CC BY
9
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
27
аспарагина, содержащие фрагменты карборана в боковой цепи, получены ацилированием 3-аминокарборана альфа-трет-бутиловыми эфирами Boc- (S) — глутаминовой и Boc- (S) — аспарагиновой кислот. Удаление защитных групп в одну стадию позволило получить карборанил-(S) — глутамин и карборанил- (S) — аспарагин в оптически чистом виде, что подтверждено результатами ВЭЖХ анализа на хиральной неподвижной фазе.
Результаты и заключение. Синтезированы производные (S) — глутамина и (S) — аспарагина, содержащие фрагменты карборана в боковой цепи и имеющие свободные ами-но- и карбоксильную группы в альфа-положении. Новые соединения отличаются высоким содержанием бора (37,5— 39,4 % по массе), хорошей растворимостью в водных средах и представляют значительный интерес с точки зрения поиска избирательных агентов для БНЗТ
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (грант 16-33-60122).
И.Д. Гулякин1, Али Хашем2, М.В. Дмитриева1,
Л.Л. Николаева12, Е.В. Игнатьева1, Н.А. Дмитричева1,
И.В. Ярцева1, Л.А. Король2
ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ПРОИЗВОДНОГО ИНДОЛОКАРБАЗОЛА - ЛХС-1208
1ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия;
2ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России, Москва, Россия
Введение. В лаборатории разработки лекарственных форм ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России выбран состав и предложена технология получения лио-филизированной липосомальной лекарственной формы (ЛЛЛФ) ЛХС-1208. Для проведения комплекса доклинических исследований наработаны экспериментальные серии ЛЛЛФ ЛХС-1208.
Цель исследования — определить показатели качества для стандартизации ЛЛЛФ ЛХС-1208.
Материалы и методы. Образцы экспериментальных серий ЛЛФ-лио ЛХС-1208. Оборудование: спектрофотометр Cary 100 (Agilent Technologies, Австралия), наносайзер Submicron Particle Sizer Nicomp-380 (Particle Sizing Systems, США), рН-метр HANNA HI 2211 (Hanna Instruments, Румыния), весы аналитические Sartorius 2405 (Sartorius AG, Германия), весы лабораторные AND DL-120 (A&D Company Limited, Япония). Методы: УФ-спектроскопия, тонкослойная хроматография (ТСХ), лазерная спектрометрия, потенциометрия.
Результаты. Для стандартизации ЛЛЛФ ЛХС-1208 выбраны следующие показатели, по которым необходимо контролировать качество препарата после получения и в процессе хранения: описание, регидратируемость, подлинность, размер везикул, pH, количественное определение и однородность дозирования, средняя масса содержимого флакона, потеря в массе при высушивании. ЛЛФ-лио представляет собой сухую пористую массу светло-желтого цвета, при регидратации которой образуется светло-желтая дисперсия. Подлинность препарата подтверждали электронным спектром поглощения, характерным для ЛХС-
1208, и проведением ТСХ-анализа. Размер липосом составил 175—190 нм; рН лиофилизата после регидратации в воде — 6,1—7,1. Содержание ЛХС-1208 во флаконе — 1,8 ± 0,3 мг — определяли методом прямой спектрофотоме-трии в максимуме поглощения при длине волны 320 ± 2 нм. Установлено, что вспомогательные вещества, входящие в состав ЛЛЛФ, не имеют в этой области собственного поглощения и не влияют на положение аналитического максимума в спектре основного вещества. Относительная ошибка определения не превышает 2,0 %. Средняя масса содержимого флакона находилась в пределах от 1,064 до 1,113 г. Потери в массе при высушивании не превышали 3 %.
Заключение. На основании проведенных исследований выбраны показатели качества для стандартизации ЛЛЛФ ЛХС-1208 и последующей разработки проекта НД.
Н.Н. Турина1. Т.С. Егорова1, С.Г. Фомина1, Д.В. Новиков1, Р.Г. Пегов2, М.А. Магомедов2, В.В. Новиков1 СВЯЗЬ ЧАСТОТЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ИЗОФОРМ МРНК МиС1/Х^ С УРОВНЕМ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА 1САМ1 В КАРЦИНОМАХ ТОЛСТОЙ КИШКИ Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород, Россия;
Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород, Россия
Введение. Исследования модельных линий раковых клеток показали, что гипогликозилирование МиС1 способствует связыванию белка с молекулой клеточной адгезии 1САМ1. Взаимодействие МиС1 и 1САМ1 опосредует миграцию опухолевых клеток в близлежащие ткани и кровоток с использованием механизмов, сходных с подвижностью клеток иммунной системы.
