CC BY
10
STATE OF THE CONDITION OF ALTERNATIVE SIMULATION OF AN ESTIMATION OF PARAMETER OF SKIN IRRITATING OPERATING (REVIEW)
Voloschenko O.I., Payetska O.V., Yalovenko O.I.
СУЧАСНИЙ СТАН АЛЬТЕРНАТИВНОГО МОДЕЛЮВАННЯ ОЦ1НКИ ПОКАЗНИКА ШК1РНО-ПОДРАЗНЮВАЛЬНО1 Д11
еобхiдною умовою надхо- тичних 3aco6iB основний шлях
дження парфумерно-косме- надходження до органiзму —
тично! продукцii на споживчий нанесення на шюру та ii при-
ринок е пiдтвердження без- датки, тому визначення по-
печностi при застосуванш дразнювально! дм засобу, йо-
згiдно з призначенням, що го iнгредiентiв на шкiру е най-
задекларовано Директивою важливiшим токсикологiчним
76/768/GEC (у законодавствi параметром при оцшц без-
бС) та ДСанПш 2.2.9.027-99 печностi дано! категорп про-
(у законодавствi Укра!ни) [1, дукцп, i вибiр альтернативних
2]. Водночас Директива моделей для замши традицй
ВОЛОЩЕНКО О.1., 2003/15/GC [3] вимагае по- ного методичного пщходу з
РАбЦЬКА О.В., ступово! вiдмови вiд дослi- його оцiнки е одним з прюри-
ЯЛОВЕНКО О.1. джень на тваринах найближ- тетних.
ДУ "|нститут ппени чим часом (остаточно з Мета роботи: проаналiзу-
та медично1 екологil 2009 р.) як таких, що супере- вати стан альтернативного
|м. Марзеева чать сучасним вимогам бю- моделювання дослiдження
АМН Укра|ни", етики. Така категоричнiсть у показника шюрно-подразню-
м. Ки|в постановцi проблеми вимагае вально! дii та виявити основы
пйй-ii; о/ки повно! ревiзii стану питання та шляхи виршення проблеми
УДК: 615.8:57.08 615 9(64 + вщбору найбiльш прийнятних замiни традицiйних пiдходiв в
665.58) альтернативних методiв для оцшц даного показника ток-
проходження вЫх етапiв валi- сикометрii на альтернативы.
дацп та регламентацii у рам- Згщно зi стандартизованим
ках 6С та ОЕСР (Органiзацii методом первинний потен^ал
економiчного ствроб^ництва подразнення шюри оцiнюють
та розвитку), що здмснюеться за ступенем прояву еритеми
компетентними оргашза^ями та набряку шюри тварини п1-
COLIPA (бвропейською асоци сля одноразового перкутан-
ацiею з косметики, засобiв ного нанесення речовини на 4
особисто! гiгiени та парфуме- години, який був запропоно-
рп), SCCNFP (Науковим комi- ваний Draize, удосконалений,
тетом з косметичних та сертифкований та регламен-
непродовольчих продуклв, тований у рамках еС та ОЕСР
призначених для споживача в — метод OECD TG 404 [7].
