CC BY
39
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ
Стимуляция опосредуемого циклооксигеназой окисления ненасыщенных жирных кислот в лейкоцитах кролика ультрафиолетовым излучением
А.К.Аносов, Н.С.Белакина
Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова, кафедра общей и медицинской биофизики медико-биологического факультета, Москва (зав. кафедрой — проф. А.Н.Осипов)
~\ Исследована стимуляция опосредуемого циклооксигеназой (ЦОГ) окисления полиненасыщенных жирных кислот (ЦОГ-зависимого перекисного окисления липидов) в изолированных лейкоцитах кролика при УФ-облучении в отсутствие ионов Саг+ в среде и последующей инкубации клеток при 37 °С. Установлено, что (1) активация ЦОГ-зависимого окисления ненасыщенных жирных кислот в лейкоцитах кролика в исследованных условиях наиболее выражена при воздействии УФС-излучения в дозе 1,28х102 эйнштейн/м2 и последующей инкубации в течение 60 мин при 37 °С; (2) фотоиндуцированная активация ЦОГ-зависимого окисления ненасыщенных жирных кислот в лейкоцитах кролика сопровождается угнетением хемилюминесцентных ответов этих клеток на стимуляцию форбол-12-миристат-13-ацетатом.
_1 Ключевые слова: УФ-излучение, лейкоциты, циклооксигеназа, окисление жирных кислот, активация
Stimulation of the Cyclooxygenase-Mediated Unsaturated Fatty Acids Oxidation in the Rabbit Leukocytes by Ultraviolet Irradiation
A.K.Anosov, N.S.Belakina
PirogovRussia n National Research Medical University, Medical-Biological Faculty,
Department of the General and Medical Biophysics, Moscow (Head of the Department — Prof. A.N.Osipov)
~\ Therapeutically important cyclooxygenase-mediated unsaturated fatty acids oxidation stimulation in the isolated rabbit leukocytes during and after UV irradiation in the absence of Ca2+ in the incubation media was studied. It was shown that (1) photoinduced activation of the cyclooxygenase-dependent unsaturated fatty acids oxidation in the rabbit leukocytes is maximal after irradiation of the cells by UVC radiation in the dose 1,28x102 einstein/m2 with following incubation during 60 min at 37 °C; (2) photoinduced activation of the cyclooxygenase-dependent unsaturated fatty acids oxidation in the rabbit leukocytes is accompanied by inhibition of these cells chemiluminescence responses to forbol-12-miristate-13-acetate stimulation.
_l Key words: UV radiation, leukocytes, cyclooxygenase, fatty acids oxidation, activation
В современной медицине активно развиваются методы терапии, основанные на введении пациенту изолированных клеток [1-4]. В целях замещения поврежденных тканей пациента и восстановления функций пораженных органов чаще всего вводят стволовые клетки [1, 2]. Однако вводимые клетки могут быть и специализированными. В этом случае их применяют как источник биологически
Для корреспонденции:
Аносов Александр Константинович, кандидат биологических наук, доцент кафедры общей и медицинской биофизики медико-биологического факультета Российского национального исследовательского медицинского университета им. Н.И.Пирогова
Адрес: 117997, Москва.ул. Островитянова, 1
Телефон: (495) 434-4474
E-mail: aleksandranosov54@mail.ru
Статья поступила 11.11.2014, принята к печати 24.12.2014
48
активных соединений, продукция которых в организме пациента, по тем или иным причинам, нарушена. Примерами такого подхода могут служить терапия сахарного диабета путем имплантации больному р-клеток поджелудочной железы [3] и введение клеток надпочечников пациентам с нарушенной функцией этих эндокринных желез [4]. Иногда больному вводят его собственные клетки, предварительно модифицированные вне организма для стимуляции продукции ими необходимых активных веществ. Этот подход используется при терапии с помощью фотофереза и при фотогемотерапии. При фотоферезе из крови больного изолируют лейкоциты, подвергают их in vitro ПУФА-воздействию (УФА-облучению в присутствии псораленов) и после этого возвращают в сосудистое русло [5, 6]. Фотогемотерапия состоит во введении пациенту его же крови, подвергнутой УФ-облучению вне организма [7, 8].
