CC BY
245
ЛИТЕРАТУРА
1. Бутерин С.П., Крыжановский С.Г. Флебосклерозирую-щее лечение варикозной болезни вен нижних конечностей // Труды 5-ой конф. ассоциации флебологов России. - М 2004. - С.168-169.
2. Гервазиев В. Б. Скрытое выключение перфорантных и варикознорасширенных вен нижних конечностей при хронической венозной недостаточности // Хирургия.
- 1999. - № 5. - С.55-58.
3. Константинова Г.Д., Зубарев А.Р., Градусов А.Р. Флебология. — М.: Видар — М., 2000. — 160 с.
4. Савельев В. С. Лечение трофических язв венозной этиологии / Пособие для врачей. — М., 2000. — 22 с.
5. Фенчин К.М. Заживление ран. — Киев,1979. — 168 с.
6. Corradi L., Colombo G, Ravera E, et al. Clinical Interest of Once-Daily Felodipine Extended-Release in Patients with Mixed and Exertional Angina // Clin Drag Invest. — 1995.
- Vol. 9, № 6. - P.324-333.
Адрес для переписки:
670047, Улан-Удэ, ул. Павлова 12, Республиканская клиническая больница им. Н.А.Семашко, профессору Жигаеву Геннадию Федоровичу. Тел. (3012) 233624
© ШАНТАНОВА Л.Н., АЛЕКСЕЕВА Э.А., ХОБРАКОВА В.Б., РАДНАЕВАД.Б. - 2009
СТРЕССПРОТЕКТИВНЫЕ И ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА СОКА CALLISIA FRAGRANS WOOD
Л.Н. Шантанова, Э.А. Алексеева, В.Б. Хобракова, Д.Б. Раднаева
(Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор — д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов, лаборатория безопасности биологически активных веществ, зав. — д.б.н., проф. Л.Н. Шантанова, лаборатория экспериментальной фармакологии, зав. — д.м.н., проф. С.М. Николаев; Бурятский государственный университет, г. Улан-Удэ, ректор — чл.-корр. РАО, проф. С.В. Калмыков, кафедра анатомии и физиологии медицинского факультета,
зав. — к.м.н., доц. Э.А. Алексеева)
Резюме. Установлена стресспротективная и иммуномодулирующая активность сока, полученного из побегов Callisia fragrans Wood. Выявлено, что указанные свойства испытуемого фитосредства обусловлены ингибированием процессов свободнорадикального окисления и повышением активности эндогенной антиоксидантной системы.
Ключевые слова: Каллизия душистая, стресспротективная и иммуномодулирующее действие, антиоксидантная активность.
STRESS-PROTECTIVE AND IMMUNOMODULATING PROPERTIES OF THE CALLISIA FRAGRANS WOOD SHOOTS
L.N. Shantanova, E.A. Alekseeva, V.B. Khobrakova, D.B. Radnaeva (Institute of the General and Experimental Biology of the Siberian Branch of the Russian Academy of Science,
Ulan-Ude; Buryat State University, Ulan-Ude)
Summary. The stress-protective and immunomodulating activity of the juice from the shoots of Callisia fragrans WOOD has been studied. It has been shown that these properties of the phytoremedy in question are due to inhibition of free radical oxidation and increased activity of the endogenous antioxidant system.
Key words: Callisia fragrans W., stress-protective and immunomodulating properties, antioxidant activity.
