Сравнительное изучение влияния дексаметазона и лекарственного сбора на уровень мочевины крови крыс при холодовой травме Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК [612.59:612.398.193]:615.27:615.322

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ДЕКСАМЕТАЗОНА И ЛЕКАРСТВЕННОГО СБОРА НА УРОВЕНЬ МОЧЕВИНЫ КРОВИ КРЫС ПРИ ХОЛОДОВОЙ ТРАВМЕ

© 2007 г. А. А. Алиева, Н. А. Назаренко, *Т. Л. Киселева,

М. Ю. Назаренко

Северный государственный медицинский университет, г. Архангельск *Институт гомеопатии и натуротерапии Федерального научного клиникоэкспериментального центра традиционных методов диагностики и лечения Росздрава, г. Москва

Россия — одна из самых холодных стран в мире: около 70 % территории ее представлено зоной вечной мерзлоты, а в ряде мест температура воздуха достигает —60 0С. Более семи миллионов человек проживают в чрезвычайно холодных регионах, классифицируемых Российским законодательством как Крайний Север и приравненные к нему районы.

В районах Крайнего Севера медицинскими учреждениями ежегодно регистрируется более 11 тысяч случаев оказания медицинской помощи пострадавшим от общего переохлаждения организма или обморожений [9].

Актуальна и экономическая сторона проблемы, так как стоимость лечения больного с отморожением в 3 раза выше стоимости лечения общехирургического больного; оперативная активность и сроки лечения при отморожении в 2 раза превышают эти показатели у ожоговых больных [6].

Изучение данной патологии показывает неуклонный рост числа пострадавших с глубокими отморожениями [1].

Несмотря на большое количество работ, посвященных изучению лекарственных препаратов, повышающих «устойчивость» к охлаждению, лечение отморожений все еще остается весьма трудной задачей. Как правило, в качестве фригопротекторов применяют препараты, влияющие на основные звенья патогенеза отморожения с противовоспалительными, жаропонижающими и обезболивающими эффектами (гормональные препараты, нестероидные противовоспалительные средства, цитостатики и др.). Однако синтетические препараты имеют ряд недостатков, ограничивающих их применение. К числу таковых относят угнетение пролиферации лимфоидных клеток, появление эрозивно-язвенных поражений слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта, нефротоксическое и гепатотоксическое действие.

Целью настоящего исследования явилось сравнительное изучение эффективности нового сбора, обладающего низкой токсичностью и экономической доступностью, и дексаметазона на модели острой холодовой травмы. В качестве критерия фригопротекторного действия был изучен биохимический маркер — мочевина крови крыс при отморожении.

Материалы и методы

Экспериментальные исследования проводились на крысах-самцах Wistar массой 160,0—180,0 г, полученных из питомника «Столбовая» Московской области. Животные находились в стандартных условиях вивария. Острую холодовую травму моделировали нанесением струи хлорэтила ( — 30 °С) на эпилированную кожу спины

Изучено влияние дексаметазона и фитосбора на биохимический показатель крови (мочевина) крыс, подвергшихся острой холодовой травме хлорэтилом (-30 °С). Настой 10 % сбора, состоящего из 7 офи-цинальных лекарственных растений, вводили животным per os в суточной дозе 7,6 г на 1 кг массы тела крысы в перерасчете на сухой вес сбора по трем схемам: до отморожения, после него, до и после отморожения. Дексаметазон вводили внутрибрю-шинно 0,1 мг/кг веса в сутки по вышеописанной схеме.

Опыты показали снижение уровня мочевины плазмы крови по сравнению с контрольной группой при всех схемах введения у крыс, получавших настой сбора. Дексаметазон показал снижение уровня мочевины не только в контрольной группе, но и группе интактных животных на 43, 8 %.

Ключевые слова: отморожение, сбор, дексаметазон, мочевина.

крысы, ограниченную трафаретом диаметром 20 мм.

В качестве лекарственных препаратов применяли лекарственный сбор, разработанный совместно сотрудниками кафедры фармакологии Северного государственного медицинского университета (г. Архангельск) и Института гомеопатии и нату-ротерапии Федерального научного клинико-экспериментального центра традиционных методов диагностики и лечения Росздрава (г. Москва), а также лекарственный препарат дексаметазон (2 мл № 25, раствор для инъекций 4 мл/мг, Шрея Лайф Саенсиз ПВТ. ЛТД).

В состав сбора включено только официнальное растительное сырье [3].

«Ядро» сбора состоит из листьев березы бородавчатой (Betula verrucosa) и травы душицы обыкновенной (Origanum vulgaris). Водное извлечение (10 % настой) сбора готовили по методике Государственной фармакопеи XI издания [4]. Настой вводили рег os в суточной дозе 7,6 г на 1 кг массы тела крысы в пересчете на сухой вес сбора. Доля 1 части растения составляла 800 мг/кг. Дексаметазон вводили внутри-брюшинно в количестве 0,1 мл препарата на крысу

1 раз в сутки ( 0,1 мг/кг веса в сутки).

