CC BY
3Закон и право. 2024. № 1. С. 247-252. Law and legislation. 2024;(1):247-252.
Научная статья УДК 343; 614.8.084
https://doi.org/10.24412/2073-3313-2024-1-247-252 EDN: https://elibrary.ru/MKTMZK
NIION: 1997-0063-12/24-052 MOSURED: 77/27-001-2024-12-252
Судебно-медицинское значение разных молекулярных форм углеводдефицитного трансферрина и сиалидазной активности организма для выявления лиц, находящихся в состоянии хронической алкоголизации
Сергей Николаевич Прошин1, Алексей Ефимович Левенков2, Владимир Владимирович Гришин3
1 Санкт-Петербургская академия Следственного комитета Российской Федерации, Санкт-Петербург, Россия
2 Национальный государственный университет физической культуры, спорта и здоровья имени П.Ф. Лесгафта, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный государственный университет физической культуры, спорта и здоровья имени П.Ф. Лесгафта; НИИ стоматологии и ЧЛХ ПСПБГМУ имени И.П. Павлова Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия
1 psnjsn@rambler.ru
2 levenkov.alescha@yandex.ru
3 w.grischin@yandex.ru
Аннотация. Алкоголизм — это заболевание, которое развивается и формируется годами и не уходит одномоментно с прекращением употребления спиртосодержащих продуктов. Особую озабоченность в связи с этим представляет хронический алкоголизм лиц тех профессий, которые осуществляют перевозку пассажиров автотранспортом, железнодорожным и водным транспортом, авиасообщениями. В связи с этим необходим дальнейший поиск биомаркеров, которые могли бы позволить определить хроническое злоупотребление алкоголем. Биомаркеры существенно различаются не только по периоду, в течение которого их можно обнаружить, и количеству употребления алкоголя, необходимому для положительного результата теста, но и по специфичности.
Углеводдефицитный трансферрин (УДТ) в зависимости от определенного количества сиаловых кислот в своей структуре представлен несколькими изоформами. Предполагается, что чем меньше сиаловых кислот в структуре УДТ, тем более выражена хроническая алкоголизация. Однако сиаловые кислоты гидролизуются не под воздействием этанола и его метаболитов, а при активации ферментов, которые называются сиалида-зы. Достоверно выявлены три типа сиалидаз: сиалидаза ассоциированная с плазматической мембраной, цито-зольная сиалидаза и лизосомальная сиалидаза. Вместе с тем не ясно, какая из сиалидазной активности вносит наибольший вклад в гидролиз (отщепление) сиаловых кислот от УДТ, а ответ на этот вопрос очень важен с точки зрения судебно-медицинской экспертизы хронической алкоголизации организма человека.
Целью данного исследования является дальнейший анализ данных и разработка представлений о механизмах формирования биомаркеров хронического алкоголизма и их надлежащего использования в судебно-медицинской экспертизе.
Выводы: необходимо провести дальнейшие исследования, чтобы выяснить, какая из сиалидазной активности вносит наибольший вклад в гидролиз (отщепление) сиаловых кислот от УДТ, а это, в свою очередь, повысит привлекательность для судебной медицины анализа на углеводдефицитный трансфер-рин для выявления лиц, страдающих хроническим алкоголизмом.
Ключевые слова: хронический алкоголизм, судебная медицина, углеводдефицитный трансферрин, сиаловые кислоты, сиалидазы
Для цитирования: Прошин С.Н., Левенков А.Е., Гришин В.В. Судебно-медицинское значение разных молекулярных форм углеводдефицитного трансферрина и сиалидазной активности организма для выявления лиц, находящихся в состоянии хронической алкоголизации // Закон и право. 2024. № 1. С. 247— 252. https://doi.org/10.24412/2073-3313-2024-1-247-252 ББЫ: https://elibrary.ru/MKTMZK
© Прошин С.Н., Левенков А.Е., Гришин В.В. М., 2024.
