CC BY
4
Turczaninowia 25, 3: 115-120 (2022) DOI: 10.14258/turczaninowia.25.3.11 http://turczaninowia.asu.ru
ISSN 1560-7259 (print edition)
TURCZANINOWIA
ISSN 1560-7267 (online edition)
УДК 582.29:581.96(479)
Staurolemma omphalarioides (Pannariaceae, Ascomycota) - новый для лихенофлоры России вид и род с полуострова Абрау (Северо-Западный Кавказ)
Г. П. Урбанавичюс1' 4*, И. Н. Урбанавичене2' 5, У. В. Симакова3' 6, В. Н. Москаленко3' 7
1 Кольский научный центр РАН, Академгородок, д. 14а, г. Апатиты, Мурманская область, 184209, Россия 2 Ботанический институт им. В. Л. Комарова РАН, ул. Проф. Попова, д. 2, г. Санкт-Петербург, 197376, Россия 3 Институт океанологии им. П. П. Ширшова, Нахимовский пр., д. 36, г. Москва, 117997, Россия 4E-mail:g.urban@mail.ru ORCID iD: https://orcid.org/0000-0003-3222-5151 5ORCID iD: https://orcid.org/0000-0002-5492-5215 6ORCID iD: https://orcid.org/0000-0002-7250-2611 7ORCID iD: https://orcid.org/0000-0002-9322-0269 *Автор для переписки
Ключевые слова: ареал, ДНК-баркодинг, Краснодарский край, лишайник, флористическая находка, экология, Staurolemma.
Аннотация. Род Staurolemma Körb., представленный видом Staurolemma omphalarioides (Anzi) P. M. Jorg. et Henssen, впервые приводится для России по сборам из Северо-Западного Кавказа с территории заповедника «Утриш» на п-ове Абрау. Виды рода Staurolemma широко распространены в тропических и субтропических областях Земли, и только один вид S. omphalarioides имеет средиземноморско-атлантический ареал. Как и в средиземноморском бассейне, на п-ове Абрау вид приурочен к теплым и влажным местообитаниям на Черноморском побережье, где произрастает в субсредиземноморских растительных сообществах, в дубово-можжевеловых и можжевелово-фисташковых лесах, на стволах и ветвях лиственных деревьев, главным образом, на Pistacia mutica Fisch. et C. A. Mey. и Quercus pubescens Willd. В статье приводятся описание и фото вида, а также информация о его систематическом положении и географическом распространении. Для части изученных образцов секвенированы нуклеотидные последовательности ITS-участка рДНК (их номера в базе данных GenBank указаны в тексте).
1 Federal Research Center «Kola Science Center RAS», Akademgorodok, 14a, Apatity, Murmansk Region, 184209, Russian Federation
2 Komarov Botanical Institute RAS, Prof. Popova Str., 2, St.-Petersburg, 197376, Russian Federation
3 Shirshov Institute of Oceanology RAS, Nakhimovskiy Pr., 36, Moscow, 117997, Russian Federation
Keywords: area, DNA barcoding, ecology, floristic finding, Krasnodar Territory, lichen, Staurolemma.
Staurolemma omphalarioides (Pannariaceae, Ascomycota), a new species and genus for the lichen flora of Russia from Abrau Peninsula (North-Western Caucasus)
G. P. Urbanavichus1, I. N. Urbanavichene2, U. V. Simakova3, V. N. Moskalenko3
Поступило в редакцию 05.08.2022 Принято к публикации 23.09.2022
Submitted 05.08.2022 Accepted 23.09.2022
Summary. The genus Staurolemma Körb., represented by the species S. omphalarioides (Anzi) P. M. J0rg. et Hens-sen, identified both by morphology and using DNA barcoding (ITS1-5.8S-ITS2 gene), is reported for the first time for Russia, based on materials collected in the North-Western Caucasus in the Utrish Reserve on the Abrau Peninsula. The genus Staurolemma is widely distributed in the tropics and subtropics, and only one species S. omphalarioides, has a Mediterranean-Atlantic area. As in the Mediterranean basin, in the Abrau Peninsula, the species is confined to warm and humid habitats on the Black Sea coast, where it grows in sub-Mediterranean plant communities, in oak-juniper and juniper-pistachio forests, on the trunks and branches of deciduous trees, mainly on Pistacia mutica Fisch. et C. A. Mey. and Quercus pubescens Willd. Description and photo of species are given with a discussion on their taxonomy and distribution. For some studied specimens, new rITS sequences were generated and their GenBank accession numbers are provided.