Все животные были разделены на 3 группы. Крысы

1-й группы (контрольная), 31 штука, подвергались действию только холодового фактора без назначения препаратов. Крысам 2-й группы, 100 штук, вводили перорально 10 % настой сбора. Крысам 3-й группы, 100 штук, вводили дексаметазон.

Животные 2-й группы, в свою очередь, были подразделены на 3 подгруппы. В первой подгруппе настой вводили в течение трех дней до отморожения (— 3...0-й день) — профилактическая схема, во второй — как до, так и после отморожения (—3.+ 12-й день) — комбинированная схема. В третьей настой вводили только после отморожения (0...+ 12-й день)

— лечебная схема.

Животным 3-й группы дексаметазон вводили по вышеописанной схеме.

Холодовую травму наносили в день, обозначенный на схеме как 0, и наблюдали в интервале последующих 12 суток. Уровень мочевины крови крыс определяли по стандартной методике на 3, 6, 9 и 12-й день постхолодового периода, во время декапитации животных, которую проводили по щадящей методике под эфирным наркозом.

Статистическую обработку результатов осуществляли с помощью пакетов Statistica 6.0, SPSS 11,5 и Sigma Plot 8.0. Для оценки нормальности распределения использовали тест Колмогорова — Смирнова, для оценки равенства дисперсий — тест Левене. Различия между группами исследовали методом однофакторного дисперсионного анализа с использованием теста правдоподобно достоверных различий Тьюки [2, 11] для апостериорных попарных сравнений при равных дисперсиях и тест Т2 Тэмхена [10] при неравных дисперсиях. Различия считались статистически значимыми при р < 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Из общего количества животных контрольной группы, у которых удалось вызвать отморожения

II—III степени, погибло 12 штук (39 % от исходного количества). Гибель животных наблюдалась в течение всего времени эксперимента, но большая часть их погибла в ранний постхолодовой период. Выжившие крысы отличались вялостью, снижением аппетита, угнетенной реакцией на внешние раздражители. Наряду с явными признаками для местного поражения (эрозивно-язвенные поражения на коже) регистрировались изменения системного характера.

Показатель уровня мочевины прогрессивно увеличивался с исходных значений (3,937 + 0,860) ммоль/л, р < 0,001, до (8,994 ± 1,140) ммоль/л, р < 0,001 (рисунок). Максимальное количество мочевины в крови крыс определялось на 6-е сутки опыта, в дальнейшем ее уровень снижался, однако даже в последний день (12-е сутки) он был выше показателя интактных животных почти в 2 раза.

—■—контроль —*—проф. схема комб. схема —*—леч. схема...|исх. данные

Изменение уровня мочевины крови крыс в опытах с введением дексаметазона (А) и фитосбора (Б) по лечебной, комбинированной и профилактической схеме при отморожении в сравнении с контролем

Серии опытов с введением фитосбора показали большую степень выживаемости лабораторных животных. В каждой серии погибло по 1—2 крысы (1 — 2 % от их исходного количества). Выжившие животные отличались активностью и хорошим аппетитом.

В сериях опытов с введением дексаметазона гибель животных наблюдалась в течение всего эксперимента, наибольшее количество (69 %) их погибло в экспериментальной точке, т. е. на 12-й день опыта.

В серии исследований с введением фитосбора наблюдалось статистически достоверное снижение уровня мочевины при всех схемах введения, примерно

в 2 раза по сравнению с контрольной группой (см. рисунок). При профилактическом введении настоя уровень мочевины на 3-и сутки равнялся (4,838 ±

0,595) ммоль/л, р < 0,001; при использовании лечебной схемы он составил (5,081 ± 0,255) ммоль/л, р <

0,001, а при комбинированном назначении — (4,395 ± 0,593) ммоль/л, р < 0,001. На 6, 9 и 12-й день наблюдения общая тенденция к снижению уровня мочевины в крови сохранялась. Он достиг первоначальных значений. Наилучшие результаты были у животных, которым настой вводили по комбинированной схеме (до и после отморожения) или только превентивно (до холодовой травмы).

При введении дексаметазона с профилактической целью уровень мочевины в сыворотке крови крыс был статистически достоверно ниже (в 2,5 раза) по сравнению с контрольной группой. В последующие сроки наблюдения (6, 9, 12-й день) уровень мочевины имел тенденцию к снижению по сравнению с контрольной группой животных. На 3-й день опыта при введении дексаметазона до отморожения он составил (3,613 ± 0,167) ммоль/л, р < 0,05; при комбинированном способе введения — (6,366 ± 0,246) ммоль/л, р < 0,05; при использовании лечебной схемы введения

— (6,224 ± 0,263) ммоль/л, р < 0,05. В последующие сроки тенденция к снижению показателя сохранялась у всех групп животных. Уровень мочевины на всех сроках был ниже значений контрольной группы. У животных, которым дексаметазон вводился до отморожения, наблюдалось статистически достоверное снижение показателя по сравнению с группой интактных животных (на 43,8 % на 12-е сутки пос-тхолодового периода).