В настоящее время одной из актуальных проблем медицины является проблема адаптации человека к окружающей среде, что связано с возрастанием экологосоциального прессинга, действующего на человека на современном этапе развития общества. Одним из путей повышения сопротивляемости организма является применение адаптогенов, представленных как синтетическими препаратами, так и средствами природного происхождения. Последние обладают рядом преимуществ, к числу которых относятся широкий спектр фармакологической активности; плавное нарастание фармакологического эффекта, низкая токсичность и отсутствием неблагоприятных побочных реакций при длительном приеме [10]. Последнее имеет особое значение ввиду широкого распространения лекарственной болезни — многочисленных осложнений, возникающих при приеме синтетических препаратов. В последние годы широкую популярность приобрело растение Каллизия душистая (Callisia fragrans Wood.), более известная под названием «золотой ус». Каллизия душистая относится к семейству Commelimceae), родиной растения являются тропические области Америки, где встречается несколько десятков видов данного семейства. В России этот вид легко культивируется, хорошо произрастает в домашних условиях. Настои и отвары побегов калли-зии душистой используют в качестве иммуномодулирующего средства для лечения самых разнообразных заболеваний от ОРВИ до злокачественных опухолей [5]. В листьях и стеблях каллизии душистой выявлено наличие простых и сложных сахаров, аминокислот, орга-
нических кислот, фенольных соединений, тритерпено-вых соединений, алколоидов, микроэлементов [2,6]. В то же время данные о фармакологических свойствах каллизии душистой в научной литературе практически отсутствуют.
Целью настоящей работы явилось определение стресспротективной и иммуномодулирующей активности сока каллизии душистой.
Материалы и методы
Объектом исследования явился сок, полученный из побегов культивируемого растения Callisia fragrans Wood. (ТУ 9373 03533369-07 «Побеги золотого уса (каллизии душистой) свежие»), содержащий в качестве консерванта спирт этиловый ректификованный (15%). Средство разработано и предоставлено ЗАО «Вифитех» (п. Оболенск, Московская обл.). Перед экспериментами с целью исключения влияния спирта сок деалкоголизировали общепринятым методом.
Эксперименты проведены на крысах линии Wistar обоего пола массой 180-200 г и мышах-самцах линии СВА и F1 (СВАхС57В1/6) обоего пола массой 20-22 г. Иммобили-за1ционный стресс воспроизводили общепринятым методом путем фиксации белых крыс в положении на спине в течение 24 ч. Животным опытной группы внутрижелудоч-но вводили сок каллизии душистой в объеме 5,0 мл/кг профилактически в течение 7 дней до стрессорного воздействия (1 раз в день за 30 минут до кормления). Животные контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды по аналогичной схеме. На 7 сутки эксперимента животных контрольной и опытных групп подвергали иммобилизационному стрессу, после чего животных декапитировали под легким эфирным наркозом и
оценивали выраженность стрессорных изменений внутренних органов животных и интенсивность процессов свободнорадикального окисления. Для этого определяли массу надпочечников, тимуса и селезенки; клеточность им-мунокомпетентных органов, а также количество деструктивных повреждений в слизистой оболочке желудка. Для каждого вида повреждений подсчитывали «индекс Паулса» (ИП) [1]. Интенсивность процессов свободнорадикального окисления оценивали по накоплению малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови [11]. О состоянии антиоксидантной системы судили по активности суперок-сиддисмутазы (СОД) [13] и каталазы [3], а также содержанию восстановленного глутатиона в крови [14].
Иммуносупрес-сивное состояние у мышей воспроизводили путем внутриже-лудочного введения азатиоприна в дозе 50 мг/кг в течение 5 дней [4]. Животным опытной группы на фоне азатиоприновой иммуносупрессии инт-рагастрально вводили сок каллизии душистой в объеме 5,0 мл/кг.
Первое введение данного средства осуществляли на 6 день эксперимента (по окончании введения азатиоприна) и затем на протяжении 14 дней 1 раз в сутки за 30 минут до кормления. Мыши контрольной группы получали дистиллированную воду в соответствующем объеме по аналогичной схеме. На 20 день эксперимента определяли массу и клеточность иммунных органов — тимуса и селезенки; количество антителообразующих клеток (АОК) — в реакции локального гемолиза [15]; функциональную активность макрофагов — в реакции фагоцитоза перитонеальных макрофагов мышей в отношении Staphyllococcus aureus in vitro [12]; влияние на гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) — согласно стандартной методике локальной ГЗТ [7]. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием критерия Стьюдента и критерия Манна-Уитни [9].