6С) i ECVAM (бвропейським Враховуючи вимоги бiоетики,
центром з валщацп альтерна- метод було доповнено страте-
тивних методiв дослщжень) гiею поетапно! оцiнки, за якою
[4-6]. Для бiльшостi косме- необхщнють кожного посли
довного етапу зумовлена да-ними, отриманими у попе-
КОЖНО-РАЗДРАЖАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ (ОБЗОР) ^ном^м^™ експери-
Волощенко аи., Раецкая Е.В.,Яловенко Е.И. менту за методом Draize у £и-
Проанализирована методическая база альтернативного м°де- падку, коли рН засобу менше 2
лирования оценки показателя кожно-раздражающего действия. або б|льше 11 5'
Отмечена возможность использования in vitro моделей для вы- -
явления способности веществ вызывать необратимые повреж- ментГаа* метод о мя Dra ¡^е'^е SU-
дения кожи и отсутствие альтернативныхметодов исследова- д у, як що субстанщя с'при-
ния, дающих результаты, адекватные данным, полученным тра- м у' ^ " 4 у
диционным ОECD TG 404. На сегодня в практике изучения кож- чин^акорозю в „одн°му..I но-раздражающего действия рекомендуется применять поэтап-
СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ АЛЬТЕРНАТИВНОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ ОЦЕНКИ ПОКАЗАТЕЛЯ
альтернативних корозмниа тест1в
ную стратегию оценки с использованием на скрининговом эта- ;МН' _
пе методов in vitro и подтверждением полученных данных c кон- исис^ш-ши кроками у ро-
кретизацией степени выраженности эффекта in vivo. звитку мет°дирниа п1даод1в
щодо оц1нки подразнювально-
67*Е&Н
го потенцiалу 3aco6iB були по-дальша розробка, пошук, удосконалення, вапща^я, ре-гламентацiя альтернативних методiв, здатних частково чи цiлком замшити традицiйний метод in vivo. Враховуючи, що методи QSAR на сьогодш мо-жуть мати лише прогнозуюче значення для деяких груп xi-мiчниx речовин, основну увагу сконцентрували на удоскона-леннi наявних сучасних in vitro моделей: i простих, i складних. Альтернативы методи оцшю-вали за двома напрямками:
□ в^^р мещ^в, якi могли б виявляти подразнення/коро-зiю шкiри;
□ в^^р методiв, якi здатнi показувати ступшь подраз-нення шкiри (встановлеш кри-терii оцiнки для кожного методу мають вiдповiдати загаль-ноприйнятим критерiям оцiнки в умовах in vivo) [8, 9].
Перший напрямок е першо-черговим завданням i спрямо-ваний на пошук методiв для скринiнгового етапу досли дження, другий — пщтвер-дження ефекту подразнення з встановленням ступеня його прояву. Модели на яких вия-вляють корозiйнi властивостi засобiв, пропонують викори-стовувати на початковому ета-пi дослiджень для виведення з подальшого експерименту сильно подразнювальних ре-човин.
Корозiя шюри — це подразнення тако'У великоi сили, яке не залишае можливостi реге-нерацii пошкодженоi дгпянки шкiри (некроз епiдермiсу, дерми). Переважна бгпьшють косметичних засобiв не здат-на спричиняти таку пошко-джувальну дiю, але деякi ш-гредiенти проявляють подiбну активнiсть, тому юнуе необ-xiднiсть встановити дозу ре-човини, за якоi цей ступшь по-дразнення не проявляеться. В
експериментах на тваринах цей показник оцшюеться тим же методом, що i подразнення шюри згщно з OECD TG 404. На даний момент два альтернативних методи були внесет у Додаток V Директи-ви небезпечних речовин 67/548/ЕеС [10] для оцшки цього показника та у сучасну стратепю оцшки показника подразнення шюри, яка пе-редбачае використання in vivo та in vitro моделей.
Для оцшки корозмного по-тен^алу шкiри пропонують ви-користовувати 2 методи, як валiдованi ECVAM та прийнят OECP [11, 12]:
□ the in vitro skin corrosion rat skin transcutaneous electrical resistance (TER) test, заснова-ний на реестрацп електрично-го опору iзольованоi дiлянки шкiри щура, що культивуеться в умовах in vitro, за дм речови-ни (TG 430) [11];
□ реконструйоваш моделi е^валенту епiдермiсу люди-ни EPISKIN та EpiDеrm, здатнi рееструвати процеси життез-датностi шкiри людини за життездатнютю клiтин у куль-турi, (TG 431) [12-15]. EPISKIN — тримiрна модель шюри людини, яка являе собою бича-чий колагеновий матрикс, по-критий колагеном людини, розшарованим дiференцiйо-ваними кератиноцитами лю-дини другого пасажу. Жит-тездатнiсть клiтин оцiнюють за МТТ випробуванням (спек-трофотометричним методом оцшки пролiферацii клiтин з використанням барвника жовтого 3-(4,5-диметилазол-2-т)-2,5-дифенттетразолм-бромиду), оцiнкою активностi клiтин епщермюу за вивть-ненням цитокiну (штерлекшу 1 (IL-1) та визначенням цито-зольного ферменту лактатде-гiдрогенази (LDH) [12, 13]. EpiDеrm представлена рекон-струйованими кертиноцита-ми людини, що зростають на спе^ально виготовленому живильному культуральному середовищi. Оцшка токсично)' дii речовини рееструеться тУпьки за рiзницею мiж часом, необхщним для зменшення клiтин у культурi на 50%, з ек-спози^ею речовини, що дос-лiджуеться, та контрольно)' [12, 14-15].
