CC BY
15
Щ МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ
A.A. Радионченко, В.П. Болотова, Л.С. Стрелис
Сибирский государственный медицинский университет, Кафедра акушерства и гинекологии, г. Томск
СТРУКТУРНО-МЕТАБОЛИЧЕСКИЙ СТАТУС ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ЮВЕНИЛЬНЫХ МАТОЧНЫХ КРОВОТЕЧЕНИЯХ
Проведена комплексная и сравнительная оценка морфологического и функционального статуса зрелых циркулирующих эритроцитарных клеток с использованием современных методов исследования. Выявлено, что у пациенток, страдающих ювениль-ными маточными кровотечениями, наблюдается структурная, метаболическая и функциональная дестабилизация эритроцитарных клеток. Выявленные нарушения поверхностной архитектоники эритроцитов, липопротеидной композиции цитомемб-ран и содержания тиоловых соединений достигают своего максимального проявления с развитием и усугублением степени железодефицитной анемии.
Ключевые слова: ювенильные маточные кровотечения, постгеморрагическая анемия, эритрон, эритроциты.
Среди гинекологической патологии детей и подростков ювенильные маточные кровотечения составляют от 10 до 30 процентов. Ювенильные кровотечения приводят, со временем, к стойким нарушениям менструальной и генеративной функций, к гормонально обусловленным заболеваниям. Основным осложнением данного заболевания является быстрое развитие постгеморрагической железодефицитной анемии [1, 2, 3, 4]. Используемые в настоящее время методы лечения анемии не являются высокоэффективными, так как не направлены прицельно на улучшение морфофункциональ-ного звена эритрона. Вследствие этого у детей часто наблюдаются рецидивы малокровия.
Основным способом остановки ювенильного маточного кровотечения является гормонотерапия. Однако эстрогенсодержащие препараты угнетают красный росток костного мозга. Восстановление показателей красной крови, как правило, состоит из назначения препаратов железа в пероральной форме. Гемотрансфузии и парентеральное введение препаратов железа в период полового созревания нежелательны вследствие возможных ближайших и отдаленных побочных эффектов и осложнений.
Несмотря на накопленный обширный фактический материал, до настоящего времени не существует единого мнения в оценке роли различных механизмов в развитии анемии у подростков и степени нарушения эри-трона при ювенильных маточных кровотечениях. В связи с этим возникла необходимость проведения комплексной и сравнительной оценки морфологического и функционального статуса зрелых циркулирующих эри-троцитарных клеток с использованием современных методов исследования.
Целью исследования явилось изучение особенностей структурно-метаболического статуса эритроцитов и механизмов нарушения периферического звена эритрона при ювенильных маточных кровотечениях.
Материал и методы исследования. Проведено комплексное обследование 100 девушек-подростков в возрасте от 11 до 18 лет. У большинства подростков менструальный цикл к моменту кровотечения не установился. Длительность маточного кровотечения варьировала в пределах от 10 до 97 дней. Пациентки были распределены по группам.
Первую (контрольную) группу составили 20 соматически здоровых девушек без признаков нарушения менструальной функции, не страдающие железодефицит-ной анемией. Во вторую группу вошли 20 девушек-подростков, страдающих ювенильными маточными кровотечениями без развития анемии. Третья (основная) группа включала 60 девушек-подростков, страдающих ювенильными маточными кровотечениями, осложненными развитием железодефицитной анемии различной степени тяжести.
Диагностика ювенильных маточных кровотечений проводилась с помощью клинических (анамнез, гинекологическое исследование), лабораторных (общеклинические, биохимические, гемостазиологические, гормональные, кольпоцитологические, бактериоскопические) и инструментальных (УЗИ, рентгенография, вагиноско-пия) методов исследования. Пациентки с заболеваниями системы крови, патологией печени, щитовидной железы и тубинфицированные в исследование не включались.
Оценка морфофункционального состояния эритрона проводилась с применением современных фундаментальных методов исследования. Показатели периферической крови (эритроциты, ретикулоциты, гемоглобин, цветной показатель, гематокрит) определяли стандартными гематологическими методами. Концентрацию железа в сыворотке крови исследовали стандартным диагностическим набором фирмы "СОИМЛУ". Трансферрин и общую железосвязывающую способность сыворотки определяли биохимическим методом с помощью наборов фирмы "ЬаЬеша" (Чехия) — Био-Ла-
□4(5) апрель 2001 С;4(?гъ и^тя Bc7jy36acce
СТРУКТУРНО-МЕТАБОЛИЧЕСКИЙ СТАТУС ЭРИТРОЦИТОВ _ПРИ ЮВЕНИЛЬНЫХ МАТОЧНЫХ КРОВОТЕЧЕНИЯХ
Тест. Количественную оценку сульфгидрильных групп и липопротеинового комплекса в эритроцитах периферической крови производили методом цитофотометрии. Для вышвления SH—групп мазки крови окрашивали по методу Chevremont et Frederick [5]. Липопротеиновый комплекс в эритроцитах периферической крови выявляли по методу Barenbaum [6] с применением жженого судана черного В. Измерение оптической плотности проводили на цитофотометре "Люмам И2". На основании полученных данных рассчитывали концентрацию изучаемыи субстратов на единицу клеточной поверхности в условных единицах оптической плотности, строили эритрограммы и определяли средние значения показателей в каждой группе обследованных [7]. Определение величины сухой массы эритроцитов производили методом ОП1 интерферометрии [8] с помощью поляризационно—интерференционного микроскопа "Biolar PI". Поверхностную архитектонику эритроцитов периферической крови оценивали методом сканирующей электронной микроскопии. Образны! крови готовили по методике Г.И. Козинца с соавт. [7]. Полученные образцы изучали в сканирующем электронном микроскопе "РЭМ"—200. На каждом образце у 50 произвольно выбранных эритроцитов измеряли диаметр и размер центральной впадины. Соотношение различных морфологических типов эритроцитов изучали из 1000 клеток у каждой пациентки, вымисляли процентное соотношение каждого типа клеток. При этом использовали классификацию, предложенную Г.И. Ко-зинцом c соавт. [7].