LAW & LEGISLATION • 01-2024
Original article
Forensic significance of different molecular forms of carbohydrate-deficient transferrin and sialidase activity of the body for identifying persons in a state of chronic alcoholism
Sergey N. Proshin1, Alexey E. Levenkov2, Vladimir V. Grishin3
1 St. Petersburg Academy of the Investigative Committee of the Russian Federation,
St. Petersburg, Russia
2 P.F. Lesgaft National State University of Physical Culture, Sports and Health, St. Petersburg, Russia
3 National State University of Physical Culture, Sports and Health named after P.F. Lesgaft; Research
Institute of Dentistry and CHLH I.P. Pavlov PSPBSMU of the Ministry of Health of the Russian
Federation, St. Petersburg, Russia
1 psnjsn@rambler.ru
2 levenkov.alescha@yandex.ru
3 w.grischin@yandex.ru
Abstract. Alcohol abuse disorders, both acute and especially chronic, represent a major clinical and socioeconomic problem due to their devastating health consequences and high prevalence worldwide. Of particular concern in this regard is the chronic alcoholism of persons in those professions that transport passengers by road, rail and water transport, and by air. In this regard, further search for biomarkers that could help determine chronic alcohol abuse is necessary. Biomarkers vary significantly not only in the period over which they can be detected and the amount of alcohol consumption required for a positive test result, but also in specificity.
Carbohydrate-deficient transferrin (UDT), depending on the specific amount of sialic acids in its structure in the body, is represented by several isoforms. It is assumed that the less sialic acids in the structure of UDT, the more pronounced chronic alcoholization. However, sialic acids are hydrolyzed not under the influence of ethanol and its metabolites, but through the activation of enzymes called sialidases. Three types of sialidases have been reliably identified: plasma membrane-associated sialidase, cytosolic sialidase and lysosomal sialidase. At the same time, it is unclear which of the sialidase activities makes the greatest contribution to the hydrolysis (cleavage) of sialic acids from UDT, and the answer to this question is very important from the point of view of forensic medical examination of chronic alcoholism in the human body.
The purpose of this study is to further analyze data and develop insights into the mechanisms of formation of biomarkers of chronic alcoholism and their appropriate use in forensic examination.
Conclusions: further studies are needed to determine which sialidase activity makes the greatest contribution to the hydrolysis (cleavage) of sialic acids from UDT, and this, in turn, will increase the forensic appeal of the carbohydrate-deficient transferrin assay for identifying individuals suffering from chronic alcoholism.
Keywords: chronic alcoholism, forensic medicine, carbohydrate-deficient transferrin, sialic acids, sialidases.
For citation: Proshin S.N., Levenkov A.E., Grishin V.V. Forensic significance of different molecular forms of carbohydrate-deficient transferrin and sialidase activity of the body for identifying persons in a state of chronic alcoholism // Law and legislation. 2024;(1):247—252. (In Russ.). https://doi.org/10.24412/2073-3313-2024-1-247-252 EDN: https://elibrary.ru/MKTMZK
Введение
Расстройства, вызванные употреблением алкоголя, как острые, так и особенно хронические, представляют собой серьезную клиническую и социально-экономическую проблему из-за их разрушительных последствий для здоровья и высокой распространенности во всем мире [3]. Лица, страдающие алкоголизмом, представляют опасность не столько для себя, сколько для общества, особенно в состоянии абстиненции. Здесь, однако, важно отметить, что даже в пери-
од относительной ремиссии, когда алкоголик прекращает употребление спиртных напитков, физиологические функции полностью к норме могут и не вернуться. При этом, что вполне естественно, человек, страдающий алкоголизмом, старается не выпадать из социальной жизни и продолжать профессиональную деятельность.
К сожалению, заболевание, а алкоголизм — это безусловно заболевание, которое развивалось и формировалось годами, не уходит одномоментно с прекращением употребления спиртосодержащих продуктов. Отсюда повышенное
ЗАКОН И ПРАВО • 01-2024
количество дорожно-транспортных происшествий, бытовой травматизм, травматизм в профессиональной сфере, особенно, если работа сопряжена с выполнением быстрых и точных операций [9; 15].
Однако особую озабоченность в связи с этим представляет хронический алкоголизм лиц тех профессий, которые осуществляют перевозку пассажиров автотранспортом, железнодорожным и водным транспортом, авиасообщениями.
Таким образом, становится совершенно очевидно, что для исключения минимальной вероятности транспортных происшествий, сопряженных с угрозой жизни пассажиров, необходим поиск биомаркеров, которые могли бы позволить определить злоупотребление алкоголем задолго до того, как сотрудник, отвечающий за транспортное средство, возьмет на себя ответственность за жизнь пассажиров.