В июне 2014 г. в процессе изучения лишайников уникальных для России субсредиземноморских растительных комплексов на территории заповедника «Утриш» на п-ове Абрау (Краснодарский край) впервые был собран необычный цианобионтный лишайник (в стерильном состоянии), внешне напоминающий представителей семейства Collemataceae Zenker. По габитусу он хорошо выделялся своим обликом и не был похож ни на один из известных видов рода Collema F. H. Wigg. s. lat.
Анализируя морфологические описания и экологию эпифитных видов цианобионтных лишайников, было предположено, что собранный образец может представлять собой ранее неизвестный в России и на Кавказе вид Staurolemma omphalarioides (Anzi) P. M. J0rg. et Henssen. Достоверно определить этот вид в стерильном состоянии было крайне затруднительно, тогда как при наличии апотециев он легко идентифицируется благодаря одноклеточным широко эллипсоидным или почти шаровидным спорам, не характерным для представителей семейства Collemataceae.
В последующем этот лишайник, уже узнаваемый в поле, неоднократно собирался на разных форофитах в разных участках заповедника. Но все собранные экземпляры были стерильными. Возможность подтвердить наше предположение и точно идентифицировать образцы до вида появилась только после применения молекулярных методов с использованием нуклеотидной последовательности ITS1-5.8S-ITS2 -участка ри-босомальной ДНК.
Материал и методы
Лихенофлористические исследования и сборы образцов лишайников на п-ове Абрау проводились традиционным маршрутно-рекогносци-
ровочным методом с 2014 по 2019 гг. Географические координаты точек сборов и высота над уровнем моря определялись при помощи навигатора Garmin GPSmap 62s в системе WGS-84.
Изучение морфологии и анатомии талломов проведено при помощи сравнительно-морфологического и сравнительно-анатомического методов с использованием световой микроскопии.
Выделение ДНК проводили с помощью набора Qiagen DNeasy Plant Mini kit в соответствии с протоколом производителя. Для амплификации (и секвенирования с помощью набора реактивов ABI PRISM® BigDye™ Terminatorv. 3.1 с последующим анализом продуктов реакции на автоматическом секвенаторе ABI PRISM 3500) выбранного участка рибосомальной ДНК ITS1-5.8S-ITS2, были использованы праймеры ITS1F (Gardes, Bruns, 1993) и ITS4 (White et al., 1990). Амплификацию фрагментов проводили с помощью набора HS-ScreenMix (Evrogen) в объеме 20 мкл (15 сек. при температуре 95 °C, 30 сек. при 55 °C, 45 сек. при 72 °C, 35 циклов). Хроматограммы были обработаны в программе CodoneCode Aligner (CodonCode Corporation, Dedham, Massachusetts). Выравнивание было проведено с помощью алгоритма MAFFTaligment (Katoh, Standley, 2013). Сравнение с базой данных GenBank проводили с помощью алгоритма BLAST (Altschul et al., 1990) с определением сходства последовательностей в % от общей длины выравнивания.
Поскольку вид впервые указывается для России, приводим его детальное описание согласно работам P. M. J0rgensen, A. Henssen (1993), P. L. Nimis (2022) и L. Arcadia (2022) с учетом собственных данных. Апотеции в собранных образцах отсутствуют, поэтому описание их строения представлено согласно процитированным выше работам. Образцы хранятся в лихенологическом гербарии БИН (LE) и личной коллекции (herb. G. Urbanavichus), дублет передан в ALTB.
Turczaninowia 2S, 3: 115-120 (2022)
117
Результаты и обсуждение
Получены последовательности участка гена 1Т81-5.88-1Т82 двух образцов: (1) длиной 606 пар нуклеотидов (образец иТ-142-01, номер в СепБапк ОР133278) и (2) длиной 614 пар нуклеотидов (образец Ь-18448, номер в СепБапк ОР133279). Сходство между этими последовательностями составляет 99,7 %; выявлены 2 замены.