Стимуляция опосредуемого циклооксигеназой окисления ненасыщенных жирных кислот в лейкоцитах кролика
ультрафиолетовым излучением
Хотя эффективность фотогемотерапии не вызывает сомнений [7, 8], причины появления терапевтической активности у крови после УФ-облучения до сих пор изучены недостаточно.
Известно, что УФ-излучение способно стимулировать зависимое от циклооксигеназы (ЦОГ) окисление ненасыщенных жирных кислот в клетках крови [9, 10]. В нашей лаборатории было показано, что терапевтическая активность облученной крови в отношении модельного острого перитонита у крыс исчезает, если кровь облучается в присутствии ингибиторов ЦОГ [11]. Это позволяет предположить, что опосредуемые ЦОГ процессы имеют большое значение в появлении у крови терапевтической активности после УФ-облучения.
Вследствие недостаточной ясности причин появления терапевтической активности у крови после облучения условия проведения фотомодификации крови при применении фотогемотерапии до сих пор часто подбираются эмпирически. В клинике обычно для этого применяется промышленный стандартный аппарат для проведения фотогемотерапии («Изольда») [8]. Однако разработанный и утвержденный для этого устройства регламент проведения лечения также основан на эмпирических данных. В связи с этим значимой научной задачей, с точки зрения авторов, является оптимизация условий воздействия УФ-излучения на клетки крови, обеспечивающих усиление эффективности данного метода лечения.
Цель исследования состояла в определении условий УФ-облучения клеток крови (лейкоцитов), при которых воздействие излучения вызывало бы в клетках крови наибольшую стимуляцию значимого для проявления терапевтического действия окисления полиненасыщенных жирных кислот, катализируемого ЦОГ. Для этого исследовали характер определяемого активностью ЦОГ пострадиационного образования в лейкоцитах продуктов окисления жирных кислот при разных дозах облучения, разных спектральных диапазонах действующего УФ-излучения и разной продолжительности инкубации клеток после облучения. Было также изучено влияние зависимого от ЦОГ образования в лейкоцитах продуктов окисления жирных кислот на хемилюминесцентные ответы этих клеток при их стимуляции форбол-12-миристат-13-ацетатом (ФМА).
Материалы и методы
Работу проводили на общей фракции лейкоцитов периферической крови беспородных кроликов-самцов массой 2-3 кг. Лейкоциты выделяли из стабилизированной трех-замещенным цитратом натрия крови («чда», «Реахим», Россия, 5% водный раствор, pH 7,4, вводился в кровь в объемном соотношении 1:10) методом дифференциального центрифугирования после осаждения эритроцитов с помощью 6% раствора декстрана с молекулярной массой 500 000 («Sigma», США) [12]. Конечную концентрацию лейкоцитов в рабочей суспензии доводили до 2х106 кле-ток/мл. В качестве среды инкубации клеток использовали либо трис-HCI буфер (136 ммоль/л NaCI, 2,7 ммоль/л KCI, 10 ммоль/л трис, pH 7,4), либо фосфатный буфер (140 ммоль/л NaCI, 8 ммоль/л Na2HP04, 2 ммоль/л КН2Р04,
pH 7,4), приготовленные на бидистиллированной воде. Фосфатный буфер использовали также при измерении кинетики хемилюминесценции. Рабочую суспензию лейкоцитов во всех случаях хранили на льду при 2-4 0С.
Облучение суспензий лейкоцитов осуществляли в пластиковых открытых кюветах, сверху, при непрерывном перемешивании с помощью магнитной мешалки. Толщина облучаемого слоя клеточной суспензии составляла около 1 см. Для облучения применяли ртутно-кварцевую лампу БУВ-ЗОП, 78% УФ-излучения которой приходилось на длину волны 253,8 нм (УФС-диапазон). Для УФВ-облучения использовали ртутно-кварцевую лампу высокого давления ДРК-120 с жидкостным светофильтром, выделявшим из спектра испускания источника участок 270-370 нм (максимум интенсивности — при 313 нм, УФВ-диапазон).