Полученные данные явились убедительным доказательством возможности нормализации измененного уровня мочевины при холодовой травме назначением 10 % настоя сбора лекарственных растений. Выявленные различия, вероятно, объясняются фармакологическими свойствами ряда ингредиентов сбора, поскольку в состав его «ядра» входят листья березы, обладающие противовоспалительным, антисептическим [5, 7, 8], иммунотропным, гипоазотемическим и ранозаживляющим действием, и другие лекарственные растения, повышающие защиту тканей от холода.

Резкое снижение уровня мочевины в серии опытов с дексаметазоном (12-й день) ниже уровня интакт-ных животных показывает, что по мере увеличения периода назначения препарата показатель мочевины снижался, вероятно, в результате изменения белкового обмена, в том числе катаболизма белков. В то же время максимальное изменение белкового обмена регистрировалось, когда дексаметазон назначался превентивно, т. е. до нанесения холодовой травмы.

Таким образом, изученный сбор лекарственных растений может быть рекомендован для комбинированного лечения и профилактики отморожений.

Выводы

1. Настой сбора лекарственных растений, введенный внутрь в периоды до, после, до и после отморожения, смоделированного на крысах, способствовал нормализации биохимического показателя мочевины крови крыс до уровня интактных животных при всех схемах назначения.

2. Введение дексаметазона с профилактической целью (—3...0-й день) вызвало снижение уровня мочевины крови крыс по сравнению с группой контроля и интактными животными (на 43,8 %), что свидетельствует о проявлении побочного действия препарата, направленного на изменение белкового обмена.

Список литературы

1. Воронин Н. И. Влияние качества первой и медицинской помощи на исходы лечения пострадавших от холодовой травмы / Н. И. Воронин, В. Н. Мерекин // Травматология и ортопедия России. — 1995. — № 4. — С. 87—88.

2. Гланц С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц ; пер. с англ. — М. : Практика, 1998. — С. 99—113.

3. Государственная фармакопея СССР — 11-е изд.

— М. : Медицина, 1990. — Вып. 2. — С. 390.

4. Государственный реестр лекарственных средств.

— Изд. официальное (по состоянию на 1 янв. 2000 г.). — М. : Издательская фирма «Материк», 2000. — 1204 с.

5. Гринкевич Н. И. Лекарственные растения : справ. пособие / Н. И. Гринкевич, И. А. Баландина, В. А. Ермакова и др. — М. : Высшая школа, 1991. — 398 с.

6. Карпушин А. А. Трудовые и материальные затраты при лечении больных с отморожением / А. А. Карпушин, Е. А. Климов // Первая научная конференция по проблеме «Холодовая травма» : тез. докл ВМОЛА им. С. М. Кирова.

— Л., 1985. - С. 38-39.

7. Лагерь А. А. Фитотерапия некоторых заболеваний / А. А. Лагерь ; под ред. проф. Г. В. Крылова. — Красноярск : Изд. Краснояр. ун-та, 1986. — 112 с.

8. Синяков А. Ф. Фитотерапия против рака / А. Ф. Синяков. — М. : Советский спорт, 1997. — 448 с.

9. Чащин В. Работа в условиях холода: российский опыт изучения проблемы / В. Чащин // Barents Newsletter on Occupational Healt and Safety. — 1998. — Vol. 1, N 3. — P. 97—99.

10. Berry D. Statistics: Theory and methods / D. Berry, B. W Lindgren. — 2 nd ed. — Belmont, CA : Duxbury Press, 1996.

11. Dawson-Saunders B. Basic and clinical biostatistics / B. Dawson-Saunders, R. G. Trapp. — London : Prentice-Hall International, 1994.

COMPARATIVE STUDY OF DEXAMETHASONE AND HERB SPECIES EFFECTS ON UREA LEVEL IN RAT BLOOD IN COLD TRAUMA

А. А. Аlieva, N. А. Nazarenko, *Т. L. Kiselyova,

М. Yu. Nazarenko

Northern State Medical University, Arkhangelsk *Institute of Homeopathy and Naturotherapy Federal Scientific Clinical-Experimental Center of Traditional Diagnostic and Treatment Methods Roszdrav, Moscow

The effect of dexamethasone and a herb species on the

biochemical (urea) index of blood of rats exposed to acute cold trauma with ethyl chloride ( — 30 °С) was studied. 10 % infusion of the species consisting of 7 officinal herbs was administered to animals per os in day’s dose 7,6 g per 1 kg of rat body mass recalculated for dry weight of the species according to 3 schemes: before frostbite, after and before and after frostbite. Dexamethasone was administered intraperitoneally, 0,1 mg/kg of weight per day according to the above-described scheme.

The trials have shown lowering of the blood urea marker in comparison with the control group in all the schemes in rats that were administered the herb species as well as its further normalization. Dexamethasone has shown lowering

of the urea marker not only in the control group, but also in the group of intact animals by 4З,8 %.

Key words: frostbite, species, dexamethasone, urea.

Контактная информация:

Алиева Аймеседо Абдулаевна — ассистент кафедры фармации и фармакологии Северного государственного медицинского университета

Адрес: 16З000, г. Архангельск, пр. Троицкий, д. 51

Тел. (8182) 28-57-70

Статья поступила 14.11.2006 г.