Результаты исследования. При изучении анамнестических данныга, обращает на себя внимание высокий удельный вес девушек, матери который страдали юве-нильными маточными кровотечениями с развитием малокровия, анемиями во время беременности, экстраге-нитальной патологией и гестозом. Пациентки с анемией на фоне ювенильных маточных кровотечений чаще страдали инфекционными заболеваниями и имели экс-трагенитальную патологию. Установлено, что при юве-нильных маточных кровотечениях к анемии склонны, как правило, пациентки с имеющимся латентным дефицитом железа, гиперэстрогенным гормональным фоном и рецидивирующим характером заболевания.
Изучение эритрона показало, что у пациенток, страдающих ювенильными маточными кровотечениями без развития анемии, отмечалась умеренная пролонгированная депрессия показателей периферической красной крови. Цитоспектрофотометрическое исследование свидетельствовало о качественной неполноценности циркулирующих эритроцитов. При этом, одновременно с резким уменьшением средней концентрации тиоловых соединений и уровня липопротеидов, вытвлялась глубокая перестройка эритроцитарной популяции с увеличением доли клеток с пониженным и низким содержанием изучаемых субстратов. Их суммарное содержание составило 52,4 %, что в 2 раза превышало соответствующие показатели контрольной группы (P < 0,05). У пациенток с ювенильными кровотечениями отмечено появление в кровеносном русле форменных элементов с предельно низкой концентрацией SH-групп (0,15 - 0,29 усл. ед.) и липопротеидов (менее 0,40 усл. ед.), не встречающихся в крови у здоровыга девушек (P < 0,02). Данная тенденция сохранялась и усугублялась при развитии анемии.
Анализ процентного распределения эритроцитов по величине сухой массы у больных с ювенильными маточ-
ныти кровотечениями (с развитием анемии и без таковой) показал, что основная часты клеток имела сухую массу в пределах 20-29 пг, в то время как в контролы-ной группе — 30-39 пг (P < 0,05). Доля клеток с массой 30-39 пг и выше значителыно уменышаласы, соответственно степени выраженности анемии (P < 0,05). Увеличился пул «очены легких» клеток с содержанием плотный веществ менее 20 пг (P < 0,01). Это свидетелыству-ет о нарушении гемоглобинсинтетических процессов в эритронормобластах костного мозга.
Вышвлена отчетливая тенденция морфологической перестройки эритроцитарной популяции. При ювенилы-ны х маточны х кровотечениях без развития анемии, на фоне достоверного снижения процента двояковогнутых дискоцитов, определялосы существенное возрастание количества трансформированных элементов, находящихся на различных стадиях дегенерации. Наиболее существенное увеличение доли видоизмененных форм эритроцитов было зарегистрировано при рецидивирующем течении заболевания, когда суммарное содержание переходный, предгемолитических, дегенеративно измененные элементов в 2 раза превышало их количество в контролыной группе (P < 0,015). При анемии на фоне маточных кровотечений также достоверно снижалось количество нормалыныга двояковогнутых дискоцитов (P < 0,015). Одновременно с этим возрастала доля жизнеспособны х переходны х форм клеток, главны м образом за счет увеличения эритроцитов с гребнем, с множественными выростами и в виде тутовой ягоды!. Выраженная сфероцитарная и стоматоцитарная трансформация элементов красной крови обусловила значителыное увеличение процента необратимо измененные предгемолитических эритроцитов. Вместе с тем, быт зарегистрирован высокий уровены дегенеративных форм (P < 0,01).
Таким образом, у девушек, страдающих ювенилыны-ми маточными кровотечениями, наблюдается структурная, метаболическая и функционалыная дестабилизация эритроцитарныга клеток. Вышвленныге нарушения поверхностной архитектоники эритроцитов, липопротеид-ной композиции цитомембран, содержания тиоловыи соединений, достигают своего максималыного проявления с развитием и усугублением степени железодефи-цитной анемии.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Кобозева Н.В., Кузнецова М.Н., Гуркин Ю.А. Гинекология детей и подростков: Руководство для врачей. — М., 1988. - 296 с.
2. Руководство по эндокринной гинекологии. /Под ред. Вихляевой Е.М. - М., 1997. - С. 307-342.
3. Коколина В.Ф. Ювенильные маточные кровотечения. -М., 1997. - 218 с.
4. Гуркин Ю.А. Гинекология подростков. - СПб., 2000. -С. 193-226.
5. Chevremont M., Frederick I. Une nouvelle methode histo-chemigue de mise en evidence des substances a fractions sulfydrile //Arch. Biol. - 1943. - Vol. 54. - P. 589-593.
6. Barenbaum M.C. The cytochemical demonstration for lipids in blood and bone marrow cell //Nature. - 1956. - Vol. 174. - P. 190-195.
7. Козинец Г.И., Котельников В.М., Гольдберг В.Е. Цитофото-метрия гемопоэтических клеток. - Томск, 1986. - 224 с.
8. Гольдберг Е.Д., Степанова Е.И., Костарева И.В. Интерференционная микроскопия в гематологии. - Томск, 1983. - 100 с.
с/^иь и^Ъя вс7^узбассе П4(5) апрель 2001