Интенсивности облучения образцов, измеренные методом ферриоксалатной актинометрии [13], составляли 4,27х10'5и 3,27х10'5 эйнштейн/(м2хс) (~30 и ~23 Вт/м2) для УФВ- и УФС-облучателей соответственно. Дозу облучения меняли за счет варьирования длительности воздействия излучения.
Выраженность перекисного окисления липидов (ПОЛ) в образцах оценивали по содержанию продуктов этого процесса, вступающих в реакцию с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТБК-активных продуктов, ТБК-АП) [14]. Содержание ТБК-активных продуктов оценивалось в следующих образцах лейкоцитарных суспензий:
1. Необлученные клетки, подвергнутые инкубации в присутствии 0,098% этанола при 37 0С (контроль, этанол вводился в образцы в связи с применением в опытах этаноль-ного раствора ацетилсалициловой кислоты, см. ниже).
2. Клетки, подвергнутые инкубации при 37°С после перемешивания в течение времени, соответствующего продолжительности УФ-облучения в присутствии этанола (контроль на неспецифическое воздействие во время облучения).
3. Клетки, подвергнутые инкубации при 37 0С после УФ-облучения в разныхдозах в присутствии этанола.
4. Необлученные клетки, подвергнутые инкубации при 37 0С в присутствии 10 4 моль/л ацетилсалициловой кислоты (аспирина) (см. ниже).
5. Клетки, подвергнутые инкубации при 370С после перемешивания в течение времени, соответствующего продолжительности УФ-облучения в присутствии аспирина.
6. Клетки, подвергнутые инкубации при 37 0С после УФ-облучения в разныхдозах в присутствии аспирина.
Разница в содержании ТБК-активных продуктов ПОЛ в образцах клеток 3 и 1 или 2 далее будет обозначаться как общее накопление данных продуктов при соответствующей дозе облучения.
Вклад в общее накопление ТБК-активных продуктов ПОЛ в образцах клеток катализируемого ЦОГ окисления ненасыщенных жирных кислот (ЦОГ-зависимого ПОЛ) оценивали по ослаблению этого накопления необратимым ингибитором ЦОГ ацетилсалициловой кислотой (аспирином). Собственно величина опосредуемого ЦОГ накопления анализируемых продуктов (величина ЦОГ-зависимого ПОЛ, ЦОГ-ПОЛ) рассчитывалась как разница в содержании ТБК-активных продуктов ПОЛ в образцах, подвергав-
49
А.К.Аносов, Н.С.Белакина / Вестник РГМУ, 2015, № 3, с. 48-52
шихся воздействию в присутствии этанола (1-3) и аспирина (4-6). Поскольку величина фонового ЦОГ-зависимого ПОЛ (разница в содержании ТБК-активных продуктов ПОЛ между образцами 1 и 4, см. выше) достаточно сильно варьировала от серии к серии, в качестве контролей всегда использовались только значения этого показателя у применяемого в данный день препарата лейкоцитов. Следует также отметить, что в выбранной нами концентрации (10‘4 моль/л) аспирин обладает только специфическим действием [15]. Аспирин («Sigma», США) вводили в исследуемые образцы в виде этанольного раствора, медленно, при непрерывном перемешивании и комнатной температуре, за 15 мин до начала облучения. В контрольные образцы аналогичным образом вводили чистый этанол.
Кинетики активированной люминолом спонтанной и сти-мулированнойхемилюминесценции лейкоцитов регистрировали на люмиагрегометре фирмы «Chronolog Corporation» (США). В работе использовали коммерческий препарат лю-минола («Serva», США). Конечная концентрация люминола в кювете для измерений составляла 20 мкмоль/л. Все измерения хемилюминесценции клеток проводили при температуре 37 °С в течение 20 мин.
В этой серии экспериментов инкубация клеток после облучения (или просто перемешивания в течение соответствующего времени) при 37 °С не проводилась. Это было связано с тем, что сама по себе длительная инкубация существенно ослабляла хемилюминесцентные ответы лейкоцитов. Впрочем, как нами было показано ранее, ЦОГ-ПОЛ инициируется в лейкоцитах и непосредственно во время УФ-облучения [10], хотя и в других условиях (в присутствии ионов Са2+ в среде).