Результаты и обсуждение
Установлено, что в результате 24-часовой иммобилизации у животных развивался комплекс изменений во внутренних органах, характерных для стресс-реакции, т.н. «триада Селье»: гипертрофия надпочечников, инволюция иммунокомпетентных органов, появление деструкций в слизистой оболочке желудка, а также уменьшение числа ядросодержащих клеток (ЯСК) в тимусе и селезенке (табл. 1, 2).
Профилактическое введение животным сока калли-зии душистой в указанном объеме не оказывает значимого влияния на выраженность инволюции иммуно-компетентных органов при стрессе, вызванном иммобилизацией. При этом, испытуемое средство предупреждает гипертрофию надпочечников: их масса была на 20% меньше, чем у крыс контрольной группы, а также способствует увеличению клеточности тимуса и селезенки соответственно на 36 и 49% по сравнению с аналогичными показателями у крыс контрольной группы (табл. 1).
Профилактическое введение сока каллизии душистой препятствовало развитию глубоких деструкций слизистой оболочки желудка белых крыс: у животных опытной группы образования полосовидных язв не наблюдалось, тогда как у крыс контрольной группы данный вид повреждений отмечался в 100% случаев. Эрозии у животных опытной группы встречались лишь в 25% случаев при 100% — в контроле. Соответственно, индекс Паулса для эрозий у животных, получавших испытуемое средство, был меньше, чем таковой у крыс контрольной группы и составил 0,25 против 1,0 в контроле (табл. 2).
Наряду с этим, установлено, что 24-часовая иммобилизация сопровождается выраженной индукцией процессов свободнорадикального окисления и параллельно развивающиеся нарушения антиоксидантного статуса организма. Профилактическое введение испытуемого средства оказывало выраженное антиоксидан-тное действие, о чем свидетельствует снижение в сыворотке крови концентрации МДА на 40%, увеличение содержания восстановленного глутатиона— на 20%, а также повышение активности каталазы — на 54% и СОД
Таблица 1
Влияние сока каллизии душистой на массу и клеточность внутренних органов белых крыс при
иммобилизационном стрессе
Группы животных Масса органов, % ЯСК, х106 /орган
тимус селезенка надпочечники тимус селезенка
Интактная 0,10+0,007 0,44+0,023 0,022+0,0002 32,1+1,40 38,1+2,83
Контрольная (стресс) 0,06+0,004 0,35+0,008 0,033+0,0002 21,7+1,92 22,6+1,15
Опытная (стресс+сок каллизии) 0,08+0,006 0,31+0,034 0,026+0,0001* 29,5+1,71* 33,7+3,08*
Примечание: * - здесь и далее означает значимость различий по сравнению с данными животных контрольной группы при р<0,05; ЯСК — ядросодержащие клетки.
Таблица 2
Влияние сока каллизии душистой на выраженность повреждений слизистой оболочки желудка и показатели процессов свободнорадикального окисления белых крыс при иммобилизационном стрессе
Показатели Группы животных
Интактная Контрольная (стресс) Опытная (стресс + сок каллизии)
Точечные кровоиз- лияния % поражения животных 0 42 50
Среднее число дестр. на 1 животное 0 2,0 1,0
Индекс Паулса 0 0,84 1,0
Эрозии % поражения животных 0 100 25
Среднее число дестр. на 1 животное 0 1,0 1,0
Индекс Паулса 0 1,0 0,25
Полос. язвы % поражения животных 0 100 0
Среднее число дестр. на 1 животное 0 1,6 0
Индекс Паулса 0 1,6 0
МДА, мкмоль/мл 7,4+0,48 14,9+2,38 9,0+0,95*
Каталаза, мкат/л 1,07+0,11 0,63+0,04 0,97+0,02
СОД, мкмоль/мл 21,1+1,00 4,7+0,52 15,0+0,82*
Восст. глутатион, мкмоль/мл 354,2+25,81 248,8+19,03 295,6+18,55*
— в три раза по сравнению с аналогичными показателями животных контрольной группы.