Различают прямые и непрямые биомаркеры. Прямые биомаркеры создаются, когда этанол метаболизируется или реагирует с веществами в организме.
Косвенные биомаркеры — это ферменты или клетки, которые претерпевают типичные изменения в ответ на острое или хроническое употребление алкоголя. Параметры, подлежащие измерению, или даже точная процедура вызова определяются для определенных ситуаций, например, в трансплантационной медицине [2] или для оценки права вождения [13].
И напротив, в других случаях, например, в вопросах, связанных с опекой и трудовым законодательством или во время программ отмены алкоголя при назначении фармакотерапии, выбор маркеров остается на усмотрение врача или токсиколога. Эти биомаркеры существенно различаются не только по периоду, в течение которого их можно обнаружить, и количеству употребления алкоголя, необходимому для положительного результата теста, но и по специфичности. Лекарства или заболевания могут повлиять на анализ биомаркеров. Таким образом, при выборе биомаркера необходимо учитывать как запрос (умеренное употребление алкоголя или воздержание), так и процедуру вызова (момент времени, в который объявляется дата взятия пробы).
Целью данного исследования является дальнейший анализ данных и разработка предоставлений о механизмах формирования биомаркеров хронического алкоголизма и их надлежащего использования в судебно-медицинской экспертизе.
Материалы и методы. Анализ литературных данных и своих исследований по представленной в статье проблеме.
Результаты и обсуждение
Из доказанных маркеров хронического алкоголизма известны: углеводдефицитный транс-феррин (УДТ) и гаммаглютамилтрансфераза. При этом ранее показано, что УДТ более точен и предпочтительнее, чем анализ на гаммаглюта-милтрансферазу [4; 12]. Однако значит ли это, что диагностическая значимость УДТ исчерпана? Дело в том, что УДТ в совокупности относится к десиалилированным изоформам транс-феррина, т.е. является трансферрином, у которого отсутствуют сиаловые кислоты.
Сиаловая кислота входит в состав многих гликопротеинов (сиалогликопротеины) и является неотъемлемым компонентом уникального класса гликосфинголипидов — ганглиозидов.
Сиалоглико протеины классифицируются исходя из того, по какой аминокислоте молекула сахара связана с протеином. Так, если протеин гликозилирован через амидную группу аспа-рагина, то это К-гликозилированный белок. Если же молекула сахара связана с белком через гидроксильную группу серина и треонина, то это О-гликозилированный белок. Как правило, большинство сиалогликопротеинов гликозили-рованы либо по К-, либо по О-типу [14].
В случае с УДТ в зависимости от определенного количества сиаловых кислот в структуре трансферрина в организме формируется несколько изоформ. Эти изоформы лишены остатков сиаловой кислоты и имеют дефицит своей олигосахаридной цепи. Гипосиалилирование или десиалилирование трансферрина приводит к изменению паттерна изоформ, который является диагностическим маркером злоупотребления алкоголем. Чем меньше сиаловых кислот в транфррине, тем более высока вероятность хронической алкоголизации у индивидуума [7].
Однако механизм, посредством которого хроническое употребление алкоголя вызывает повышение уровня СБТ в сыворотке крови, до сих пор не понятен. Поэтому нами был проведен эксперимент с восемью парами самцов крыс, которые содержались на адекватном жидком рационе, содержащем либо алкоголь (36% энергии), либо изокалорическую декстрозу (контроль) в течение четырех недель, после чего были получены образцы крови и печени.
Содержание УДТ в сыворотке крыс, получавших алкоголь, увеличивалось на 45% (Р < 0,05)
ЬАМ & LEGISLATION • 01-2024
по сравнению с соответствующими контрольными животными. Напротив, у крыс, получавших этанол, активность сиалилтрансферазы (ВТ), га-лактозилтрансферазы (ОТ) и К-ацетилглюкоза-минтрансферазы (К-АОТ), которые представляют собой гликозилтрансферазы, участвующие в синтезе углеводной боковой цепи трансферрина, была снижена на 24% и 40% (Р < 0,05), 23% и 51% (Р < 0,05, 0,001) и 20% и 26% (Р < 0,05) в общих гомогенатах печени и фракции Гольд-жи (ОБ), соответственно, что было выражено в единицах на 100 г массы тела.