Достоверность различий во всех сериях экспериментов оценивалась с использованием критерия Стьюдента при уровне значимости р <0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
Судя по имеющимся в литературе данным [16], между стимуляцией клеток и началом опосредуемой ЦОГ продукции простагландинов (которая сопровождается форми-
рованием регистрируемых нами ТБК-активных продуктов ПОЛ) может наблюдаться латентный период, величина которого зависит от природы стимула. Однако имеется ли подобный латентный период при активации накопления продуктов ЦОГ-зависимого ПОЛ в лейкоцитах УФ-излучением, неизвестно. В связи с этим на первом этапе работы было исследовано влияние на зависимое от ЦОГ фотостимулированное накопление продуктов ПОЛ в суспензиях лейкоцитов времени инкубации клеток при 370С после УФС-облучения.
Оказалось, что при инкубации подвернутых облучению лейкоцитов в течение 15 мин регистрируемого увеличения определяемого ЦОГ накопления ТБК-активных продуктов ПОЛ в лейкоцитах УФС-излучение не вызывает. Это может быть проиллюстрировано следующим (выражено в процентах к контролю): максимальная величина ЦОГ-зависимого ПОЛ в исследованных клетках при облучении в дозе 3,84х10'2 эйнштейн/м2 и последующей инкубации составила (нормировано к контролю) 97 ± 22%, а в необлученных клетках, инкубируемых в тех же условиях после простого перемешивания в кювете для облучения, — 100 ± 16%.
В то же время увеличение продолжительности инкубации лейкоцитов при 37 0С после облучения до 60 мин привело к появлению достоверных различий в величинах ЦОГ-зависимого ПОЛ между облученными и необлученными образцами (табл. 1). Это иллюстрируется следующим. Если принять величину ЦОГ-ПОЛ в контроле, после перемешивания и инкубации, за 100%, то величина максимального ЦОГ-зависимого ПОЛ в облученных в дозе 3,84х10'2 эйнштейн/м2 клетках составит 262,5 ± 75%.
Таким образом, можно полагать, что (1) зависимое от ЦОГ окисление жирных кислот при его стимуляции в лейкоцитах УФС-излучением в отсутствие ионов Са2+ характеризуется наличием латентного периода между фотостимуляцией клеток и началом накопления в их суспензии определяемых ЦОГ ТБК-активных продуктов окисления и (2) величина этого латентного периода при инкубации лейкоцитов после УФС-облучения при 37 °С в исследованном диапазоне доз составляет более 15, но менее 60 мин.
Таблица 1. Содержание ТБК-АП ПОЛ в образцах суммарной фракции лейкоцитов кролика, подвергнутых коротковолновому
УФ-облучению в различных дозах с последующей инкубацией (60 мин при 37°С) в среде без ионов Са2+
Контроль Опыт
(перемешивание) (УФ-облучение)
ТБК-АП, % ТБК-АП, %
Добавка по отношению ЦОГ-ПОЛ Доза, эйнштейн/м2 Добавка по отношению ЦОГ-ПОЛ
к контролю к контролю
Этанол 100 ± 6 21 ± 18,5 0 Этанол 100 ± 6 21 ± 18,5
Аспирин 79 ± 12,5 0 Аспирин 79 ± 12,5
Этанол 92 ± 17 20 ± 25 0,0128 Этанол 175 ±21 96 + 29*
Аспирин 79±8 0,0128 Аспирин 79±8
Этанол 108 ± 17 25 ± 34 0,0256 Этанол 179 ± 12,5 75 ± 25
Аспирин 83± 17 0,0256 Аспирин 104 ± 12,5
Этанол 150 ±21 33 + 35,5 0,0384 Этанол 225 ±8 87,5 + 25
Аспирин 117± 14,5 0,0384 Аспирин 137,5 ± 17
*—различия с соответствующим контролем достоверны при р <0,05
SO
Стимуляция опосредуемого циклооксигеназой окисления ненасыщенных жирных кислот в лейкоцитах кролика