В следующей серии экспериментов было исследовано влияние сока каллизии душистой на состояние иммунной системы при азатиоприновой иммуносупрессии (табл. 3, 4).
нальную активность перитонеальных макрофагов в 1,5 раза по сравнению с аналогичными показателями у мышей контрольной группы, что соответствует уровню физиологической нормы (табл. 4).
Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что профилактическое введение сока каллизии ду-
^ г ~ шистой в объеме 5,0 Таблица 3
Влияние сока каллизии душистой на массу и клеточность тимуса и селезенки мышей при азатиоприновой иммуносупрессии
Группы животных Тимус Селезенка
Относительная масса, % ЯСК, х106/орган Относительная масса, % ЯСК, х 106 /орган
Интактная 0,10+0,007 32,1+1,42 0,44+0,023 38,1+2,80
Контрольная (азатиоприн+Н2О) 0,08+0,004 19,2+1,93 0,37+0,008 18,3+1,12
Опытная (азатиоприн+ сок каллизии) 0,09+0,007 26,6+1,51* 0,47+0,038* 24,6+2,19*
Примечание. ЯСК — ядросодержащие клетки.
Как следует из приведенных таблиц, на фоне введения азатиоприна у животных развивается выраженное иммунодепрессивное состояние, о чем свидетельствует значимое снижение массы иммунокомпетентных органов, их клеточности, угнетение реакции ГЗТ и активности клеточного звена иммунитета. Установлено, что профилактическое введение сока каллизии душистой в объеме 5,0 мл/кг оказывало выраженное иммуномодулирующее действие, препятствуя иммуносупрес-сивному действию азатиоприна (табл. 3). В частности, масса тимуса и селезенки мышей опытной группы была соответственно на 12 и 27% выше, чем в контроле. Под влиянием испытуемого средства возрастала также кле-точность иммунных органов, число ядросодержащих клеток у животных опытной группы было в среднем на 25% больше по сравнению с показателями контрольной группы.
Таблица 4
Влияние сока каллизии душистой на выраженность реакции гиперчувствительности замедленного типа, количество антителообразующих клеток и функциональную активность макрофагов при азатиоприновой иммуносупрессии у мышей
мл/кг на фоне им-мобилизационного стресса и азатиопри-новой иммуносупрессии оказывает стресспротективное и иммуномодулирующее действие, уменьшая выраженность стрессорных изменений во внутренних органах животных и нарушений в системе иммунитета. Установлено, что механизм его антистрессорного действия связан с ингибированием процессов свободнорадикального окисления и повышением мощности эндогенной ан-тиоксидантной системы организма животных, о чем свидетельствует уменьшение концентрации продуктов пероксидации липидов и повышение мощности эндогенной антиоксидантной системы. Поскольку известно, что стрессорная реакция, независимо от этиологии повреждающего фактора, сопровождается развитием иммунодефицитных состояний [8], можно полагать, что выявленное иммуномодулирующее действие испытуемого средства является одним из ведущих механизмов реализации его стресспротективной активности.
Антиоксидантное действие испытуемого средства, по-видимому, связано с опосредованным влиянием комплекса полисахаридов, входящих в его состав, способных связывать металлы переменной валентности, в
частности, ионы железа и тем самым предотвращать
Показатели Группы животных
Интактная Контрольная (азатиоприн +Н2О) Опытная (азатиоприн+ каллизия)
Индекс реакции ГЗТ, % 22,1+1,80 14,2+1,27 21,7+2,35*
Количество АОК на селезенку 70773+3061 33075+2831 79136+6797*
на 106 спленоцитов 440+33 271+18 432+48*
Показатели фагоцитоза активность 80,33,08 48,7+4,39 75,2+1,92*
интенсивность 7,9+0,43 4,2+0,17 6,6+0,22*
Курсовое введение испытуемого средства мышам на фоне азатиоприновой иммуносупрессии сопровождалось повышением индекса реакции ГЗТ до уровня физиологической нормы, а также активацией гуморального звена иммунного ответа, о чем свидетельствует увеличение количества АОК как в абсолютных, так и в относительных значениях соответственно в 2,4 и 1,8 раз по сравнению с аналогичными показателями у мышей контрольной группы. Наряду с этим, показано, что введение сока каллизии душистой повышало функцио-
ЛИТЕРАТУРА
1. Амосова Е.Н, Зуева Е.П., Разина Т.Г. Поиск новых противоязвенных средств из растений Сибири и Дальнего Востока// Экспер. и клинич. фармакология. — 1998. — Т 61. — С.31-35.