Эти ферменты также были значительно менее активны в печеночных фракциях Гольджи (ОБ) 2 и 3. Подавление активности трансфера-зы у крыс, получавших этанол, по-видимому, было связано, по крайней мере частично, с инактивацией фермента ацетальдегидом, тогда как сам этанол не оказал никакого эффекта.
Аналогичные результаты были получены и у людей: у пяти злоупотребляющих алкоголем было выявлено снижение активности сиалилт-рансферазы в печени на 23% и повышение активности сиалидазы на 41% соответственно по сравнению с тремя непьющими субъектами. То есть, сиаловые кислоты гидролизуются не под воздействием этанола и его метаболитов, а при активации ферментов, которые называются си-алидазы.
Достоверно выявлены три типа сиалидаз: сиалидаза ассоциированная с плазматической мембраной, цитозольная сиалидаза и лизосо-мальная сиалидаза [10; 11; 14]. Эти ферменты играют различные физиологические роли, но их способность различать типы связей, соединяющих сиаловые кислоты и соседние остатки, а также между идентичностью и расположением лежащих в основе сахаров никогда систематически не изучалась. При анализе специфичности нейраминидаз была показана кинетика гидролиза БОБ1РУ-меченных субстратов, содержащих распространенные сиалилированные олигосаха-риды млекопитающих: 3^а-ЬасКАс, 3'Б1аЬас, Б1аЬех, Б1аЬеа, Б1аЬес, 6'Б1аЬас и 6'Б1аЬасКАс.
Были обнаружены существенные различия в субстратной специфичности ферментов по отношению к субстратам, содержащим а2,6-свя-занный сиаловой кислотой, которые легко расщеплялись такими сиалидазами, как Кеи3 и №и1, но не №и4 и №и2. Природа остатка сахара на восстанавливающем конце, либо глюкоза (О1с), либо К-ацетил-Б-глюкозамин (О1сКАс), оказала лишь незначительное влияние на все нейраминидазы, тогда как основная структура
1,3 или 1,4-связь между D, на которой было обнаружено, что галактоза (Gal) и GlcNAc) важны для Neu4, сильно предпочитающего изомер р3 (ядро 1) р4 (ядро 2). Neu3 и Neu4 в целом были более активны, чем Neul и Neu2, вероятно, из-за их предпочтения гидрофобных субстратов.
Neu2 и Neu3 были исследованы методом молекулярной динамики, чтобы определить благоприятную ориентацию субстратов в сайтах связывания и интерпретировать различия в их специфичности. Наконец, используя нокаутные мышиные модели, было подтверждено, что специфичность субстрата, наблюдаемая in vitro, повторяется в ферментах, обнаруженных в тканях мозга мышей. Эти данные впервые доказывают характерные субстратные предпочтения нейра-минидаз и их способность различать отдельные сиалозидные мишени в трансферрине.
Азуйне с сотрудниками [1], исследуя эффект хронического потребления алкоголя у крыс (крысам этанол вводили с пищей в течение восьми недель), выявили, что в группе крыс, которые получали этанол в дозах, обеспечивающих 36% от общего количества пищевых калорий (ОКПК), активность САПМ в печени по отношению к контролю возрастала на 220%, тогда как активность ЦС — только на 63%. При этом активность ЛС в печени снижалась и составляла лишь 31% от контроля.
Следует отметить, что изменение разных форм сиалидазной активности в печени крыс происходило в зависимости от дозы. Так, если крысы получали этанол в количестве 10.8% и 21.6% от ОКПК, активность САПМ повышалась на 40% и 67%, соответственно. Активность ЦС повышалась на 17% и 19%, если количество этанола составляло 10.8% и 21.6% от ОКПК. Активность ЛС по отношению к контролю снижалась уже в группе крыс, которые получали этанол в количестве 10.8% от ОКПК и наибольшего снижения, как уже было отмечено выше, достигало в печени у крыс, которые получали этанол в течение трех месяцев в дозах, обеспечивающих 36% от ОКПК.
В связи с полученными Азуйне с сотрудниками данными (2005) интересно отметить, что хроническое потребление алкоголя индуцирует активность сиалидазы, ассоциированной с плазматической мембраной (САПМ) также в лейкоцитах и эритроцитах периферической крови [8]. То есть, этанол является универсальным фактором в регуляции разных форм сиалидазной активности для клеток разных типов тканей.