ультрафиолетовым излучением
Таблица 2. Содержание ТБК-АП ПОЛ в образцах суммарной фракции лейкоцитов кролика, подвергнутых коротковолновому (УФС) и средневолновому (УФВ) ультрафиолетовому облучению с последующей инкубацией (60 мин при 37°С) в среде без ионов Са2+
УФС-облучение (доза — 1,28х10'2 эйнштейн/м2) УФВ-облучение (доза — 1,57х10'2 эйнштейн/м2)
Контроль (перемешивание) Опыт Контроль (перемешивание) Опыт
ТБК-АП, ТБК-АП, ТБК-АП, ТБК-АП,
Добавка % по цог-ПОЛ Добавка % по цог-ПОЛ Добавка % по цог-ПОЛ Добавка % по ЦОГ-ПОЛ
отношению отношению отношению отношению
к контролю к контролю к контролю к контролю
Этанол 100 ± 10 Этанол 221 ± 26 Этанол 100 ± 6 Этанол 134 ± 6
-5 ± 18 100 + 31* 31 ± 14 43± 12
Аспирин 105±8 Аспирин 121 ±5 Аспирин 69±8 Аспирин 91 ±6
* — различия с соответствующим контролем достоверны при р <0,05
Продолжительный латентный период между облучением лейкоцитов и началом накопления в образцах облученных клеток продуктов ЦОГ-зависимого окисления ненасыщенных жирных кислот позволяет предположить, что УФ-излучение стимулирует это окисление не прямо, за счет фотомодификации ЦОГ, а косвенным путем, включающим в себя процессы, для осуществления которых требуется определенное время. Например, ранее подобный латентный период наблюдали в препаратах макрофагов мыши при их стимуляции экзогенной арахидоновой кислотой [16]. Очевидно, что при такой стимуляции требуется время для встраивания арахидоната в мембраны клеток и его диффузии в места локализации ЦОГ, что, скорее всего, и является причиной появления латентного периода между такой стимуляцией клеток и началом продукции ими простагланди-нов. Возможно, нечто подобное происходит и в лейкоцитах после УФ-облучения.
Изданных, представленныхвтабл. 1, вытекаеттакже, что степень фотоиндуцированной активации ЦОГ-зависимого ПОЛ в лейкоцитах зависит от дозы УФС-облучения клеток перед инкубацией: максимальная активация наблюдается при облучении в дозе 1,28х10 2 эйнштейн/м2. В этом случае ЦОГ-зависимое ПОЛ в клетках определяло в среднем 55% общего накопления ТБК-активных продуктов ПОЛ. С ростом дозы вклад ЦОГ-зависимого ПОЛ в общее накопление ТБК-активных продуктов падал, и в лейкоцитах, облученных в дозе 3,84х102 эйнштейн/м2, ЦОГ определяла только 39% общего накопления этих продуктов в образцах.
Причин такой зависимости выраженности опосредуемого ЦОГ окисления жирных кислот в лейкоцитах от дозы облучения клеток может быть две. Во-первых, возможно, что при больших дозах наблюдается частичная прямая фотоинактивация конститутивной циклооксигеназы в исследуемых клетках УФ-излучением. Во-вторых, возможно, что наблюдаемая нами при небольших (до 1,28х10 2 эйнштейн/м2) дозах облучения активация в лейкоцитах опосредуемого ЦОГ окисления жирных кислот связана с подготовкой этих клеток к фотоиндуцированному апоптозу [17]. С ростом же дозы облучения все более значительная часть лейкоцитов из-за сильного необратимого фотоповреждения функционально значимых компонентов клеток погибает вследствие некроза (или некроптоза). Поскольку при некрозе конститутивная ЦОГ клеток быстро инактивируется, выраженность стимуляции излучением опосредуемого этим ферментом окисления жирных кислот снижается.