Цель исследования — сопоставить характер экспрессии изоформ мРНК МиС1 и уровень экспрессии молекулы клеточной адгезии 1САМ1 в образцах опухолевых очагов пациентов с раком толстой кишки (РТК).
Материалы и методы. Исследовали 58 образцов опухолевых очагов, полученных после резекции опухоли от пациентов с колоректальным раком, проходивших лечение в ГБУЗ НО «Нижегородский областной клинический онкологический диспансер». Частоту обнаружения альтернативных форм мРНК в опухолевых очагах пациентов с РТК исследовали методом ОТ-ПЦР. Уровень экспрессии генов МиС1 и 1САМ1 определяли методом ОТ-ПЦР в реальном времени. Нормирование уровней экспрессии проводили относительно мРНК 4 генов домашнего хозяйства: бета-2-микроглобулина, тирозин-3-монооксигеназы, убикви-тина С, гипоксантин-гуанин фосфорибозилтрансферазы.
Результаты. Матричная РНК МиС1 обнаружена в 76 % (44 из 58) образцов опухолевых очагов пациентов с РТК, мРНК 1САМ1 в 80 % (50 из 58). Корреляционных связей между уровнями экспрессии генов МиС1 и 1САМ1 не обнаружено. В опухолевых очагах, позитивных на мРНК МиС1, исследовали частоты обнаружения 9 вариантов сплайсинга мРНК МиС1. мРНК изоформ, относящихся к группе МиС1/А^, детектировалась в 34 % (15 из 44) опухолевых очагов; мРНК группы МиС1/Х^ выявлены
Спецвыпуск/ том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
28
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
в 9 % (4 из 44) опухолевых очагов. Присутствие мРНК MUC1-Rep регистрировалось в 39 % (17 из 44) образцов, а мРНК MUC1-Seq детектировалась в 77 % (34 из 44) исследованных образцах опухолей ТК. При сравнении уровней мРНК ICAM1 в опухолевых очагах РТК, содержащих разные альтернативные формы мРНК MUC1, показано, что обнаружение мРНК MUC1 /X-Z ассоциировалось с более высоким уровнем мРНК ICAM1 (p = 0,017).
Заключение. Представленные данные показывают, что в карциномах ТК обнаружение изоформ с выпадением участков, кодирующих внеклеточный регион MUC1 (MUC1/X-Z), связано с высоким уровнем экспрессии гена ICAM1. Вероятно, белки, кодируемые данными изофор-мами мРНК, вовлечены в процессы ICAM1-опосредованной подвижности клеток РКТ, метастазирова-ние и прогрессию заболевания.
Д.В. Гусев, А.И. Поляков, Н.Г. Якунина, Т.А. Алиева, Е.Н. Бедрина
|ПИРРОЛО- [2,1-С] [1,4] -БЕНЗОДИАЗЕПИНЫ -ПРОГНОЗИРОВАНИЕ И ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ АНАЛОГОВ АНТРАМИЦИНА
ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
Введение. 1,4-бензодиазепины, благодаря высокому терапевтическому индексу, низкой токсичности и разнообразной биологической активности, нашли широкое применение в медицине. Противоопухолевая активность среди природных антибиотиков в ряду пирроло- [2,1-с] [1,4] -бензодиазепинов привела к значительному росту интереса к группе этого класса соединений.
Цель исследования — поиск новых противоопухолевых препаратов в ряду 1,4-бензодиазепинов методом компьютерного скрининга и дальнейший синтез перспективных соединений классов пирроло- и пиридо-бензодиазепинов, комплексных соединений палладия и платины.