У США для оцшки корозм-но' здатност прийнято тест
Corrositex, який виявляе пе-нетрацiю речовин Kpi3b гщро-вану колагенову матрицю, е мембранним фтьтром. Вико-ристовуеться тiльки для оцшки кислот, основ та Ухшх по-хiдних, поки що рекомендо-ваний для розгляду, але ще не прийнятий 6С законодав-ством [16].
Для реестрацiï подразню-вальноУ дiï засобiв запропоно-вано деяк методи оцiнки ко-розмноУ здатностi засобiв: EPISKIN, EpiDеrm та iншi моде-лi. Всi альтернативы модели за допомогою яких можна оци нити подразнювальний потен-цiал, подiляють на
□ моделi реконструйованоУ шкiри людини;
□ шюрш експлантати та культури оргашв;
□ методи QSAR (кiлькiсна оцшка взаемоди "структура — активнють").
Моделi реконструйованоУ шкiри людини е штучно ство-реними. Вони подiбнi шкiрi людини, частiше тримiрнi, ос-новними кл^инами яких е зростаючi кератиноцити рiз-них стадiй диференцiювання, що культивуються на рiзних субстратах на поверхш роз-подiлу двох фаз "пов^ря — ри дина" [17-19]. Деяк з них вже досягли рiвня комерцiйного виробництва (EPISKIN, Epi-Dеrm, The SkinEthic), iншi по-требують доопрацювання (the inhouse Cosmitаl model, (PCP) in vitro, RE-DED model тощо). Розглянут вище EPISKIN, Epi-Dеrm вже офщшно визнанi, регламентацiя SkinEthic мо-делi — на стадiï валщацмних випробувань, (PCP) in vitro — на етап превалiдацiйних ви-пробувань.
SkinEthic модель, розробле-на M. Rosdy i L. Clauss [20], яв-ляе собою культуру нормаль-них кератиноци^в людини, що зростають на полкарбонатно-му живильному середовищi на поверхнi роздiлу двох фаз — "пов^ря — рiдина", моделюе постiйно зростаючу шкiру людини на межi роздiлу двох фаз. Модель рекомендують вико-ристовувати при оцшц ефекту одноразово! аплiкацiï i плану-ють доопрацювати у напрямку випробовування повторних доз, але процедура виконання ще потребуе ретельно'| дороб-ки. Оцшка ефекту подразнен-ня рееструеться за визначен-
Е&Н*68
ням життездатностi клiтин, ви-дiлення iнтерлiкiну 1 (1L-1) та морфолопчними змiнами кш-тин у культурi [20, 21].
Методи iз застосуванням моделей EPISKIN, EpiDеrm, The SkinEthic показують висо-ку кореляцю з методом in vivo, але можуть бути використанi для виявлення подразнюваль-ного ефекту тiльки при одно-разовiй аплiкацii i не дають адекватно' характеристики ступеня прояву ефекту по-дразнення повною мiрою.
Метод визначення кштинно' проникностi (PCP) in vitro, роз-роблений Pfaller i Troppmair, заснований на оцшц по-шкодження епiдермального бар'еру за параметрами TER (трансепщермальною рези-стентнютю) i трансепiтелiаль-ний транспорт маленьких молекул типу FITC-inulin (PCP). Речовини наносять на кштини, що засiянi на 24-рiвневiй пла-стинi полiкарбонатного фть-тру. Бар'ерне ушкодження оци нюеться за вимiрюванням TER i PCP, якi е i прогнозувальними показниками нефротоксично-сл. Впровадження методу знаходиться на етап превали дацii. Вiн може бути викори-станий для оцiнки одноразо-вих ушкоджень рiзних типiв еттелю без адекватноi (тра-дицiйнiй) характеристики ступеня виявлення ушкодження [22].