Сравнение последовательностей с представленными в базе данных СепБапк показало, что одна из них (ОР133278) на 100 % совпадает с га-плотипами Staurolemma отрка1атШйг$ Южной Европы; этот гаплотип встречен в Италии, Хорватии, Турции, Португалии, Испании и островах Зеленого Мыса (Беп^кзЬу е! а1., 2014). Наибольшее сходство второй последовательности (ОР133279) с опубликованными ранее данными составляет 99,6 %, а обнаруженные замены уникальны для данного гаплотипа. Сходство полученных данных с представителями других видов рода составляет менее 90 %.
Поскольку для образцов, последовательности которых опубликованы в базе данных, имеется подробное морфологическое описание в
том числе и важных для диагностики признаков (апотециев), мы можем считать, что исследованные образцы относятся к тому же виду, что распространен в Южной и Северной Европе. Один из двух выявленных гаплотипов широко распространен в Средиземноморском регионе и, возможно, имеет местное происхождение (Bendiksby et al., 2G14). Второй гаплотип пока не встречен в других районах и является уникальным, что, возможно, отражает изолированность «утришской» популяции.
Staurolemma omphalarioides (Anzi) P. M. J0rg. et Henssen, 1993, Graphis Scripta S: 13. = Collema omphalarioides Anzi, 18б2, Comm. Soc. Critt. Ital. 1: 131. = Physma omphalarioides (Anzi) Arnold., 18б7, Flora, Regensburg SG: 119. = Lempholemma omphalarioides (Anzi) Zahlbr., 1924, Cat. Lich. Univers. 3: 18. = Staurolemma dalmaticum Körb., 18б7, Verh. zool.-bot. Ges. Wien 17: 7G6. = Physma dalmaticum (Körb.) Zahlbr., 189G, Annln K. K. naturh. Hofmus. Wien S: 47. = Physma hispanicum Samp., 1917, Assoc. Españ. para el Progresse de las Ciencias, Congr. Sevila: 13б. = Lempholemma hispanicum (Samp.) Zahlbr., 1924, Cat. Lich. Univers. 3: 17. (рис.).
Рис. Staurolemma omphalarioides, общий вид стерильного таллома. Шкала - Б мм.
Таллом мелколопастной, гомеомерный, во влажном состоянии желатинозно разбухающий, образует подушечки до 1 см в диам. (редко до 2-3 см). Отдельные лопасти более или менее выражены только по краю таллома, обычно 1-3 мм шир. (редко до 5 мм шир.), округлые, с восходящим краем, черные, 250-400 мкм толщ. во влажном состоянии (в сухом - 100-250 мкм толщ.), с изи-диями, сначала тонкими, субцилиндрическими, до 0,05 мм толщ., позже шаровидными, 0,1-0,2 мм в диам. Верхняя и нижняя кора отсутствуют. Фотобионт - Nostoc, клетки шаровидные, 4-5 мкм в диам., в цепочках, не образующих отчетливого слоя. Гифы в центре лопастей 1,5-4 мкм толщ., анастомозирующие, без видимых перегородок. Апотеции в изученных образцах отсутствуют; по литературным данным, образуются часто; 0,3-0,8 мм в диам., сидячие или на коротких ножках, с плоским, темно-коричневым до черного диском и выступающим, коричневым, обычно изидиозным талломным краем. Эксци-пул параплехтенхимный; эпигимений темно-коричневый; гимений до 100 мкм выс., коричневый в верхней части, в остальном бесцветный, от йода синеет в нижней части; гипотеций 100-140 мкм выс.; парафизы без видимых перегородок, 1 мкм толщ., на верхушках утолщенные до 2 мкм, с полушаровидной сероватой шапочкой. Сумки 55-67 х 15-23 мкм, 8-споровые, булавовидные, с амилоидными стенками, но без выраженных апикальных структур. Споры одноклеточные, бесцветные, от широко эллипсоидных до почти шаровидных, толстостенные, 12-15 х 7-10 мкм. Пикнидии встречаются редко, погруженные. Конидии палочковидные, 3 х 1 мкм.
Как указывают J0rgensen и Henssen (1993), Staurolemma omphalarioides - очень вариабельный вид, особенно по размерам и цвету таллома и лопастей, степени развития изидий, а также по форме и размерам спор. При отсутствии апоте-циев лишайник внешне может напоминать молодые экземпляры изидиозного вида Lathagrium fuscovirens (With.) Otalora, P. M. J0rg. et Wedin, также встречающегося на п-ове Абрау, но обитающего на каменистом субстрате. Из эпифит-ных цианобионтных лишайников с развитыми апотециями, обитающих в аналогичных сообществах, внешне похожими могут быть виды Enchylium conglomeratum (Hoffm.) Otalora, P. M. J0rg. et Wedin и E. ligerinum (Hy) Otalora, P. M. J0rg. et Wedin, хорошо отличающиеся отсутствием изидий и наличием узких веретеновидных спор с 1-3 поперечными перегородками.