Материалы и методы. Оценку вероятности проявления фармакологических эффектов, клеточных и молекулярных механизмов, токсических свойств проводили с помощью компьютерной системы прогнозирования спектра биологической активности по химической структуре соединений. Использована система «Prediction of Activity Spectra for Substances», разработанная в Институте биомедицинской химии. Синтез ряда соединений пирроло- [2,1-с] [1,4] -бензодиазепинов с благоприятным прогнозом, имеющих в качестве функциональных производных активные циа-нидные, карбоксильные группы, осуществлен посредством 5-центровой 4-компонентной азидной реакции Уги, реакций мультикомпонентных конденсаций. Цитотоксическая активность соединений оценена в МТТ-тесте. При доклиническом исследовании соединений, синтезированных в лаборатории химического синтеза НИИ ЭДиТО, использованы перевиваемые опухоли мышей из банка опухолевых штаммов ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России: лимфоцитарная лейкемия Р-388 и эпидермоидная карцинома легких Льюис (LLC).
Результаты. Создана электронная база данных из 598 структур, из которых выбран ряд химических структур,
для которых с высокой вероятностью (более 70 %) прогнозируется противоопухолевый и противолейкозный эффекты при низкой токсичности. В МТТ-тесте протестированы 26 соединений, цитотоксическую активность проявили 10 соединений. Два соединения испытаны на мышах. При LLC мышей в дозе 50 мг/кг одно соединение проявило противоопухолевый эффект на следующий день после окончания лечения (торможение роста опухоли 65 %, р < 0,05). В дозе более 60 мг/кг наблюдалось снижение продолжительности жизни [увеличение продолжительности жизни — (-10) %].
Заключение. По результатам виртуального скрининга для синтеза выбран ряд виртуальных соединений, для которых с высокой вероятностью прогнозируется значимая противоопухолевая активность при низкой вероятности токсического действия. Проведен синтез новых гетероциклических соединений и комплексов металлов с использованием реакций мультикомпонентных конденсаций. Получено более 20 новых пирроло- [2,1-с] [1,4] -бензодиазепинов. На основании полученных данных определен синтетический путь для получения эффективных противоопухолевых препаратов, отвечающих современным требованиям.
Д. Ж. Давыдов1, Е.А. Морозова2, Н.В. Ануфриева2,
Т.В. Демидкина2, В.С. Покровский1
ДИНАМИКА СОДЕРЖАНИЯ МЕТИОНИНА
В ПЛАЗМЕ КРОВИ МЫШЕЙ ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ
МЕТИОНИН - ГАММА-ЛИАЗЫ
ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России,
Москва;
2ИМБ им. В.А. Энгельгардта РАН России, Москва
Введение. Метионин — у-лиаза (МГЛ) — фермент, катализирующий реакцию у-элиминирования L-метионина и обладающий антипролиферативной активностью in vitro и in vivo. Динамика концентрации метионина в плазме крови является одним из наиболее важных фармакодинами-ческих параметров, определяющих противоопухолевую активность МГЛ.
Цель исследования — определить динамику концентрации метионина in vivo после однократного введения МГЛ из C. sporogenes, C. freundii, C. tetani.
Материалы и методы. Препараты МГЛ C. sporogenes, 80 Ед/мл; МГЛ C. freundii, 50 Ед/мл; МГЛ C. tetani, 50 Ед/мл, получены и выделены в ФГБУН «ИМБ им. В.А. Энгельгардта» и ФГУП «ГосНИИгенетика». Препараты МГЛ вводили мышам-самкам линий C57Bl6j или DBA2, массой тела 18—23 г. МГЛ вводили внутривенно (в/в), внутрибрю-шинно (в/ б) и подкожно (п/к) в дозе 500, 1000 или 2000 Ед/кг однократно, кровь у мышей забирали через 10, 30 мин, 1, 2, 4, 6, 8, и 10 ч после введения (n = 3). Содержание L-метионина в сыворотке крови мышей после введения МГЛ определяли хроматографически (ВЭЖХ).
Результаты. Исходная концентрация метионина в плазме крови составила 16,3 мкМ/л. При введении в/в 500 Ед/кг концентрация метионина снижалась до неопределяемого уровня в течение 10 мин и оставалась на неопределяемом уровне в течение 3 ч у всех мышей после введения МГЛ из C. tetani и 6 ч после введения МГЛ из C. sporogenes. Для МГЛ из C. freundii зафиксирован отсроченный эффект и максимально быстрое восстановление уров-
Спецвыпуск I том 16 I 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