На следующем этапе работы была сопоставлена эффективность стимуляции ЦОГ-зависимого ПОЛ в лейкоцитах средне- (УФВ) и коротковолновым (УФС) ультрафиолетовым излучением. Для этого была подобрана такая доза средневолнового УФ-излучения, которая вызывала за время облучения и последующей инкубации накопление в лейкоцитарной суспензии такого же количества ТБК-активных продуктов ПОЛ, что и та доза коротковолнового УФ-облучения, при которой аспирин был наиболее эффективен (1,28х102 эйнштейн/м2). В наших условиях эта доза средневолнового УФ-излучения оказалась равной 1,57х102 эйнштейн/м2. Величины содержания ТБК-активных продуктов ПОЛ в образцах лейкоцитов представлены в табл. 2. Из этих данных следует, что фотостимуляция ЦОГ-зависимого ПОЛ в лейкоцитах в отсутствие ионов Са2+ в среде средневолновым (УФВ) излучением, в отличие от коротковолнового (УФС), слаба и статистически недостоверна. Это позволяет предположить, что в изученных условиях средневолновое УФ-излучение является менее эффективным активатором зависимого от ЦОГ окисления жирных кислот в лейкоцитах кролика, чем коротковолновое. Правда, следует обратить внимание на следующий факт: уровень ЦОГ-зависимого ПОЛ в лейкоцитах в серии экспериментов по средневолновомуУФ-облучению этих клетокбыл достаточно высок уже на момент начала облучения и превышал аналогичный показатель в 10 раз в сравнении с серией с коротковолновым облучением. Вместе с тем величина максимального прироста содержания продуктов ЦОГ-зависимого ПОЛ в клетках конечна и определяется максимально возможной активностью конститутивной циклооксигеназы. Поэтому не исключено, что полученный результат связан с тем, что исходный уровень ЦОГ-зависимого ПОЛ в исследованных препаратах лейкоцитов в данной серии был уже близок к максимальному, и средневолновое УФ-излучение не могло вызвать его дополнительного прироста.
Интересно, что активация ЦОГ-зависимого ПОЛ в изолированных лейкоцитах кролика после коротковолнового УФ-облучения сопровождается утратой данными клетками способности к другим проявлениям функциональной активности. Например, после УФС-облучения лейкоцитов в дозе 1,28х10 2эйнштейн/м2эти клетки утрачивали способность к спонтанному и стимулированному ФМА люминол-активированному хемилюминесцентному ответу (табл. 3). Если же клетки облучались дозой УФС-излучения, при которой активации ЦОГ-зависимого ПОЛ в них не на-
51
А.К.Аносов, Н.С.Белакина / Вестник РГМУ, 2015, № 3, с. 48-52
Таблица 3. Величины спонтанного и стимулированного ФМА хемилюминесцентного ответа образцов суммарной фракции лейкоцитов кролика, подвергнутых коротковолновому УФ-облучению в различных дозах
Максимальная интенсивность хемилюминесценции лейкоцитов, уел. ед.,
Тип хемилюминесценции в скобках — % по отношению к контролю
Контроль УФ-облучение Контроль УФ-облучение
(перемешивание) (1,28х10'г эйнштейн/м2) (перемешивание) (2,56х10‘3 эйнштейн/м2)
Спонтанная 169 (100) 7(4) 162 (100) 128 (79)
Стимулированная ФМА 1150 (100) 17,5 (1,5) 416(100) 418 (100)
Представлены средние максимальные значения интенсивности хемилюминесценции образцов клеток по данным не менее чем 5 независимых опытов. Отклонения величин от средней не превышали 5%.
блюдалось (2,56х10‘3 эйнштейн/м2), то хемилюминесцентный ответ (стимулированный ФМА и спонтанный) у лейкоцитов сохранялся. Таким образом, коротковолновое УФ-излучение в дозах, стимулирующих ЦОГ-зависимое окисление ненасыщенных жирных кислот, подавляет хемилюминесцентные ответы лейкоцитов.
Выводы
1. АктивациятерапевтическизначимогоЦОГ-зависимого окисления ненасыщенных жирных кислот в лейкоцитах кролика в исследованных условиях наиболее выражена при УФС-облучении клеток в дозе 1,28х10'2 эйнштейн/м2 и последующей инкубации в течение 60 мин при 37 °С.
2. Фотоиндуцированная активация ЦОГ-зависимого окисления ненасыщенных жирных кислот в лейкоцитах кролика сопровождается угнетением хемилюминесцентных ответов этих клеток на стимуляцию форбол-12-миристат-13-ацетатом.