Шюрш експлантати та куль-тури оргашв — моделi бiльш високого рiвня конструюван-ня. Вони утвореш з експланта-тiв шкiри ссав^в або людини, функцiонування яких пщтри-муеться у живильному сере-довищi in vitro.
The Mouse Skin Integrity Function Test (SIFT) е трансплантатом шюри мишi у модельному середовищi, вiдображае бюхи мiчнi процеси живо' шкiри, мае високу репродукцшну здат-нiсть, мщш бар'ернi властиво-стi. Оцiнка щшсност рогового шару здiйснюеться вимiрю-ванням параметрiв трансепи дермальноi втрати води (TEWL) та електричного опору шюри (ER). Перкутанна аб-сорбцiя хiмiчних речовин пiсля експозицii продукту оцшюеть-ся за рiзницею показникiв TEWL та ER до та тсля аплка-цii. Але метод мае низьку мiжлабораторну вщтворюва-нiсть. Значення TEWL i Er ви-
м1рюють лише у вузькому д|-апазон1 реестрац1' подразнен-ня [23-26].
Prediskin модель — це модель культури шюри людини, яка отримана при пластичнм х1рург1' вщ пац1ента i культи-вуеться in vitro. Засоби, що дослщжуються, наносяться на шюру на 20 годин, вщсоток життездатних клiтин у культурi оцiнюють за МТТ дослщжен-ням. При зменшенш життездатних кл^ин у культурi нижче 35% провадять псто-логiчнi дослiдження для виявлення характеру пошко-дження. I' недолком е занад-то висока чутливють, яка спричиняе велику кшькють псевдопозитивних результа-тiв, тому випробовування по-ки що мае обмежене прогно-зувальне значення [23-24].
The Pig Ear Test являе собою модель вуха свиш, що культи-вуеться in vitro. Реестра^я по-дразнення заснована на виз-наченш абсолютного збть-шення TEWL поверхш шкiри вуха пiсля експозицп речовини, але варiабельнiсть отри-маних результатiв була занад-то велика, тому випробову-вання матиме поки що обме-жене прогнозувальне значення [23-24].
У програмi дослщження ме-тодiв оцiнки шюрно-подраз-нювального показника, прий-нятою COLIPA, вiдзначено, що моделi, утворенi iз шкiрних ек-сплантатiв, та культури оргашв, як i моделi реконструйова-но' шкiри людини, потребують доробки у напрямку пошуку бiльш механiзованих критерi'в оцiнки, модершзаци само' мо-делi для досягнення бшьшо' адекватностi природним умо-вам, щентифкацп специфiч-них бiомаркерiв подразнення при залученш методiв молеку-лярно' бiологi' та генно' Ыже-нерп. Сучаснi методи не готовi
■ ОГЛЯД Л1ТЕРАТУРИ S
для оцшки впливу багаторазо-вих аплiкацiй засобу та ступеня прояву подразнювально! дм i можуть бути рекомендовав для використання на скринш-говому етат дослiджень у комплексi батаре! тестiв in vitro [27].
Розроблений нами "Споаб оцiнки цитотоксично1 дii засо-бiв на основi поверхнево-ак-тивних речовин" пропонуе за-стосовувати як in vitro моделi короткострокову суспензмну культуру еритроцитiв, перед-бачае оцiнку гемолiтичноi д^' засобу на еукарютичну ктти-ну (еритроцит), оцiнку вщсот-ка денатурацii гемоглобшу у клiтиннiй культурi та розраху-нок iнтегрального показника Кс (коефМента цитотоксич-ностi), що враховуе результа-ти обох дослiджень та показуе ступшь цитотоксично1 дii засобу. СпоЫб придатний для оцiнки ттьки косметичних за-собiв на основi ПАР [28]. Про-веденi порiвняльнi дослiджен-ня розробленим способом та традицiйним методом доот-дження шюрно-подразню-вальноi дii in vivo показали, що даний метод при викори-станш на скринiнговому етат дослщжень дозволяе роздi-лити засоби на
□ таю, що однозначно не спричинятимуть шюрно-по-дразнювальну дю (при Кс>10) i дослiдження на тваринах можна не провадити;
□ таю, що потенцмно здатш спричиняти шюрно-подраз-нювальну дю (при 10<Кс>0), тобто дослiдження на тваринах необхщш;
□ препарати спричиняють шюрно-подразнювальну дiю (при Кс<0), тобто для пщтвер-дження наявност ефекту дос-лiдження на тваринах можна не провадити.