Изученные образцы. Россия: «Краснодарский край, муниципальное образование город-курорт Анапа, п-ов Абрау, Государственный природный заповедник "Утриш", 38 кв., щель Атма-чева, дубово-можжевеловый лес, на стволе дуба пушистого (Quercus pubescens Willd.), 100 м над ур. м., 44°47'09.6'' с. ш. 37°26'45.3'' в. д. 28 VI 2014. Г. П. Урбанавичюс, И. Н. Урбанавичене» (herb. Urbanavichus); «Краснодарский край, муниципальное образование город-курорт Анапа, п-ов Абрау, Государственный природный заповедник "Утриш", 27 кв., фисташково-можжевеловый лес на берегу Черного моря, на стволе фисташки (Pistacia mutica Fisch. et C. A. Mey.), 25 м над ур. м., 44°43'05.0'' с. ш. 37°26'36.9'' в. д. 18 IX 2014. Г. П. Урбанавичюс, И. Н. Урбанавичене» (herb. Urbanavichus); «Краснодарский край, муниципальное образование город Новороссийск, п-ов Абрау, Государственный природный заповедник "Утриш", 13 кв., подножие юго-западной части Казенного бугра, фисташково-можжевеловый лес, на стволе фисташки (Pistacia mutica Fisch. et C. A. Mey.), 100 м над ур. м., 44°43'44.3'' с. ш. 37°27'25.4'' в. д. 25 IX 2014. Г. П. Урбанавичюс» (LE № L-18448, GenBank OP133279); «Краснодарский край, муниципальное образование город Новороссийск, п-ов Абрау, Государственный природный заповедник "Утриш", 40 кв., можжевелово-фисташковый лес на склоне южной экспозиции, на стволе фисташки (Pistacia mutica Fisch. et C. A. Mey.), 100 м над ур. м., 44°43'01.0'' с. ш. 37°27'33.0'' в. д. 14 IX 2015. Г. П. Урбанавичюс, И. Н. Урбанавичене» (herb. Urbanavichus); «Краснодарский край, муниципальное образование город Новороссийск, п-ов Абрау, Государственный природный заповедник "Утриш", 7 кв., щель Юрзи-на, можжевелово-дубовый лес, на стволе дуба (Quercus sp.), 130 м над ур. м., 44°44'12.6'' с. ш. 37°33'15.9'' в. д. 4 V 2018. Г. П. Урбанавичюс, И. Н. Урбанавичене» (herb. Urbanavichus № Ut-142-01, GenBank OP133278); «Краснодарский край, муниципальное образование город Новороссийск, п-ов Абрау, Государственный природный заповедник "Утриш", 60 кв., ясенево-дубовый лес, на стволе ясеня (Fraxinus excelsior L.), 250 м над ур. м. 11 V 2018. Г. П. Урбанавичюс» (ALTB, LE, herb. Urbanavichus); «Краснодарский край, муниципальное образование город-курорт Анапа, п-ов Абрау, Государственный природный заповедник "Утриш", 27 кв., фисташково-можжевеловый лес на берегу Черного моря, на стволе можжевельника высокого (Juniperus excelsa M. Bieb.), 20 м над ур. м., 44°43'05.0'' с. ш. 37°26'36.9'' в. д. 9 VII
Turczaninowia 25, 3: 115-120 (2022)
119
2019. Г. П. Урбанавичюс, И. Н. Урбанавичене» (herb. Urbanavichus).
Распространение в мире. Северная Европа - Норвегия; Южная Европа - Португалия, Испания, Франция, Италия, Словения, Хорватия, Босния и Герцеговина, Черногория, Албания, Греция; Юго-Западная (Передняя) Азия -Турция, Кипр, Сирия, Израиль, Иран; Северная Африка - Марокко, Алжир, Тунис; острова в Атлантическом океане - Канарские о-ва, о-ва Зеленого Мыса (J0rgensen, Henssen, 1993; Seaward et al., 2004; Bilovitz, Mayrhofer, 2011; Bendiksby et al., 2014; Malicek et al., 2021; Arcadia, 2022).