Авторы выражают глубокую благодарность профессору кафедры общей и медицинской биофизики медикобиологического факультета Российского национального исследовательского медицинского университета им. Н.И.Пирогова Дмитрию Ивановичу Рощупкину за ценные советы и замечания, высказанные им в ходе работы и подготовки данного материала к публикации.
Литература
1. Halberstadt С., Emerich D.F., Gonsalves К. Combining cell therapy and nanotechnology// Expert Opin Biol Ther. 2006. V.6 (10). P.971-981.
2. Talebi S., Aleyasin A., Soleimani M., Massumi M. II Derivation of islet-like cells from mesenchymal stem cells using PDX1-transducing lentiviruses II Biotechnol Appl Biochem. 2012. V.59 (3). P.205-212.
3. Bertuzzi F., Marzorati S., Secchi A. Islet cell transplantation II Curr Mol Med. 2006. V.6 (4). P.369-374.
4. Zhou H., Aziza J., Sol J.C. et al. Cell therapy of pain: Characterization of human fetal chromaffin cells at early adrenal medulla development//Exp Neurol. 2006. V.198 (2). P.370-381.
5. Scarisbrick J. Extracorporeal photopheresis: what is it and when should it be used? II Clin Exp Dermatol. 2009. V.34 (7). P.757-760.
6. Maeda A. Extracorporeal photochemotherapy II J Dermatol Sci. 2009. V.54 (3). P.150-156.
7. Knott E.K. Development of ultraviolet blood irradiation II Am J Surg. 1948. V.76 (2). P.165-171.
8. Аполлонова Л.А., Лебкова Н.П., Степанова E.H., Тугуши О.А. Терапевтическое действие ультрафиолетового облучения аутологичной крови в раннем периоде острой лучевой болезни II Радиац. биол. Радиоэкол. 1999. Т.39. №2-3. С.287-292.
9. Горюнов А.В., Рощупкин Д.И. Перекисное окисление липидов в тромбоцитах, индуцированное УФ-излучением II Биол. мембраны. 1989. Т.6. №5. С.551-554.
10. Рощупкин Д.И., Мурина М.А. Свободнорадикальное и циклооксигеназное окисление липидов в мембранах клеток при УФ-облучении II Биол. мембраны. 1998. №2. С.221-226.
11. Соколов А.Ю., Аносов А.К., Рощупкин Д.И. Роль фотомодификаций, предотвращаемых ингибиторами пероксидации липидов, в лечебном действии УФ-облученной крови при перитоните у крыс II Биофизика. 1993.Т.38.№4.С.703-707.
12. Физиология лейкоцитов человека / Под ред. В.А.Алмазова. Л.: Наука, 1979. С.110—115.
13. Экспериментальные методы химической кинетики / Под ред. Н.М.Эммануэля и Г.Б.Сергеева. М.: Высшая школа, 1980. С.146-148.
14. Asakawa Т., Matsushita S. Coloring conditions of thiobarbituric acid test for detecting lipid hydroperoxides II Lipids. 1980. V.15 (3). P.137-140.
15. Vargaftig B.B., Chingard M., Benveniste J. Present concepts on the mechanisms of platelet aggregation II Biochem Pharmacol. 1983. V.30 (2). P.263-271.
16. Gonchar M., Sergeeva M., Mevkh A, Varfolomeyev S. Kinetics of prostanoid synthesis by macrophages is regulated by arachidonic acid sources II Eur J Biochem. 1999. V.265 (2). P.779-787.
17. Davidovich P., Kearney C.J., Martin S.J. Inflammatory outcomes of apoptosis, necrosis and necroptosis II Biol. Chem. 2014. V.395 (10). P.1163-1171.
Информация об авторе:
Белакина Наталья Сергеевна, аспирант кафедры общей и медицинской
биофизики медико-биологического факультета Российского национального
исследовательского медицинскогоуниверситета им. Н.И.Пирогова
Адрес: 117997, Москва.ул. Островитянова, 1
Телефон: (495) 434-4474
E-mail: aleksandranosov54@mail.ru
52