Розробка ктькюних методiв математичного моделювання
69*Е&Н
STATE OF THE ^NDITION OF ALTERNATIVE SIMULATION OF AN ESTIMATION OF PARAMETER OF SKIN IRRITATING OPERATING (REVIEW)
Voloschenko O.I., Payetska O.V., Yalovenko O.I.
Methodical base of alternative simulation of an estimation of a parameter of skin irritating operating is parsed. Possibility of using in vitro of models for detection of capacity of matters to
call skin corrosion and absence of alternate method of testing adequate conventional ОECD TG 404 is marked. Today in practice of analysis of a parameter of skin irritating operating it is recommended to apply an installment (step by step) a strategies of an estimation with usage on sсrining a stage of methods in vitro and endorsement of the obtained data by concretization of a degree of an expressiveness of effect in vivo.
при використанш комп ютер-ного програмування (in silico) оцшки взаемозв'язку структу-ри та активност (методи QSAR) речовин для виявлення подразнювально! (корозмно!) здатност1 речовин, засоб1в е перспективним напрямком наукового анал1зу та узагаль-нення результалв досл1-джень. Але вони можуть вико-ристовуватися ттьки на етап1 прогнозування подразнювально! активност речовини i вимагають ретельно! дороб-ки, осктьки розрааоваш на вузький спектр речовин по-дiбноi аiмiрноi будови (методи М. Barratt, H. Hayashi i спи вавторiв, M. Smith та ствав-торiв тощо) [29-31].
1снуе низка шшиа альтерна-тивниа методiв оцшки подразнювально! дii, але ми придти-ли увагу тим, як найбiльш близькi до впровадження у практику саштарно-ппешрниа дослiджень, е ри можливо бу-дуть найближчим часом за-гальновизнаними.
Висновки
Аналiз та узагальнення стану шформацмноУ та експеримен-тальноУ бази альтернативного моделювання методу визна-чення показника шюрно-по-дразнювальноУ дii показуе, що
□ незважаючи на широкий спектр iснуюриа альтернатив-ниа бiологiрниа моделей жод-на з ниа не може замшити те-стування на тваринаа при дос-лiдженнi показника шюрно-по-дразнювальноУ дii у повному обсязi, тому запропоновано вводити поетапну стратепю оцшки, яка врааовуе викори-стання in vitro та in vivo мето-дiв, що зменшуе використання тварин в експериментальниа дослщженняа (урааування ви-мог бiоетики) i прискорюе темпи Ух виконання;
□ альтернативы методи для оцшки корозп шюри вали
довано i прийнято 6С (Дода-ток V Директиви 67/548/Е6С) i на р1вн1 OECP (TG 430 i TG 431) i можуть замшити тради-ц1йн1 п1дходи з оцшки цього показника;
□ оцшку шюрно-подразню-вального потенцiалу рекомендовано провадити у два етапи: перший — визначення рН та корозмно! здатност in vitro, другий — проведення досл1-джень in vitro та in vivo засоб!в, подразнювальний ефект яких не встановлено на першому етапi. моддл1 EPISKIN, Epi-Dеrm та The Mouse Skin Integrity Function Test (SIFT) е най-61льш перспективними при визначенш подразнювально! дм речовин для класифкацп та маркування (подразнювальш / неподразнювальнi)'
□ на сучасному етап впровадження альтернативнi методи дослщження можуть бути запропоноваш т1льки при оцш-ц1 подразнення при одноразо-в1й аплiкацii для констатацп наявностi ефекту, не врахо-вуючи ступ1нь його прояву та повторну (багаторазову) ек-спозицю;
□ бтьшють in vitro мдтод1в показуе велику варiабельнiсть показникiв та не вщтворюе увесь можливий дiапазон прояву даного критерю;
□ для визначення ступеня подразнення при багаторазо-вому нанесены необхщно провадити подальш! досл1дждння у напрямку створення бтьш адекватно! природним умовам мехашзовано! моддл1, щенти-фiкацii нових маркерних гешв подразнювально! дм. 1нформа-ц1я щодо виявлення бюмарке-р1в е ключовою для повно! оц1нки ризику i нин1 може бути отримана ттьки з експери-мднт1в на тваринах та з даних щодо подразнення шюри на волонтерах;
□ при удосконаленш мате-
матичного моделювання прогнозування ризику подразнення використання моделей QSAR на початковому етат проведення дослщжень дозволить бтьш обфунтовано планувати програму досли джень, що зумовить адекват-ний вибiр батаре! in vitro моделей для випробувань;
□ для оцшки подразнювально! дм косметичних засо-бiв, серед яких бтьше 80% не повиннi спричиняти подразнення шюри, застосування in vitro методiв виявлення засо-бiв, як однозначно не подраз-нюють шюру, значно спрощуе випробовування, скорочуе ктькють експериментальних тварин та собiвартiсть доаш-джень, тому створення по-етапно! стратегiï оцiнки показника шюрно-подразню-вальноï дiï при залученнi на скриншговому етапi досли джень таких in vitro методiв е перспективним напрямком розвитку методично! бази державно! саштарно-епщеми олопчно! експертизи косметичних засобiв.