Указание Staurolemma omphalarioides из Южной Кореи (Moon, 1999) основано на неверном определении и относится к виду S. perforatum (J0rgensen, 2010).
Staurolemma omphalarioides - почти облигат-ный эпифитный лишайник, обитающий на коре широкого спектра форофитов, но чаще всего на стволах разных видов дубов Quercus sp., часто также на оливе (Olea europaea L.) и каштане (Castanea sp.), менее часто на иных форофитах -Acacia sp., Cedrus sp., Eucatyptus sp., Pistacia sp. и др. (J0rgensen, Henssen, 1993). И только в Норвегии, на самом северном пределе распространения, вплоть до полярного круга, вид поселяется на стволах осины Populus tremula L. или рябины Sorbus sp. (J0rgensen, 2007).
В большинстве случаев известные местообитания S. omphalarioides отличаются достаточно высокой влажностью воздуха и хорошей освещенностью. Вид довольно часто встречается в садах и парках, в посадках вдоль дорог, что не свидетельствует о его строгой приуроченности к старовозрастным лесным массивам (J0rgensen, Henssen, 1993). В высотном диапазоне вид, скорее, приурочен к низменным условиям, невысоко поднимаясь по склонам гор, обычно в пределах первых сотен метров; лишь в самых южных частях ареала на юге Испании, в Северной Африке, на Канарских о-вах и о-вах Зеленого Мыса вид может подниматься до 1000-1500 м над ур. м. (J0rgensen, Henssen, 1993).
На п-ове Абрау S. omphalarioides отмечен на высотах практически от уровня моря до 250 м над ур. м. Из семи известных местонахождений только два расположены на удалении 5-6 км от берега Черного моря, остальные - в пределах первых сотен метров и до 2 км от береговой полосы. Все обнаруженные места обитания связаны с субсредиземноморской растительностью -
дубово-можжевеловыми или можжевелово-фи-сташковыми лесами.
Род Staurolemma Körb. в основном представлен видами австралазийского распространения, вероятно, гондванского происхождения (J0rgensen, 2010). Долгое время этот род относили к семейству Collemataceae и лишь в последнее время на основании методов молекулярной филогении включили в семейство Pannariaceae (Wedin et al., 2009). В настоящее время род насчитывает 8 видов, выделяемых в два подрода: Staurolemma и Hymenolemma P. M. J0rg. (J0rgensen, 2010). Представители первого (S. oculatum P. M. J0rg. et Aptroot, S. omphalarioides и S. orbiculare P. M. J0rg. et Aptroot.) встречаются в основном в регионах со средиземноморским климатом, имеют относительно толстый таллом, очень напоминающий талломы видов рода Collema, и амилоидные стенки сумок. Представители второго (S. carolinianum P. M. J0rg., S. dussii (Vain.) P. M. J0rg. et Henssen, S. fruticosum Henssen, S. perforatum P. M. J0rg., S. weberi P. M. J0rg. et Henssen) имеют преимущественно тропическое и субтропическое распространение, характеризуются тонким, мембрановидным, распростертым талломом и отсутствием йодной реакции стенок сумок. Только один вид этого рода - S. omphalarioides, обладающий достаточно обширным средиземноморско-атлантическим ареалом, встречается в Европе, Северной Африке и Юго-Западной (Передней) Азии (J0rgensen, 2010).
Хотя в России виды рода Staurolemma ранее не были известны, находка такого вида на Северо-Западном Кавказе, где встречается много реликтовых южно- и западноевропейских лишайников с океаническим и средиземноморским распространением, представляется нам вполне естественной. Тем более что ближайшее к п-ову Абрау местонахождение находится в Турции (Kinalioglu, 2009).