2. Анцупова Т.П., Федухина Г.П. Фитохимическое изучение дихоризандры // Сб. науч. тр. серия «Химия и биол.
развитие свободнорадикальных процессов. Кроме этого, биологически активные соединения, входящие в состав сока каллизии душистой и, прежде всего, витамины и некоторые микроэлементы, оказывают опосредованное антиокислитель-ное действие, выражающееся в способности защищать от окислительной деструкции важнейшие эндогенные соединения, участвующие в антиокси-дантной защите: супероксиддисмутазу, каталазу и тио-ловые соединения, способствуя тем самым усилению и пролонгированию их эффекта. Таким образом, испытуемое средство, содержащее комплекс биологически активных веществ, обеспечивает активацию ферментов антиокислительной защиты организма, восполнение пула структурных антиокислителей и уменьшение расхода эндогенных резервов антиоксидантов, что в конечном итоге обеспечивает инактивацию агрессивных продуктов пероксидации липидов.
акт. в-ва». — Улан-Удэ, 2004. — Вып. 9. — С.154-156.
3. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. и др. Методы определения активности каталазы // Лабор. дело. — 1988. - № 1. - С.16-19.
4. Лазарева Л.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета. - М., 1985. - 255 с.
5. Огарков В.Н. Золотой ус в лечении болезней века. -СПб., 2006. - 128 с.
6. Оленников Д.Н., Зилфикаров И.Н., Торопова А.А., Ибрагимов Т.А. Химический состав сока каллизии душистой Callisia fragrans W. и его антиоксидантная активность (in vitro) // Химия раст. сырья. — 2008. — № 4. — С.95-100.
7. Петров Р.В. Хаитов Р.М., Чередеев А.Н. и др. Иммуно-фармакологические подходы к оценке иммуномодуляторов // Иммуномодуляторы. — М., 1987. — С.9-10.
8. Прокопенко Л.Г., Афанасьев В.А., Авакян А.Р. Иммуно-метаболические аспекты холодового стресса. — Курск, 1998. - 167 с.
9. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. — М., 2000. — 263 с.
10. Сур С.В., Гриценко Э.Н. Проблемы и перспективы разработки и внедрения современных лекарственных средств растительного происхождения // Фарматека. — 2001. — № 9. — С.10-14.
11. Темирбулатов Р.А., Селезнев Е.И. Метод повышения ин-
Адрес для переписки:
670024, г. Улан-Удэ, ул Добролюбова 35. кв.16, Алексеева I
тенсивности свободнорадикального окисления липидсодержащих компонентов крови и его диагностическое значение // Лабор. дело. — 1981. — № 4. — С.209-211.
12. Фрейдлин И.С. Использование культуры мышиных перитонеальных макрофагов в качестве модели для изучения клеток мононуклеарной фагоцитарной системы организма и их изменений под влиянием биологически активных веществ: методич. рекомендации. — Л., 1976. — С.8-10.
13. Чевари С., Чаба И., Секей Й. Роль супероксиддисмута-зы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах // Лабор. дело. — 1985. — № 11. — С.678-681.
14. Anderson M.E. Glutathion: chemical, biochemical and medicinal aspects // Pt.A. — N.Y., 1989. — P.333-405.
15. Cunningham A.J. A method of increased sensitivity for detecting single antibodyforming cells // Nature. — 1965. — Vol. 207, № 5001. — P1106-1107.