Л1ТЕРАТУРА
1. EC. Council Directive 76/768/EEC of 27 July 1976 on the approximation of the laws of the Member States relating to cosmetic products // Official Journal of the European Communities. — 1976. — L262. — P. 169-200.
2. Державы саштарш правила i норми безпеки продукцп парфумерно-косметично! про-мисловостк ДСанПш 2.2.9.02799 / МОЗ Укра!ни. — К., 1999. — 42 с.
3. EU. Directive 2003/15/EC of the European Parliament and of the Council of 27 February 2003 amending Council Directive 76/768/EEC on the approximation of the laws of the Member States relating to cosmetic products // Official Journal of the
r
E&H*70
European Union. — 2003. — L66. — P. 26-35.
4. New from ECVAM // NCA — Newsletter. — 2004. — № 17. — C. 13.
5. Rossignol M.R. 1.1. The 7-th Amendment to the Cosmetics Directive // ATLA. — 2005.— Vol. 33. — P. 19-20.
6. Safety Data Reguirements for the Purposes of the Cosmetics Directive / I. Manou, C. Es-kes, O. de Silva et al. // ATLA. — 2005. — Vol. 33. — P. 21-26.
7. OECD Guidelines fur the Testing of Chemicals No. 404: Acute Dermal Irritation / Corrosion / Organisation for Economic Cooperation and Development. — Paris, France. — 2002.— 13 p.
8. Fentem J.H., Botham P.A. ECVAMs activities in validating alternative tests for skin corrosion and irritation // ATLA. — 2002. — Vol. 30, Suppl. 2. — P. 61-67.
9. Harmonised Integrated Classification System for Human Health and Environmental Hazards of Chemical Substances and Mixtures. OECD series on testing and assessment / Organisation for Economic Cooperation and Development. — Paris, France. — 2001. — 249 p.
10. Annex I to Commission Directive 2000/33/EC adapting to technical prograssfor the 27-th time Council Directive 67/548/EEC on the approximation of laws, regulations and administrative provisions relating tothe classification, packaging and labelling of dangerous substances // Official Journal of the European Union. — 2000.— L136. — P. 91-97.
11. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals № 430. In vitro Skin Corrosion: Transcu-taneous Electrical Resistance Test (TER) / Organisation for Economic Cooperation and Development. — Paris, France. — 2002. — 12 p.
12. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals № 431. In vitro Shin Corrosion: Human Shin Model Test / Organisation for Economic Cooperation and Development. — Paris, France. — 2002. — 8 p.
13. ECVAM Statement on the scientific validity of the EPISKIN test (an invitro test for skin cor-rosivity) // ATLA. — 1998. — Vol. 26. — P. 277-280.
14. The ECVAM international validation study on in vitro tests for skin corrosivity 2. Results
I*
and evaluation by the Management Team / J.H. Fentem, G.E.B. Archer, M. Ball et al. // Toxicology in Vitro. — 1998. — Vol. 12. — P. 483-524.
15. The ECVAM prevalidation study on the use of EpiDerm for skin corrosivity testing / M. Li-ebsch, D. Traue, C. Barrabas // ATLA. — 2000. — Vol. 28. — P. 371-401.