Благодарности
Авторы выражают признательность администрации и сотрудникам заповедника «Утриш», заместителю директора по науке О. Н. Быха-ловой за помощь в организации исследований. Полевые работы первых двух авторов в 20152018 гг. осуществлены в рамках проекта «Лихе-нофлора Северного Кавказа: таксономическая структура, разнообразие, специфика, систематика отдельных таксонов и вклад в разноо-
бразие лихенофлоры России», поддержанного грантом РФФИ № 15-29-02396. Исследования У. В. Симаковой и В. Н. Москаленко проведены в рамках гостемы FMWE-2021-0007 «Морские и океанские экосистемы в условиях меняющегося климата и антропогенного воздействия: структура и биологическая продуктивность экосистемы Арктического бассейна и морей Рос-
сии, экосистемы и потенциальные биологические ресурсы открытого океана». Исследования И. Н. Урбанавичене проведены в рамках госзадания БИН РАН «Флора и систематика водорослей, лишайников и мохообразных России и фитогеографически важных регионов мира» (№ 121021600184-6).
REFERENCES / ЛИТЕРАТУРА
Altschul S. F., Gish W., Miller W., Myers E. W., Lipman D. J. 1990. Basic local alignment search tool. J. Mol. Biol. 215(3): 403-410.
Arcadia L. 2022. The lichens and lichenicolous fungi of Greece. Online draft version 15 January 2022. ULR: https:// www.lichensofgreece.com/flora.html (Accessed 05 February 2022).
Bendiksby M., Mazzoni S., Jorgensen M. H., Halvorsen R., Holien H. 2014. Combining genetic analyses of archived specimens with distribution modelling to explain the anomalous distribution of the rare lichen Staurolemma omphalarioides: long-distance dispersal or vicariance? Journal of Biogeography 41: 2020-2031. DOI: 10.1111/jbi.12347 Bilovitz P. O., Mayrhofer H. 2011. Catalogue of the lichenized and lichenicolous fungi of Bosnia and Herzegovina. Phyton (Horn, Austria) 51(1): 1-67.
Gardes M., Bruns T. D. 1993. ITS primers with enhanced specificity for basidiomycetes - application to the identification of mycorrhizae and rusts. Mol. Ecol. 2(2): 113-118. DOI: 10.1111/j.1365-294X.1993.tb00005.x
Jorgensen P. M. 2007. Collemataceae. In: T. Ahti, P. M. Jorgensen, H. Kristinsson, R. Moberg, U. Sochting, G. Thor (eds.). Nordic Lichen Flora. Vol. 3. Uppsala: Nordic Lichen Society. Pp. 14-42.
Jorgensen P. M. 2010. New discoveries in the lichen genus Staurolemma Körber. Nova Hedwigia 90(1-2): 153-159. DOI: 10.1127/0029-5035/2010/0090-0153
Jorgensen P. M., Henssen A. 1993. Physma omphalarioides - its taxonomic position and phytogeography. Graphis Scripta 5(1): 12-17.
Katoh K., Standley D. M. 2013. MAFFT Multiple Sequence Alignment Software Version 7: Improvements in Performance and Usability. Mol. Biol. Evol. 30(4): 772-780. DOI: 10.1093/molbev/mst010
Kinalioglu K. 2009. Lichens from the Amasya, Çorum, and Tokat regions of Turkey. Mycotaxon 109: 181-184. DOI: 10.5248/109.181
Malicek J., Bouda F., Konecnâ E., Sipman H., Vondrâk J. 2021. New country records of lichenized and non-lichen-ized fungi from Southeastern Europe. Herzogia 34(1): 38-54. DOI: 10.13158/heia.34.1.2021.38 Moon K. H. 1999. Lichens in Mt. Sorak. Journ. Hattori Bot. Lab. 86: 187-220.
Nimis P. L. 2022. ITALIC - The Information System on Italian Lichens. Version 7.0. University of Trieste, Dept. of Biology. ULR: https://dryades.units.it/italic (Accessed 20 January 2022).
Seaward M. R. D., Sipman H. J. M., Schultz M., Maassoumi A. A., Haji Moniri Anbaran M., Sohrabi M. 2004. A preliminary lichen checklist for Iran. Willdenowia 34(2): 543-576. DOI: 10.3372/wi.34.34218
Wedin M., Wiklund E., Jorgensen P. M., Ekman S. 2009. Slippery when wet: phylogeny and character evolution in the gelatinous cyanobacterial lichens (Peltigerales, Ascomycetes). Molecular Phylogenetics and Evolution 53: 862-871. DOI: 10.1016/j.ympev.2009.08.013
White T. J., Bruns T. D., Lee S. B., Taylor J. W. 1990. Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. In: M. A. Innis, D. H. Gelfand, J. J. Sninsky, T. J. White (eds.). PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications. New York: Academic Press. Pp. 315-322.
