — P. 1327-1328.
9. Association of estrogen receptor and glucocorticoid receptor gene polymorphisms with sporadic breast cancer/Curran J. E.: Lea R. A., Rutherford S. [et al.] // Int. J. Cancer. — 2001. — Vol. 95. — P. 271-275.
10. Association of the D allele of the angiotensin I converting enzyme polymorphism with malignant vascular injury / Mayer N. J., Forsyth A., Kantachuvesiri S. [et al.] // Molecular Pathology. — 2002. — Vol. 55. — P. 29-33.
11. Association study of polymorphisms in the human estrogen receptor alpha gene and prostate cancer risk / Cancel-Tassin G., Latil A., Rousseau F. [et al.] // Eur. Urol. — 2003,— Vol. 44. — P. 487-490.
12. Bethea C. L. Diverse actions of ovarian steroids in the serotonin neuralsystem/Bethea C. L.,LuN.Z.,GundlahC.,StreicherJ.M.// Front. Neuroendocrinol. — 2002. — Vol. 23. — P. 41-100.
13. Cameron O. G. Menstrual fluctuation in the symptoms of panic anxiety/Cameron O. G., Kuttesch D., McPhee K., CurtisG. C.// J. Affect. Disord. — 1998. — Vol. 15. — P. 169-174.
14. Carlbring P. 12-month prevalence of panic disorder with or without agoraphobia in the Swedish general population / Carlbring P., Gustafsson H., Ekselius L., Andersson G. // Soc. Psychiatry. Psychiatr. Epidemiol. — 2002. — Vol. 37. — P. 207-211.
15. Chiurchiu C. Angiotensin-converting enzyme inhibition and renal protection in nondiabetic patients: the data of the metaanalyses / Chiurchiu C., Remuzzi G., Ruggenent P. // J. Soc. Nephrol. — 2005. — Vol. 16, N 58. — P. 58-63.
16. Colson W./.The ER-1 G594A polymorphism is associated with migraine susceptibility in two independent case / control groups / Colson N. J., Lea R. A., Quinlan S., MacMilan J. // Neurogenetics. — 2004, — Vol. 5,N2. — P. 129-133.
17. Eddahibi S. Serotonin transporter overexpression is responsible for pulmonary artery smooth muscle hyperplasia in primary pulmonary hypertension / Eddahibi S., Humbert M., Fadel E., Adnot S. // J. Clin. Invest. — 2001. — Vol. 108, N8. — P. 1141-1150.
18. Effect of medroxyprogesterone pretreatment on pentagastrin-induced panic symptoms in females with panic disorder / Le Melledo J., Jhangri G. S., Lott P. [et al.] // Psychiatr. Res. — 2002. — Vol.101. — P. 237-242.
19. Effect of tegaserod on gut transit in male and female subjects / Degen L., Petrig C., Studer D. [et al.] // Neurogastroenterol. Motil.-2005.-Vol. 17. — P. 821-826.
20. Frank R. r.The hormonal causes of premenstrual tension / Frank R. T. //Arch. Neurol. Psychiatry. — 1931. — Vol. 26. — P. 1053-1057.
21. Gershon M. D. Plasticity in serotonin control mechanisms in the gut/Gershon M. D.//Curr. Opin. Pharmacol. —2003. — Vol. 3, N6. — P. 600-607.
22. Hagermark O. Peripheral and central mediators of itch / Hager-mark O. // Scin. Pharmacol. — 1992. — Vol. 5, N 1,— P. 1-8.
23. Hertzberg T. The impact of pregnancy and puerperium on panic disorder / Hertzberg T., Wahlbeck K. // J. Psychosom. Obstet. Gynaecol. — 1999. — Vol. 20. — P. 59-64.
24. Hsieh Yao-Yuan PROGINS Alu sequence insertion is associated with hyperprolactinaemia but not leiomyoma susceptibility / Hsieh Yao-Yuan, Chan Ian-Pan // Clinical. Endocrinology. — 2005. —Vol. 62, N4. — P. 492-497.
25. IsraelS.L. Premenstrualtension/lsraelS. L.//JAMA. —1938,— Vol. 110. — P. 1721-1723.
26. Jinks S. L. Responses of superficial dorsal horn neurons to intradermal serotonin and other irritants: comparison with scratching behavior / Jinks S. L., Carstens E. // Journal of Neurophysiol. — 2002. — Vol. 87, N3. — P. 1280-1289.