16. ECVAM Statement on the application of the CORROSITEX assay for skin corrosivity testing // ATLA. — 2001. — Vol. 29. — P. 96-97.
17. Alternative methods for skin irritation testing: the current status. ECVAM Skin Irritation Task Force Report 1 / P.A. Botham, L.K. Earl, J.M. Fentem et al. // ATLA. —
1998. — Vol. 2. — P. 195-211.
18. A revalidation study on in vitro tests for acute irritation: results and evaluation by the Management Team / J.H. Fentem, D. Rriggs, C. Elliott et al. // Toxicology in Vitro. — 2001.— Vol. 15. — P. 57-93.
19. Predictive ability of reconstructed human epidermis equivalents for the assessment of skin irritation of cosmetics / C. Faller, M. Bracher, N. Dami, R. Roguet // Toxicology in Vitro. — 2002. — Vol. 16. — P. 557-572.
20. Rosdy M.A., Clauss L.C. Complete human epidermal cell differentiation in chemical defined medium at the air-liquid interface on inert filter substrates // Journal of Investigative Dermatology. — 1990. — Vol. 5. — P. 409-414.
21. Predictivity of an in vitro model for acute and chronic skin irritation (SkinEtihc) applide to the testing of topical vehicles / A. de Brugerolle de fraissinette, V. Picarles, S. Chibout et al. // Cell Biology and Toxicology. —
1999. — Vol. 15. — P. 121-135.
22. Transepithelial resistance and inline permeability as endpoints in vitro nephrotoxidty testing / N. Duff, S. Carter, G. Feldman et al. // ATLA. — 2002.— Vol. 30, Suppl. 2. — P. 53-59.
23. Follow-up to the ECVAM Prevalidation Sady on In vitro Tests for Acute Skin Irritation. ECVAM Skin Irritation Task Force Report 2 / V. Zuang, M. Balls, P.A. Botham et al. // ATLA. — 2002. — Vol. 30. — P. 109-129.
24. A prevalidation study on in vitro tests for acute skin irritation: results and evaluation by the Ma-
nagement Team / J.H. Fentem, D. Briggs, C. Chesne et al. // Toxicology in Vitro. — 2001. — Vol.15. — P. 57-93.
25. A prerevalidation study on the in vitro skin irritation function test (SIFT) for prediction of acute skin irritation m vivo: results and evaluation of FCVAM Phase III / J.K. Heylinling, S. Diot, W.J. Fasa-no W.J. et al. // Toxicology in Vitro.
— 2003. — Vol. 17. — P. 123-138.
26. Heylings J.R., Clowes H.M., Hughes L. Comparison of tissue sources for the skin integrity function test (SIFT) // Toxicology in Vitro. — 2001. — Vol. 13.— P. 597-600.
27. Skin Irritation and Corrosion / V. Zuang, M.-A. Alonso, P.A. Botham et al. // ATLA. — 2005.
— Vol. 33, Suppl. 1. — Р 35-46.
28. Волощенко О.I., Раець-каО.В., Яловенко O.I., Кузьми наА.1. Споаб оцшки цитото-ксично'У дм 3aœ6iB на основi поверхнево-активних речовин // Патент на корисну модель № 28727, зареестр. 25.12.2007, заява № 2007 06922. Висно-вок про видачу декларацмно-го патенту на корисну модель за результатами формально)' експертизи, затв. 21.08.2007, № 23856/1 вщ 13.09.2007.
29. Barratt M.D. Quantitative structure-activity relationships for skin irritation and corrosivity of neutral and electrophilic organic chemicals // Toxicology in vitro. — 1996. — Vol. 10. — P. 247-256.
30. A quantitative structure-activity relationships study of the skin irritation potential of phenols / H. Hayashi, Y Nakamura, K. Hi-gashi et al. // Toxicology in vitro.
— 1999. — Vol. 13. — P. 915-922.
31. A robust structure-activity relationships (SAR) model for esters that cause skin irritation in humans / J.S. Smith, O.T. Macina, N.B. Sussman et al. // Toxicology in vitro. — 2000. — Vol. 55. — P. 215-222.
71*E&H
