Сравнительное токсикологическое изучение отечественного воспроизведенного винкристина и винкристина фирмы Teva Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



56 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

тивность его противоопухолевого действия и снизить воз- венная форма винкристина (ВК-В), в лаборатории фарма-можное цитотоксическое действие на нормальные клетки. кологии и токсикологии проведено доклиническое токси- Цель исследования — разработка систем адресной до- кологическое изучение ВК-В в сравнении с винкристином ставки Лактаптина к опухолевым клеткам. фирмы Тева, Израиль (ВК-Т). Материалы и методы. Отбор опухоль-адресованных Цель исследования — сравнительное изучение острой пептидов, экспонированных в составе поверхностного бел- и субхронической токсичности ВК-В и ВК-Т на мелких ка pIII нитчатого бактериофага M13, проводили из фаго- лабораторных животных для подтверждения их идентич-вой пептидной библиотеки в системах in vitro и in vivo. ности. Плазмиды, несущие гены, кодирующие рекомбинантный Материалы и методы. Исследования проведены на 70 мы-слитый белок, состоящий из опухоль-адресованного пеп- шах-самцах гибридах B6D2F1 и 160 неинбредных крысах-тида и Лактаптина, получали методами генной инженерии. самцах, полученных из разведения РОНЦ им. Н.Н. Блохина. Таким образом выведены рекомбинантные штаммы виру- ВК-В — раствор для внутривенного (в/в) введения с кон-са осповакцины со встройкой 2 трансгенов — апоптозин- центрацией ВК 0,93 мг/мл, во флаконе по 2 мл, серия 031014. дуцирующего белка лактаптина и гранулоцитарно-макро- ВК-Т — раствор для в/в введения с концентрацией ВК фагального колониестимулирующого фактора (ГМ-КСФ) 1 мг/мл, во флаконе по 1 мл, серия 14F20КF. В опытах по ост-человека — в районы генов тимидинкиназы и вирусного рой токсичности препараты вводили мышам однократно в/в ростового фактора. в диапазоне доз от 2 до 10 мг/кг, крысам — от 0,25 до 1,5 мг/кг. Результаты. Проведен отбор опухоль-адресованных В опытах по субхронической токсичности препараты вво-пептидов в системе in vitro на культурах раковых клеток дили в/в ежедневно трехкратно в 3 суммарных дозах 0,25; 0,5 мыши и человека и in vivo на мышиной опухолевой модели и 0,75 мг/кг. Срок наблюдения за животными составил 30 сут. и на опухоли молочной железы человека в модели ксено- Результаты. В результате проведенных исследований графтов. Получены рекомбинантные плазмиды, кодирую- установлено, что ВК-В и ВК-Т у животных вызывают оди-щие рекомбинантные слитые белки, состоящие из ото- наковые проявления токсичности: пилоэрекцию, сужение бранных пептидов и Лактаптина, и штаммы Escherichia глазных щелей, гиподинамию, диарею, анорексию, сукро-coli — продуценты слитых белков. Цитотоксическая и апо- вичные выделения из носа и глаз. Установлено, что сроки птотическая активность рекомбинантных белков в отно- гибели и число павших животных, как в опытах на мышах, так шении раковых клеток человека в культуре не уступает и в опытах на крысах, получавших ВК-В и ВК-Т, практиче-активности Лактаптина, при этом тропность слитых белков ски не отличаются. Получены расчетные токсические дозы к опухоли превышает тропность Лактаптина в 3—5 раз. для крыс ВК-В: ЛД10 = 0,54 мг/кг; ЛД50 = 0,77 (0,66 ^ 0,91) мг/кг Получены рекомбинантные штаммы вируса осповакцины и ВК-Т: ЛД10 = 0,42 мг/кг; ЛД50 = 0,61 (0,48 0,71) мг/кг, с двойной делецией генов тимидинкиназы и ростового которые практически не отличаются друг от друга. По ре-фактора и встройкой в делетированные участки генома зультатам изучения субхронической токсичности установлено, 2 трансгенов — апоптозиндуцирующего белка лактаптина что ВК-В и ВК-Т по показателям токсичности (клинические и ГМ-КСФ человека: VV-GMCSF Lact — вариант с несе- проявления токсичности, летальность, гепатотоксичность, кретируемой формой лактаптина; VV-GMCSF-S (long) — биомаркеры токсичности, морфометрия органов) и по ре-Lact — вариант с секретируемой формой лактаптина зультатам патоморфологического исследования практиче-с длинной лидерной последовательностью; VV-GMCSF- ски не отличаются друг от друга. S-Lact — вариант с секретируемой формой лактаптина с ко- Заключение. На основании результатов, полученных роткой лидерной последовательностью. Все полученные при сравнительном изучении ВК-В и ВК-Т, установлено, рекомбинанты продемонстрировали высокую цитотокси- что препараты практически идентичны по показателям ческую активность в отношении клеток рака молочной как острой, так и субхронической токсичности. железы человека MCF7 и MDA-MB-231. Также показано, что вирус с двойными делециями (аттенуированный вирус Н.Ю. Кульбачевская1, О. И. Коняева1, Н.П. Ермакова1 осповакцины) адресно накапливается в клетках опухоли В.А. Чалей1, И. Б. Меркулова1, Т. В. Абрамова1, при внутриопухолевом введении и способен находить от- В.М. Бухман1, Т. И. Малова2 даленные метастазы и реплицироваться в них. ИЗУЧЕНИЕ СУБХРОНИЧЕСКОЙ Заключение. Разработаны системы адресной доставки ТОКСИЧНОСТИ БОРХЛОРИНА - НОВОГО противоопухолевого препарата Лактаптин, позволяющие ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРА повысить противоопухолевую эффективность лекарствен- В ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ного средства. ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ НА КРЫСАХ 1ФГБУ«РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Н.Ю. Кульбачевская, О.И. Коняева, Н.П. Ермакова, Минздрава России, Москва: В.А. Чалей, А.А. Сергеев, К.А. Сережин, В.М. Бухман 2ООО «ВЕТА-Гранд», Москва СРАВНИТЕЛЬНОЕ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ Введение. Борированный хлорин е6 синтезирован ОТЕЧЕСТВЕННОГО ВОСПРОИЗВЕДЕННОГО в ИНЭОС им. АН. Несмеянова РАН. В РОНЦ им. Н.Н. Бло-ВИНКРИСТИНА И ВИНКРИСТИНА ФИРМЫ TEVA хина разработана лиофилизированная липосомальная ле-ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва карственная форма (ЛЛЛФ) борхлорина. Введение. В лаборатории разработки лекарственных Цель исследования — изучение субхронической токсич-форм РОНЦ им. Н.Н. Блохина воспроизведена лекарст- ности ЛЛЛФ борхлорина.

№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