Алексеевна, E-mail: [email protected]
СЛУЧАИ ИЗ ПРАКТИКИ
© ОСТАНКО В.Л., БЕЛОБОРОДОВА Е.В., ГИБАДУЛИНА И.О., БЕЛОБОРОДОВА Э.И. - 2009
ОЦЕНКА КОЛЛОИДНОЙ СТАБИЛЬНОСТИ ЖЕЛЧИ У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМИ ГЕПАТИТАМИ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ
В.Л. Останко, Е.В. Белобородова, И. О. Гибадулина, Э.И. Белобородова
(Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск, ректор — д.м.н., акад. РАМН, проф.
В.В. Новицкий, кафедра терапии факультета повышения квалификации и последипломной подготовки специалистов,
зав. — д.м.н., проф. Э.И. Белобородова)
Резюме. Цель данной работы — выявить структуру нарушений коллоидной стабильности пузырной желчи у больных с Хроническим вирусным гепатитом С (ХГС) и при сочетанном злоупотреблении алкоголя (ХГС+алк). Обследовано 100 больных: 50 — с «чистым» ХГС и 50 —ХГС+алк. В результате фракционного хроматического минутированного дуоденального зондирования с биохимическим исследованием состава пузырной желчи у обследованных больных нарушения биохимии пузырной желчи были диагностированы в 100% случаев (в сторону ее литогенности). Степень изменения основных биохимических показателей пузырной желчи зависела от этиологии заболевания. Полученные данные необходимо учитывать в лечебной тактике ведения больных с хроническим вирусным гепатитом С и при сочетанной этиологии.
Ключевые слова: хронический вирусный гепатит С, алкоголь, биохимический состав желчи.
THE EVALUATION OF COLLOID STABILITY OF BILE IN PATIENTS WITH CHRONIC HEPATITIS OF DIFFERENT ETHIOLOGY
V.L. Ostanko, E.V. Beloborodova, I.O. Gibadulina, E.I. Beloborodova (Siberian State Medical University)
Summary. The presented results show the structure of deteriorations of colloid stability of gall bile in the patients with chronic viral hepatitis C and in the patients with both chronic viral hepatitis C and alcohol abuse. The object of this study were 100 patients: 50 patients with chronic viral hepatitis C and 50 patients both with chronic viralhepatitis C and alcohol abuse. In results of fractious chromatic minutes duodenal intubationg with biochemical study of the composition ofgall bile in the patients with chronic viral hepatitis C and patients with alcohol abuse. The degree of the change in the main biochemical factors in gall bile depended on etiology of a diseases. The data obtained should be taken into account in the treatment of patients with chronic viral hepatitis C and mixed etiology.
Key words: chronic viral hepatitis C, alcohol abuse, biochemical composition, gall bile.
На сегодняшний день одной из наиболее актуальных проблем современной гастроэнтерологии является проблема хронических вирусных гепатитов [1,2,5]. Наряду с этим Российская Федерация занимает лидирующую позицию в мире по потреблению алкоголя. Ряд авторов доказали быстропрогрессирующее течение хронического гепатита С на фоне повреждающего действия алкоголя, который «провоцирует» активацию НCV-ин-фекции и приводит к быстрому формированию цирроза печени [1,3,6].
Доказано, что клиническое течение хронических вирусных гепатитов крайне вариабельно, что и обуслов-
ливает различный по продолжительности период формирования цирроза печени. Нарушение оттока желчи с развитием внутрипротокового холестаза в сочетании с инфекционным фактором может приводить к более выраженной альтерации паренхимы печени и изменениям физико-химического состава желчи, проявляющимся, прежде всего, ее коллоидной дестабилизацией. Все вышеперечисленное обусловливает образование «порочного круга» взаимосвязанных патологических процессов в гепатобилиарной системе, значительно повышая риск развития быстропрогрессирующего фиброза в печени у данной категории больных.