ЗАКОН И ПРАВО • 01-2024
Рассмотрим более подробно результаты исследований, полученных Гариге с сотрудниками [5], касающиеся геномной регуляции генов, кодирующих соответствующие сиалидазы, в ответ на хроническое воздействие алкоголя. Количество матричной РНК (мРНК) для генов, кодирующих ЦС и САПМ, при введении крысам этанола с пищей в дозах, обеспечивающих 10.6%, 20.8% и 36% от ОКПК, повышалось дозозави-симо: для цитозольной сиалидазы и САПМ это повышение составило 20%, 34% и 69% и 22%, 26% и 47% соответственно. При этом количество мРНК для гена, кодирующего лизосомальную сиалидазу, дозозависимо снижалось на 35%, 50% и 80%, соответственно.
Интересно отметить, что, когда крысы получали этанол в дозах, обеспечивающих 36% от ОКПК, транскрипционная активность промоте-ров генов, кодирующих ЦС и САПМ, повышалась на 59% и 55% соответственно. В то же время транскрипционная активность промотера гена, кодирующего ЛС, снижалась на 22% (от контроля).
Очевидно, что изменение активности различных форм сиалидаз при потреблении млекопитающими алкоголя может иметь как краткосрочные эффекты для организма, так и отсроченные во времени последствия. При этом следует отметить, что разные формы сиалидаз имеют разную субстратную специфичность [6]. Вместе с тем не ясно, какая из сиалидазной активности вносит наибольший вклад в гидролиз (отщепление) сиаловых кислот от УДТ, а ответ на этот вопрос очень важен с точки зрения судебно-медицинской экспертизы хронической алкоголизации организма человека.
Вывод
Необходимо провести дальнейшие исследования, чтобы выяснить, какая из сиалидазной активности вносит наибольший вклад в гидролиз (отщепление) сиаловых кислот от УДТ, а это, в свою очередь, повысит привлекательность для судебной медицины анализа на углеводдефицит-ный трансферрин для выявления лиц, страдающих хроническим алкоголизмом.
Список источников (References)
1. Azuine M.A., Patel S.J., Lakshman Raj.M. Chronic ethanol feeding controls the activities of various sialidases by regulating their relative synthetic rates in the rat liver // Metabolism. 2005. Vol. 54. Pp. 1056-1064.
2. Bundesarztekammer. Richtlinien zur Organtransplantation gem. § 16 TPG Richtlinie gemaB § 16 Abs. 1 S. 1 Nrn. 2 u. 5 TPG fUr die Wartelisten-fUhrung und Organvermittlung zur Lebertransplantation // www.bundesaerztekammer.de/fileadmin/ user_upload/downloads/pdf-Ordner/RL/ RiliOrgaWlOvLeberTx2015121011.pdf (Accessed: 29.09.2017)
3. Connor J.P., Haber P.S., Hall W.D. Alcohol use disorders // Lancet. 2016. Vol. 387. № 10022. Pp. 988-998. doi: 10.1016/S0140-6736(15)00122-1
4. Fleming M.F., Anton R.F., Spies C.D. A review of genetic, biological, pharmacological, and clinical factors that affect carbohydrate-deficient transferrin levels // Alcohol Clin. Exp. Res. 2004. Vol. 28. № 9. Pp. 1347-1355. doi: 10.1097/01 .alc.00001 39815.89794.be
5. Garige M., Azuine M.A., Lakshman Raj.M. Chronic ethanol consumption upregulates the cytosolic and plasma membrane sialidase genes, but downregulates lysosomal membrane sialidase gene in rat liver // Metabolism. 2006. Vol. 55. Pp. 803-810.
6. Garofalo T, Tinari A., Matarrese P. et al. Do mitochondria act as «cargo boats» in the journey of GD3 to the nucleus during apoptosis? // FEBS Lett. 2007. Vol. 581. № 21. Pp. 3899-3903.
7. Helander A., Eriksson G, Stibler H., Jepps-son J. O. Interference of transferrin isoform types with carbohydrate deficient transferrin quantification in the identification of alcohol abuse // Clin. Chem. 2001. Vol. 47. Pp. 1225-1233.