27. KatoJ. Gene expression of progesterone receptor isoforms in the rat brain/Kato J., HirataS., NozawaA., Yamada-Mouri N. // Horm. Behav. — 1994. — Vol. 28. — P. 454-463.
28. Lane D. A. Role of hemostatic gene polymorphism in venous and arterial thrombotic disease / Lane D. A., Grant P. G. // Blood. — 2000. — Vol. 95. — P. 1517-1532.
29. Loch E. Treatment of PMS with phytopharmaceutical formulation containing vitex agnus castus / Loch E., Selle H., Boblitz N. // J. of Womens Health. — 2000. — Vol. 9, N 3,— P. 315-320.
30. Masahiro S. Six polymorphisms on ER-1 gene in Japanese, American and German populations / Masahiro S., Yuichiro T., Noriaki S., Rajvir D. // Eur. J. Clin. Pharmacol. — 2003. — Vol.59, N 5-6. — P. 389-393.
31. No significant association between progesterone receptor exon 4 Val 660 Leu G/T polymorphism and risk of ovarian cancer / Spurdle A. B., Webb P. M., Purdie D. M. [et al.] // Carcinogenesis. — 2001, — Vol. 22, N5. — P. 717-721.
32. Polymorphism l/D of the ACE gene and disturbance of blood pressure in type 1 diabetic children and adolescents / Sdadkowska A., Pietrzak I., Klich I. [et al.] // Przeql. Lec. — 2006. — Vol. 63, N 3, Suppl. — P. 32-36.
33. Progins alu insertion and human diversity / Donaldson C. J., CkapanzanoS. P., WatsonS.C. [etal.]//Mutation Research.— 2002. — Vol. 501. — P. 137-141.
34. Sayed-Tabatabaei F. A. Angiotensin-converting enzyme gene polymorphism and carotid artery wall thickness: a metaanalysis /Sayed-Tabatabaei F. A., Houwing-Duistermaat J. J., van Duijn C. M., Witteman J. C. // Stroke. — 2003. — Vol. 34, N7. — P. 1634-1693.
35. Selective expression of estrogen receptor alpha and beta isoforms in human pituitary tumors / Shupnik M. A., Pitt L. K., Soh A. Y. [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. — 1998. — Vol. 83. — P. 3965-3972.
36. Serotonin transporter polymorphism and harm avoidance personalityinchronictensiontypeheadache/ParkJ.W.,KimJ.S.: Lee H. K. [et al.] // Headache. — 2004. — Vol. 44, N 10. — P. 1005-1009.
37. WeizmanA. Serotonin transporter polymorphism and response to SSRIs in major depression and relevance to anxiety
disorders and substance abuse / Weizman A., Weizman R. // Pharmacogenomics. — Vol. 1. — P. 335-341. 38. YamaquchiT. Itch-associated response induced by intradermal serotonin trough 5-HT2 receptors in mice / Yamaquchi T., NagasavaT., Saton M., Kuraishi Y. //Neurosci Res. — 1999. — Vol. 35, N2. — P. 77-83.
Статья представленаТ. Э. Иващенко НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта,
Санкт-Петербург
ASSOCIATION BETWEEN CLINICAL FEATURES OF PREMENSTRUAL SYNDROME AND FUNCTIONAL POLYMORPHISM OF PATHOGENETICALLY SIGNIFICANTGENES
AganezovaN. V., Morozova E. В., Chukhlovin А. В., Linde V. A., Totolian Areg A.
■ Summary: Carrying the hyperactive variants of 5-serotonin transporter (5-HTT), angiotensin-converting enzyme (ACE), progesterone receptor (PR), estrogen receptor-1 (ER) genes is associated with development of premenstrual syndrome (PMS). When studying the frequency of promoter variants of ACE, HTT, PR, ER-1 genes in 201 patients with PMS, the significant correlations were revealed between the S/S allele of 5-HTT, D/D ACE, S/L PR gene and clinical course of desease. Hence, the promoter genotype of 5-HTT, ACE, PR in PMS, should be a possible genetic marker, in order to predict clinical course of the disorder.
■ Key words: gene polymorphism; serotonin transporter; angiotensin-converting enzyme; progesterone receptor; estrogen receptor-1; premenstrual sindrome