8. MarmillotP., Rao M.N., Liu Q, Lakshman M.R. Chronic ethanol increases ganglioside sialidase activity in rat leukocytes, erythrocytes, and brain synap-tosomes // Alcohol. Clin. Exp. Res. 1999. Vol. 23. Pp. 376-380.
9. Peiro-Perez R., Segui-Gomez M., Perez-Gonzalez C., Miralles-Espi M., Lo'pez-Maside A., Benavides F.G. [Road traffic, leisure, domestic and workplace injuries. A description of the situation in Spain] // Gac. Sanit. 2006. Suppl 1. Pp. 32-40. doi: 10.1157/13086024
10. Proshin S, Yamaguchi K, Wada T, Miyagi T. Modulation of neuritogenesis by ganglioside-specific sialidase (Neu 3) in human neuroblastoma NB-1 cells // Neurochem. Res. 2002. Vol. 27. № 7/8. Pp. 841-846. doi: 10.1023/a:1020269326825
11. Proshin S.N., Kaminskaya E. V., Lebedev A.A., Shabanov P.D. Cells of rhabdomyosarcoma PA-23 tumor clones with high and low metastatic potential differ by activity of lysosomal sialidase // Bull. Exp. Biol. Med. 2008. Vol. 145. № 3. Pp. 355-357. doi: 10.1007/s10517-008-0090-x
LAW & LEGISLATION • 01-2024
12. Schmidt L.G., Schmidt K.P., Ohse D., Rom-melspacherH, Mbller C. Superiority of carbohydrate-deficient transferrin to gamma-glutamyltransferase in detecting relapse in alcoholism / / Am J Psychiatry. 1997. Vol. 154. № 1. Pp. 75-80. DOI: 10.1176/ ajp.154.1.75
13. Schubert W, Mattern R, Brenner-Hartmann J. 3th edition. Bonn: Kischbaum Verlag, 2013. Beurteilungskriterien: Urteilsbildung in der medizinischpsychologischen Fahreignungsdiagnostik. Pp. 244—276.
14. Takahashi K, Proshin S., Yamaguchi K., Yamashita Y, Katakura R, Yamamoto K., Shima H,
Hosono M., Miyagi T. Sialidase NEU3 defines invasive potential of human glioblastoma cells by regulating calpain-mediated proteolysis of focal adhesion proteins // Biochim. Biophys. Acta Gen Subj. 2017. Vol. 1861. № 11. Pp. 2778-2788. doi: 10.1016/j.bbagen.2017.07.023
15. Wright N.A., Lee L. T. Alcohol-related traffic laws and drunk-driving fatal accidents / / Accid Anal Prev. 2021. № 161. Pp. 106358. doi: 10.1016/ j.aap.2021.106358
Информация об авторах
Прошин С.Н. — кандидат биологических наук, доктор медицинских наук, доцент кафедры судебно-экспертной и оперативно-розыскной деятельности
Левенков А.Е. — кандидат биологических наук, доцент кафедры спортивной медицины и комплексной реабилитации
Гришин В.В. — кандидат биологических наук, доцент кафедры спортивной медицины и комплексной реабилитации Национального государственного университета физической культуры, спорта и здоровья имени П.Ф. Лесгафта; старший научный сотрудник НИИ стоматологии и ЧЛХ ПСПБГМУ имени И.П. Павлова Минздрава России
Вклад авторов: авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Статья поступила в редакцию 13.11.2023; одобрена после рецензирования 08.12.2023; принята к публикации 14.12.2023.
Information about the authors
Proshin S.N. — candidate of biological sciences, doctor of medical sciences, associate professor of the department of forensic-expert and operational-search actions
Levenkov A.E. — candidate of biological sciences, associate professor of the department of sports medicine and comprehensive rehabilitation
Grishin V.V. — candidate of biological sciences, associate professor of the department of sports medicine and comprehensive rehabilitation of the Lesgaft National State University of physical education, sports and health; senior research fellow, Research Institute of Dentistry and ChLH, St. Petersburg State Medical University. I.P. Pavlov of the Ministry of Health of Russia
Contribution of the authors: the authors contributed equally to this article. The authors declare no conflicts of interests.
The article was submitted 13.11.2023; approved after reviewing 08.12.2023; accepted for publication 14.12.2023.
ЗАКОН И ПРАВО • 01-2024
